Manual de Tecnicas RANDOX 3a Ed

Central de Diagnostica e Insdustria S.A de C.V.
Representante exclusivo en México de la marca Randox Laboratories Ltd.

Diagonal Patriotismo No. 8-301, Col. Hipódromo Condesa
C.P. 06170, México, D.F. Tel/Fax: 5515-2893 / 5276-4889 / 5276-4901 / 5273- 0896
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CONTENIDO
INDICE ALFABETICO
Pág. Pág. Pág.
ACIDO URICO (Reactivo Liofilizado)............. 1 COLESTEROL LDL DIRECTO................ 20 LDH....................................................... 39
Método Uricasa-PAP Método de Aclaramiento Método DGKC
ACIDO URICO (Reactivo A121 2 CREATININA ................................................. 21 LIPASA............................................................. 40
Método Uricasa-PAP Jaffe sin desproteinización Método Turbidimetrico
ALBUMINA Y PROTEINAS ...................... 3 FACTOR REUMATOIDE ........................... 22 LIPIDOS TOTALES...................................... 41
Método Verde de Bromocresol y Biuret Método de aglutinación en latex Método Colorimetrico
ALBUMINA...................................................... 4 F. ACIDA (Total y Prostatica)........................ 23 MAGNESIO..................................................... 42
Método Verde de Bromocresol Método Cinetico Método Calmagite
AMILASA......................................................... 5 F. ACIDA (Total y Prostatica)........................ 24 POTASIO......................................................... 43
pNPG7 Bloqueado por Benzilidina Método Punto Final Método Tetrafenilboro
ANTIESTREPTOLISINA "O".................... 6 FOSFATASA ALCALINA............................ 25 PROTEINA C REACTIVA .......................... 44
Método de aglutinación en latex Método DGKC Método de aglutinación en latex
BILIRRUBINA DIRECTA............................ 7 FOSFORO....................................................... 26 PROTEINAS TOTALES.............................. 45
Método Jendrassik Modificado Método de Fosfomolibdato Método Biuret
BILIRRUBINA TOTAL................................. 8 γ- GT.................................................................. 27 PROTEINAS EN ORINA............................. 46
Método DCA γ-Glutamil-p-nitroanilida Método Rojo de Pirogalol
BILIRRUBINA Total y Directa........................ 9 GLUCOHEMOGLOBINA A1C ............... 28 PRUEBA DE EMBARAZO (Casete).......... 47
Método de Jendrassik Método Inmunologico Método Inmunocromatografico.
CALCIO................................................. 10 GLUCOSA....................................................... 29 PRUEBA DE EMBARAZO.................... 48
Método Orto Cresoftaleina Método GOD-PAP Método de aglutinación en latex
CALCIO........................................................ 11 GLUCOSA............................................. 30 SIFILIS RPR.......................................... 49
Método Arzenazo III Método Hexocinasa Método de aglutinación antigeno carbon
CK-NAC Activada................................. 12 GOT / ASAT.......................................... 31 SODIO............................................................... 50
Método DGKC Método IFCC Método Enzimatico Colorimetrico
CK-MB (NAC Activada)........................ 13 GOT / ASAT.......................................... 32 SUERO CONTROL HUMANO.................. 51
Método Inmunoinhibicion Método de Color Ensayados Nivel II y III
CK-NAC / CK-MB.................................. 14 GPT / ALAT.......................................... 33 TRIGLICERIDOS (Reactivo Liofilizado)........ 52
Reactivo Combinado Método IFCC Método GPO-PAP
CLORO................................................. 15 GPT / ALAT........................................... 34 TRIGLICERIDOS (Reactivo Liquido)............. 53
Método Tiocianato Método de Color Método GPO-PAP
COLESTEROL ..................................... 16 HEMOGLOBINA con patrón..................... 35 UREA Alta Sensibilidad..................................... 54
Método CHOD-PAP Método de Drabkin Método GLDH
COLESTEROL HDL con patrón............... 17 HIERRO con Capacidad de Fijación............. 36 UREA BERTHELOT..................................... 55
Método de Precipitación Método Ferene Método Berthelot Modificado
COLESTEROL LDL con patrón............... 18 HIERRO................................................ 37
Método de Precipitación con Heparina Método Ferene
COLESTEROL HDL DIRECTO................ 19 CAPACIDAD de Fijación Total de Hierro...... 38
MANUAL DE TECNICAS
Bioquimica Clínica
PRESENTACION DE LA EMPRESA VISION

Central de Diagnostica e Industria S.A de C.V, es una organización Nuestra visión es ofrecer nuevas posibilidades analíticas
integrada por personal especializado en las diferentes áreas del que permitan a nuestros clientes contar con reactivos de
laboratorio clinico. calidad en las presentaciones, estabilidades y precio que
Tenemos el orgullo de representar en México de manera exclusiva a mejor se adapten a sus necesidades. Asi como ofrecer al
la mancuerna perfecta para solucionar las necesidades del laboratorio. laboratorio sistemas de vanguardia en base al desarrollo e
investigación de nuevos productos como es la tecnología
- La línea de reactivos de alto prestigio en Europa fabricada por BIOCHIP ARRAY de RANDOX, que permitira al laboratorio de
RANDOX Laboratories Ltd. Patología Clínica estar en un primer plano de la medicina.
- La línea de instrumentos analíticos para el laboratorio de la marca
Vital Scientific que cumplen con las normas de calidad internacional
OBJETIVO DEL MANUAL
Queremos aprovechar nuestra 3a. Edición para extender un patente
MISION
agradecimiento a todos nuestros clientes y amigos. El presente manual de
Nuestra misión es la de coadyuvar a mejorar la calidad tecnicas de bioquímica clínica tiene como proposito fundamental el dar a
de vida de los pacientes, basado en el suministro conocer una pequeña parte de la amplia gama de productos de la línea de
oportuno de reactivos y equipo de laboratorio fabricado RANDOX con el fin de facilitar a nuestros usuarios y amigos la selección de
con las normas internacionales de calidad, que permita las metodologías en función de las diferentes presentaciones, estabilidades
al laboratorio emitir resultados exactos y precisos para y el manejo técnico de las pruebas para tener una mejor decisión en la
satisfacer las necesidades clínicas de las instituciones adquisición de sus productos.
de salud, que apoyen al medico a emitir un correcto

diagnostico para el tratamiento apropiado.
RANDOX MEXICO SA DE CV. Convento de Acolman # 26 Fracc. Jardines de Santa Monica Cp. 54050
Tlalnepantla, Edo. de México Tel: (55) 2628-2500 con 3 líneas Fax Directo: (55) 5365-9833 e-mail: cdisacv@prodigy.net.mx
ACIDO URICO (Reactivo Liofilizado) 1
Método Uricasa-PAP
Cat. No. PREPARACION DE LAS SOLUCIONES UTILIZANDO UN FACTOR

UA 230 R1a. Tampón 1 x 100ml R1a. Tampón. Listo para usar, estable hasta la fecha
Concentración de ácido úrico.
6 x 15 ml R1b. Reactivo Enzima 6 x 1 5ml de caducidad conservado entre +2 y +8°C.
UA231 R1a. Tampón 2 x 50ml R1b. Reactivo enzima. UA 230. Reconstituir un vial de
(µmol/l) (mg/dl)
2 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 2 x 50ml reactivo R1b con 15 ml de tampón R1a. Estable durante
UA232 R1a. Tampón 4 x 50ml 21 días cuando se conserva entre +2 y +8°C.
Longitud Suero / Suero /
4 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 4 x 50ml UA231, UA 232 y UA233. Reconstituir el contenido de Orina Orina
de onda Plasma Plasma
UA233 R1a. Tampón 10 x 50ml un vial de reactivo enzima R1b con un pequeño volumen de
10 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 10 x 50ml tampón R1a y transferir el contenido entero a la botella R1a,
En cada juego de reactivos se incluye el Patrón Estable durante 21 días cuando se conserva @ +2 a +8ºC. 520 nm 2026 22306 34.1 375
o 5 días entre +15 y +25°C. Protegido de la luz. 546 nm 3112 34202 52.3 575
PROCEDIMIENTO
METODO COLORIMETRICO VALORES NORMALES
El ácido úrico se convierte, catalizado por la uricasa Longitud de onda: 520 nm: Hg 546nm Suero: Hombre 202 - 416 µmol/l
en alatonina y peroxido de hidrógeno. El peroxido de Cubeta: 1 cm de espesor 3.4 - 7.0 mg/dl
hidrogeno formado, catalizado por la peroxidasa, Temperatura de Reacción: 20-25°C ó 37°C Mujer 142 - 339 µmol/l
oxida el ácido 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico Medición: frente a reactivo blanco 2.4 - 5.7 mg/dl
y la 4-aminofenazona para dar un compuesto de solo se requiere un Orina: 1.5 - 4.5 mmol/24hrs
quinoneimina rojo-violeta reactivo blanco por serie 250 - 750 mg/24hrs
LINEARIDAD
PRINCIPIO(1,2) Pipetear en tubos de ensayo: El método es lineal hasta 1189 µmol/l (20 mg/dl). Para
Ac. Urico + O2 + 2H2O uricasa > alantoína + CO2 + H2O2 concentraciónes superiores diluir la muestra 1 + 1 con
2H2O2 + Acido 3.5-dicloro-2-Hidroxibencenosulfonico Reactivo Blanco Muestra Patrón NaCl al 9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado
+ 4-Amino-fenazona peroxidasa > Muestra --- 20 µl --- por 2.
N-(4-antipirill)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimina Patrón --- --- 20 µl
Reactivo 1000 µl 1000 µl 1000 µl NOTAS
MUESTRA Concentraciónes de hemoglobina hasta 100 mg/dl y de
Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA. Mezclar, incubar durante 15 min a 20 - 25°C o durante bilirrubina hasta 20 mg/dl no afectan la determinación
Orina, diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. exactamente 5 min a 37° C. Medir la absorbancia de la de ácido úrico. Si las mediciones no pueden llevarse a
muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo cabo a 520 nm o Hg 546 nm deberá utilizarse el patrón.
REACTIVOS blanco durante los 15 minutos siguientes.
PRECAUCIONES
Componentes Concentraciones en la prueba CALCULO Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con
Suero o Plasma la boca. Respetar las precauciones normales necesarias
R1a- Tampón HEPES 50 mmol/l, pH 7.0 Amuestra x conc. del patrón que se requieren al manejar reactivos de laboratorio
Conc. Acido Urico =
3.5 DCHBS 4.0 mmol/l Apatrón
R1b. Reactivo Enzima Orina
4-Aminofenazona 0.25 mmol/l Amuestra REFERENCIAS
> 1000 U/l Conc. Acido Urico = x conc. del patrón x 11
Peroxidasa Apatrón 1. Barham, D., and Trinder, p., Analyst 97, 142-145
Uricasa > 200 U/l (1972).
CAL. Patrón 506 mmol(8.5mg/dl)
ACIDO URICO (Reactivo Liquido) 2
Método Uricasa-PAP
PREPARACION Y ESTABILIDAD DEL REACTIVO CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. El reactivo enzima y el patrón están listos para usar. Estable Para un control de exactitud y reproducibilidad:
UA1611 R1. Reactivo Enzima 1 x 100ml hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre Multisueros normal y elevado ensayados
CAL.Patrón 1 x 5ml +2 y +8°C. Protegido de la luz Para un control de reproducibilidad:
UA1612 R1. Reactivo Enzima 2 x 100ml Multisueros: bajos, normal y elevado
CAL.Patrón 1 x 5ml PROCEDIMIENTO
UA1613 R1. Reactivo Enzima 4 x100 ml LINEARIDAD
CAL.Patrón 1 x 5ml Longitud de onda: 520 nm: Hg 546nm El método es lineal para una concentración de 1189 µmol/l
UA1614 R1. Reactivo Enzima 10 x 20 ml Cubeta: 1 cm de espesor ó 20 mg/dl.Para muestras con concentraciones superiores
CAL.Patrón 1 x 5ml Temperatura de Reacción: 20-25°C ó 37°C diluir 1 + 1 con solución de NaCl al 0.9% y repetir la prueba
Medición: frente a reactivo blanco Multiplicar el resultado por 2.
METODO COLORIMETRICO solo se requiere un
El ácido úrico se convierte, catalizado por la uricasa reactivo blanco por serie NOTAS
en alatonina y peroxido de hidrógeno. El peroxido de La hemoglobina hasta 100 mg/dl y Bilirrubina hasta 20
Pipetear en tubos de ensayo:
hidrogeno formado, catalizado por la peroxidasa, mg/dl no afectan la determinación.
oxida el ácido 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico Reactivo Blanco Muestra Patrón
y la 4-aminofenazona para dar un compuesto de PRECAUCIONES
quinoneimina rojo-violeta Muestra --- 20 µl --- Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
Patrón --- --- 20 µl con la boca. Respetar las precauciones normales nece-
PRINCIPIO(1,2) Reactivo 1000 µl 1000 µl 1000 µl sarias, que se requieren al manejar reactivos de laboratorio
Ac. Urico + O2 + 2H2O uricasa > alantoína + CO2 + H2O2 El reactivo contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el
2H2O2 + Acido 3.5-dicloro-2-Hidroxibencenosulfonico Mezclar, incubar durante 15 min a 20 - 25°C o durante contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente el
+ 4-Amino-fenazona exactamente 5 min a 37° C. Medir la absorbancia de la área afectada con agua abundante. En caso de ingestión
peroxidasa
> N-(4-antipirill)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimia muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un médico
blanco durante los 15 min siguientes.
MUESTRA REFERENCIAS
Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA, orina. CALCULO 1. Barham, D., and Trinder, p., Analyst 97, 142-145 (1972).
Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. Suero o Plasma 2. Fossati, p, Príncipe, L., and Berti, G., Clin. Chem. 26/2,
Amuestra x conc. del patrón 227 - 231 (1980).
Conc. Acido Urico =
REACTIVOS Apatrón
Orina:
Componentes Concentraciones en la prueba
Amuestra
Conc. Acido Urico = x conc. del patrón x 11
R1. Reactivo Enzima Apatrón
Tampón HEPES 200 mmol/l:pH 7.55
4-Aminofenazona 0.25 mmol/l VALORES NORMALES
3.5 DCHBS 4.0 mmol/l Suero: Hombre 202 - 416 µmol/l
Uricasa > 200 U/l 3.4 - 7.0 mg/dl
Peroxidasa > 1000 U/l Mujer 142 - 339 µmol/l
CAL.Patrón 595 µmol/l (8.5mg/dl) Orina: 1.5 - 4.5 mmol/24hrs
250 - 750 mg/24hrs
ALBUMINA Y PROTEINAS 3
Mètodo Verde de Bromocresol y Biuret

PREPARACIÓN Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS: PROCEDIMIENTO PARA ALBUMINA
Cat. No.
PA 2019 R1. Reactivo de Albumina BCG 5 x 13.5 ml Albúmina Longitud de onda 578 nm ( 620 nm)
Concentrado R1. Reactivo de Albumina BCG (concentrado) Cubeta 1 cm path length
R2. Reactivo de Prot. Totales 1 x 250 ml Diluir el contenido de un frasco con 87 ml de agua Temperatura Ambiente
. Biuret destilada. Estable por 3 meses entre +15 -25°C.
CAL. Patrón 1 x 5 ml Proteínas Totales Pipetear en tubos de ensayo:
R2. Reactivo de Proteínas Totales (Biuret)
(1,2)
PRINCIPIO Proteínas y Albumina Reactivo listo para su uso. Estable hasta la fecha de Blanco Patrón Muestra
Las proteínas y sus péptidos reaccionan con iones cúpricos caducidad conservado entre +15 y +25 °C
en un medio alcalino formando un complejo colorido que Agua dest. 10 µl . - -
puede ser medido a 546 nm según la reacción de Biuret. Patrón - 10 µl -
PROCEDIMIENTO PARA PROTEINAS Muestra - - 10 µl
La albúmina en suero se une cuantitativamente con el Reactivo 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml
indicador 3,3',5,5'-tetrabromo-m cresol sulfoneftaleina Longitud de onda 546 nm
(verde de bromocresol BCG). El complejo albúmina-BCG Cubeta 1 cm path length Mezclar, incubar durante 5 min entre +20 y +25°C.
presenta una absorción máxima a 578 nm, siendo la Temperatura Ambiente Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del
absorbancia directamente proporcional a la concentración patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco.
de albumina en la muestra Pipetear en tubos de ensayo:
CALCULO PARA ALBUMINA
MUESTRA Blanco Patrón Muestra
Suero , plasma heparinizado ó EDTA g/dl = Abs muestra x 4.3
Agua destilada 20 µl - - Abs patrón
REACTIVOS Patrón - 20 µl -
Muestra - - 20 µl VALORES DE REFERENCIA ALBUMINA
Componentes Concentración de las soluciones Reactivo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml Adultos 3.4 - 4.8 g/dl 34 - 48 g/L
R1. Reactivo de Albumina BCG (concentrado) Mezclar, incubar 30 minutos a temperatura ambiente. LINEARIDAD
Buffer de succinato 75 mmol/l; pH 4.2 Medir la absorbancia de la muestra y del patrón PROTEINAS TOTALES 13 g/dl 130 g/L
Verde de bromocresol 0.15 mmol/l contra el blanco de reactivos ALBUMINA 6 g/dl 60 g/L
Brij 35 45 g/l Si la muestra alcanza estos valores diluír 1+1 con
CALCULO PARA PROTEINAS TOTALES solución salina y multiplicar el resultado por 2
R2. Reactivo de Proteínas Totales (Biuret) g/dl = Abs muestra x 5.0
Hidróxido de Sodio 200 mmol/L Abs patrón REFERENCIAS
Tatrato de Sodio y Potasio 32 mmol/L 1. Weichselbaum, T. E., Amer. J. Clin Path., 16:40
Yoduro Potásico 30 mmol/L VALORES DE REFERENCIA DE PROTEINAS 2. Henry, R. J. Cannon, D. C., Winkelman, J. W. Clinical
Sulfato Cúprico 12 mmol/L Chemistry, principles and Techniques, Harper & Row
Adultos 6.6 a 8.7 g/dl 66 a 87 g/L 2nd Ed. 1974
CAL. Patrón Niños 5.6 a 8.5 g/dl 56 a 85 g/L 3. Doumas, B.T., Watson, W.A., Biggs, H,G., Clin. Chim.
Valor del Patrón para Proteínas 50 g/L Recien Nacidos 5.3 a 8.9 g/dl 53 a 89 g/L Acta. 1971; 31: 87.
Valor del Patrón para Albúmina 45 g/L
ALBUMINA 4
Método de Verde de Bromocresol

CAL Patrón CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. Listo para usar. Estable hasta caducidad cuando se Para un control de exactitud y reproducibilidad:
almacena entre +15-25°C. Multisueros Normal y Elevado ensayados
AB362A R1. Reactivo BCG 3 x 13.5 ml Para un control de reproducibilidad:
CAL Patrón 1x5 ml PROCEDIMIENTO Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
PRINCIPIO Longitud de onda 578 nm ó 620 nm LINEARIDAD

