Introdução

Quando um aminoácido é titulado, sua curva de titulação indica a reação de cada grupo funcional com o íon hidrogênio.
Tomamos como exemplo o aminoácido alanina. Se partirmos de pH bem ácido (em torno de 1) as moléculas desse aminoácido se
apresentarão sob a forma catiônica mostrada na figura abaixo. Nessa forma iônica todos os grupos que podem receber hidrogênio
estão ligados esse átomo.

Se formos adicionando gradativamente quantidade pequenas de NaOH sobre a solução de alanina, medindo a cada adição o pH e se
construirmos um gráfico relacionando o pH da solução em função do número de equivalente de OH adicionados, obteremos uma
curva como três regiões definidas: AB, BC e CD, conforme demonstrado na figura 1. Essas regiões representam as transformações
iônicas que a molécula de alanina pode sofrer pela alteração do pH a que são submetidas a partir da adição de equivalentes em OH
adicionados a um meio extremamente ácido.

Figura 1 – Curva de Titulação da alanina – mostrando as

formas iônicas do aminoácido e os valores de pKa dos
grupos ionizáveis e pI do aminoácido.
pK1 = 2,35; pK2 = 9,69; pI = 6,02

A região AB apresenta uma região de tamponamento e

um ponto de inflexão onde encontraremos 50% da
alanina totalmente protonada e 50% de alanina sem o
próton do grupo carboxila, o pH nesse ponto representa
o pK1 do aminoácido.

01 - REGIÃO AB – COOH = COO- →

No ponto A, início, temos muito h+ e ao começarmos jogar OH- a tendência é de o ph aumentar.
No meio da primeira etapa da titulação (pk1), metade do grupo carboxila perdeu seu hidrogênio ionizável e metade ainda está
protonada.
O grupo alfa – AMINA continua intacto (+ NH3). Lá no pk2, este grupo sofrerá o que o COOH sofreu. Ficará 50% protonado
(ficará com um próton a mais e por isso positivo pois o seu normal seria NH2 que é o neutro (outros 50%).
Nesse momento o pH é igual ao pK1 do grupo protonado que ainda está sendo titulado e é essa região de pH uma das quais o
aminoácido tem poder de tamponamento, sempre variando de uma unidade a menos a uma unidade a mais do pH. Além disso, em
um campo elétrico o aminoácido iria em direção ao eletrodo negativo (o cátodo).
No intervalo LM temos a melhor região tamponante que é sempre uma unidade acima e outra abaixo.
A constante de ionização (ka ou kb) significa uma constante de equilíbrio de reações que envolvem íons. É conhecida também como
constante de dissociação, pode ser definida como um valor que expressa a relação entre as concentrações de eletrólitos dissociados
em meio aquoso, isto é, o equilíbrio iônico em solução aquosa.

https://brasilescola.uol.com.br/quimica/calculo-ph-uma-solucao-tampao.htm
https://www.youtube.com/watch?v=CZsiynldFvg&t=23s https://www.youtube.com/watch?v=aN0Y4rLsHAQ

No ponto pk1 (pka) o ph da solução passou a ser de 2,35. O pk1

se refere ao grupo COOH. Nesse ponto Ka é a constante de
acidez. Pka é o (- logaritmo de Ka). pKa = - log ka. Quanto maior
o Ka, menor o pka.
Assim 2,35 = - log ka
Então de 2,35 até 6,02 pode-se adicionar
No ponto pk1 temos que protonados =
desprotonados; Assim ph = pKa + log 1
= pka + 0 e então ph = pka = 2,35.

02 – REGIÃO BC – PH = 6,02 → 100% de COO- → ponto isoelétrico do aminoácido.

Na região BC pode ser observado o ponto de inflexão em pH =

6,02 que representa o ponto isoelétrico (pI) do aminoácido.
Nesse ponto 100% das moléculas de alanina encontram-se sem
o próton da carboxila, portanto pI é o pH onde a carga elétrica da
molécula (ZWITTERON) é nula.

03 – REGIÃO CD
Continuando a acrescentar mais NAOH. O próton da amina será
perdido, assim como o do COO-. A molécula fica negativa.

pk2 = pkb. A concentração de NH3+(amina protonada) é igual à concentração de NH2. (amina desprotonada)
Continuando a adição do NaOH, encontraremos uma nova região CD com uma área de e um novo ponto de inflexão (pK2), onde 50%
da alanina encontram-se sem o próton do grupo carboxila e sem o próton do grupo amina, portanto na forma aniônica, com carga
elétrica negativa. A titulação é finalizada quando toda a alanina (100%) encontra-se totalmente sem próton nos dois grupamentos
ionizáveis da molécula (amina e carboxila).
CONCLUSÃO - A titulação de um aminoácido permite encontrar
os pKa’s e o seu ponto isoelétrico, o que é característico de cada
molécula. A determinação da forma iônica dos aminoácidos é
importante em processos técnicos de separação e purificação
dessas moléculas. Além disso, a forma iônica de um aminoácido
é fundamental para a estrutura e atividade biológica das
proteínas (polímeros de aminoácidos), principalmente aqueles
aminoácidos que possuem grupo da cadeia lateral ionizável,
além do grupamento
amino e carboxila descritos acima.

Acima de um ph de 9,60 predomina a amina desprotonada.

Abaixo de um ph de 2,34 predomina a carboxila protonada.