DETERMINACIÓN DE LAS CONDICIONES

PARA LA HIDRÓLISIS DE SACAROSA PRESENTE

EN MUCÍLAGO DE CACAO CCN 51

Jhon Jairo Sarmiento Suárez

Director: PhD. Luis Javier López Giraldo

Codirector: MSc. Arley René Villamizar Jaimes

1
 INTRODUCCIÓN
El aprovechamiento de subproductos agrícolas surge
debido a la creciente escasez de recursos naturales Tabla de composición del mucílago de cacao CCN51[2].
y problemas ambientales, tendiendo a convertir
estos subproductos en ingredientes alimentarios[1]. Parámetro (Vera, 2013)
Acidez titulable
1,05 ± 0,05
(%ácido cítrico)
pH 3,25 ± 0,08

Proteína (g/100g) 0,28 ± 0,01

Humedad
84,20 ± 3,53
(g/100g)
Cenizas (g/100g) 1,50 ± 0,06
Sacarosa
6,15 ± 0,06
(g/100g)
Glucosa (g/100g) 4,67 ± 0,05

[1] (Sendra et al., 2009) Fructosa (g/100g) 5,08 ± 0,08

°Brix 16,8 ± 1,1

2
 PROBLEMÁTICA

Durante el proceso de poscosecha se generan

subproductos como el múcilago de cacao que no
son aprovechados y se desperdician, estos residuos
son aptos para ser hidrolizados para aumentar el
contenido de monosacáridos.

3
 Estructura resina Amberlite IR120[1] MARCO TEÓRICO

Cadena del H+ intercambiables Enlace cruzado

polímero

[1] (McMurry, 2007)

4
 ANTECEDENTES
Condiciones de hidrólisis encontradas en la literatura usando diversas resinas de intercambio
iónico
Relación
Técnica, Conversión
Autor Resina resina:sacaro Condiciones
mensurando (%)
sa (p/p)
(Adnadjevic
Amberlite DNS,
& Jovanovic, 2,6 170 °C, 1 h 85-100
IR 120 H sacarosa
2012)
(Plazl,
Leskovšek, & Amberlite HPLC,
1,6 80 °C, 3h 100
Koloini, 200C sacarosa
1995)
(Zajŝek & Real-time
Amberlite 79 °C, 1,5
Gorŝek, FTIR, 3,6 100
IR 120 H h, N2
2010) sacarosa
(Marzo,
Amberlite HPLC,
Gervasini, & - 80 °C, 4 h 91
A120 sacarosa
Carniti, 2012)

5
 ANTECEDENTES

Relación
Técnica, Conversión
Autor Resina resina:sacaro Condiciones
mensurando (%)
sa (p/p)
(Takagaki,
Tagusagawa, Amberlyst HPLC,
0,2 80 °C, 2h 75
& Domen, 15 sacarosa
2008)
(Dhepe et al., Amberlyst HPLC,
0,5 80 °C, 4h 88
2005) 15 sacarosa
(Kim et al., Amberlyst HPLC,
166 110 130°C, 2h 80-100
2005) 35W celobiosa
(Kitano et al., Amberlyst HPLC,
0,8 90 °C, 24 h 62
2009) 15 Celobiosa
(Xu et al., Dowex50 SEC, 120 °C, 26 h, 5
0,5 95
2008) x2 100 maltose bar N2

6
 OBJETIVOS

Objetivo general

Establecer las condiciones de hidrólisis de residuos de mucílago del material de cacao

CCN-51 para generar jarabes con una mayor concentración glucosa y fructosa.

Objetivos específicos

• Determinar la influencia de las variables del proceso (relación sustrato:catalizador y

temperatura) sobre la conversión de sacarosa presente en el mucílago de cacao
CCN-51, en azúcares simples (glucosa, fructosa), usando como catalizador una
resina de intercambio iónico Amberlite IR 120.

• Determinar la influencia de la temperatura y el tiempo como variables de la hidrólisis

no catalítica de la sacarosa presente en el mucílago de cacao CCN-51.

• Determinar el efecto de la reactivación de la resina de intercambio iónico sobre la

actividad catalítica de hidrólisis de la sacarosa presente en el mucílago de cacao
CCN-51.

7
 METODOLOGÍA

Materiales y reactivos

Pasteurización

• Glucosa, fructosa y sacarosa

• Agua tipo HPLC
• Mucílago filtrado de cacao del Filtrado
material CCN-51 del municipio de
Lebrija.