La albúmina en suero se une cuantitativamente Cubeta 1 cm de espesor
con el indicador 3,3',5,5'-tetrabromo-m cresol Temperatura 20 - 25°C El método el es lineal hasta 60 g/l. Muestra con concentra-
sulfoneftaleina (verde de bromocresol BCG). El Medición Frente al reactivo de blanco ciones mayores deberán der diluidas 1 + 1 con NaCl al
complejo albúmina-BCG presenta una absorción 0.9% y reensayadas. Multiplicar el resultado por 2.
máxima a 578 nm, siendo la absorbancia Pipetear en tubos de ensayo:
directamente proporcional a la concentración de PRECAUCIONES
albumina en la muestra Reactivo
Blanco Patrón Muestra Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
MUESTRA boca. Respetar las precauciones normales necesarias
Suero: Reactivo 3,0 ml 3,0 ml 3,0 ml que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
La muestra puede ser almacenada entre +2 a 8°C Agua desionizada 10 µl ---- ----
hasta 72hrs. Si la muestra no puede ser analizada en Patrón ---- 10 µl ---- Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están dis-
este tiempo necesita congelarse y almacenarse a Muestra ---- ---- 10 µl ponibles si se desean.
-20°C hasta por 6 meses
Mezclar, incubar durante 5 min entre +20 y +25°C. Medir REFERENCIAS
REACTIVO la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón)
frente al reactivo blanco. 1. Doumas, B.T., Watson, W.A., Biggs, H,G., Clin. Chim.
Componentes Concentracion inicial de soluciónes
Acta. 1971; 31: 87.
R1. Reactivo BCG Concentrado CÁLCULOS 2. Pinnel, A.E., and Northam, B.E., Clin. Chem., 1978;
Buffer de succinato 75 mmol/l; pH 4.2 Concentración de albúmina 24:80.
Verde de bromocresol 0.15 mmol/l 3. Lasky, F.D., et al., Clin. Biochem., 1985; 18:290.
Brij 35 45 g/l Amuetra
= x Concentración de Patrón
CAL Patrón Apatrón
Albumina de suero humano 45g/l (4.5g/dl)
Buffer tris 100 mmol/l; pH 7.3 VALORES NORMALES EN SUERO
(3) (3)
Adultos 34 - 48 g/l 3.4 - 4.8 g/dl
PREPARACIÓN DE REACTIVO
R1. BCG Concentrado
Diluir el contenido de un frasco con 87 ml de agua
destilada. Estable por 3 meses entre +15 -25°C.
AMILASA 5
pNPG7 - Bloqueado por Benzilidina
PREPARACION DE LOS REACTIVOS LINEARIDAD
Cat. No. Reconstituir el contenido de un vial de sustrato R1b. El método es líneal hasta una concentración de 1300 U/l
AY 1002 R1a. Tampón 1 x 50 ml con el volumen apropiado de tampón R1a: Para concentraciónes superiores, diluir 1+1 con 0.9% de
20 x 2 ml R1b. Sustrato 20 x 2 ml 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AY 1002) solución NaCl al 0.9% y repetir la prueba.
5 ml para el kit de 20 x 5 ml (AY891) Multiplicar el resultado por 2.
AY 891 R1a. Tampón 1 x 105 ml Estable durante 21 días conservado entre +2 y +8ºC
20 x 5 ml R1b. Sustrato 20 x 5 ml NOTAS
Evitar hemolisis ya que se obtendrían valores inferiores.
(1,2,3) PROCEDIMIENTO
METODO COLORIMETRICO Evitar la contaminación de reactivos, muestras y materiales
El método utiliza como sustrato un p-nitrofenilmalto- Longitud de onda: Hg 405 nm (400-420 nm) de vidrio con saliva o sudor ya que tienen un alto contenido
heptaosido bloqueado por benzilidina. Dos enzimas Cubeta: 1 cm de espesor de amilasa. No pipetear con la boca.
indicadoras son empleadas: la glucoamilasa para Temperatura: 37ºC
escindir los productos de la reacción de la amilasa, y Medición: frente al aire PRECAUCIONES
la α-glucosidasa para liberar el p-nitrofenol. La glucosa Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
terminal del sustrato se bloquea químicamente para Pipetear en la cubeta: boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que
prevenir la escisión por las enzimas indicadoras. que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Muestra 20 ul El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
α-amilasa
bl-G7pNP > bl-G2-5 + G2-5-pNP Sustrato 1000 ul contacto con la piel y mucosas,.En caso de contacto con la
piel lavar inmediatamente el área afectada con agua abun-
glucoamilasa
G2-5-pNP > glucose + pNP-glucósido Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 60 seg y dante. En caso de ingestión o contacto con los ojos llamar
empezar a cronometrar el tiempo simultaneamente. inmediatamente a un médico.
α-glucosidasa
pNP-glucósido > glucosa + pNP Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. La acida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
tubería , lo que podría producir azidas explosivas.
bl-G7pNP = pNP/maltoheptaosido bloqueado CALCULOS Cuando se tire este reactivo enjuagar abundantemente con
Para calcular la actividad de la amilasa utilizar la aguas para evitar la formación de estas azidas. Las super-
MUESTRA siguiente fórmula: ficies metálicas que hayan sido puestas en contacto con la
Suero, plasma heparinizado u orina. Diluir la orina 1+2 azida sódica deben ser lavadas con hidróxido sódico al 10%.
con solución NaCl al 0.9%. Multiplicar el resultado por 3 U/l = 5544 x ∆A 405 nm/min
Hojas informativas de sobre Salud y Seguridad están
REACTIVOS VALORES NORMALES disponibles si se desean.
Suero: Hasta 95 U/l (37ºC)
Componentes Concentración inicial de los reactivos
Hasta 69 U/l (30ºC) REFERENCIAS
R1a. Tampón Hasta 52 U/l (25ºC) 1. Richard A. Kaufman and Norbert W. Tietz, Clin.
Tampón pipes 50 mmol/l, pH 7.0 Orina: random < 490 U/l Chem. 26/7;846/853; 1980
Cloruro cálcico 5.0 mmol/l 24 hr < 450 U/24 hrs 2. David H., Clin. Chem. 28/7;1485-1489; 1982.
Cloruro sódico 50 mmol/l 3. Rauscher E., Newman U., Schaich E., Van Bulow S.,
R1b. Sustrato CONTROL DE CALIDAD Wahlefeld A., Clin. Chem. 31/1;14-19;1985.
Tampón pipes 12 mmol/l, pH 7.0 Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Glucoamilasa > 5 U/ml Multisueros normal y elevado ensayados
pNP-maltoheptaosido bloq. 0.8 mmol/l Para un control de reproducibilidad:
α-glucosidasa > 12 U/ml Multisueros bajo, normal y elevado.
ANTIESTREPTOLISINA "O" 6
Test en placa de aglutinacion en Latex
la temperatura ambiente. No congelar ningún reactivo. Evaluación semicuantitativa de los resultados
Cat. No. LO 2487 LO 2715 Agitar bien el reactivo de latex antes de utilizar La concentración de ASO puede ser estimada de la ultima
R1. Reactivo Látex 50 Test 100 Test dilución con aglutinación visible
R2. Diluyente 1 x 50 ml 1 x 100 ml PROCEDIMIENTO
Control Positivo 1 x 0.5 ml 1 x 0.5 ml A. Determinación cualitativa ASO (Ul/ml) = Dilución más elevada con reacción positiva
Control Negativo 1x 1ml 1x 1ml En cada uno de los circulos de reacción de la placa x sensibilidad del reactivo (200 Ul/ml)
Placa de cristal 1 1 colocar.
Muestra Control Control INTERPRETACION DE RESULTADOS
PRINCIPIO Positivo Negativo Los resultados positivos pueden identificar una infección
El reactivo ASO contiene particulas de látex recubierta Muestra/ aguda de estreptococos por lo que debe repetirse el test
50 µl 50 µl 50 µl
con antígeno estreptolisina O. Cuando el reactivo se Control en intervalos semanales para determinar la progesión
mezcla con suero que contiene ASO a un nivel superior de la infección. También se pueden encontrar niveles
Dispensar a lado de cada gota de muestra y control.
a 200Ul/ml las particulas aglutinan. Esto se interpreta elevados de ASO en pacientes con fiebre escarlatina,
como una muestra positiva. Reactivo artritis reumatoide aguda, y otras infecciones estreptococas
50 µl (gota) 50 µl (gota) 50 µl (gota)
Latex
MUESTRA CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda suero fresco o suero refrigerado a +2 Mezclar y extender con una varilla para llenar el circulo del Los conteroles deben realizarse con cada serie de test.
y +8°C durante no más de 48 horas. Desechar cualquier test. Rotar la placa y observar si hay alguna aglutinación El control pósitivo de ASO debe mostrar una aglutinación
suero contaminado lipémico o hemolizado y evitar la cual debería ocurrir en 2 minutos. No leer despues de 3 clara. El control negativo de ASO no debe reaccionar.
plasma cuyo contenido en fibrinogeno pueda causar minutos, ya que si se seca el reactivo podría dar lugar a la
aglutinación inespecifica. apariencia de una falsa aglutinación. VALORES NORMALES EN SUERO(3)
Se considera Internacionalmente 200Ul/ml como limite
Evaluación cualitativa de los resultados superior del rango normal.
REACTIVOS
Una aglutinación marcada indica una concentración de ASO Se recomienda que cada laboratorio establesca sus
R1. Reactivo Látex (Dispensador Azul) superior a 200 Ul/ml. Una suspensión lechosa homogenea propios valores de referencia ya que los valores pueden
Suspención acuosa amarilla de particulas de indica una concentración de ASO inferior a 200 Ul/ml. variar con la edad, sexo, dieta o localización geografica.
látex recubiertas de antígeno estreptolisina O
(1 gota 50µl) B. Determinación Semicuantitativa(2) PRECAUCIONES Y AVISOS
R2. Diluyente Preparar las diluciones de la muestra con diluyente 2 de La placa de reacción debe ser enjuagada varias veces
Glicina tamponada salina pH 8.2 acuerdo a la tabla siguiente:- con agua deionizada o destilada despues de su utilización
Control positivo (Dispensador Rojo) ya que restos de detergentes o de muestras anteriores
Líquido estabilizado conteniendo ASO a ASO pueden afectar el resultado. La placa lavada puede
concentración superior a 200 Ul/ml (1 gota 50µl) Dilución (IU/ml en muestra no secarse con papel lint-free o dejarla secar al aire.
Control negativo (Dispensador Blanco) diluida)
Líquido estabilizado conteniendo ASO a REFERENCIAS
1+1 400
concentración inferior a 200Ul/ml (1 gota 50µl) 1. Spaun, I., et al., Bull. WHO, (1961) 24: 271
1+2 600
2. Bach, G.L., Cadotte, R., Wiatr, R.A., Bhorade, M., and
1+3 800
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Anderson, T.,O., Amer. J. Clin. Path. (1972), 57: 209.
1+4 1000
Todos los reactivos y controles están listos para 1+5 1200 3. Klein, G.C., Baker, C.N., and Jones, W.L., Appl. Micro-
usar y son estables hasta la fecha de caducidad 1+6 1400 biol., (1979), 21: 999.
cuando se conservan entre +2 y +8°C.Sin embargo,
antes de usar, deben dejarse hasta que alcancen
Realizar cada dilución de acuerdo al procedimiento
cualitativo hasta que no se observe ninguna aglutinación
BILIRRUBINA DIRECTA 7
Método Jendrassik Modificado
PROCEDIMIENTO
Cat. No. CALIBRACIÓN
Longitud de onda: 560 nm (550 - 570)
BR2362 R1a. Acido Sulfanilico 2 x 250 ml Cubeta: 1 cm de espesor Recomendamos Suero de Calibración Randox Nivel II,
2 x 250 ml R1b. Nitrito Sódico 1 x 30ml Temperatura de reacción: 20 - 25°C Cat. No. CAL 2351.
Medición: frente a reactivo blanco
PRINCIPIO CONTROL DE CALIDAD
La bilirrubina Directa se determina en ausencias de un PIPETEAR EN TUBOS DE ENSAYO Para un control de exactitud y reproducibilidad:-
acelerador mediante la reacción con ácido sulfanilico Multisueros normal y elevado ensayados.
diazotado. Patrón / Muestra Para un control de reproducibilidad:-
Blanco Patrón Blanco Muestra Multisueros bajo, normal y elevado.
MUESTRA
Reactivo Blanco 1.0 ml ---- 1.0 ml ---- PRECAUCIONES
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma. La Reactivo de Trabajo ---- 1.0 ml ---- 1.0 ml
hemólisis interfiere en el análisis. Las muestras frescas Patrón 40 µl 40 µl ---- ---- Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear
se deberán guardar protegidas de la luz. Muestra ---- ---- 40 µl 40 µl con la boca. Respetar las precauciones normales
necesarias, que se requieren al manejar reactivos
REACTIVOS Mezclar y dejar reposar durante exactamente 5 minutos de laboratorio.
entre 20-25°C e inmediatamente después leer la
Componentes Concentración de las soluciones absorbancia de la muestra/patrón y la muestra blanco REFERENCIAS
frente al reactivo blanco (A) 1. Winsten, S. and Cehely, K.B. (1968) Clin. Chem.
R1a. Acido Sulfanilico 29 mmol/l Concentración de Bilirrubina Directa en la Muestra 14, 107
Acido Clorhídrico 0.17 mol/l 2. Tietz, N. (1990) in Clinical Guide To Laboratory Test
R1b. Nitrito Sódico 38.5 mmol/l A Muestra - A Muestra Blanco Ed. W.B. Saunders. CP Philadelphia, PA. p90
= x concentración del patrón
A Patrón - A Patrón Blanco .
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están
PREPARACIÓN DE LAS SOLUCIONES disponibles si se desean.
VALORES NORMALES EN SUERO
REACTIVO BLANCO: Se utiliza directamente el reactivo
número R1a. Ácido Sulfanílico. Bilirrubina Directa: Hasta 0.25 mg/dl (4.3 mmol/l)
REACTIVO DE TRABAJO: A 2.5 ml de reactivo R1a, Acido LINEARIDAD

Sulfanílico, se agrega 1 gota de reactivo R1b, Nitrito sódico Este método es lineal hasta 256 mmol/l (15 mg/dl).
La mezcla es estable 25 horas entre +2 y +8°C ó 5 horas para concentraciones superiores, diluir la muestra 1
entre +15 y +25°C protegida de la luz. + 5 con solución de NaCL al 0.9% y repetir la prueba.
El reactivo de trabajo se prepara siempre fresco. Multiplicar el resultado por 6.
BILIRRUBINA TOTAL 8
Método DCA
Cat. No. 3. Reactivo blanco CONTROL DE CALIDAD
BR 243 1. Reactivo DCA 1 x 100 ml Listo para usar. Son estables hasta la fecha de caducidad Para un control de exactitud y reproducibilidad:
2 x 100 ml 2. Reactivo Nitrito 1 x 100 ml conservados entre +2 y +8°C. Multisueros normal y elevado ensayados.
3. Reactivo Blanco 2 x 100 ml Para un control de reproducibilidad:
PROCEDIMIENTO Multisueros bajo, normal y elevado.
METODO COLORIMETRICO
Longitud de onda 546nm, Hg 546 nm LINEARIDAD
PRINCIPIO Cubeta 1 cm de espesor
La bilirrubina ligada a la albúmina se libera mediante Temperatura 20-25°C El método es lineal hasta 510 µmol/l (30 mg/dl). A
un detergente. La bilirrubina total reacciona con Medición Frente a muetra blanco concentraciones superiores a 342 µmol/l (20 mg/dl)
2,4-dicloroanilina para formar una azobilirrubina. Pipetear en la cubeta: se recomienda el ensayo pediátrico.
coloreada.
Ensayo normal Ensayo pediátrico NOTAS
MUESTRA
Suero fresco libre de hemólisis, plasma heparinizado Muestra Muestra Muestra Muestra La hemólisis interfiere con el ensayo. Evitar la expo-
o EDTA plasma. Almacenar en la obscuridad hasta Blanco Blanco sición de las muestras a la luz del sol. El reactivo
que sea utilizada. almacenado puede desarrollar una leve coloración,
Muestra 100 µl 100 µl 20 µl 20 µl pero esto no afectará a los resultados. Sin embargo,
REACTIVOS Reactivo de trabajo 1000 µl ---- 1000 µl ---- es aconsejable utilizar en reactivo blanco en cada serie.
Reactivo blanco ---- 1000 µl ---- 1000 µl Si la absorbancia del reactivo blanco es mayor de
Componentes Concentración de las soluciones 0.040 A, deberá prepararse reactivo de trabajo fresco.
Mezclar, y dejar durante 10 min protegido de la luz..Medir la
1. Reactivo DCA absorbancia de la muestra (Amuestra) frente al blanco (entre
2,4-dicloroanilina 3.0 mmol/l una medida y la otra no deben transcurrir mas de 60 minutos). REFERENCIAS
Acido clorhídrico 80 mmol/l
Detergente 60 g/l CALCULOS 1. Rand, R.N. And di Pasqua, A., Clin, Chem. 1962; 8:
2. Nitrito Sódico 3.0 mmol/l 570
3. Reactivo blanco Concentración de bilirrubina: 2. Weigl, E. Et al., Med. Klin. 1975; 70:664.
2,4-dicloroanilina 1.5 mmol/l 3. Schellong, G., Icterus neonatorum, Thieme Verlag
Acido clorhídrico 40 mmol/l Ensayo normal Ensayo pediatrico Stuttgart 1962; 82.
Detergente 30 g/l c[mg/dl] c[µmol/l] c[mg/dl] c[µmol/l]
12.5 x A 214 x A 58 x A 992 x A
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES

Mezclar el reactivo DCA (botella 1) con el reactivo
(3)
nitrito (botella 2) en proporción 1 + 1. Antes de usar VALORES NORMALES
dejar a temperatura ambiente durante al menos 15
minutos protegido de la luz. Es estable durante 10 Adultos: Hasta 1.10 mg/dl o 19µmol/l
días conservado entre +15 y +25°C ó 21 días entre Neonatos: Hasta 13.3 mg/dl o 227µmol/l
+2 y +8°C.
BILIRRUBINA 9
Método Colorimetrico Bilirrubina Total (BT) CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. Pipetear en la cubeta: Para un control de exactitud y reproducibilidad:

Multisueros Humanos Nivel I y II ensayados.
BR 411 R1. Acido Sulfanilico 1 x 50 ml Muestra Blanco (ml) Muestra (ml) Para un control de reproducibilidad:
225 ml R2. Nitrito 1 x 10 ml Multisueros Humanos Normal y Elevado o Control de
100 Test R3. Cafeína 1 x 100 ml Reactivo R1 0.20 0.20 bilirrubina Elevado Cat. No. BE 454.
R4. Tartrato 1 x 100 ml Reactivo R2 ---- 1 gota (0.05 ml)
Reactivo R3 1.00 1.00 LINEARIDAD
(1)
PRINCIPIO Muestra 0.20 0.20
La bilirrubina total se determina en presencia de cafeina El método es lineal hasta 425 µmol/l (25 mg/dl). Si la
mediante la reacción con ácido sulfanilico diazotado. Mezclar, y dejar reposar durante 10 min entre 20-25ºC absorbancia exede 1.5 (ABT o ABD) diluir la muestra 1 + 4
La bilirrubina directa (conjugada) se determina en con NaCl 0.9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado
ausencia de cafeina. Reactivo R4 1.00 1.00 por 5.
MUESTRA Mezclar y dejar reposar durante 5-30 min entre +20 y + 25ºC. NOTAS
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma. Leer la absorbancia de la muestra frente a la muestra blanco
(ABT) La hemólisis interfiere en la prueba. Deben utilizarse
REACTIVOS Bilirrubina Directa (BD) muestras frescas y deben guardarse protegidas de la luz
Componentes Concentraciòn de las soluciones Pipetear en la cubeta: PRECAUCIONES
R1. Acido Sulfanilico Muestra Blanco (ml) Muestra (ml) Unicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
Acido clorhidrico 29 mmol/l boca. Respetar las precauciones normales necesarias
R2. Nitrito Sódico 0.17 N Reactivo R1 0.20 0.20 que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
R3. Cafeína 25 mmol/l Reactivo R2 ---- 1 gota (0.05 ml)
Benzoato Sódico 0.26 mol/l NaCl .9% 2.00 2.00 El reactivo 4 contiene hidroxido sódico que es caustico
R4. Tartrato 0.52 mol/l Muestra 0.20 0.20
Hidróxido Sódico 0.93 mol/l Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están dispo-
1.9 N Mezclar y dejar reposar durante 5 min exactos entre +20 y nibles si se desean.
+25ºC. Leer la absorbancia de la muesra frente a la muestra
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES blanco (ABD). REFERENCIA
Todos los reactivos están listos para usar, Son
estables hasta la fecha de caducidad cuando se CALCULOS 1. Jendrassik, L. And Grof. P., Biochem. Z. 1938; 297: 81
conservan entre +15 y +25ºC. Bilirrubina total (µmol/l) = 185 x ABT (578 nm) 2. Serlock, S. (1951) P. 204 in Liver Disease, Churchill,
Bilirrubina total (mg/dl) = 10.8 x ABT (578 nm) London.
PROCEDIMIENTO Bilirrubina directa (µmol/l) = 246 x ABD (546 nm)
Bilirrubina directa (mg/dl) = 14.4 x ABD (546 nm)
Longitud de onda:
(2)
Bilirrubina total Hg 578 nm (560-600 nm) VALORES NORMALES EN SUERO
Bilirrubina Directa Hg 546 nm (530-560 nm) Bilirrubina total: Hasta 17 µmol/l
Cubeta: 1 cm de espesor Hasta 1 mg/dl
Temperatura de reacción: 20-25ºC Bilirrubina directa: Hasta 4.3 µmol/l
Medición: frente a muestra blanco Hasta 0.25 mg/dl
Randox Mexico SA de CV Convento de Acolman 26. Col Jardines de Santa Monica, Tlalnepantla Edo de Mex
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CALCIO 10
Método Orto Cresoftaleina Reactivo de Trabajo CALCULOS
Mezclar volúmenes iguales de las soluciones R1 y R2 en Amuestra
cantidad suficiente para el numero de muestras que se Concentración = Apatrón x 2.50
Cat. No. vayan a ensayar . Estable durante 7 días cuando se (mmol/l)
CA 590 Ca CAL 5 ml conservan entre +2 y +8°C ó 3 días entre +15 y +25°C. Amuestra
200 ml R1. TAMPON/BUFFER 1 x 100 ml Concentración = Apatrón x 10.0
R2 CROMOGENO 1 x 100 ml PROCEDIMIENTO (mg/dl)
R3. EDTA 10 ml
Longitud de onda: Hg 578 nm ( 550-590 nm) CONTROL DE CALIDAD
METODO COLORIMETRICO.(1) Espectofotometro: 570 nm Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Cubeta: 1 cm de espesor Multisueros normal y elevado ensayados.
O-cresoftaleina sin desproteinización. Medición: frente a reactivo blanco Para un control de reproducibilidad.
solo se requiere un Multisuero bajo, normal y elevado.
PRINCIPIO blanco por serie
Los iones calcio forman un complejo violeta con la Temperatura: 20 - 25°C / 37°C LINEARIDAD
o-cresoftaleína complexona en medio alcalino. Si la concentración de calcio excede 3.75 mmol/l
1. Para ensayos individuales (15 mg/dl)diluir 0.1 ml de muestra con 0.1 ml de
MUESTRA agua bidestilada y repetir la prueba. Multiplicar el
Suero, plasma heparinizado u orina. Diluir la orina Pipetear en tubos de ensayo: resultado por 2
1 + 1 en NaCl 0.9%. Multiplicar el resultado po 2.
Reactivo Patrón Muestra VALORES NORMALES
REACTIVOS Blanco Suero: 2.02 - 2.60 mmol/l (8.10-10.4 mg/dl)
Orina: - 6.2 mmol/24hrs (100 - 249mg/24 hrs)
Componentes Concentracion de las soluciones Muestra ---- ---- 25 µl
Agua destilada 25 µl ---- ---- NOTAS
Ca Calibrador Patrón Solución 1 ---- 25 µl ---- Si la muestra tiene un fuerte color intrínseco.
Calcio 2.5 mmol/l (10 mg/dl) Solución 2 0.50 ml 0.50 ml 0.50 ml (hemoglobina: >200 mg/dl, bilirrubina >20mg/l ó
R1. Tampón/ Buffer Solución 3 0.50 ml 0.50 ml 0.50 ml marcada lipemia) debe utilizarse una muestra (Amuestra)
2-amino-2-metil-propan-1-ol 3.5 mol/l, pH 10.7 según el procedimiento del ensayo, añadir 1 gota de
R2. Cromógeno Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del solución 4 (EDTA) a la muestra y al reactivo blanco.
o-cresoftaleína patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a Cuando las muestras se hayan decolorado (despúes
Complexona 0.16 mmol/l 50 minutos. de unos 10 seg) leer la absorbancia de la muestra
8-hidroxiquinolina 6.89 mmol/l blanco frente al reactivo blanco (reactivo blanco/EDTA)
Acido cloehidrico 60 mmol/l 2. Para ensayos en serie para obtener Amuestra/EDTA.
R3. EDTA 150 mmol/l Por consiguiente.
Pipetear en tubos de ensayo: Amuestra (corregida) = Amuestra - Amuestra/EDTA
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Reactivo Patrón Muestra Esta prueba es muy sensible, por lo que se recomienda
1. Para ensayos individuales Blanco el uso de articulos desechables. Antes de ser utilizados,
Todas las soluciones están listas para usar. los utensilios de cristal deben ser enjuagados con ácido
mantener las botellas cerradas despúes de Muestra ---- ---- 25 µl clorhidrico diluido y luego con abundante agua destilada.
utilizarlas. Estables hasta la fecha de caducidad Agua destilada 25 µl ---- ----
cuando se conservan entre +15º y +25ºC Patrón ---- 25 µl ---- REFERENCIAS
2. Para ensayos en serie Reactivo de trabajo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml 1. Ray Sarkar, B.B., and U.P.S Chauhan., Anal Biochem.
Todas las soluciones estàn listas para usar . 1967; 20; 155
mantener las botellas cerradas despúes de Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del 2. Barnett, R.N., et al. (1973) Amer. J. Clin. Path. 59:836
utilizarlas. Estables hasta la fecha de caducidad patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a
cuando se conservan entre +15º y +25ºC 50 minutos.
CALCIO 11
Método Arzenazo III

NOTA: NO USAR oxalato sódico, EDTA o floruro sódico NOTAS
Cat. No. como anticoagulantes, ya que interfieren con el Las interferencias no específicas de la absorbancia se
CA2390 R1. Reactivo Arzenazo 6 x 100 ml análisis y deberán ser evitados. El suero es estable corrigen añadiendo Reactivo EDTA (cat. No. CA2392)
CAL. Patrón 1 x 5 ml durante 8 horas a temperatura ambiente ó 24 horas el cual elimina el calcio del complejo coloreado Arsenazo
CA2390B R1. Reactivo Arzenazo 1 x 100 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C cálcico III y permite una medición exacta del blanco de
CAL. Patrón 1 x 5 ml muestra
CA2391 R1. Reactivo Arzenazo 2 x 100 ml REACTIVOS
CAL. Patrón 1 x 5 ml CALIBRACIÓN
Componentes Concentración Inicial Recomendamos Suero de Calibración Randox Nivel II,
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA.(1) de las Soluciones Cat. No. CAL 2350, o suero de calibración Randox Nivel 2
Cat. No. CAL 2351, o suero de calibración Randox Nivel 3
El Calcio es el elemento mineral más abundante en R1. Reactivo Arzenazo
el cuerpo humano, con aproximadamente el 99% Acetato sódico 90 mmol/l, pH5,9 CONTROL DE CALIDAD
principalmente en los huesos como hidroxiapatito. Arsenazo 348 µmol/l
El resto del calcio es distribuido entre varios tejidos Estabilizadores no reactivos Para un control de exactitud y reproducibilidad:-
y fluidos extracelulares. El calcio está asociado a la Multisueros normal y elevado ensayados
coagulación de la sangre, conducción neuromuscular, PREPARACIÓN DE LAS SOLUCIONES Para un control de reproducibilidad:-
excitabilidad del esqueleto y músculo cardíaco, y la Todos los reactivos están listos para usar. Estables hasta Multisueros bajo, normal y elevado .
activación enzimática. la fecha de caducidad cuando se conservan entre +15 y
+25°C. LINEARIDAD
Los niveles de calcio en el suero se controlan por Este método es lineal hasta 4.25 mmol/l (17 mg/dl). Para
medio de hormonas paratiroidea y vitamina D. Un PROCEDIMIENTO muestras superiores, diluir 1+1 con solución NaCl al 0.9%
desequilibrio en cualquiera de estos modulares, y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 2.
puede dar lugar a alteraciones del nivel de calcio Longitud de onda: 650 nm (640 nm - 660 nm)
en el suero. Cubeta: 1 cm de espesor VALORES NORMALES(3)
Temperatura: 25/30/37°C
Los aumentos en suero pH o vitamina D se asocian Medición: frente al aire Niños (hasta 1 mes) 1.75 - 2.87 mmol/l
normalmente con hipercalcemia, la cual puede dar (7 - 1 1.5 mg/dl)
lugar a mieloma múltiple y otras enfermedades neo- Pipetear en la cubeta: 1 mes - 1 año 2.15 - 2.79 mmol/l
plásticas. la Hipocalcemia se observa en hipopara- (8.6 - 1 1.2 mg/dl)
tiroidismo, nefrosis y pancreatis. Reactivo Adultos hasta 30 años 2.05 - 2.54 mmol/l
Blanco Calibrador Muestra (8.2 - 10.2 mg/dl)
PRINCIPIO ORINA: 100 - 249 mg/24 horas
El Arzenazo III se une específicamente al calcio Agua destilada 15µl ------ ------
formado un complejo coloreado a 650 nm Muestra ------ ------ 15µ l
CAL. Patrón ------ 15µ l ------
Ca++ + Arzenazo III Complejo coloreado R1. Reactivo 1.0ml 1.0 ml 1.0ml
REFERENCIAS
La cantidad de calcio presente en la muestra es Mezclar y leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y 1. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry 2nd
directamente proporcional a la intensidad del calibrador (Acalibrador ) frente al reactivo blanco al cabo ed. N.B. Saunders Co., Philadelphia (1976)
complejo coloreado formado. de 5 minutos. 2. Michaylova, V., and IIIkova, P., Anal Chem Acta, 53:
194 (1971).
MUESTRA(4) CALCULO 3. Jacobs, D.S., Laboratory Test Handbook 2nd ed
Suero/Plasma:, orina diluída 1:10 con agua destilada Amuestra 1990
Concentración = A x valor del calibrador 4. Young, D. Pestaner L., Clin Chem. 21: 5 (1975).
calibrador
CK-NAC Activado 12
Método DGKC

VALORES NORMALES EN SUERO
Cat. No.
CK 110 R1a Tampón Glucosa 1 x 70 ml R1a Tampón Glucosa 25°C 30 °C 37°C
R1b. Enzimas / Coenzim 20 x 2.5 ml Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Hombres > 80 U/L > 130 U/L > 195 U/L
Sustrato cuando se conserva entre +2 y +8ºC Mujeres > 70 U/L > 110 U/L > 170 U/L
METODO UV1 R1b. Enzimas / Coenzima / Sustrato para CK Total

Este es un método estandar optimizado según las Reconstituir un vial de reactivo R1b con 2.5 ml de CONTROL DE CALIDAD
recomendaciones de la Deutshen Gesellschaft für tampón R1a. Estable durante 21 días entre +2 y +8º C Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Klinsche Chemie. y 3 días entre +15 y +25ºC Multisuero normal y elevado ensayados
Para unc ontrol de reproducibilidad:
PRINCIPIO Multisueros: bajo, normal y elevado.
PROCEDIMIENTO
Fosfato de Creatina + ADP CK

> Creatina + ATP Longitud de onda 340 nm, Hg 365 nm o Hg 334nm LINEARIDAD
HK
ATP + Glucosa > Glucosa 6-P + ADP Cubeta 1 cm de espesor Si la variación de absorbancia por minuto excede:
G6PDH
Gluc-6P + NADP > Gluconato-6P + NADPH + H Temperatura 25, 30, 37°C 0.25 a 340 nm/Hg, Diluir 0.1 ml de muestra en 0.9 ml de
Medición frente al aire NaCl al 0.9% y repetir la prueba multiplicando el resultado
MUESTRA: Suero , plasma heparinizado ó EDTA por 10.
Pipetear en la cubeta:
REACTIVO NOTAS
Macro Semi Micro Evitar la hemolisis ya que interfiere con el ensayo.
Componentes Concentración en la prueba Muestra 100 uL 20 uL
Reactivo de CK total 2500 uL 500 uL PRECAUCIONES
R1a Tampón Glucosa Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con
Tampon Imidazol 0.10 mol/l pH 6.7 Mezclar, incubar durante: 3 min a 25°C la boca. Respetar las precauciones normales necesarias
Glucosa 20 mmol/L 2 min a 30°C que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Mg-Acetato 10 mmol/L 1 min a 37°C El reactivo contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el
EDTA 2.0 mmol/L contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente el
R1b. Enzimas / Coenzima / Sustrato para CK Total Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar área afectada con agua abundante. En caso de ingestión
ADP 2.0 mmol/L el tiempo simultaneamente. Leer de nuevo al cabo o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un
AMP 5.0 mmol/L de 1, 2 y 3 min. médico.
Pentafosfato de diadenosina 10 umol/L
NADP 2.0 mmol/L CALCULOS REFERENCIAS
HK > 2.5 U/ml Para calcular la actividad de la CK utilizar las formulas 1. Rec. GSCC (DGKC): J. Clin. Chem. Clin. Biochem.
G6P-DH > 1.5 U/ml siguientes: 1977; 15: 255
N-Acetilcisteína 20 mmol/L 2. Stein, W.,(1985) Med Weit ; 36:572
Fosfato de Creatina 30 mmol/L U/L = ∆A / min x 4127 a 340 nm 3. Szasz, G., et al. Clin. Chem. 1976; 22: 650
CK-MB 13
Método manual U.V.
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES PROCEDIMIENTO (Calculo a 1 min de incubacion)
Cat. No. R1a. Tampon CK-NAC/CK-MB/Glucosa Tambien se puede medir la variación de la Absorbancia
CK 1296 Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad por min (∆A/min). Para los calculos debera usarse la
R1a. Tampon CK-NAC/CK-MB/Glucosa 1 x 70 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C media de 5 medidas. En este caso las formulas serian:
R1b. Enzimas / Coenzimas / 19 x 2.5 ml R1b. Enzimas / Coenzimas / Anticuerpo para CK-MB
Sustrato / Anticuerpo Reconstituir un vial de reactivo R1b con 2.5 ml de Longitud de Onda CK-B (U/l) CK-MB (U/l)
Control 1x 2 ml tampón R1a. Estable durante 21 días entre +2 y +8º C 340 nm 4127 x ∆A 8254 x ∆A
y 3 días entre +15 y +25ºC
3
PRINCIPIO RANGOS DE REFERENCIA
Prueba de inmunoinhibición. Se incorpora un anticuerpo Control Infarto de miocardio (IM)
dentro del reactivo CK que inhibe la fracción M. Esto signi- Reconstituír un vial de suero control con 2 ml de agua La probabilidad de lesion miocardica es mayor cuando
fica que sólo se mide la actividad de la subunidad B. Para destilada. Reposar 15 minutos, mezclar suavemente estan presentes los tres factores siguientes:
obtener la actividad de CK MB, el factor se multiplica x 2 hasta disolver el contenido. Estable durante 5 días entre
+2 y +8°C 25°C 30°C 37°C
1. CKHombre > 80 U/l1 > 130 U/l2 > 195 U/l*
MUESTRA: Suero , plasma heparinizado ó EDTA PROCEDIMIENTO (Calculo a 5 min) CKMujer > 70 U/l1 > 110 U/l2 > 170 U/l*
1
2. CK-MB > 10 U/l > 16 U/l2 > 25 U/l*
REACTIVO Longitud de onda 340 nm, Hg 365 nm o Hg 334nm 3. Cuando esta presente una actividad CK-MB entre 6 y
Cubeta 1 cm de espesor 25% de la actividad total de la CK
Componentes Concentración en la prueba
Temperatura 25, 30, 37°C
R1a. Tampon CK-NAC/CK-MB/Glucosa Medición frente al aire * Valores calculados
Tampon Imidazol 0.10 mol/l pH 6.7 Cuando se sospecha de IM pero los valores obtenidos están debajo de
Glucosa 20 mmol/L los limites especificados. Para confirmar si ha ocurrido un infarto reciente
Mg-Acetato 10 mmol/L Macro Semi Micro la prueba debera repetirse 4 horas despúes.
EDTA 2.0 mmol/L Muestra 100 uL 20 uL
R1b. Enzima/Coenzima/Sustrato/Anticuerpo Enzima / Coenzima CONTROL DE CALIDAD
ADP 2.0 mmol/L Sustrato / Anticuerpo 2500 uL 500 uL Para un control de exactitud y reproducibilidad:
AMP 5.0 mmol/L Suero Control Cat. No. CK 1212
Pentafosfato de diadenosina 10 umol/L Mezclar, dejar reposar a la temperatura adecuada
NADP 2.0 mmol/L durante 10 min. Añadir a una cubeta y leer la absorbancia LINEARIDAD
HK > 2.5 U/ml A1. Leer la Absorbancia 2 al cabo de 5 minutos exactos Hasta 2000 U/L
G6P-DH > 1.5 U/ml
∆A = A2 - A1
N-Acetilcisteína 20 mmol/L REFERENCIAS
Fosfato de Creatina 30 mmol/L CALCULO a 5 minutos de incubacion 1. Stein, W., Med Weit 1985; 36:572
Anticuerpo (CK-M) 2. Szasz, G., and E. W. Busch, Paper presented at 3rd
Control ver instructivo anexo Longitud de Onda CK-B (U/l) CK-MB (U/l) Eur. Cong. Clin, Chem., Brighton/England, June
340 nm 825 x ∆A 1651 x ∆A 1979;3-8
3. Wurburg, U., et al., Clin, Chem. 1976; 54:357
CK - CKMB (Combinado) 14
Método Enzimático NAC activado
Cat. No. La concentracion de sustratos coenzimas y enzimas PROCEDIMIENTO PARA CK MB
CK 2317A R1a. Tampon 1 x 70 ml son identicas a las de CK Total.
CK-NAC/CK-MB/Glucosa Longitud de onda 340 nm
R1b. Enzimas / Coenzimas 9 x 2.5 ml PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Cubeta 1 cm path length
Sustrato / Anticuerpo para CK Total Temperatura 25, 30, 37°C
R1b. Enzimas / Coenzimas 9 x 2.5 ml R1a. Tampon CK-NAC/CK-MB/Glucosa Medición frente a aire
Sustrato / Anticuerpo para CK-MB Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8ºC
1
PRINCIPIO CK TOTAL R1b. Enzimas / Coenzimas / Sustrato para CK Total Macro Semi Micro
Fosfato de Creatina + ADP CK > Creatina + ATP Reconstituir un vial de reactivo R1b con 2.5 ml de Muestra 100 uL 20 uL
HK
ATP + Glucosa > Glucosa 6-P + ADP tampón R1a. Estable durante 21 días entre +2 y +8º C Reactivo de CK MB 2500 uL 500 uL
Gluc-6P + NADP G6PDH > Gluconato-6P + NADPH + H y 3 días entre +15 y +25ºC
PRINCIPIO 3 CK MB R1b. Enzimas / Coenzimas / Anticuerpo para CK-MB Mezclar, incubar 10 minutos a temperatura ambiente.
Prueba de inmunoinhibición. Se incorpora un anticuerpo Reconstituir un vial de reactivo R1b con 2.5 ml de Leer Abs 1 y exactamente despúes de 5 min. Leer
dentro del reactivo CK que inhibe la fracción M. esto tampón R1a. Estable durante 21 días entre +2 y +8º C Abs 2. Calcular el ∆A por un minuto
significa que sólo se mide la actividad de la subunidad y 3 días entre +15 y +25ºC
B. Para obtener la actividad de CK MB, el factor se 3. Suero control opcional (Cat. No OCK57) ∆A / min = A2 - A1
multiplica x 2. 5 min
PROCEDIMIENTO PARA CK TOTAL
MUESTRA: Suero , plasma heparinizado ó EDTA CALCULO PARA CK MB
Longitud de onda 340 nm
REACTIVO Cubeta 1 cm path length U/L = ∆A / min x 8254
Temperatura 25, 30, 37°C
Componentes Concentración en la prueba
Medición frente a aire RANGOS DE REFERENCIA
Reactivo para CK Total Infarto de miocardio (IM)
R1a. Tampón / Glucosa La probabilidad de lesion miocardica es mayor cuando
Tampon Imidazol 0.10 mol/l pH 6.7 Macro Semi Micro estan presentes los tres factores siguientes:
Glucosa 20 mmol/L Muestra 100 uL 20 uL
Mg-Acetato 10 mmol/L Reactivo de CK total 2500 uL 500 uL 25°C 30°C 37°C
EDTA 2.0 mmol/L 1. CKHombre > 80 U/l1 > 130 U/l2 > 195 U/l*
R1b. Enzima/Coenzima/Sustrato CK Total Mezclar, incubar 3 minutos a temperatura ambiente. CKMujer > 70 U/l1 > 110 U/l2 > 170 U/l*
1
ADP 2.0 mmol/L Leer al cabo de 1, 2 y 3 min. Calcular ∆A / min. 2. CK-MB > 10 U/l > 16 U/l2 > 25 U/l*
AMP 5.0 mmol/L 3. Cuando esta presente una actividad CK-MB entre 6 y
Pentafosfato de diadenosina 10 umol/L CALCULO PARA CK TOTAL 25% de la actividad total de la CK
NADP 2.0 mmol/L
HK > 2.5 U/ml U/L = ∆A / min x 4127
G6P-DH > 1.5 U/ml LINEARIDAD
N-Acetilcisteína 20 mmol/L VALORES DE REFERENCIA DE CK TOTAL Hasta 2000 U/L
Fosfato de Creatina 30 mmol/L 25°C 30 °C 37°C
Hombres > 80 U/L > 130 U/L > 195 U/L REFERENCIAS
Reactivo para CK-MB Mujeres > 70 U/L > 110 U/L > 170 U/L 1. Stein, W., Med Weit 1985; 36:572
R1b. Enzima Coenzima / anticuerpo (CK-MB) 2. Wurburg, U., et al., Clin, Chem. 1976; 54:357
CLORO 15
Método Tiocianato mercurioso (II)
PROCEDIMIENTO Para un control de reproducibilidad:
Cat. No. Multisueros: bajo, normal y elevado.
CL1645A R1. Reactivo Tiocianato 1 x 500 ml 436 nm (400 - 480 nm)
CAL. Patrón Cubeta: 1 cm de espesor Un control (nivel 1 ó 2) debe ser analizado despues de
CL1646 R1. Reactivo Tiocianato 10 x 20 ml Temperatura: 37°C cada 10 muestras. Los valores obtenidos deben caer
CAL. Patrón Médición: frente a reactivo blanco dentro del rango especificado. Si estos valores estan
fuera de rango, para excluir el error es necesario revisar
Pipetear en la cubeta:
METODO COLORIMETRICO los siguientes puntos.
Reactivo 1. Revisar la fuente de luz del instrumento
Patrón Muestra
Los iones de Cloro reaccionan con tiocianato mercurioso Blanco 2. Limpieza de puntas y pipetas
para formar perclorato y tiocianato. 3. Calidad del agua, evitar contaminación
Agua destilada 10 µl ----- ----- 4. Checar fecha de caducidad del kit
El tiocianato liberado forma un complejo rojo con el Patrón ----- 10 µl ----- 5. Llamar al soporte tecnico de Randox
cloruro férrico en presencia de ácido nitrico. Muestra ----- ----- 10 µl
Reactivo 1000 µl 1000 µl 1000 µl LINEARIDAD
MUESTRA
Mezclar e incubar durante 5 minutos a 37°C. Medir la Este método es lineal entre concentraciones de cloro
Suero, plasma EDTA o plasma heparinizado, absorbancia de la muestra o el patrón frente al reactivo de 60 mmol/l y 140 mmol/l.
fluido cerebroespinal, fluido amniotico, orina. blanco.
PRECAUCIONES:
CALCULO
REACTIVOS Unicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con
Concentración de cloro en la muestra la boca, respetar las precauciones normales necesarias
Componentes Concentracion de los reactivos que se requieran al manejar reactivos de laboratorio.
A muestra
= x concentración del patrón
R1. Reactivo Tiocianato A patrón Hojas informativas sobre la Salud y Seguridad están
Nitrato-Férrico (III) 22.2 mmol/l Disponibles si se desean.
Nitrato de Mercurio 1.89 mmol/l
Cloruro de Amonio 1.1 mmol/l VALORES DE REFERENCIA REFERENCIA
Tiocianato de Amonio 2.72 mol/l 97 - 107 mmol/l
Acido Nitrico 28.0 mmol/l Dado que pueden ocurrir variaciónes debido a la edad, 1. Fried R., et al. J. Clin, Chem. Clin. Biochem. 1972;
CAL Patrón 100 mmol/l sexo, dieta y situación geográfica, recomendamos que 10: 280
cada laboratorio establesca sus propios rangos normales.
PREPARACION DE LOS REACTIVOS
R1. Reactivo de Tiocianato CONTROL DE CALIDAD
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Para un control de exactitud y reproducibilidad:
cuando se conserva entre +15 y +25°C. Multisueros normal y elevado analizados.
COLESTEROL 16
Método CHOD-PAP
Cat. No. PREPARACIÓN DE REACTIVO VALOR DE REFERENCIA(4)
CH198 R1. Reactivo 1 x 100 ml R1. Reactivo Niveles de riesgo
Listo para usar. Es estable hasta la fecha de caducidad
Valor Interpretación
CH199 R1. Reactivo 2 x 100 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C en ausencia de
contaminación y protegido de la luz. < 5.17 mmol/l (200 mg/dl) Colesterol en sangre
CH200 R1. Reactivo 6 x 30 ml deseado
CAL. Patrón 5.17 - 6.18 mmol/l (200-239 mg/dl) Colesterol en sangre
CH201 R1. Reactivo 6 x 100 ml Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad limite-alto
cuando se conserva entre +2 y +8°C. > 6.20 mmol/l (240 mg/dl) Colesterol en sangre alto
CH202 R1. Reactivo 10 x 20 ml
PROCEDIMIENTO
Cada juego de reactivos incluye CAL. Patrón CONTROL DE CALIDAD
Longitud de onda: 500 nm; Hg 546 nm Para un control de exactitud y reproducibilidad:
(1,2,3)
PRINCIPIO Cubeta: 1 cm de espesor Multisuero normal y elevado ensayados
El colesterol se determina después de hidrólisis Temperatura: 20-25°C / 37°C Para un control de reproducibilidad:
enzimática y oxidación. El indicador quinoneimina Medida: frente a reactivo blanco Multisuero: bajo, normal y elevado.
se forma a partir de peróxido de hidrógeno y
4-amino-antipirina en presencia de fenol y peroxidasa. Pipetear en la cubeta: LINEARIDAD
El método es lineal hasta una concentración de colesterol
Ester de colesterol +H2O colesterol
esterasa >Colesterol + Acidos Grasos Reactivo Blanco Patrón Muestra de 19.3 mmol/l (750 mg/dl). Las muestras con concentra-
ciónes de colesterol superiores a ésta , deben ser diluidas
colesterol
Colesterol + O2 esterasa
> Colesten-3-ona + H2O2 Agua destilada 10 (ul) ---- ---- 1+ 2 con NaCl al 0.9%. Multiplicar el resultado por 3.
Patrón ---- 10 (ul) ----
2H2O2 + fenol + 4-aminoantipirina peroxidasa > quinoneimina +H2O Muestra ---- ---- 10 (ul) PRECAUCIONES
Reactivo 1000 (ul) 1000 (ul) 1000 (ul) Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con
MUESTRA la boca. Respetar las precauciones normales nece-
Mezclar incubar durante 10 min a 20 - 25°C ó 5 min a sarias, que se requieren al manejar reactivos de
Suero, Plasma heparinizado o EDTA plasma. 37°C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) frente al laboratorio. El reactivo contiene azida sódica. Evitar
blanco antes de 60 min. su ingestión o el contacto con la piel y mucosas,.En
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO caso de contacto con la piel lavar inmediatamente el
CÁLCULOS área afectada con agua abundante.
1. Utilizando un patrón:
Componentes Concentración inicial de la solución.
NOTA
Conc. de colesterol = Amuestra x conc. de patrón Valores de hemoglobina hasta 200 mg/dl y de
R1. Reactivo en la muestra Apatrón bilirrubina hasta 5mg/dl. No interfieren en la prueba.
4-aminoantipirina 0.30 mmol/l
Fenol 6 mmol/l 2.Utilizando Factor: REFERENCIAS
Peroxidasa > 0.5 ml 1. Kassirer,J.P. New Eng. J. Med. 1971; 285;385
Colesterol Esterasa > 0.15 U/ml Longitud de onda mmol/l mg/dl 2. Tietz, N,W.,Fundementals of Clinical Chemistry W.B.
Colesterol oxidasa > 0.1 U/ml Saunders Company, 1970 Philadelphia
Tampón Pipes 80 mmol/l:pH 6.8 Hg 546 nm 21.7 x ∆A 840 x ∆A 3. Young. D.S., Pestaner, L.C., Gibbermann,V. Clin.
CAL. Patrón 5.17 mmol/l (200 mg/dl) 500 nm 14.3 x ∆A 553 x ∆A Chem., 1975; 21; 1D.
COLESTEROL HDL con Patrón 17
Método de Precipitación con Acido Fosfotúngstico PROCEDIMIENTO: * Se considera la dilución en el paso de precipitación
El patrón no debe usarse en el paso de precipitación
Cat. No. Procedimiento con Factor
1. Precipitación:
CH 203 R1.Reactivo Precipitante 4 x 80 ml
HDL = Abs de muestra - Abs de blanco x F
CAL. Patrón 1 x 5 ml
Pipetear en tubos para centrífuga:
MACRO MICRO
Macro Semi-Micro
CH 204A R1.Reactivo Precipitante 1 x 80 ml Long de onda mg/dl mg/dl
CAL. Patrón 1 x 5 ml muestra 500 µL 200 µL
Precipitante (R1) 1000 µL ---- 500 nm 180 210
HDL COLESTEROL Precipitantre diluído (R1) ---- 500 µL 546 nm 274 320
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL Y VLDL) y las
fracciones de quilomicrones precipitan cuantitativamente Mezclar, incubar 10 min a temperatura ambiente. Centrifugar LINEARIDAD:
al añadir ácido Fosfotúngstico en presencia de iones de 10 minutos a 4000 rpm ó 2 min a 12000 rpm El método es lineal hasta una concentración de HDL-
magnesio. Después de centrifugar, la concentración de Separar el sobrenadante y realizar la determinación de colesterol colesterol de 200 mg/dl. Las muestras por arriba de ésta
colesterol se determina en la fracción de HDL (lipopro- antes de que transcurran 2 horas. concentración deberán diluírse 1 + 2 con solución salina
teínas de alta densidad) que queda en el sobrenadante. 2. Medida de Colesterol por el Método CHOD-PAP 0.9% y el resultado se multiplica por 3.
MUESTRA: Longitud de onda: 546 nm INTERPRETACION CLINICA