Homogenización

Desmucilaginación

Retiro del grano con

mucílago
8
 METODOLOGÍA

Parámetros del equipo de HPLC para el análisis de

azúcares

Equipo y columna Parámetros Especificaciones

COREGEL 107-H 7,8 x
Columna
300 mm (8 μm)
Temperatura de
30 °C
la columna
HPLC Thermo Dionex Ultimate 3000 Temperatura del
equipado con desgasificador, inyector 30 °C
detector RI
automático, una columna ICE COREGEL Volumen de
107-H y un RI. 20 µL
inyección
Flujo 0,6 mL/min
Isocrático; 0,005 M
Fase móvil
de H2SO4

9
 METODOLOGÍA

Análisis instrumental

Se disolvieron 2 g mucílago filtrado

en 10 mL de agua tipo 1, la mezcla
se agitó por 2 minutos y se centrifugó
a 4000 rpm
Una parte de la solución se pasó por
un filtro de jeringa de 0,45 µm y
membrana de fluoruro de
polivinilideno (PVDF).
Se inyectaron 20 μL del filtrado al
equipo de HPLC.

10
 METODOLOGÍA

Caracterización fisicoquímica

Característica Método
Acidez titulable AOAC 942.15
pH AOAC 970.21
Proteína AOAC 970.22
Humedad AOAC 986.13
Cenizas AOAC 972.15

11
 METODOLOGÍA

Hidrólisis catalítica

Valores máximos y mínimos del diseño experimental[1].

Niveles Temperatura (°C) Relación resina:sacarosa (p/p)

-1 70 3,2
Análisis de
+1 80 3,6 Medición de
resultados
la cantidad - Conversión de
de azúcares_ sacarosa
Conversión de la sacarosa[2]. Ejecución de los - Sacarosa - Diagrama de
Pareto
experimentos - Glucosa
- Superficie de
𝐶𝑖 − 𝐶𝑓 - Fructosa respuesta
%𝐶 = 𝑥100
𝐶𝑖 Realización del
%C: porcentaje de conversión diseño
experimental
Ci: concentración inicial
sacarosa
Cf: concentración final
sacarosa

[1] (Zajŝek & Gorŝek, 2010)

[2] (Adnadjevic & Jovanovic, 2012)
12
 METODOLOGÍA

Hidrólisis no catalítica

Valores máximos y mínimos del diseño experimental[1].

Niveles Temperatura °C Tiempo (min)

-1 150 5
Análisis de
+1 175 10 Medición de
resultados
la cantidad - Conversión de
de azúcares_ sacarosa
Conversión de la sacarosa[2]. Ejecución de los - Sacarosa - Diagrama de
Pareto
experimentos - Glucosa
- Superficie de
𝐶𝑖 − 𝐶𝑓 - Fructosa respuesta
%𝐶 = 𝑥100
𝐶𝑖 Realización del
%C: porcentaje de conversión diseño
experimental
Ci: concentración inicial
sacarosa
Cf: concentración final
sacarosa

[1] (Sepúlveda, Romaní, Aguilar, & Teixeira, 2018)

[2] (Adnadjevic & Jovanovic, 2012)
13
 METODOLOGÍA

Reutilización del catalizador

Tratamiento de la resina[1]

Hidrólisis de Retiro de la
sacarosa resina

Activación,
Lavado de
HCl 2M, 5
la resina
min

[1] (Zajŝek & Gorŝek, 2010)

14
 RESULTADOS

Caracterización fisicoquímica

Antes de Después de
Parámetro (Vera, 2013)
pasteurización pasteurización
Acidez titulable (%ácido
0,83 ± 0,06 0,87 ± 0,04 1,05 ± 0,05
cítrico)
pH 3,42 ± 0,07 3,35 ± 0,08 3,25 ± 0,08
Proteína (g/100g) 0,50 ± 0,03 0,47 ± 0,03 0,28 ± 0,01
Humedad (g/100g) - 82,75 ± 0,01 84,20 ± 3,53
Cenizas (g/100g) - 0,20 ± 0,03 1,50 ± 0,06
Sacarosa (g/100g) 6,34 ±0,20 6,31 ± 0,06 6,15 ± 0,06
Glucosa (g/100g) 6,49 ± 0,14 6,28 ± 0,09 4,67 ± 0,05
Fructosa (g/100g) 6,51 ± 0,10- 6,46 ± 0,06 5,08 ± 0,08
°Brix 17,4 ± 1,0 17,5 ± 1,3 16,8 ± 1,1