Suero, plasma heparinizado o con EDTA Cubeta: 1 cm de paso de luz
Medición: contra blanco de reactivo Sin Riesgo Riesgo
REACTIVOS Temperatura: 20-25°C ó 37°C Riesgo Moderado Alto
Pipetear en tubos de reacción:
Componentes Concentración de la Solución Hombres > 55 mg/dl 35-55 mg/dl < 35 mg/dl
Blanco Patrón Muestra Mujeres > 65 mg/dl 45-65 mg/dl <45 mg/dl
R1. Acido Fosfotúngstico 0.55 mmol/l
Cloruro de Magnesio 25 mmol/l Agua destilada 100 µL - -
Patrón - 100 µL - CONTROL DE CALIDAD
PREPARACION DE REACTIVOS: Sobrenadante - - 100 µL Para un control de exactitud y precisión
Reac de Colest 1000 µL 1000 µL 1000 µL Multisueros: Control de Lipidos , bajo , normal y alto
1.- Macroensayos: Listo para usar. Sin diluír.
Estable hasta la fecha de caducidad conservado Mezclar, incubar 10 min de +15 a +25°C ó 5 min a 37°C NOTAS
entre +2 y +25°C Medir la absorbancia de la muestra y del patrón contra Solo deben utilizarse sobrenadantes claros. En caso de
2.- Semi-Microensayos. Prediluír el reactivo precipitante el blanco de reactivos. que la sedimeintación haya sido incompleta (sobrenadante
en proporción 4+1 con agua bidestilada (diluír el contenido turbio) debido a concentraciones elevadas de triglicéridos
en el frasco de 80 ml con 20 ml de agua bidestilada). El CÁLCULOS: la muestra debe diluírse 1+1 con solución salina fisiológica
reactivo diluído es estable hasta la fecha de caducidad Concentración de HDL-Colesterol y el proceso de precipitación deberá ser repetido. El resul-
conservado entre +2 y +25 °C. El patrón está listo para A de la muestra tado se multiplica por 2.
mg/dl = x conc del patron
su uso. Estable hasta la fecha de caducidad almacenado A del patrón
entre +2 y +8 °C REFERENCIAS:
Procedimientos
1. Assman G. Internist 1979; 20:559
DETERMINACION DE COLESTEROL HDL Macro Semimicro 2.- Friedewald, W.T. Et al Clin, Chem., 1972; 18:449
Vease paquete adicional de colesterol CHOD-PAP A de la muestra A de la muestra 3.- Lopes-Virella, M. F. Et al, Clin, Chem 1977; 23:882
mg/dl = A x 150 * A del patrón x 175 *
Cat. CH198, CH199, CH200, CH201 del patrón
COLESTEROL LDL con patrón 18
Método de Precipitación con Hepárina
1. Precipitación
Cat. No. mmol/l mg/dl
Pipetear en tubos de centrifugación:
CH 1350A Reactivo Precipitante 1 x 100 ml
Patrón de Colesterol 1 x 5 ml Suero 100 µl 500 nm 32.70 1265
Reactivo de precipitación 1000 µl Hg 546 nm 49.63 1920
CH 1351 Reactivo Precipitante 3 x 100 ml
Patrón de Colesterol 1 x 5 ml Mezclar y dejar reposar 10 min a temperatura ambiente
Centrifugar durante 15 min a 4.000 rpm determinar la Calculo de LDL Colesterol
PRINCIPIO concentración de colesterol del sobrenadante hasta la Se requiere cuantificar el contenido de Colesterol total
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL) se precipitan hora siguiente a la centrifugación. y restar el valor obtenido en el sobrenadante
por medio de la heparina en su punto isoélectrico
(ph 5.04) después de la centrifugación las 2. Prueba de Colesterol en el sobrenadante Colesterol - LDL = Colesterol Total - Colesterol en
lipoproteínas de alta densidad (HDL) y las de muy el sobrenadante
baja densidad (VLDL) permanecen en el sobrenadante. Longitud de onda: 500 nm. Hg 546 nm
Estas se pueden determinar por medio de métodos Cubeta: 1 cm de espesor Interpretación Clínica
enzimáticos. Temperatura: 20-25°C ó 37°C
Medición: Frente a reactivo blanco Rango de valores esperados LDL Colesterol en suero
MUESTRA
Pipetear en tubos de ensayo. mg/dl mmol/l
Suero
Reactivo Patrón Pronostico favorable < 150 < 3.9
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Blanco 50 mg/dl Muestra Rango Sospecha 150 - 190 3.9 - 4.9
Riesgo aumentado > 190 > 4.9
Componentes Concentración inicial de la solución
Agua destilada 50 ul ---- ----
Sobrenadante ----- ---- 50 µl
Heparin 50,000 IU/l Patrón ----- 50 µl ---- NOTAS
Citrato Sódico 0.064 mol/l, pH 5.04 Reactivo 1000 µl 1000 µl 1000 µl Las lipoproteinas de baja densidad y las poco frecuentes
Patrón 1.29 mmol/l (50 mg/dl) aterogenicas precipitan cuantitativamente.
Mezclar, incubar durante 10 min entre +20 y +25°C Se da una ligera coprecipitacion de VLDL, pero dado que
PREPARACION DE REACTIVOS: ó 5 min a 37°C. Medir la absorbancia de la muestra su contenido de colesterol es bajo, los valores de
1.- Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo colesterol LDL no aumentan significativamente y no afecta
conservado entre +2 y + 8°C. El estándar está listo para blanco antes de 60 min. a la estimación de riesgo cardiovascular.
su uso. Estable hasta la fecha de caducidad almacenado
entre +2 y +8 °C 1.Calculo del NO LDL con patrón de 50 mg/dl CONTROL DE CALIDAD
∆A muestra x 550*
Para un control de exactitud y precisión
DETERMINACION DE COLESTEROL LDL = Multisueros: Control de Lipidos , bajo , normal y alto
∆Apatrón
Vease paquete adicional de colesterol CHOD-PAP
Cat. CH198, CH199, CH200, CH201 *= Se considera la dilución en el paso de precipitación REFERENCIAS:
1.- H. Wieland and D. Seidel, J. Lipid Res. 24,904
DETERMINACIÓN DEL NO LDL COLESTEROL Procedimiento con factor (1983)
Se puede hacer con patrón o con factor Concentración de colesterol en el sobrenadante 2.- G. Assmann, Internist 20,559 (1979)
Nota: El patrón de 50 mg/dl no debe usarse en el
paso de precipitación. No LDL = Abs de muestra - Abs de blanco x F
COLESTEROL HDL DIRECTO 19
Método de Aclaramiento
MUESTRA: Después agregar:
Cat. No. Suero ó plasma heparinizado, no emplear EDTA. El
Reactivo R2 0.250 ml 0.250 ml
CH 3811A Reactivo enzimático R1 1 x 51 ml HDL - Colesterol es estable 6 días entre +2 y +8°C. la
Reactivo enzimático R2 1 x 20 ml muestra no debe congelarse. Mezclar, incubar 5 minutos a 37°C. Medir la absorbancia
Solución patrón HDL A2 de la muestra y del patrón contra agua destilada
COMPOSICION DE LOS REACTIVOS:
CH 2652A Reactivo enzimático R1 2 x 30 ml CALCULOS:
Reactivo enzimático R2 1 x 20 ml Reactivo enzimático R1: ( A2 - A 1) muestra x Conc del patrón
HDL -Colest=
Solución patrón HDL Solución Tampón pH 7.0 100 mmol/L ( A2 - A 1) patrón
HDAOS N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3,5-dimetoxianilina) 0.56 mmol/L
IMPORTANCIA CLINICA Colesterol Esterasa 800 U/L VALORES ESPERADOS:
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) transportan Colesterol Oxidasa 507 U/L
el colesterol desde las células periféricas hacia el Catalasa 800 KU/L SIN RIESGO RIESGO
hígado, donde es convertido a acidos biliares y es Reactivo enzimático R2: RIESGO MODERADO ALTO
excretado hacia el intestino. Se ha comprobado que Solución Tampón pH 7.0 100 mmol/L
existe una relación inversa entre los niveles de HDL 4-Aminoantipirina 4 mmol/L Hombres > 55 mg/dl 35-55 mg/dl < 35 mg/dl
y la incidencia de enfermedades coronarias(,1) Peroxidasa 4 KU/L Mujeres > 65 mg/dl 45-65 mg/dl <45 mg/dl
,2,3
PRINCIPIO El ensayo consiste en 2 partes: PREPARACION DE LOS REACTIVOS: De acuerdo al Programa Nacional de Educación de
Reactivos R1 y R2 : Los reactivos estan listos para su uso. Colesterol (NECP), los valores de HDL-Colesterol pueden
FASE DE ACLARAMIENTO Estable hasta la fecha de caducidad almacenado entre ser afectados por un gran número de factores como fumar,
1. La eliminación de quilomicrones, VLDL y LDL +2 y+8°C. Una vez abiertos debe evitarse la contaminación ejercicio, hormonas, edad y sexo. Por lo que se recomienda
colesterol por medio de colesterol esterasa, colesterol y deben mantenerse los frascos bien cerrados. que cada laboratorio determine los valores de acuerdo a
oxidasa y subsecuentemente catalasa Evite introducir pipetas ó puntas en el reactivo su población.
Esteres de colesterol Colesterol esterasa Colesterol + Acidos grasos PROCEDIMIENTO: INTERFERENCIAS:

Colesterol + O2 Colesterol oxidasa Colestenona + H2 O2 El ensayo no se ve afectado por muestas ictericas con
H2 02 Catalasa + 2 H2 O + O2 Longitud de onda 578 nm bilirrubinas <30mg/dl, Factor Reumatoide <1000 IU/ml,
Cubeta 1 cm paso de luz hemoglobina <500g/dl y Triglicéridos <1200 mg/dl. Si se
FASE DE REACCIÓN Temperatura 37 °C sobrepasan estas concentraciones, la muestra debe
2. La determinación específica de la fracción diluírse 1+ 9 con solución salina fisiológica. El resultado .
HDL-Colesterol después de la etapa descrita en se multiplica por 10.
el paso 1 Patrón Muestra
LINEARIDAD: Hasta 150 mg/dl
Esteres de colesterol Colesterol esterasa Colesterol + Acidos grasos Patrón 10 µl -
Colesterol Colesterol oxidasa Colestenona + H2 O2 Muestra - 10 µl REFERENCIAS:
2 H2O2 + 4-AA + HDAOS Peroxidasa Pigmento de quinona +4H2O2 Reactivo R1 750 µl 750 µl 1.- National Institutes of Health Consensus Develompent
Conference Statement: Triglycerides, High Density
La intensidad de quinoneimina producida es directa- Mezclar, incubar 5 minutos a 37°C. Medir la Absorbancia Lipoprotein and Coronary Heart Disease. Washington DC
mente proporcional a la concentración de Colesterol. A1 de la muestra y del patrón contra agua destilada. Feb 26-28, 1992
En la segunda reacción la catalasa se inhibe por otros 2.- Assman G., Europ.Guideline.S,Amer.Jcardiol
componentes. 1990:65 :11F
COLESTEROL LDL DIRECTO 20
Método de Aclaramiento
MUESTRA: Después agregar:
Cat. No. Suero ó plasma heparinizado, no emplear EDTA.
Reactivo R2 0.250 ml 0.250 ml
CH 3841A Reactivo enzimático R1 1 x 51 ml El LDL - Colesterol es estable 6 días entre +2 y 8°C.
Reactivo enzimático R2 1 x 20 ml La muestra no debe congelarse. Mezclar, incubar 5 minutos a 37°C. Medir la absorbancia
Solución patrón LDL COMPOSICION DE LOS REACTIVOS:
A2 de la muestra y del patrón contra agua destilada.
CH 2657A Reactivo enzimático R1 2 x 30 ml Reactivo enzimático R1: CALCULOS:

Reactivo enzimático R2 1 x 20 ml Solución Tampón pH 7.0 100 mmol/L LDL -Colesterol = ( A2 - A 1) muestra x Conc del patrón
Solución patrón LDL HDAOS N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3,5-dimetox 0.56 mmol/L ( A2 - A 1) patrón
Colesterol Esterasa 800 U/L
IMPORTANCIA CLINICA Colesterol Oxidasa 507 U/L VALORES ESPERADOS:
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL) son Catalasa 800 KU/L
sintetizadas en el hígado. Se ha demostrado que la Reactivo enzimático R2: SIN RIESGO RIESGO
mayor parte del colesterol almacenado en las placas Solución Tampón pH 7.0 100 mmol/L RIESGO MODERADO ALTO
ateroscleróticas se origina de LDL. 4-Aminoantipirina 4 mmol/L
Por ésta razón la concentración de LDL-Colesterol es Peroxidasa 4 KU/L Adultos < 130 mg/dl 130-159 mg/dl >160 mg/dl
considerada la determinación más importante dentro
de los parámetros relacionados a aterosclerosis PREPARACION DE LOS REACTIVOS: De acuerdo al Programa Nacional de Educación de
coronaria. Reactivos R1 y R2 : Los reactivos estan listos para su uso (NECP), los valores de LDL-Colesterol.
Estable hasta la fecha de caducidad almacenado entre +2 pueden ser afectados por un gran número de factores
PRINCIPIO El ensayo consiste en 2 partes: y+8°C. Una vez abiertos debe evitarse la contaminación y como fumar, ejercicio, hormonas, edad y sexo. Por lo que
FASE DE ACLARAMIENTO deben mantenerse bien cerrados. se recomienda que cada laboratorio determine los valores
1. La eliminación de quilomicrones, VLDL y HDL Evite introducir pipetas ó puntas en el reactivo de acuerdo a su población.
colesterol por detergentes especificos y posterior
transformación enzimatica del colesterol en agua y PROCEDIMIENTO: INTERFERENCIAS:
oxigeno. El ensayo no se ve afectado por muestas ictericas con
Longitud de onda 578 nm bilirrubinas <30mg/dl, Factor Reumatoide <1000 IU/ml,
Esteres de colesterol Colesterol esterasa Colesterol + Acidos grasos Cubeta 1 cm path length hemoglobina <500g/dl y Triglicéridos <1200 mg/dl. Si se
Colesterol + O2 Colesterol oxidasa Colestenona + H2 O2 Temperatura 37 °C sobrepasan estas concentraciones, la muestra debe
H2 02 Catalasa + 2 H2 O + O2 diluirse 1+ 9 con solución salina fisiológica. El resultado
Pipetear en tubos de ensayo: se multiplica por 10.
FASE DE REACCIÓN
2. La determinación específica de la fracción Patrón Muestra LINEARIDAD: Hasta 1000 mg/dl
LDL - Colesterol después de la etapa descrita en Sensibilidad desde 10 mg/dl
el paso 1 Patrón 10 µl -
Muestra - 10 µl REFERENCIAS
Esteres de colesterol Colesterol esterasa Colesterol + Acidos grasos Reactivo R1 750 µl 750 µl 1.- Rifai N., et al, Clin Cem., 38: 150-160, 1992
Colesterol Colesterol oxidasa Colestenona + H2 O2 2. Naito. H.K.: et al, clin chem 41: 132-133,1995
2 H2O2 + 4-AA + HDAOS Peroxidasa Pigmento de quinona +4H2O2 Mezclar, incubar 5 minutos a 37°C. Medir la Absorbancia 3. Armstrong V., et al Arztl Lab. 31: 325-330, 1985
A1 de la muestra y del patrón contra el agua destilada.
La intensidad de quinoneimina producida es
proporcional a la concentración de colesterol.
CREATININA 21
Método Jaffe sin desproteinización
CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. Pipetear en la cubeta: Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Multisueros Normal, Elevado ensayados.
CR510 CAL. Patrón 1x 5 ml Patrón Muestra Para un control de reproducibilidad:
200 ml R1a. Acido picrico 1 x 100 ml Macro Semi Macro Semi Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
R1b. Hidroxido sódico 1 x 100 ml Micro Micro
LINEARIDAD
PRINCIPIO Reactivo de trabajo 2.0 ml 1.0 ml 2.0 ml 1.0 ml Si la concentración excede 884µmol/l (10mg/dl) en suero
La creatinina en solución alcalina reacciona con ácido Solución Patrón 0.2 ml 0.1 ml ---- ---- o plasma ó 44.2 mmol/l (500 mg/dl) en orina, diluir suero
picrico para formar un complejo coloreado. La cantidad Muestra ---- ---- 0.2 ml 0.1 ml plasma u orina diluida 1 + 4 con NaCl al 0.9% y repetir la
del complejo formado es directamente proporcional a la prueba. Multiplicar el resultado por 5.
concentración de creatinina. Mezclar, leer la absorbancia A1 del patrón y de la muestra
al cabo de 30 segundos. Exactamente 2 min despúes leer NOTAS
MUESTRA la absorbancia A2 del patrón y de la muestra. El grado de reacción y la absorbancia del producto de la
Suero, plasma heparinizado o EDTA reacción son muy sensibles a la temperatura. La
Orina: Diluir 1 + 49 con agua bidestilada CALCULOS temperatura especificada debe ser por lo tanto mantenida.
A2 - A1 = ∆Amuestra ó ∆Apatrón La hemolisis interfiere en la prueba. No usar sueros
REACTIVOS lipémicos. El método es susceptible a interferencias por
Concentración de creatinina en suero o plasma: altos niveles de sustancias reductoras. Hervir la orina antes
Componentes Concentraciónes en la prueba de la prueba puede ayudar a reducir estas interferencias.
∆Amuestra
x 177 = µmol/l
CAL. Patrón 177umol/l (2 mg/dl) ∆Apatrón PRECAUCIONES
R1a. Acido picrico 35 mmol/l Unicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
R1b. Hidroxido sódico 0.32 mol/l ∆Amuestra boca. Respetar la precauciones normales necesarias que
x 2 = mg/dl
∆Apatrón se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Concentración de creatinina en orina: La solcuion 2 contiene ácido picrico que es tóxico.
Todos los reactivos están listos para usar. Estables La solución 3 contiene hidróxido sódico que es caustico.
hasta la fecha de caducidad cuando se conservan ∆Amuestra
x 8.85 = mmol/l
entre +15 y +25°C. ∆Apatrón Hojas informativas sobre salud y seguridad están
disponibles si se desean.
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO ∆Amuestra
x 100 = mg/dl
Mezclar volumenes iguales de Soluciónes R1a y R1b. ∆Apatrón REFERENCIAS
Estable durante 3 días cuando se conserva entre 1. Bartels, H., Bohmer, M., (1972) Clin. Chem. Acta 37: 193
+15 y +25°C. Aclaramiento mg creatinina/dl orina x ml orina 24hrs 2. Schirmeister, J., H Willmann, and H. Kiefer, (1964).
= (ml/min)
de creatinina mg Creatinina/dl suero x 1440 Dtsch. Med. Wschr, 89: 1018.
PROCEDIMIENTO
(2)
VALORES NORMALES
Longitud de onda: Hg 492 (490-510 nm)
Cubeta: 1 cm de espesor Suero: Hombre 53 - 97 µmol/l(0.6 - 1.1 mg/dl)
Temperatura: 25/30/37°C Mujer 44 - 80 µmol/l(0.5 - 0.9 mg/dl)
Medición: Frente al aire Orina: 8.84 - 13.3 mmol/24 hrs
1 - 1.5 g/24 hrs
FACTOR REUMATOIDE 22
Test en placa de aglutinacion en Latex
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Evaluación cualitativa de los resultados
Cat. No. RF 2716 Todos los reactivos y controles están listos para usar y son Agregados claramente visibles de las particulas de látex
R1. Reactivo Látex 100 Test estables hasta la fecha de caducidad cuando se conservan con un fondo claro indica una concentración de RF
R2. Diluyente 1 x 100 ml entre +2 y +8°C.Sin embargo, antes de usar, deben dejarse superior a 8 Ul/ml. .Agregados finos indican una concen-
Control Positivo 1 x 1 ml hasta que alcancen la temperatura ambiente. tración de RF de 8.0Ul/ml una suspensión lechosa indica
Control Negativo 1 x 1 ml Agitar el reactivo de látex antes de usar. una concentración por debajo de 8.0 Ul/ml
Placa de cristal (reutilizable) 1
PROCEDIMIENTO Determinación semicuantitativa
PRINCIPIO Determinación cualitativa La concentración de FR puede ser estimada de la última
El reactivo RF contiene particulas de látex recubiertas En cada uno de los circulos de reacción de la placa colocar dilución con aglutinación visible.
con gamma globulina humana. Cuando el reactivo se
mezcla con suero que contiene RF a un nivel mayor FR (Ul/ml) = Dilución más elevada con reacción positiva
Control Control
de 8.0Ul/ml las particulas se aglutinan. Muestra x sensibilidad del reactivo (8 Ul/mll)
Positivo Negativo
Esto se interpreta como prueba positiva.
El reactivo puede ser utilizado también en la semi- Muestra/ INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
50 µl 50 µl 50 µl
cuantificación de RF. Para este fin la muestra se Control El RF detectado por tecnicas serologicas no son necesa-
somete a diluciones seriadas y cada una se analiza riamente especifico de Artritis Reumatoide activa (RA)
Dispensar a lado de cada gota de muestra y control.
cualitativamente. El nivel de RF puede estimarse Un resultado positivo debe ser confirmado realizando un
apartir de la ultima dilución con aglutinación visible. Reactivo test en paralelo y consultando la historia clínica del pacie-
Latex nte. Pueden ocurrir resultados falsos positivos en sueros
MUESTRA de pacientes con sifilis, cirrosis de higado, hepatitis,lupus
Se recomienda suero fresco. El suero puede ser Mezclar y extender con una varilla para llenar el circulo del eritematoso, esclerodermia y otras condiciones varias,
almacenado entre +2 y +8°C durante 48 horas despúes test. Rotar la placa y observar si hay alguna aglutinación, la pero son raras en el caso de fiebre reumatoide.
de su recolección. Desechar cualquier suero cual debería ocurrir en 2 minutos. No leer despues de 3 Aunque en los casos anteriores el titulo de RF es
contaminado, lipemico o hemolizado. No utilizar plasma minutos, ya que si se seca el reactivo podría dar lugar a la generalmente inferior que en RA.
ya que el fibrinogeno puede causar aglutinaciónes apariencia de una falsa aglutinación.
inespecificas. PRECAUCIONES Y AVISOS
Determinación semicuantitativa. La placa de reacción debe ser enjuagada varias veces
Preparar las diluciones de la muestra con diluyente 2 de con agua deionizada o destilada despues de su
REACTIVOS
acuerdo a la tabla siguiente:- utilización ya que restos de detergentes o de muestras
R1.Reactivo Látex (dispensador azul) anteriores pueden afectar el resultado. La placa lavada
Suspención acuosa de particulas de látex amarillas puede secarse con papel lint-free o dejarla secar al aire.
Dilución RF(Ul/ml muestra no diluida)
recubiertas con gamma globulina humana (1 gota
de 50µl) REFERENCIAS
1+1 16
R2. Diluyente 1. Singer, J.M., Amer. J: Med., 1961; 31: 766-779
1+2 24
Glicina tamponada salina pH 8.2 1+4 40 2.Johnson, P.M. And Päge Faulk. W., Clin. Immunol.
Control Positivo (Dispensador Rojo) 1+8 72 Immunopath., (1976), 6:414-430
Liquido estabilizado que contiene RF a una 1 + 16 136 3. Piotz, C.M., and Singer, J.M., J.M., Amer. J.Med.,
concentración mayor de 8 Ul/ml (1gota de 50µl) (1956), 21:893-896
Control Negativo (Dispensador Blanco) 4. Anderson, S.G., Bentzon, M.W., Houba, V, and Krag.
Liquido estabilizado que contiene FR a una Realizar cada dilución de acuerdo al procedimiento P., Bull, Wld. Hlth. Org., (1970) 42:311-318
concentración inferior a 8 Ul/ml (1 gota de 50µl) cualitativo hasta que no se observe ninguna aglutinación
FOSFATASA ACIDA 23
Método Cinetico
Para Fosfatasa Acida total VALORES NORMALES EN SUERO2
Cat. No. Disolver el contenido de una botella de sustrato R2
con 3 ml de tampón R1. 30°C 37°C
AC 1011 R1. Tampón 1 x 70 ml Es estable durante 5 días cuando se conserva entre
20 x 3 ml R2. Sustrato 20 x 3 ml +2 y +8°C ó 24 horas entre +15 y +25°C. Cuando se Fosfatasa ácida total
R3. Tartrato 10 viales conserva protegido de la luz Hombre Hasta 8.2 U/l Hasta 10 U/l
R4. Estabilizador 1 vial Para Fosfatasa no prostatica Mujer Hasta 3.0 U/l Hasta 3.7 U/l
Disolver el contenido de una botella de sustrato R2 Fosfatasa prostática Hasta 1.5 U/l Hasta 1.6 U/l
METODO COLORIMETRICO con 3 ml de tampón R1 transferir el contenido a un vial
PRINCIPIO(1) Fosfatas de tartrato R3. Es estable durante 5 días entre +2 y +8°C CONTROL DE CALIDAD
ácida
1-naftil-fosfato + H2O > fosfato + 1-naftol ó 24 horas entre +15 y +25°C. Cuando se conserva Para un control de exactitud y reproducibilidad:
1-naftol+sal de 4-cloro-2-metilfenildiazonio* > colorante azo protegido de la luz. Multisueros normal y elevado ensayados.
* = Sal TR - Fast Red. Para un control de reproducibilidad:
PROCEDIMIENTO Multisueros bajo, normal y elevado.
PREPARACION DE LA MUESTRA
Suero. La muestra se estabiliza añadiendo una gota Longitud de onda: Hg 405 nm LINEARIDAD
de acido acético (estabilizador R4) a 1 ml de suero. Es Cubeta: 1 cm de espesor Si la variación de absorbancia por minuto excede 0.100,
estable durante 3 días entre +2 y +8°C ó 24 horas Temperatura: 30/37°C diluir 0.2 ml de muestra con 0.4 ml de NaCl al 0.9% y
entre +15 y +25°C. Medición: frente al aire repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 3.
REACTIVOS Pipetear en tubos de ensayo: NOTAS

Sueros hemolíticos e ictéricos (bilirrubina > 3 mg/dl)
Componentes Concentraciónes en la prueba Macro Semi Micro interfieren en la prueba .
R1. Tampón Muestra 0.20 ml 0.10 ml PRECAUCIONES

Tampón citrato 75 mmol/l, pH 5.2 Solución de reactivo 2.00 ml 1.00 ml Unicamente para disgnostico in vitro. No pipetear con la
R2. Sustrato R2 boca. Respetar las precauciones normales necesarias
1-naftilfosfato 10 mmol/l que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
TR-Sal Fast Red 2.5 mmol/l Mezclar, verter en la cubeta e incubar durante 5 min a
R3. Tartrato 30/37°C. Leer la absorbancia inicial y empezar a Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están
Tartrato sódico 135 mmol/l cronometrar el tiempo simultaneamente. Leer de nuevo disponibles se se desean.
R4. Estabilizador al cabo de 1, 2 y 3 min
Acido acético 3 mmol/l REFERENCIAS
CALCULOS 1. Hilmann, G. J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1971;9;273
Para calcular la actividad de la fosfatasa ácida en la 2. Silver. D, et al., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21:
PREPARACION DE LOS REACTIVOS muestra utilizar las formulas siguientes. 519
R1. Tampón
Listo para usar. Es estable hasta la fecha de Fosfatasa ácida total
caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C. U/l = 743 x ∆Asol.2a/min
Fosfatasa prostática
U/l = 743 x (∆Asol.2a/min - ∆Asol.2b/min.)
FOSFATASA ACIDA 24
Método Colorimetrico
4. Hidróxido sódico VALORES NORMALES(3)
Cat. No. Para 10 test diluir 10 ml de solución 4 en 90 ml de agua Fosfatasa ácida total Hasta 11 U/l (37°C)
bidestilada. Es estable hasta la fecha de caducidad Fosfatasa prostática Hasta 4 U/l (37°C)
AC 565 1. Tampón 1 x 105 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C.
10 x 10 ml 2. Sustrato 10 x 10 ml
3. Tartrato 1 x 5 ml PROCEDIMIENTO CONTROL DE CALIDAD
4. Hidroxido sódico 1 x 105 ml Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Longitud de onda: Hg 405 nm Multisueros Normal y Elevado ensayados
METODO COLORIMETRICO Cubeta: 1 cm de espesor Para un control de reproducibilidad:
Temperatura: 37°C Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
PRINCIPIO(1,2) Fosfatas Medición: frente a reactivo blanco
ácida
p-nitrofenilfosfato+ H2O >p-nitrofenol + fosfato LINEARIDAD
Pipetear en tubos de ensayo: Si la variación de absorbancia excede 0.800: diluir 0.2
MUESTRA ml de muestra en 0.6 ml de NaCl al 0.9% y repetir el
Suero. Las muestras deben estar completamente libres Reactivo Blanco Muestra 1 Muestra 2 ensayo multiplicando el resultado por 4, o diluir 0.1 ml
de hemólisis. de muestra en 0.9 ml de albúmina al 5% multiplicando
Estabilizar la muestra con 5 mg de NaHSO4H2O por ml Solución 2 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml el resultado por 10.
de suero. Solución 3 --- --- 0.1 ml
PRECAUCIONES
REACTIVOS Incubar durante exactamente 5 min a 37°C; añadir a Unicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
intervalos de 30 seg.: boca. Respetar las precauciones normales necesarias
Componentes Concentraciónes en la prueba que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Muestra --- 0.2 ml 0.2 ml
1. Tampón La reacción del sustrato libera p-nitrofenol. Evitar el
Tampón citrato 55 mmol/l, pH 4.8 Incubar durante exactamente 30 min a 37°C; añadir a contacto con la piel, no ingerir ni inhalar el vapor.
2. Sustrato intervalos de 30 seg.:
p-nitrofenilfosfato 5.5 mmol/l Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están
3. Tartrato sódico 200 mmol/l NaOH diluido 10.0 ml 10.0 ml 10.0 ml disponibles si se desean.
4. Hidróxido sódico 200 mmol/l Muestra 0.2 ml --- ---
REFERENCIAS
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Mezclar y leer la absorbancia de la muestra frente al 1. Andersch, M., et al, Amer. J. Clin, Path. 17: 571.1947.
1. Tampón reactivo blanco. 2. Fishman, W.H., et al. J. Biol. Chem. 200: 89, 1953
Listo para usar. Es estable hasta la fecha de 3. Richterich, R. et al. (1962) Schweiz Med. Wschr. 92:
caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C. CALCULOS 1496.
2. Sustrato Para calcular la actividad de la fosfatasa ácida en la
Reconstituir el contenido de una botella 2 con 10 ml muestra utilizar las formulas siguientes:
de tampón 1. Es estable durante 5 días cuando se
conserva entre +2 y +8°C. U/l (37°C)
3. Tartrato
Listo para usar. Es estable hasta la fecha de Fosfatasa ácida total: 101 x A muestra 1
caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C. Fosfatasa prostática: 101 x (A muestra 1 - A muestra 2)
FOSFATASA ALCALINA 25
Método DGKC optimado
Reconstituir un vial de sustrato R1b con el volumen CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. adecuado de Tampón R1a:-
3 ml para el kit de 20 x 3 ml (AP 542) Para un control de exactitud y reproducibilidad:
AP 542 R1a. Tampón 1 x 70 ml 20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AP 501) Multisueros normal y elevado ensayados.
20 x 3 ml R1b. Sustrato 20 x 3 ml Estable durante 30 días conservado entre +2 y +8°C ó Para un control de reproducibilidad:
3 días entre +15 y +25°C. Multisueros bajo, normal y elevado.
AP 501 R1a. Tampón 1 x 105 ml
5 x 20 ml R1b. Sustrato 5 x 20 ml LINEARIDAD
PROCEDIMIENTO
(1)
METODO COLORIMETRICO Si la variación de absorbancia por minuto excede 0.250
Longitud de onda: Hg 405 nm diluir 0.1 ml de muestra en 0.9 ml de NaCl al 0.9% y
Este es un método estándar optimizado según las Cubeta: 1 cm de espesor repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 10.
recomendaciónes de la Deutsche Gesellschaft für Temperatura: 25°C, 30°C, 37°C
Klinische Chemie. Medición: frente al aire NOTAS
PRINCIPIO Pipetear en la cubeta: Macro Semi - Micro Evitar la hemolisis ya que interfiere en la prueba.
Micro
p-nitrofenilfosfato + H2O ALP > fosfato + p-nitrofenol PRECAUCIONES
Muestra 0.05 ml 0.02 ml 0.01 ml
MUESTRA Reactivo (25°C, 30°C, 37°C) 3.00 ml 1.00 ml 0.50 ml Unicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Suero ó plasma heparinizado. Mezclar, leer la absorbancia inicial y emprezar a que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
cronometrar el tiempo simultaneamente. Leer de nuevo La solución 1 contiene azida sódica. Evitar su ingestión
REACTIVOS al cabo de 1, 2 y 3 min. o contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto
con la piel, lavar inmediatamente el area afectada con
Componentes Concentraciónes en la prueba CALCULOS agua abundante. En caso de ingestión o contacto con
los ojos llamar inmediatamente a un médico.
R1a. Tampón Para calcular la actividad de la ALP utilizar las formulas La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las
Tampón dietanolamina 1 mol/l, pH 9.8 siguientes: tuberias, lo que podria producir azidas explosivas.
MgCl2 0.5 mmol/l Cuando se tire este reactivo enjuagar abundantemente
R1b. Sustrato U/l = 3300 x ∆A 405 nm/min Macro con agua para evitar la formación de estas azidas. Las
p-nitrofenilfosfato 10 mmol/l U/l = 2760 x ∆A 405 nm/min Semi-Micro superficies metálicas que hayan sido puestas en
U/l = 2760 x ∆A 405 nm/min Micro contacto con la azida sódica deben ser lavadas con
hidróxido sódico al 10%.
R1a. Tampón VALORES NORMALES EN SUERO Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están
Listo para usar. Es estable hasta la fecha de disponibles si se desean.
caducidad cuando se conserva entre + 2 y +8°C.
25°C 30°C 37°C REFERENCIAS
R1b. Sustrato
Cat. No. AP 542, AP 501 Hombre/mujer 60-170 U/l 73-207 U/l 98-279 U/l 1. Rec. GSCC (DGKC), J., Clin. Chem. Clin. Biochem
1972; 10: 182
FOSFORO INORGANICO 26
Método Fosfomolibdato
CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. R1a Reactivo Blanco R1b Molibdato Para un control de exactitud y reproducibilidad:-
Multisueros normal y elevado ensayados.
PH1016 R1a. Reactivo Blanco 210 ml 7.0 ml 3.0 ml Para un control de reproducibilidad:-
300 ml R1b. Molibdato 90 ml 14.0 ml 6.0 ml Multisueros bajo, normal y elevado.
CAL. Standard (Patron) 1 x 5 ml 28.0 ml 12.0 ml
LINEARIDAD
(1)
PRINCIPIO Estable durante 8 semanas entre +15 y 25°C El Método es lineal hasta una concentración de 6.5
El fosforo inorganico reacciona con molibdato amónico mmol/l (20 mg/dl). Las muestras con concentraciones
en presencia de ácido sulfúrico para tomar un complejo PROCEDIMIENTO superiores deberán diluirse 1 + 4 con NaCl al 0.9% y
fosfomolibdato que se mide a 340 nm. repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 5.
Longitud de onda: 340 nm, Hg 334 nm
MUESTRA Cubeta: 1 cm de espesor NOTA
Suero plasma (con EDTA o fluoruro). Evitar muestras Temperatura: 20°C-25°C/37°C Muestras ictéricas y ligeramente lipémicas requieren
hemoliticas ya que la hemólisis interfiere en la prueba. Medida: frente al reactivo blanco una muestra blanco. Usando el mismo esquema, para
Orina: diluir la orina 1 +19 en solución NaCl al 0.9% pipetear mezclar 10 µl de muestra con 1000 µl de reactivo
Multiplicar el resultado por 20. Pipetear en la cubeta: blanco, en este caso debe restarse la absorbancia de la
muestra blanco (Amuetra blanco) de la absorbancia de la
REACTIVOS Blanco Patrón Muestra muestra (Amuestra).
Componentes Concentraciónes en la prueba Agua destilada 10 µl --- --- PRECAUCIONES

Muestra --- --- 10 µl Únicamente para diagnostico invitro. No pipetear con la
R1a. Reactivo blanco Standard (Patrón) --- 10 µl -- boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Acido suslfúrico 0.36 mol/l Reactivo de trabajo 1 ml 1 ml 1 ml que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Cloruro sódico 154 mmol/l
Detergente Mezclar e incubar durante 10 min a 20-25°C ó 5 min a Las soluciones 1, 2 contienen ácido sulfúrico. Evitar la
R1b. Reactivo Molibdato 37°C. Leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del ingestión o el contacto con la piel y mucosas.
Molibdato amónico 3.5 mmol/l patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco.
Acido sódico 0.36 mol/l La solución 3 contiene azida sódica. Evitar su ingestión o
Cloruro sódico 154 mmol/l CALCULOS el contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto
CAL Standard (Patrón) Concentración de fósforo inorganico con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con
Fósforo 1.61 mmol/l ( 5mg/dl) ∆Amuestra agua abundante. En caso de ingestión o contacto con los
= Contrración del pátron x ojos llamar inmediatamente a un médico.
∆Apatrón
PREPARACION DE LOS REACTIVOS REFERENCIAS
Todos los reactivos están listos para usar. Estables VALORES NORMALES 1. Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and
hasta la fecha de caducidad cuando se conservan Techniques, 2nd Edition, Harper and Row, p. 525,1974
entre +15 y +25°C. Suero: 0.87 - 1.45 mmol(2.68 - 4.5 mg/dl) 2. Tietz, N., Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B.
Orina: 25 - 65 mmol/24 hrs Saunders Company, Philadelphia 1983; 5: 384
Mezclar una botella de Reactivo Blanco 1 con una
botella de Molibdato 2 (300 ml de reactivo de trabajo).
Para volumenes más pequeños preparar el reactivo
para el análisis según la tabla siguiente:
γ − GT 27
Método γ-Glutamil-p-nitroanilida PREPARACION DE LAS SOLUCIONES LINEARIDAD
2. Sustrato Si la concentración en la muestra excede de 222 U/l.
Reconstituir un vial de sustrato 2 con 3 ml de agua ej. ∆A/min es de 0.2 a Hg 405 nm. Diluir 0.1 ml de
Cat. No. bidestilada muestra con 0.5 ml de NaCl al 0.9% y repetir el analisis
Estable durante 21 días entre +2 y +8°C ó 2 días entre Multiplicar el resultado por 6.
GT 1065 2. Sustrato 20 x 3,0 ml +15 y +25°C.
CONTROL DE CALIDAD
SIGNIFICADO CLÍNICO(2) PROCEDIMIENTOS Para un control de exactitud y reproducibilidad:-
Se recomienda Multisueros de Control ensayados
La γGT presente en el suero parece ser originada Longitud de onda: Hg 405 nm (400-420 nm)
primariamente por el sistema hepatobiliar, y su actividad Cubeta: 1 cm de espesor ESPECIFICIDAD (3,4)
es elevada en cualquier forma de enfermedad hepática. Temperatura: 25°C/30°C/37°C Evitar la hemólisis, ya que interfiere con el análisis.
La γGT es más sensible que la fosfatasa alcalina para la Medición: frente al aire Referirse a las hojas de aplicación apropiadas para
detección de ictericia obstructíva colangitis y colecistitis. limitaciones especificas de cada analizador. Young et al y
Pipetear en la cubeta: Friedman et al dan una lista de sustancias y condiciones
PRINCIPIO
(1)
que afectan la actividad γGT in vivo.
Macro Semi Micro
L- γ - Glutamil-p-nitroanilida + glicilglicina γ-GT VALORES NORMALES EN SUERO / PLASMA(5)
Muestra 0.20 ml 0.10 ml
L- γ - Glutamilglicilglicina + p-nitroanilida Reactivo (25°C, 30°C, 37°C) 2.00 ml 1.00 ml 25°C 30°C 37°C
MUESTRA Mezclar, leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar Hombre 6 - 28 U/l 8 - 38 U/l 11 - 50 U/l
el tiempo simultáneamente, leer de nuevo al cabo de 1,2 y 3 Mujer 4 - 18 U/l 5 - 25 U/ l7 - 32 U/l
Usar suero ó plasma EDTA, libre de hemólisis, otros minutos
anticuagulantes interfieren en el análisis. Dado que los valores esperados como valores "normales"
La γGT en el suero es estable durante 7 días entre CÁLCULOS se ven afectados por la edad, sexo, dieta, situación
+2 y +8°C Para calcular la actividad de la γGT. Utilizar las siguientes geográfica y otros factores, cada laboratorio deberá esta-
formulas: blecer sus propios valores esperados para este ensayo.
REACTIVOS
∆A/min x vol total del análisis (ml) x 1000 REFERENCIAS
Componentes Concentraciones en la Prueba
= U/l γ GT 1. Szasz, G., Clin Chem. 1969. 1969; 22: 124-136
2. Sustrato E x paso de la luz de la cubeta (cm) x vol de muestra (ml) 2. Teitz, N.N., Fundamentals of Clinical Chemistry ed 3
Tampón Tris 71.5 mmol/l, pH 8.25 Philadelphia, W B Saunders Co. 1987, pg 391.
Glicilglicina 126 mmol/l ∆A/min = Cambio en la Absorbancia por minuto. 3. Young D S, et al: Clin Chem. 1975; 21: No. 5
L-g-glutamil-p-nitroanilida 4 mmol/l 1000 = Factor para convertir ml en I 4. Friedman R B. Et al: Clin Chem. 1980; 26: No. 4
Surfactantes E = Absortividad Molar de p-nitroanilida 5. Jacobs D,S et al: Laboratory Test Handbook 2nd
9.9 cm2/µmol a 405 nm Edition: 199.
6. Ladenson J M. Gradwohl's Clinical Laboratory Methods
ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO 2.2 ml x 1000 and Diagnosis, Bth ed, Sonnenwirth A C and Jarett L,
Factor = 1111
Los reactivos sin abrir son estables hasta la fecha 9.9 x 1 cm x 0.2 ml eds, St Louis MO: C V Mosby Co, 1980.
de caducidad cuando se conservan entre +2 y +8°C. U/l = 1111 x ∆A 405 nm
GLUCOHEMOGLOBINA HbA1c 28
Método inmunologico PRETRATAMIENTO DE LA MUESTRA Incubar 10 minutos a temperatura ambiente y leer la
Mezclar 10µl de sangre total con 400 µl del reactivo absorbancia contra blanco de reactivos a 620 nm.
Cat. No. desnaturalizador
HA 3830A El primer paso del procedimiento involucra el pretratamiento CALCULO DE Hb TOTAL
HbA1c R1 Anticuerpo 1 x 14 ml de la muestra de sangre total. Se lisan las celulas rojas y se Abs problema
Hb total = x conc. del patrón en g/d
HbA1c R2 Aglutinador 1 x 14 ml provoca la hidrólisis de la hemoglobina por la acción de una Abs patrón
R3 desnaturalizador de Hemoglobina 1 x 50 ml enzima proteasa presente en el reactivo desnaturalizador de
Hb. R1 Hemoglobina Total 1 x 28 ml hemoglobina. CALCULO DE RESULTADOS
CALIBRACION HbA1c (g/dl)
% HbA1c = x 100
PRINCIPIO Se requiere la serie de calibradores cat. número HA3444 Tot. Hb(g/dl)
La presencia de HbA1c en la muestra se mide mediante Para la calibración de hemoglobina total se utiliza el calibra-
aglutinacion en latex. Compitiendo la glucohemoglobina dor numero 1 de la serie. Mientras que para la fracción VALORES ESPERADOS
con anticuerpos monoclonales HbA1c. HbA1c , se utilizan los calibradores del 1 Cada laboratorio debe establecer sus propios valores
al 6. NOTA: los calibradores no requieren pretratamiento de referencia de acuerdo a su población.
REACTIVOS La fracción HbA1c es en % de Hemoglobina total:
PROCEDIMIENTO PARA HbA1c
Compocición de los reactivos
Longitud de onda. 620nm - del 4 al 6% en pacientes no diabeticos
R3. Desnaturalizador de hemoglobina Cubeta 1cm de espesor - del 6 al 8% en diabeticos controlados
- Pepsina porcino, tampon y conservadores. Temperatura 37°C - del 8 al 20% en pacientes diabeticos sin control
Hb. R1. Hemoglobina Total
Pipetear en tubos de ensayo
- Hidroxido de sodio El ensayo proporciona resultados precisos y exactos en
HbA1c R1: Anticuerpos MACRO SEMIMICRO un rango de Hemoglobina total hasta 23 g/dl.
- Suero de albumina bovina, tampon, surfactantes y Patrón ó muestra Patrón ó muestra En caso de una vida corta de células rojas tales como
conservadores. anemia hemolìtica u otras enfermedades hemolìticas
HbA1c R2: Aglutinador HbA1c R1 500µl 250µl asi como en el embarazo, pérdida importante de sangre
- Hapteno HbA1c unido covalentemente al polimero Patrón (1-6) Muestra pretratada 20µl 10µl recientemente se reflejará en un decremento en el % de
Suero albumina bovina, buffer, conservadores glucohemoglobina. Las muestras que presentan
surfactantes variantes F y E no tienen interferencias significativas.
Incubar 5 minutos a 37°C
PREPARACION HbA1c R2 500µl 250µl Substancia Concentración sin interferencia
Todos los reactivos como se suministran son estables Bilirrubinas 30 mg/dl
hasta la fecha de caducidad indicada cuando se Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 30 segundos Triglicéridos 100 mg/dl
almacenan entre +2 y +8°C. Deben protegerse de calor a 620 nm, a temperatura 37°C. Leer de nuevo al cabo de 1 Factor Reumatoide 2000 UI/ml
extremo, de la luz directa ó de la congelación. minuto. Acido Acetilsalicílico 60 mg/dl
Los reactivos deben mezclarse suavemente antes de Urea 500 mg/dl
usarse. CALCULO DE HbA1c
Anotar el ∆A de cada uno de los estàndares del 1al 6 y grafi- CONTROL DE CALIDAD
MATERIAL REQUERIDO Y NO PROPORCIONADO car ∆A contra Concentración Interpolar en la gráfica el ∆A del Se recomienda el catalogo Número HA 3445 Control
HbA1c Calibrador. Cat. HA 3444 son liquidos estables problema para obtener la concentración de HbA1C en g/dl nivel 1 y nivel 2 para HbA1C como material de control
hasta caducidad, listos para usar diario.
HbA1c Control. Cat. HA 3445 PROCEDIMIENTO PARA HEMOGLOBINA TOTAL
Pipetear en tubos de ensayo REFERENCIAS:
MUESTRA 1.-Cohen P.M. Perspective: mesurement of Circulating
Blanco Patrón Muestra
Se utiliza sangre capilar o venosa, se recomienda sangre Glycated Protein to monitor Intermediate - Term
total con EDTA ó heparina de amonio como anticuagulante. Hb. R1 Hemo. Total 500µl 500µl 500µl Changes in Glycaemic Control Eur J Clin Biochem.
La muestra es estable 6 meses a -70°C. 2 semanas entre Patrón (1) -------- 40µl -------- 1992:30 8129: 851-859
4 - 8°C y una semana a 25°C. Muestra Pre.tratada -------- -------- 40µl
GLUCOSA 29
Método GOD-PAP Reactivo adicional: Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm
Uranil Acetato 0.16% Cat. No. DP647 2x500 ml Cubeta: 1 cm de espesor
Cat. No. PREPARACIÓN DE LAS SOLUCIONES Temperatura: 15-25°C o 37°
GL2623 R1. Reactivo Glucosa 6 x 100 ml R1. Reactivo Glucosa. Listo para usar. Estable hasta la Medición: frente a reactivo blanco
CAL. Patrón 1 x 5 ml fecha de caducidad entre +2 y +8°C Pipetear en tubos de ensayo:
CAL. Patrón Macro Semi micro
GL2614A R1. Reactivo Glucosa 1 x 500 ml Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad entre Patron ó Reactivo Patrón ó Reactivo
CAL. Patrón 1X5ML +2 y +8°C. Muestra Blanco Muestra Blanco
Patrón
GL2614 R1. Reactivo Glucosa 2 x 500 ml 1. PROCEDIMIENTO PARA EL ENSAYO DE GLUCOSA o Muestra 200 µl ---- 100 µl ----
CAL. Patrón 1 x 5 ml GOD-PAP SIN DESPROTEINIZACION Reactivo 2000 µl 2000 µl 1000 µl 1000 µl
PRINCIPIO Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm Mezclar incubar de 10-20 minutos a 37°C, Medir la
La glucosa se determina después de una oxidación enzima- Cubeta: 1 cm de espesor absorbancia del patrón (Apatrön) y la muestra (Amuestra)
tica en presencia de glucosa oxidasa. El peroxido de hidró- Temperatura: 15-25°C o 37° frente al reactivo blanco antes de 60 min.
geno formado reacciona, catalizado por la peroxidasa, con Medición: frente a reactivo blanco
fenol y 4-aminofenazona para formar un indicador de CALCULO:
Pipetear en tubos de ensayo: Amuestra
quinoneimina rojo-violeta
Concentración de glucosa (mg/dl) = Apatrón x 100
Macro Semi micro
(2)
PRINCIPIO DE REACCIÓN Patrón ó Reactivo Patrón ó Reactivo VALORES NORMALES
Glucosa + O 2+ H2O GOD > Acido Glucónico +H2O2 Muestra Blanco Muestra Blanco suero, plasma (en ayuno) 75 - 115 mg/dl
POD
2H2O2 + 4-aminofenazona + fenol > quinoneimina + 4H2O
Patrón ó CONTROL DE CALIDAD
MUESTRA Muestra 20 µl ---- 10 µl ---- Para un control de exactitud y reproducibilidad
Sangre, suero, plasma heparinizado o EDTA plasma. La Reactivo 2000 µl 2000 µl 1000 µl 1000 µl Multisueros normal y elevado ensayados.
glucosa es estable durante 24 horas entre +2 y +8ºC si el LINEARIDAD
suero o plasma se prepara en los 30 min. que siguen a su Mezclar, incubar minimo durante 10 min a 37°C, Medir El ensayo es lineal hasta una concentración de glucosa
recogida. la absorbancia del patrón (Apatrön) y la muestra (Amuestra) de 22.2 mmol/l (400 mg/dl). Para muestra con valores
frente al reactivo blanco antes de 60 min. superiores a dichas concentraciones, diluir 1 + 2 con
REACTIVOS agua destilada y multiplicar el resultado por 3
1. PROCEDIMIENTO PARA EL ENSAYO DE Esta lectura no se ve afectada por el ácido úrico acido
Componentes Concentración inicial de las Soluciones
GLUCOSA GOD-PAP CON DESPROTEINIZACION ascórbico, glutatión, anticoagulantes, bilirrubina y
Desproteinizar la sangre inmediatamente creatinina en concentraciones fisiológicas.
R1. Reactivo Glucosa NOTA:
Pipetear en tubos de centrifugación
Tampón fosfatos 50 mmol/l, pH 7.0 Un color rosa palido el cual se irá oscureciendo con el
Fenol 11 mmol/l Uranil acetato 1.0 ml tiempo es un hecho normal de este reactivo y no afecta
4-aminofenazona 0.77 mmol/l Muestra 0.1 ml el funcionamiento del mismo.
Glucosa Oxidasa > 1.5 k U/l REFERENCIAS
Peroxidasa > 1.5 k U/l Enjuagar la pipeta varias veces con la mezcla centrifugar 1. Barham, D, and Trinder. P. Analyst 1972; 97; 142
CAL. Patrón 5.55 mmol/l (100 mg/dl) la mezcla a 10,000 g durante 10 min y usar 0.2 ml de 2. Teuscher, A, and Richterich, P. Schweiz Med.
sobrenadante para el análisis. El sobrenadante se puede Wschr. 1971: 101 : 345 and 390
conservar durante 3 días entre +2 y +8°C.
GLUCOSA 30
Método Hexocinasa 2 a la botella 1, enjuagando varias veces la botella 2 o para Mezclar bien e incubar durante 5 min a +37°C ó durante
un numero de pruebas pequeño pipetear 100 µl de reactivo 10 min entre +20 y +25°C. Medir la absorbancia de la
Cat. No. enzima 2 en 10 ml de Tampón 1 y mezclar. El reactivo de muestra y el patrón frente al reactivo blanco antes de 30
GL 1611 1. Tampón 4 x 100 ml trabajo es estable durante 3 meses entre +2 y +8°C o minutos.
4 x 100 ml 2. Reactivo Enzima 4 x 1.0 ml durante 2 semanas entre +15 y +25°C. Protegido de la luz CALCULO
Patrón 1 x 5 ml ej. 10 ml (1) + 100 µ l (2) Procedimiento 1- con factor
PROCEDIMIENTO 1
METODO UV Concentración de Glucosa
Longitud de onda
El método es completamente enzimático y utiliza las Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm) (mg/dl) (mmol/l)
enzimas hexocinasa y glucosa-6-fosfato. Cubeta: 1 cm de espesor
PRINCIPIO DE LA REACCIÓN Temperatura: 20-25°C/37°C Hg 365 nm 540 x ∆Amuestra 30 x ∆Amuestra
Glucosa + ATP
HK
> G-6-P + ADP Medición: frente al aire Hg 334 nm 297 x ∆Amuestra 16.6 x ∆Amuestra
G-6-P + NAD +
G6P-DH
> gluconato-6-P + NADH + H
+
(absorbancia en aumento) 340 nm 292 x ∆Amuestra 16.2 x ∆Amuestra
MUESTRA
Sangre, suero, plasma, orina y CSF. Procedimiento 2 (opcional para Procedimiento 1)
Si es posible, separar los componentes celulares del Patrón Muestra Amuestra
suero o plasma, no despues de 1 hora de haber Concentración de Glucosa = 100 x Apatrón (mg/dl)
tomado la muestra de sangre. Añadiendo un Muestra --- 10 µl
inhibidor de la glicolisis (NaF, KF). La muestra puede Patrón (opcional) 10 µl --- Amuestra
ser conservada hasta 24 horas entre +15 y +25°C. Tampón 1 1000 µl 1000 µl Concentración de Glucosa = 5.55 x Apatrón (mmol/l)
REACTIVOS
Mezclar y medir la absorbancia A1
VALORES NORMALES
Componentes Concentraciónes en la prueba
Reactivo Enzima 2 10 µl 10 µl
1. Tampón Sangre (en ayuno) 3.6-5.3 mmol/l 65-95 mg/dl
Pipes 100 mmol/l, pH 7.6 Mezclar bien e incubar durante 5 min a +37°C o durante Suero, plasma (en ayuno) 3.9-5.8 mmol/l 70-105 mg/dl
ATP 4 mmol/l 10 min entre +20 y +25°C. Orina 0-1.1 mmol/l 0-20 mg/dl
NAD* 3 mmol/l Medir la absorbancia A2 antes de 30 minutos. C.S.F. 2.8-4.2 mmol/l 50-70 mg/dl
Iones Magnesium 15 mmol/l A2 - A1 = ∆Amuestra
Acido Sódico CONTROL DE CALIDAD
2. Reactivo Enzima PROCEDIMIENTO 2 Para un control de exactitud y reproducibilidad:-
Hexocinasa > 25 U/ml Solo para autoanalizadores con medición bicromática. Multisueros normal y elevado ensayados.
G6P-DH > 75 U/ml Para un control de reproducibilidad:-
Acido Sódico Longitud de onda: Medición bicromática Multisueros bajo, normal y elevado.
Patrón 340/380 nm LINEARIDAD
Glucosa 5.55 mmol/l (100 mg/dl) Cuveta: 1 cm de espesor El método es lineal hasta una concentración de glucosa
Temparatura: 20-25°C/37°C de 38.9 mmol/l (700 mg/dl)
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Medición: frente al reactivo blanco NOTA
Procedimiento 1 Cuando se utiliza el procedimiento 2, la concentración
El tampón, el reactivo enzima y el patrón están de la glucosa se calcula utilizando el patrón. El factor de
listos para usar y son estables hasta la fecha de calculo sólo se puede usar con el procedimiento 1.
Reactivo Blanco Muestra Patrón
caducidad cuando se conserva a +8°C.
Procedimiento 2 Muestra --- 10 µl --- REFERENCIAS
(Solo para Autoanalizadores con medición bicromatica) Patrón --- --- 10 µl 1. Stein, M.W, Methods of Enzymatic Analysis (Bergmeyer)
Transferir todo el contenido de un vial de reactivo enzima Reactivo de Trabajo 1000 µl 1000 µl 1000 µl H.U., ed) Academic Press, New York, 1974; 1196-1201
GOT / ASAT 31
Método IFCC
Cat. No. R1b. Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato VALORES NORMALES EN SUERO

AS1202 R1a. Tampón/Sustrato 1 x 70 ml Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato
20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 20 x 2 ml R1b con el volumen adecuado de Tampón / Sustrato R1a 25°C 30°C 37°C
α-oxoglutarato 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AS 1202)
20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AS1267) Hombre: Hasta 18 U/l Hasta 25 U/l Hasta 37 U/l
AS1267 R1a. Tampón/Sustrato 1 x 105 ml Es estable durante 14 días conservado entre +2 y +8°C ó Mujer: Hasta 15 U/l Hasta 21 U/l Hasta 31 U/l
5 x 20 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 5 x 20 ml 24 horas entre +15 y +25°C.
α-oxoglutarato CONTROL DE CALIDAD
PROCEDIMIENTO Para un control de exactitud y reproducibilidad:
METODO UV Multisueros Normal y Elevado ensayados.
Este es un método estándar optimizado según las Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm ó Hg 365 nm) Para un control de reproducibilidad:
concentraciones recomendadas por la IFCC. Cubeta: 1 cm de espesor Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
PRINCIPIO Medición: Frente al aire LINEARIDAD
AST
α-oxoglutarato + L-aspartato > L-glutamato + oxaloacetato Si la variación de absorbancia por minuto excede de:
Semi 0.16 a 340 nm/Hg 334 nm
+ MDH +
oxoloacetato + NADH + H > L-malato + NAD Pipetear en cubeta: Macro Micro 0.08 a Hg 365 nm
diluir 0.1 ml de muestra con 0.9 ml de NaCl al 0.9% y
MUESTRA Muestra 0.2 ml 0.1 ml repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 10.
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato 2 2.0 ml 1.0 ml
NOTAS
REACTIVOS Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 1 min. Leer Evitar la hemólisis ya que interfiere con el análisis.
de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. Observar si la variación
Componentes Concentraciones en la prueba de la absorbancia por minuto es entre los rangos de: PRECAUCIONES
Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
R1a. Tampón/Sustrato 0.11 y 0.16 a 340/Hg 334 nm boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Tampón tris 80 mmol/l, pH 7.5 0.06 y 0.08 a Hg 365 nm que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
L-aspartato 240 mmol/l El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
R1b. Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato Para el calculo usar sólo las valores obtenidos durante los contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
α-oxoglutarato 12 mmol/l 2 primeros minutos. el área afectada con agua abundante. En caso de
MDH > 420 U/l ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a
LD > 600 U/l CALCULOS un médico
NADH 0.18 mmol/l Para calcular la actividad de la AST utilizar las fórmulas La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
siguientes: tuberias, lo que podría producir azidas explosivas.
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES U/l = 1746 x ∆A 340 nm/min REFERNCIAS

R1a. Tampón/Sustrato U/l = 1780 x ∆A Hg 334 nm/min International Federation of Clinical Chemistry, Scientific
Listo para usar. Estables hasta la fecha de caducidad U/l = 3235 x ∆A Hg 365 nm/min Comittee. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1980, 18: 521-534.
cuando se conserva entre +2 y +8°C.
GOT / ASAT 32
Método de Color
Cat. No. Patrón

AS 147 1. Tampón GOT 1 x 100 ml Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Mezclar, incubar durante exactamente 30 min a 37°C
2x100 ml 2. 2.4-Dintrofenilhidrazina 1 x 100 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C
3. Hidróxido de sodio 1 x 100 ml 2,4-DNP 0.5 ml 0.5 ml
Patrón piruvato 1 x 10 ml PROCEDIMIENTO Muestra 0.1 ml ----
Método colorimetrico (Reitman y Frankel) para la Longitud de onda: Hg 546 nm (530 - 550 nm) Mezclar, dejar reposar durante exactamente 20 minutos
determinación de aspartato aminotransferasa en suero. Cubeta: 1 cm de espesor entre +20 y +25°C.
Temperatura de incubación: 37°C
PRINCIPIO Hidróxido Sódico 5.0 ml 5.0 ml
AST
α-oxoglutarato + L-aspartato > L-glutamato + oxaloacetato
1. Medición frente a Reactivo Blanco Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra)frente
La transaminasa Glutamico-oxalacetica se mide por la a la muestra blanco al cabo de 5 minutos
monitorización de la concentración de oxaloacetato Pipetear en tubos de ensayo:
hidrazona formado con 2.4-dinitrofenil-hidrazina. CALCULO
Reactivo Blanco Muestra Obtener la actividad de GOT en el suero a partir de la
MUESTRA siguiente tabla:
Muestra ---- 0.1 ml
Absorbancia U/l Absorbancia U/l
Componentes Concentración en la prueba Tampón 0.5 ml 0.5 ml
Agua Destilada 0.1 ml ---- 0.020 7 0.100 36
1. Tampón GOT 0.030 10 0.110 41
Tampón fosfato 100 mmol/l pH 7.4 Mezclar, incubar durante exactamente 30 min a 37°C. 0.040 13 0.120 47
L-aspartato 100 mmol/l 0.050 16 0.130 52
α-oxoglutarato 2 mmol/l 2,4-DNP 0.5 ml 0.5 ml 0.060 19 0.140 59
2. 2.4-Dintrofenilhidrazina 1 mmol/l 0.070 23 0.150 67
3. Hidróxido de sodio 0.4 mmol/l Mezclar, dejar reposar durante exactamente 20 min entre 0.080 27 0.160 76
Patrón Piruvato +20 y +25°C. 0.090 31 0.170 89
Piruvato 2 mmol/l
Hidróxico Sódico 5.0 ml 5.0 ml
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES CALIBRACION UTILIZANDO PATRON
1. Tampón GOT Mezclar, leer la absorbancia de la muestra A(muestra) frente El patrón Piruvato se utiliza para preparar una curva de
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad al reactivo blanco al cabo de 5 minutos. calibración cuando no se pueden obtener lecturas a
cuando se conserva entre +2 y +8°C. 546 nm. Se permite aumentar la cantidad de piruvato
2. Medición frente a Muestra Blanco para reaccionar con 2,4 dinofenilhidrazina. La
2. 2.4-Dintrofenilhidrazina concentración de hidrazona formada es aproximadamente
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Pipetear en tubos de ensayo: proporcional a la cantidad de piruvato reaccionado.
Muestra Blanco Muestra PREPARACION DEL REACTIVO
3. Hidroxido sódico Para construir la curva de calibración para GOT, diluir
Preparar un vial de hidroxido sódico 3 con agua Muestra ---- 0.1 ml 1.5 ml de Patrón Piruvato con 4.5 ml de Tampón GOT
bidestilada hasta obtener 1000 ml en un frasco Tampón GOT 0.5 ml 0.5 ml inmediatamente antes de la medición.
volumetrico. Estable hasta la fecha de caducidad
PROCEDIMIENTO La curva de calibración se obtiene trazando las REFERENCIAS
absorbancias medidad frente a las actividades de la Reitman, S., and Frankel, S., Amer. J. Clin. Path., 1957;
Longitud de onda: 490-560 nm transaminasa en U/l. 28: 56
Cubeta: 1 cm de espesor ordenadas = absorbancia
Temperatura: 20 - 25°C abcIsas = actividad en U/l
Pipetear en tubos de ensayo: VALORES NORMALES