15
 RESULTADOS

Hidrólisis catalítica

Concentraciones de sacáridos presentes en mucílago filtrado hidrolizado

Variables independientes Variables de respuesta

R:S
Exp Temperatura (°C) Sacarosa (g/100g) Glucosa (g/100g) Fructosa (g/100g)
(p/p)
I NA NA 6,31 ± 0,06 6,46 ± 0,09 8,27 ± 0,06
1 68 3,4 2,93 ± 0,07 7,41 ± 0,17 8,94 ± 0,39
2 70 3,2 2,13 ± 0,03 7,67 ± 0,16 9,65 ± 0,45
3 70 3,6 2,10 ± 0,04 7,91 ± 0,13 9,83 ± 0,11
4 75 3,1 1,37 ± 0,07 8,09 ± 0,16 10,69 ± 0,12
5 75 3,7 1,26 ± 0,07 7,99 ± 0,08 10,66 ± 0,16
6 80 3,6 2,20 ± 0,06 7,98 ± 0,22 9,95 ± 0,13
7 80 3,2 2,20 ± 0,11 7,96 ± 0,08 9,86 ± 0,18
8 82 3,4 0,88 ± 0,02 8,00 ± 0,08 10,80 ± 0,61

16
 RESULTADOS

Conversión de sacarosa (%)

Hidrólisis catalítica

100
Conversión de sacarosa

80

60
Superficie de respuesta
(%)

40

20

0
1 2 3 4 5 6 7 8
Experimentos

Diagrama de Pareto
17
 RESULTADOS

Hidrólisis no catalítica

Concentraciones de sacáridos presentes en mucílago filtrado hidrolizado

Variables independientes Variables de respuesta

Tiempo Fructosa
Exp Temperatura (°C) Sacarosa (g/100g) Glucosa (g/100g)
(min) (g/100g)
I NA NA 6,92 ± 0,81 6,39 ± 0,12 8,72 ± 0,04
1 175 15 2,71 ± 0,06 8,44 ± 0,50 10,98 ± 1,06
2 175 5 6,21 ± 1,26 6,25 ± 0,14 8,83 ± 0,65
3 150 5 6,44 ± 0,98 6,79 ± 0,14 8,74 ± 0,06
4 150 15 4,59 ± 0,71 7,33 ± 0,39 9,60 ± 0,09
5 145 10 5,84 ± 1,44 6,74 ± 1,05 8,86 ± 0,35
6 180 10 4,06 ± 1,02 7,35 ± 0,85 10,08 ± 0,84
7 163 17 3,92 ± 0,33 7,85 ± 0,48 10,31 ± 1,10
8 163 3 6,70 ± 0,25 6,77 ± 0,36 8,33 ± 0,01
NA: No aplica
18
 RESULTADOS

Conversión de sacarosa (%)

Hidrólisis no catalítica

Rendimiento de la sacarosa

70
Conversión de sacarosa

60
50
40 Superficie de respuesta
(%)

30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8
Experimentos

Diagrama de Pareto
19
 RESULTADOS

Reutilización del catalizador

Rendimiento de la sacarosa durante la reutilización del catalizador

80
[A] [A] [A] [A] [A] [A] [A] [A]

Conversión de sacarosa (%)

70
60
50
40
30 65 63 64 64 63 63 64
58
20
10
0
Exp 1r 2r 3r
Exp 6 Exp 7

20
 CONCLUSIONES

De acuerdo con los resultados obtenidos en este trabajo, las mejores condiciones para llevar a
cabo la hidrólisis catalítica del mucílago filtrado de cacao, fueron una temperatura de 82 °C y
una relación resina:sacarosa de 3,4 (p/p); con estos valores se alcanza una conversión de
sacarosa del 86%. Así mismo, los resultados del análisis estadístico confirmaron que la
temperatura y el tiempo tienen un efecto estadísticamente significativo sobre la conversión de
sacarosa.
En la hidrólisis no catalítica se encontró que el tiempo es la única variable que tiene un efecto
estadísticamente significativo, descartándose la temperatura. La mayor conversión de
sacarosa se alcanza a una temperatura de 175 °C y un tiempo de 15 minutos.

En el proceso de hidrólisis de sacarosa, el uso de la resina Amberlite IR 120H como catalizador

presenta determinadas ventajas sobre el proceso no catalítico, como el trabajo a bajas
temperaturas y un mayor porcentaje de conversión. Teniendo en cuenta que el catalizador es
fácil de retirar de la solución y regenerarse.

Los resultados de la reutilización de la resina, luego de 3 hidrólisis sucesivas, confirman que

entre las ventajas de su uso se encuentran: su estabilidad y su capacidad a ser reactivados sin
pérdida de actividad.

21
22