Suero hasta 12 U/l
Tubo Patrón Agua Solución
No. Piruvato Bidestilada Tampón CONTROL DE CALIDAD
(ml) (ml) (ml) Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Multisueros Normal y Elevados ensayados
1 0.00 0.2 1.00 Para un control de reproducibilidad:
2 0.05 0.2 0.95 Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
3 0.10 0.2 0.90
4 0.15 0.2 0.85 LINEARIDAD
5 0.20 0.2 0.80 Si la absorbancia excede de 0.170, diluir 0.1 ml de muestra
6 0.25 0.2 0.75 con 0.9 ml de solución NaCl al 0.9% y repetir la prueba.
7 0.30 0.2 0.70 Multiplicar el resultado por 10.
8 0.35 0.2 0.65
9 0.40 0.2 0.60 NOTAS
10 0.45 0.2 0.55 La hemólisis interfiere con el análisis.
En algunos sueros las actividades de la transaminasa son
estimuladas por medio de altas concentraciones de
Mezclar, y pipetear en cada tubo 1.0 ml de solución aldehídos, cetonas, o oxo-ácidos. Para evitar tal riesgo,
Reactivo 2. Mezclar e incubar durante 20 minutos entre medir frente a suero blanco (proceso 2) en lugar de frente
+ 20 y +25°C. Añadir 10 ml de solución de hidróxido a reactivo blanco (proceso 1).
Sódico a cada tubo. Mezclar y leer la absorbancia frente
al blanco (tubo no. 1) al cabo de 5 min. PRECAUCIONES
Las absorbancias de las cantidades de piruvato boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
aumentadas (0.05 - 0.45 ml Patrón Piruvato) que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
corresponden a las actividades de la transaminasa en El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
U/l siguientes: contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
el área afectada con agua abundante. En caso de
ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a
Tubo No. GOT U/l Tubo No. GOT U/l un médico
La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
2 6 7 31 tuberias, lo que podría producir azidas explosivas.
3 11 8 37
4 16 9 44
5 20 10 52
6 25
GPT / ALAT 33
Método IFCC
Cat. No. R1b. Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato VALORES NORMALES EN SUERO

AL1200 R1a. Tampón/Sustrato 1 x 70 ml Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato
20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 20 x 2 ml R1b con el volumen adecuado de Tampón / Sustrato R1a 25°C 30°C 37°C
α-oxoglutarato 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AS 1202)
20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AS1267) Hombre: Hasta 22 U/l Hasta 29 U/l Hasta 40 U/l
AL1268 R1a. Tampón/Sustrato 1 x 105 ml Es estable durante 14 días conservado entre +2 y +8°C ó Mujer: Hasta 17 U/l Hasta 22 U/l Hasta 31 U/l
5 x 20 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 5 x 20 ml 24 horas entre +15 y +25°C.
α-oxoglutarato CONTROL DE CALIDAD
PROCEDIMIENTO Para un control de exactitud y reproducibilidad:
METODO UV Multisueros Normal y Elevado ensayados.
Este es un método estándar optimizado según las Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm ó Hg 365 nm) Para un control de reproducibilidad:
concentraciones recomendadas por la IFCC. Cubeta: 1 cm de espesor Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
PRINCIPIO Medición: Frente al aire LINEARIDAD
ALT
α-oxoglutarato + L-alanina > L-glutamato + piruvato Si la variación de absorbancia por minuto excede de:
Semi 0.16 a 340 nm/Hg 334 nm
oxoloacetato + NADH + H+ LD
> L-lactato + NAD+ Pipetear en cubeta: Macro Micro 0.08 a Hg 365 nm
MUESTRA Muestra 0.2 ml 0.1 ml repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 10.
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato 2 2.0 ml 1.0 ml
NOTAS
REACTIVOS Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 1 min. Leer Evitar la hemólisis ya que interfiere con el análisis.
de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. Observar si la variación
Componentes Concentraciones en la prueba de la absorbancia por minuto es entre los rangos de: PRECAUCIONES
R1a. Tampón/Sustrato 0.11 y 0.16 a 340/Hg 334 nm boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Tampón tris 100 mmol/l, pH 7.5 0.06 y 0.08 a Hg 365 nm que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
L-alanina 0.6 mol/l El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
R1b. Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato Para el calculo usar sólo las valores obtenidos durante los contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
α-oxoglutarato 15 mmol/l 2 primeros minutos. el área afectada con agua abundante. En caso de
LD > 1.2 U/ml ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a
NADH 0.18 mmol/l CALCULOS un médico
Para calcular la actividad de la ALT utilizar las fórmulas La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
siguientes: tuberias, lo que podría producir azidas explosivas.
U/l = 1746 x ∆A 340 nm/min REFERENCIAS
R1a. Tampón/Sustrato U/l = 1780 x ∆A Hg 334 nm/min International Federation of Clinical Chemistry, Scientific
Listo para usar. Estables hasta la fecha de caducidad U/l = 3235 x ∆A Hg 365 nm/min Comittee. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1980, 18: 521-534.
GPT / ALAT 34
Método de Color si a
Patrón Piruvato
Cat. No. Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad 2,4-DNP 0.5 ml 0.5 ml
AL146 1. Tampón 1 x 100 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C Muestra 0.1 ml ----
2x100 ml 2. 2.4-Dintrofenilhidrazina 1 x 100 ml
3. Hidróxido de sodio 1 x 100 ml PROCEDIMIENTO Mezclar, dejar reposar durante exactamente 20 minutos
Patrón piruvato 1 x 10 ml entre +20 y 25°C.
Longitud de onda: Hg 546 nm (530 - 550 nm)
Método colorimetrico (Reitman y Frankel) para la Cubeta: 1 cm de espesor Hidróxico Sódico 5.0 ml 5.0 ml
determinación de alanina aminotrasferasa en suero Temperatura de incubación: 37°C
Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) frente
PRINCIPIO a la muestra blanco al cabo de 5 minutos.
α-oxoglutarato + L-alanina ALT
> L-glutamato + piruvato 1. Medición frente a Reactivo Blanco
CALCULO
La transaminasa Glutamico-piruvico se mide por la Pipetear en tubos de ensayo: Obtener la actividad de GPT en el suero a partir de la
monitorización de la concentración de piruvato siguiente tabla:
hidrazona compuesto de 2.4-dinitrofenil-hidrazina. Reactivo Blanco Muestra
Absorbancia U/l Absorbancia U/l
MUESTRA Muestra ---- 0.1 ml 0.025 4 0.275 48
Tampón 0.5 ml 0.5 ml 0.050 8 0.300 52
Componentes Concentración en la prueba Agua Destilada 0.1 ml ---- 0.075 12 0.325 57
0.100 17 0.350 62
1.Tampón Mezclar, incubar durante exactamente 30 min a 37°C. 0.125 21 0.375 67
Tampón fosfato 100 mmol/l pH 7.4 0.150 25 0.400 72
L-alanina 200 mmol/l 2,4-DNP 0.5 ml 0.5 ml 0.175 29 0.425 77
α-oxoglutarato 2.0 mmol/l 0.200 34 0.450 83
2. 2.4-Dintrofenilhidrazina 2.0 mmol/l Mezclar, dejar reposar durante exactamente 20 min entre 0.225 39 0.475 88
3. Hidróxido de sodio 4.0 mmol/l +20 y +25°C. 0.250 43 0.500 94
Patrón piruvato 2.0 mmol/l
Hidróxico Sódico 5.0 ml 5.0 ml CALIBRACION UTILIZANDO PATRON
El patrón Piruvato se utiliza para preparar una curva de
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Mezclar, leer la absorbancia de la muestra A(muestra) frente calibración cuando no se pueden obtener lecturas a
1. Tampón GOT al reactivo blanco al cabo de 5 minutos. 546 nm. Se permite aumentar la cantidad de piruvato
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad para reaccionar con 2,4 dinofenilhidrazina. La
cuando se conserva entre +2 y +8°C. 2. Medición frente a Muestra Blanco concentración de hidrazono formada es aproximadamente
proporcional a la cantidad de piruvato reaccionado.
2. 2.4-Dintrofenilhidrazina Pipetear en tubos de ensayo:
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad PREPARACION DE LOS REACTIVOS
cuando se conserva entre +2 y +8°C. Muestra Blanco Muestra Usar Patrón Piruvato no diluido, para la contrucción de la
curva de calibración para GPT
3. Hidroxido sódico Muestra ---- 0.1 ml
Preparar un vial de hidroxido sódico 3 con agua Tampón 0.5 ml 0.5 ml Longitud de onda: 490-560 nm
bidestilada hasta obtener 1000 ml en un frasco Cubeta: 1 cm de espesor
volumetrico. Estable hasta la fecha de caducidad Mezclar, incubar durante exactamente 30 min a 37°C Temperatura: 20 - 25°C
Pipetear en tubos de ensayo: La curva de calibración se obtiene trazando las REFERENCIAS
absorbancias medidas frente a las actividades de la Reitman, S., and Frankel, S., Amer. J. Clin. Paqth., 1957;
Tubo Patrón Agua Solución transaminasa en U/l. 28: 56
No. Piruvato Bidestilada Tampón
(ml) (ml) (ml) ordenadas = absorbancia
abcisas = actividad en U/l
1 0.00 0.2 1.00
2 0.05 0.2 0.95 VALORES NORMALES
3 0.10 0.2 0.90 Suero hasta 12 U/l
4 0.15 0.2 0.85
5 0.20 0.2 0.80 CONTROL DE CALIDAD
6 0.25 0.2 0.75 Para un control de exactitud y reproducibilidad:
7 0.30 0.2 0.70 Multisueros Normal y Elevados ensayados
8 0.35 0.2 0.65 Para un control de reproducibilidad:
9 0.40 0.2 0.60 Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
10 0.45 0.2 0.55
LINEARIDAD
Mezclar, y pipetear en cada tubo 1.0 ml de solución Si la absorbancia excede de 0.5, diluir 0.1 ml de muestra
Reactivo 2. Mezclar e incubar durante 20 minutos entre con 0.9 ml de solución NaCl al 0.9% y repetir la prueba.
+ 20 y +25°C. Añadir 10 ml de solución de hidróxido Multiplicar el resultado por 10.
Sódico a cada tubo. Mezclar y leer la absorbancia frente
al blanco (tubo no. 1) al cabo de 5 minutos. NOTAS
La hemólisis interfiere con el análisis.
Las absorbancias de las cantidades de piruvato En algunos sueros las actividades de la transaminasa son
aumentadas (0.05 - 0.45 ml Patrón Piruvato) estimuladas por medio de altas concentraciones de
corresponden a las actividades de la transaminasa en aldehidos, cetonas, u oxo-ácidos. Para evitar tal riesgo,
U/l siguientes: medir frente a suero blanco (proceso 2) en lugar de frente
a reactivo blanco (proceso 1).
Tubo No. GPT U/l PRECAUCIONES

2 9 boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
3 10 que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
4 27 El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
5 37 contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
6 46 el área afectada con agua abundante. En caso de
7 56 ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a
8 67 un médico
9 77 La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
10 87 tuberias, lo que podría producir azidas explosivas.
HEMOGLOBINA (TOTAL) 35
Método estandarizado ICSH
Cat. No. PREPARACION DE LAS SOLUCIONES VALORES ESPERADOS EN SUERO HUMANO

*(2)
1. Reactivo de Drabkin NORMAL
HG 1539A 1. Reactivo Conc 3 x 100 ml Diluír 1 volumen de reactivo con 9 volumenes de agua
3 x 100 ml Reactivo concentrado para preparar destilada. Alternativamente puede diluir el contenido Hemoglobina en sangre (g/dl)
3 x 1000 ml de reactivo de trabajo completo de una botella de reactivo agregando 900 ml de
agua destilada. El reactivo no diluído es estable hasta la Hombres Adultos 13-18
HG 1539 1. Reactivo Conc 5 x 100 ml fecha de caducidad almacenado entre +2 y +8°C. El Mujeres adultas 11-16
5 x 100 ml Reactivo concentrado para preparar reactivo diluído es estable al menos 6 meses almacenado Recién nacidos 14-23
5 x 1000 ml de reactivo de trabajo entre +15 y +25°C. almacenado en un frasco ambar.
* Dado que hay variaciones debido a la edad, raza
(2) Descarte la solución si se decolora o se oscurece
METODO COLORIMETRICO ejercicio, estaciones y altitud, se recomienda que cada
(2)
PRINCIPIO laboratorio establezca sus propios rangos normales.
Método cuantitativo para la determinación in vitro de MATERIALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS
hemoglobina en sangre de acuerdo a las Estandar de Cianometahemoglobina cat No. ST 656 LINEARIDAD Hasta 21 g/dL
recomendaciones del Comité Internacional para la
NOTA: PRECAUCIONES
Estandarización de Hematología (ICSH). Método
Si la medición se realiza a una longitud de onda Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
manual.
boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
La hemoglobina primero es oxidada por el potasio diferente entre 540 y 546 nm, se debe realizar la
que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
ferrocianato a metahemoglobina y es convertida a curva de calibración
cianometahemoglobina por el cianuro de potasio. La REFERENCIAS
reaccion es monitoreada a 540 nm PROCEDIMIENTO 1.- Van Kampen, E. J. And Zijlstra, W.G., Clin Chim. Acta, 1961;
6: 538-544
(1)
MUESTRA Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) 2.- International Committee for Standarizationin Haematology.
Sangre entera. Cubeta: 1 cm de espesor Brit. J. Haemat., 1967: 13 (suppl.)71
la sangre obtenida por punción capilar debe fluir Temperatura: 20-25°C
libremente y pipeteada inmediatamente en la solución Medición: contra agua destilada
de Drabkin, enjuagando la pipeta 3 ó 4 veces en dicha
solución. La sangre obtenida por punción venosa debe Pipetear en tubos de ensayo:
ser recogida en tubos con anticoagulantes sólidos tales
como; oxalato, citrato, EDTA o heparina. Despúes de MACRO SEMI-MICRO
ser bien mezclada con el anticoagulante, la sangre Muestra Muestra
puede conservarse hasta 2 años congelada ó al menos
1 semana a 30°C. Muestra de Sangre 0.020 ml 0.010 ml
Reactivo diluído 5.000 ml 2.500 ml
REACTIVOS
Componentes Concentraciónes en la prueba Enjuagar la pipeta 3-4 veces con el reactivo. Mezclar bien
y dejar reposar por 3 minutos a temperatura ambiente
1. Reactivo diluído Medir la absorbancia de la muestra frente a AGUA DEST
Fosfato Potasico 1.03 mmol/l
Ferrocianuro potásico 0.61 mmol/l CALCULO CON FACTOR
Cianuro potásico 0.77 mmol/l Conc Hemoglobina= Abs muestra x 22.82 (mmol/L)
Conc Hemoglobina= Abs muestra x 36.77 (g/dL)
rev 05 Jan 07 aw
HIERRO con Capacidad de Fijación 36
Método Ferene
Cat. No. PREPARACION DE LOS REACTIVOS Referencia Muestra

SI 250 200 ml 1. Cromógeno 1 x 10 ml 2.Reductor
2. Reductor 2 x 15 ml Disolver el contenido de un vial de reductor 2 con 15 ml Reactivo ferroso 2.0 ml 2.0 ml
3. Tampón hierro 1 x 100 ml de agua desionizada libre de hierro. Es estable durante Tamponado
4. Tampón UIBC 1 x 100 ml 4 semanas entre +4 y +8°C. Reductor 0.1 ml 0.1 ml
5. Reactivo ferroso 1 x 5 ml Agua libre de hierro 0.5 ml ----
6. Patrón bajo 1 x 10 ml Reactivo ferroso tamponado Muestra ---- 0.5 ml
7. Patrón alto 1 x 10 ml Añadir 1 ml de reactivo ferroso 5 al contenido de una
botella de tampón UIBC 4. Es estable durante 6 meses Mezclar, incubar durante 7 min. Entre 15 - 25°C/37°C.
PAQUETE SUPLEMENTARIO: conservado entre +15 y +25°C. Leer la absorbancia inicial de la muestra y de la
SI 1676 5. Reactivo ferroso 10 x 5 ml El resto de los reactivos están listos para usar. Estables referencia frente a agua desionizada.
hasta la fecha de caducidad cuando se conservan entre
PRINCIPIO +15 y +25°C. Cromogeno 0.1 ml 0.1 ml
El ion férrico se disocia de su proteina transportadora
transferrina, en medio ácido y simultaneamente es PROCEDIMIENTO PARA HIERRO Mezclar, incubar durante 15 min a 15 - 25°C/37°C. Leer
reducido a su forma ferrosa. Este ion ferroso se la absorbancia final de la muestra y de la referencia
acompleja con el cromógeno, el cual es un indicador Longitud de onda: 595 nm (590-610 nm) frente a agua desionizada. Restar la absorbancia inicial
sensible al hierro, para formar un cromógeno azul que Cubeta: 1 cm de espesor de la absorbancia final para obtener el ∆A del patrón y de
absorbe a 595 nm Temperatura: 15-25°C/37°C(hierro) la referencia.
En la medición de la capacidad de union del hierro no
saturado (UIBC), se añade una cantidad conocida de ion Pipetear en tubos de ensayo: CALCULOS
ferroso en exeso sobre el suero en medio alcalino. Este Hierro en suero
satura los sitios de unión del hierro de la transferrina que Reactivo Muestra Patrón ∆Amuestra
Concentración= x Conc. de patrón
estaban sin ocupar. La cantidad de hierro libre medida de Blanco ∆Apatrón
esta manera se resta de la cantidad total añadida para
obtener el UIBC. Tampón 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml UIBC
Reductor 0.1 ml 0.1 ml 0.1 ml Utilizando el procedimiento anteriormente descrito debe
MUESTRA Agua libre de h 0.5 ml ---- ---- construirse un gráfico de calibración a partir del ensayo de
Suero Patrón ---- 0.5 ml ---- los patrónes 6 y 7. Este puede ser utilizado para calcular
Muestra ---- ---- 0.5 ml las concentraciónes de hierro por el procedi.miento UIBC.
REACTIVOS El tubo "referencia" nos proporciona una medida de la
Mezclar, leer la absorbancia inicial de la muestra y del cantidad total de hierro añadida a cada muestra. La
Componentes Concentracion de la prueba
patrón frente al reactivo blanco absorbancia del tubo "referencia". La diferencia representa
1. Cromogeno el UIBC lo cual puede calcularse del grafico de calibración.
Ferene 22.2 mmol/l Cromógeno 0.1ml 0.1ml 0.1ml
2. Reductor De esta manera: ∆Ac= (∆Ar - ∆As)
Acido ascórbico 1.3 mol/l Mezclar, incubar durante 15 min entre 15 - 25°C/37°C. Donde ∆Ac = Absorbancia UIBC
3. Tampón hierro Leer la absorbancia final frente al reactivo blanco. Restar ∆Αr = Absorbancia de referencia
Tampón acetato 0.87 mol/l, pH 4.65 la absorbancia inicial de la absorbancia final para obtener ∆Αs = Absorbancia de la muestra
Dimetil sulfóxido el ∆A del patrón y de la muestra.
4. Tampón UIBC La concentración de hierro correspondiente a ∆Ac se lee
Tampón tris 1.0 mol/l pH 8.3 PROCEDIMIENTO PARA UIBC en el gráfico de calibración. Este es el UIBC de la muestra
5. Reactivo ferroso
Sulfato de amonio y hierro 3 mmol/l Pipetear en tubos de ensayo: VALORES NORMALES EN SUERO
6. Patrón bajo 35.8 µmol/l (0.2mg/dl) Hierro en suero: 7.34 - 23.6 µmol/l (0.04-0.13 mg/dl)
7. Patron alto 107.4 µmol/l (0.6mg/dl) UIBC: 20 - 58.7 µmol/l (0.11-0.33 mg/dl)
CONTROL DE CALIDAD
Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Multisueros normal y elevado ensayados
Para un control de reproducibilidad:
Multisueros: bajo, normal y elevado
LINEARIDAD
Hierro en suero 143µmol/l (0.8mg/dl)
UIBC 89.4µmol/ (0.50mg/dl)
NOTAS
Para que los utensilios de cristal queden libres de hierro
deben lavarse con ácido clorhidrico 0.1N y enjuagarse
con agua desionizada libre de hierro.
REFERENCIAS
1. Siedel, J., et al (1984). Clin Vhem. 30 : 975
2. Goodwin.J.F., et al (1966) Clin Chem. 12 : 47
HIERRO 37
Método Ferene
Cat. No. PROCEDIMIENTO PARA HIERRO Mezclar, incubar durante 15 minutos a 20 - 25°C. Leer
SI 257 1. Cromógeno 1 x 10 ml la absorbancia final frente al reactivo blanco. Restar la
2 x 100 ml 2. Reductor 1 x 15 ml Longitud de onda: 595 nm (590-610 nm) absorbancia final para obtener el ∆A del patrón y de la
3. Tampón 2 x 100 ml Cubeta: 1 cm de espesor muestra.
4. Patrón 1 x 10 ml Temperatura: 20-25°C
Medición frente a reactivo blanco CALCULOS
PAQUETE SUPLEMENTARIO
SI 264 1. Cromógeno 12 x 10 ml Pipetear en tubos de ensayo: ∆Amuestra
Concentración= x Conc. de patrón
SI1042 2. Reductor 20 x 1 ml ∆Apatrón
Reactivo Muestra Patrón
Blanco VALORES DE REFERENCIA
Hierro en suero: 7.34 - 23.6 µmol/l
(1,2,3)
PRINCIPIO Tampón 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml 41 - 132 µgl/dl
El ión férrico se disocia de su proteina transportadora Reductor 0.1 ml 0.1 ml 0.1 ml
transferrina, en medio ácido y simultaneamente es Agua libre de hierro 0.5 ml ---- ---- CONTROL DE CALIDAD
reducido a su forma ferrosa. Este ión ferroso se acompleja Patrón ---- ---- 0.5 ml Para un control de exactitud y reproducibilidad:
con el cromógeno, el cual es un indicador sensible al Muestra ---- 0.5 ml ---- Multisueros normal y elevado ensayados
hierro, para formar un cromógeno azul que absorbe a Para un control de reproducibilidad:
595 nm. Mezclar, leer la absorbancia inicial de la muestra y del Multisueros: bajo, normal y elevado
patrón frente al reactivo blanco
MUESTRA LINEARIDAD
Suero (No usar plasma en este análisis) Cromógeno 0.1ml 0.1ml 0.1ml El método es lineal hasta una concentración de 143 µmol/l
(600 µg/dl) las muestras con concentraciónes superiores
REACTIVOS Mezclar, incubar durante 15 min entre 20 - 25°C se deberán diluir 1 + 2 con agua desionizada y repetir la
Leer la absorbancia final frente al reactivo blanco. Restar prueba. Multiplicar el resultado por 3.
Componentes Concentracion de la prueba
la absorbancia inicial de la absorbancia final para
1. Cromogeno obtener el ∆A del patrón y de la muestra. NOTAS
Ferene 22.2 mmol/l Es esencial que todos los aparatos utilizados en la
2. Reductor PROCEDIMIENTO SEMI-MICRO recogida de las muestras y en la prueba esteén libres de
Acido ascórbico 1.3 mol/l contaminación con trazas de hierro.
3. Tampón Pipetear en la cubeta Para que los recipientes de cristal quedenl libres de hierro
Tampón acetato 0.87 mol/l, pH 4.65 deben lavarse con ácido clorhidrico diluido.
Dimetil sulfóxido Reactivo Muestra Patrón (Aproximadamente 0.1N) y enjuagarse abundantemente
Surfactante Blanco con agua desionizada libre de hierro.
4. Patrón 35.8 µmol/l (200 µg/dl)
Tampón 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml PRECAUCIONES
Reductor 0.05 ml 0.05 ml 0.05 ml Unicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Agua libre de hierro 0.25 ml ---- ---- boca . Respetar las precauciones normales necesarias.
2. Reductor Patrón ---- ---- 0.25 ml que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Disolver el contenido de un vial de reductor 2 con Muestra ---- 0.25 ml ----
15 ml de agua desiónizada libre de hierro. Estable REFERENCIAS
durante 4 semanas entre +4 y +8°C. Mezclar, leer la absorbancia inicial de la muestra y del 1. Siedel, J., et al (1984). Clin Vhem. 30:975
El resto de los componentes están listos para usar patrón frente al reactivo blanco 2. Goodwin, J.F., et al (1966) Clin Cem. 12: 47.
Estables hasta la fecha de caducidad cuando se
conservan entre +15 y +25°C. Cromógeno 0.05 ml 0.05 ml 0.05 ml
CAPACIDAD de Fijación de Hierro 38
Método de Carbonato de Magnesio
Cat. No. 6. Carbonato Básico de Magnesio Para calcular la capacidad de fijación no saturada (CFNS)
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad restar al CTFH la concentración de hierro en suero.
TI 1010 5. Solución de Hierro 1 x 100 ml cuando se conserva entre +15 y +25°C.
100 ml 6. Carbonato Básico
CFNS = CTFH - Concentración de Hierro en suero
de Magnesio 2x 10 g
PROCEDIMIENTO
(1,2)
PRINCIPIO Pipetear en tubo de centrifugación de 10 ml: VALORES NORMALES (CTFH)
Se añade hierro en exceso al suero para saturar la Suero: 46.4 - 69.5 µmol/l (0.259 - 0.388 mg/dl)
transferrina. El hierro no ligado se precipita con el Suero 0.5 ml
carbonato básico de magnesio. Tras la centrifugación Solución 5 1.0 ml CONTROL DE CALIDAD
se determina el hierro en el sobrenadante.
Mezclar, dejar reposar durante 5-30 min entre +20 y +25°C Multisueros normal y elevado ensayados
MUESTRA Añadir una espátula llena (180mg) de carbonato básico Para un control de reproducibilidad:
Suero de magnesio, Botella 6. Dejar reposar durante 30-60 min Multisueros: bajo, normal y elevado
entre + 20 y +25°C, mezclando frecuentemente durante
este periodo. Despues centrifugar a 3000 rpm durante 10 NOTAS
REACTIVOS minutos. Recoger el sobrenadante.
El sobrenadante debe ser totalmente claro tras la
Componentes Concentracion de la prueba centrifugación. De lo contrario, tendria que ser decantado y
El sobrenadante puede conservarse durante una hora centrifugado de nuevo. Utilizar un rotor centrifugación de
máximo. cabeza oscilante y no de cabeza en ángulo.
5. Solución de Hierro Utilizar 0.5 ml de sobrenadante para el análisis con los
Hierro 89.5 µmol/l (500 µg/100ml) kits de hierro en suero (Cat. SI 257 y Cat. No, SI 255). REFERENCIAS
6. Carbonato Básico de Magnesio
1. Ramsey, W.N.M. The determination of the total iron-
CALCULO DE CAPACIDAD TOTAL DE FIJACION DE binding capacity of serum. Adv. Clin. Chem. 1: 1, 1958
HIERRO (CTFH) 2. Ferruccio Ceriotti and Givanni Ceriotti, Imroved direct
MATERIAL REQUERIDO Y NO SUMINISTRADO specific determination of serum iron and total iron-binding
para el análisis de Hierro en suero (Cat.No. SI 257 Utilizando el patrón suministrado en el kit de hierro. capacity.clin.chem. 26: 327-331, 1980
y Cat.No. SI 255)
Amuestra
CTFH (µmol/l) = Apatrón x 107.4
5. Solución de Hierro Amuestra

Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad CTFH (mg/dl) = Apatrón x 0.6
LDH 39
Método DGKC
Cat. No. PROCEDIMIENTO VALORES NORMALES EN SUERO(2)
LD 401 R1a. Tampón/Sustrato 1 x 70 ml Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm) 25°C 30°C 37°C
20 x 3 ml R1b. NADH 20 x 3 ml Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura: 25/30/37°C Adultos 120-240 U/l 160-320 U/l 230-460 U/l
METODO UV Medición: frente al aire
Este es un método estándar optimizado según las Pipetear en la cubeta: CONTROL DE CALIDAD
recomendadas de la Deutsche Gesellschaft für Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Klinische Chemie. 25°C/30°C 37°C Multisueros Normal y Elevados ensayados
Macro Semi micro Macro Semi micro Para un control de reproducibilidad:
PRINCIPIO Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
Reactivo 3.0ml 1.0 ml 3.0 ml 1.0 ml
Piruvato + NADH + H+
LDH
> L-lactato + NAD
+
Muestra 0.1 ml 0.04 ml 0.05 ml 0.02 ml LINEARIDAD
MUESTRA Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 0.5 min y Si la variación de absorbancia por minuto excede de:
empezar a cronometrar el tiempo simultaneamente. Leer 0.1 a 340 nm/Hg 334 nm
Suero plasma heparinizado o EDTA plasma de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. 0.05 a Hg 365 nm
REACTIVOS CALCULOS repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 10.
Componentes Concentraciónes en la prueba Para calcular la actividad de la LDH utilizar las formulas PRECAUCIONES
siguientes:
R1a. Tampón/Sustrato Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
Tampón fosfato 50 mmol/l, pH 7.5 25°C/30°C boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Piruvato 0.6 mmol/l Macro Semi Micro que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
R1b. NADH 0.18 mmol/l El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
U/l = 4921 x ∆A 340 nm/min U/l = 4127 x ∆A 340 nm/min , contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
U/l = 5016 x ∆A Hg 334 nm/min U/l = 4207 x ∆A Hg 334 nm/min el área afectada con agua abundante. En caso de
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES U/l = 9118 x ∆A Hg 365 nm/min U/l = 7647 x ∆A Hg 365 nm/min ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a
un médico
R1a. Tampón/Sustrato 37°C La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Macro Semi Micro tuberias, lo que podría producir azidas explosivas.
cuando se conservan entre +2 y +8°C.
R1b. NADH U/l = 9683 x ∆A 340 nm/min U/l = 8095 x ∆A 340 nm/min , REFERENCIAS
Reconstituir un vial de R1b. NADH con 3 ml de U/l = 9871 x ∆A Hg 334 nm/min U/l = 8252 x ∆A Hg 334 nm/min
Tampón/Sustrato R1a. U/l = 17941 x ∆A Hg 365 nm/min U/l = 15000 x ∆A Hg 365nm/min 1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem.
Estable durante 4 días entre +2 y +8°C ó 5 horas 1970; 658; 1972; 10; 182.
entre +15 y +25°C. 2. Weisshaar, H.D., et al, (1975). Med. Welt. 26:387
LIPASA 40
Triacilglicerol Lipasa E.C.3.1.1.3
Método U.V.
R1b. Sustrato VALORES NORMALES EN SUERO(2)
Cat. No. Reconstituir el contenido de un vial sustrato R1b con Suero: Hasta 190 U/l (25 / 30 / 37°C)
LI 188 R1a. Tampón 1 x 70 ml 2.5 ml de Tampón R1a. Estable durante 2 semanas
20 x 2.5 ml R1b. Sustrato 20 x 2.5 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C ó 5 días entre CONTROL DE CALIDAD
CAL. Patrón 4 x 3 ml +15 y +25°C. Para un control de exactitud y reproducibilidad:
Para método manual y automatizado (600 pbas) CAL. Patrón Multisueros Normal y Elevados ensayados
Disolver el contenido de un vial de CAL. Patrón en 3.0 Para un control de reproducibilidad:
METODO TURBIDIMETRICO(2) ml de agua bidestilada, rotar lentamente durante 30 Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
minutos antes de utilizar. Estable durante 5 días entre
PRINCIPIO +2 y +8°C ú 8 horas entre +15 y +25°C. LINEARIDAD
Si la actividad de la lipasa excede 700 U/l diluir la muestra
Trioleina + 2H2O Lipasa
> monogliceridos + 2 acido PROCEDIMIENTO 1 + 1 con NaCl al 0.9% y repetir la prueba. Multiplicar el
oléico resultado por 2.
Se mide la disminución de la turbidez a 340 nm. Longitud de onda: 340 nm (Hg 365 nm o Hg 334 nm)
Cubeta: 1 cm de espesor NOTAS
MUESTRA Temperatura: 25/30/37°C La hemolisis interfiere en la prueba. En raras ocasiones
Medición: frente al aire el suero del paciente puede presentar un aumento de la
Suero plasma heparinizado o EDTA plasma absorbancia en vez de un descenso. La actividad de la
Pipetear en la cubeta: lipasa en estas muestras normalemente se encuentra
REACTIVOS dentro del rango normal. Actividades extremadamente
Patrón Muestra elevadas de lipasa pueden conducir a un considerable
Componentes Concentraciónes en la prueba Macro Semi Micro Macro Semi Micro consumo de sustrato, siendo estos casos, A1 menor de
0.500. Cuando esto ocurra, diluir la muestra 1+9 con una
R1a. Tampón Reactivo 2.5 ml 1.0 ml 2.5 ml 1.0 ml solución de NaCl 0.9% y repetir la prueba. Multiplicar el
Tampón Tris 26 mmol/l, pH 8.9 Muestra ---- ---- 0.1 ml 0.04ml resultado por 10. Es preferible utilizar cubetas de cristal
R1b. Sustrato Patrón 0.1 ml 0.04ml ---- ---- deben lavarse abundantemente, especialmente despúes
Desoxicolato sódico 16.7 mmol/l de haber sido utilizadas para ensayos de trigliceridos ó
Cloruro de cálcico 0.04 mmol/l Mezclar. Evitar la formación de espuma. Leer la absorbancia colesterol.
Trioleína 0.3 mmol/l A1 del patrón y de la muestra al cabo de 4 minutos. Despues
Colipasa 4 mg/l de otros 5 minutos leer la obsorbancia A2 del patrón y de la PRECAUCIONES
CAL. Patrón muestra. Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
Lipasa actividad indicada en el vial boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
en U/l a 25/30/37°C ∆Ade la muestra o del patrón = A1 - A2 que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
CALCULOS contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Calcular el factor de la prueba de la siguente manera: el área afectada con agua abundante.
R1a. Tampón
Actividad (patrón)
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Factor = REFERENCIAS
∆Apatrón
cuando se conservan entre +2 y +8°C. 1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem.
Actividad lipasa en la muestra = Factor x ∆Amuestra 1970; 658; 1972; 10; 182.
2. Weisshaar, H.D., et al, (1975). Med. Welt. 26:387
LIPIDOS TOTALES 41
Método Colorimétrico
Pipetear en tubos de ensayo: CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. Para un control de exactitud y reproducibilidad:
TL100 1. Patrón 1 x 70 ml Reactivo Multisueros normal y elevado ensayados
3 x 100 ml 2. Reactivo Colorante 3 x 100 ml Blanco Patrón Muestra Para un control de reproducibilidad:
Multisueros bajo, normal y elevado.
Reactivo adicional: acido sulfúrico concentrado Solución 1 ---- 0.05 ml ----
(Requerido pero no suministrado) Muestra ---- ---- 0.05 ml LINEARIDAD
Acido sulfúrico ---- 2.00 ml 2.00 ml Si la concentración de lipidos totales excede 40 g/l
MÉTODO COLORIMETRICO (4000 mg/dl) diluir 0.1 ml de muestra con 0.9 ml de
Tapar, mezclar por inversión y dejar reposar en un baño NaCl al 0.9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado
(1)
PRINCIPIO de agua hirviendo durante 10 min. Despúes enfriar en un por 10.
Los lipidos reaccionan con ácido sulfurico, ácido baño de agua fria y pipetear de nuevo en tubos de ensayo
fosfórico y vanilina para formar un complejo de color secos: NOTAS
rosado. La solución 2 y el ácido sulfúrico son muy viscosos. Se
A partir de las soluciones recomienda pipetear cerca de la base del tubo de ensayo
MUESTRA anteriores ---- 0.10 ml 0.10 ml y mezclar bien ambas soluciones. Debe tenerse cuidado
Suero o plasma heparinizado. Acido sulfúrico 0.10 ml ---- ---- cuando se llenen las cubetas ya que las burbujas de aire
Solución 2 2.50 ml 2.50 ml 2.50 ml atrapadas tardan en desaparecer. Si el volumen final no
REACTIVOS es suficiente para llenar la cubeta, los volumenes
Mezclar, dejar reposar durante 30 minutos a temperatura especificados pueden duplicarse sin que los cálculos se
Componentes Concentración en la prueba ambiente (20 - 25°C). Verter sobre cubetas secas y leer vean afectados. Detergentes y grasas interfieren en la
la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) determinación.
1.Patrón frente al reactivo blanco antes de 30 minutos.
Lipidos Totales 10 g/l (1000 mg/dl) PRECAUCIONES
2. Reactivo colorante CALCULOS Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la
Acido fosfórico 11.7 mol/l Para calcular la concentración total de lipidos en la muestra: boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Vanilina 13 mmol/l que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Amuestra
g/l = 10 x
Apatrón La solución 2 contiene ácido fosfórico que es cáustico.
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Si la solución entra en contacto con la piel o mucosas,
Todas soluciones están listas para usar. Estables hasta Amuestra lavar inmediatamente con agua abundante. Si la solución
mg/dl = 1000 x
la fecha de caducidad cuando se conservan entre +15 Apatrón entra en contacto con los ojos lavar inmediatamente con
y +25 °C. agua y consultar un oftalmólogo. No fumar mientras se
(1)
VALORES NORMALES usen estás soluciones. Mantener la solución 1 lejos de
PROCEDIMIENTO llamas abiertas, descargas eléctricas y fuentes de calor
Suero: 4-10 g/l (400-1000 mg/dl) ya que podrían prender.
Longitud de onda: Hg 546 nm (530-560 nm)
Cubeta: 1 cm de espesor Como puede haber variaciones debido a la edad, sexo, REFERENCIAS
Medición: Frente a reactivo blanco dieta y situación geografica, se recomienda que cada 1. Zollner, N., and Kirsch, K., Z Ges. Exp. Med., 1962
Temperatura de reacción: 100°C laboratorio establezca sus propios rangos normales. 135: 545.
Temperatura de medición: 20-25°C
MAGNESIO 42
Método Calmagita
Cat. No. 2. Tampón CONTROL DE CALIDAD

Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Para un control de exactitud y reproducibilidad:-
MG 573 1. Reactivo de color 1 x 100 ml cuando se conserva entre +15 y +25ªC Multisueros normal y elevado ensayados
1x200ml 2. Tampón 1 x 100 ml Para un control de reproducibilidad:-
3. Patrón 1 x 5 ml 3. Patrón Multisueros bajo, normal y elevado
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad
PRINCIPIO cuando se conserva entre +15 y +25ªC LINEARIDAD
Este método es lineal hasta 2.67 mmol/l (6.49 mg/dl)
Los iones magnesio reaccionan en medio alcalino con el Reactivo de trabajo Muestras con concentraciones superiores deberán
colorante metalocromo calmagita, para formar un Mezclar volúmenes iguales de reactivo de color 1 y de ser diluidas 1+1 con agua bidestilada y repetir la prueba.
cromóforo, el cual absorbe luz a 520 nm. El calcio es Tampón 2. Usar inmediatanmente Multiplicar el resultado por 2.
excluido de la reacción al formar un complejo con EGTA.
PROCEDIMIENTO VALORES NORMALES(2)
MUESTRA
ADULTOS
Longitud de onda: 520 nm; 546 nm
Suero, plasma heparinizado, orina o LCR. No debe Cubeta: 1 cm de espesor Suero/
utilizarse plasma preparado utilizando anticuagulantes Temperatura: 20-25ºC Plasma 0.7 - 1.1 mmol/l (1.70 - 2.70 mg/dl)
tales como EDTA, citrato u oxalato. La orina de 24 horas Medición: frente al aire CSF 0.98 - 1.27 mmol/l (2.40 - 3.10 mg/dl)
podría contener sedimentos que absorben magnesio. Orina 2.1 - 8.22 mmol/24 hrs (50 - 200 mg/24hrs)
Pipetear en las cubetas:
Añadir unas gotas de ácido clorhídrico concentrado
hasta alcanzar un pH entre 3-4 para disolver el sedimento. Reactivo Patrón Muestra
Diluir la orina 1+4 con agua bidestilada y multiplicar el Blanco NOTA
resultado por 5. Se recomienda el uso de tubos desechables. El material
React. de trabajo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml de cristal debe enjuagarse con ácido clorhídrico diluido y
REACTIVOS Agua destilada 10 µl ---- ---- con agua destilada.
Patrón ---- 10 µl ----
Componentes Concentracion de las soluciones Muestra ---- ---- 10 µl PRECAUCIONES
Únicamente para diagnostico invitro. No pipetear con la
1. Reactivo de color Mezclar, incubar durante 3 min a temperatura ambiente boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Calmagite 0.2 mmol/l leer la absorbancia del patrón (Apatrón) y de la muestra que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
EGTA (Amuestra) frente al reactivo blanco, antes de 30 minutos Las soluciones 1, 2 , 3 contienen azida sódica. Evitar su
Dimetilsulfòxido ingestión o el contacto con la piel y mucosas. En caso
2. Tampón de contacto con la piel, lavar inmediatamente el área
Tampón Dietanolamina 1 mol/l, pH 12.50 CÁLCULOS afectada con agua abundante.En caso de ingestión o
Surfractantes ∆Amuesra contacto con los ojos llamar inmediatamente a un médico
3. Patrón Magnesio 1.0 mmol/l (2.43 mg/dl) Concentración de magnesio (mmol/l) = x 1.0
∆Apatrón
REFERENCIAS
∆Amuesra 1. Grindler et al. Clin. Chem. 1971: 17: 662.
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Concentración de magnesio (mg/dl) = x 2.43 2. Tietz N. W. Clínica Guide to Laboratory Tests. W.B.
1. Reactivo de color
∆Apatrón Saunders Co (1983)
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +15 y +25ªC Revisado 03/04/97
POTASIO 43
Método Tetrafenilboro
Cat. No. PROCEDIMIENTO: LINEARIDAD

1. Precipitación: El método es lineal hasta una concentración de potasio de
PT1600 1. Reactivo de Precipitación 1 x 100 ml 10 mmol/l. Las muestras por arriba de ésta concentración
2. Na-Tetrafenilboro 1 x 50 ml Pipetear en tubos para centrifuga: deberán diluirse 1 + 2 con solución salina 0.9% y el
3. Na.OH 1 x 50 ml resultado se multiplica por 3.
Patrón 1 x 5 ml Macro Micro
VALORES DE REFERENCIA
PRINCIPIO Muestra 100 µl 50 µl Suero 3.6 - 5.5 mmol/l
El reactivo de tetrafenilboro reacciona con los iones Reactivo de precipitación 1000 µl 500 µl Plasma 4.0 - 4.8 mmol/l
potasio en un medio alcalino libre de proteínas para
producir una suspensión turbia de tetrafenilboro de Mezclar y centrifugar a alta velocidad entre 5 y 10 min CONTROL DE CALIDAD
potasio. La turbidez producida es proporcional a la Para un control de precisión y exactitud:
concentración de potasio en la muestra. 2. Ensayo para Potasio: Multisueros normal y elevado ensayados
Para un control de precisión
Longitud de onda: 578 nm Multisueros: normal y elevado
MUESTRA Cubeta: 1 cm de paso de luz
Suero ó plasma con heparina de litio. Medición: contra blanco de reactivo NOTAS
Temperatura: +20 y +25°C La hemólisis de las muestras interfiere con el ensayo
REACTIVOS debido a la alta concentración de potasio en los glóbulos
Pipetear en tubos de reacción: rojos. Por lo tanto , las muestras deben separarse del
Componentes Concentracion de la prueba paquete celular tan pronto como sea posible.
Patrón Muestra Se recomienda que se utilice material de plástico
1. Reactivo de presipitación desechable para el análisis. El material de vidrio
Acido tricloroacético 0.3 mol/l Reactivo de Trabajo 1000 µl 1000 µl contaminado representa una gran fuente de error. Evite
2. Tetrafenilboro de sodio 0.2 mol/l Patrón 100 µl ---- la contaminación por detergentes.
3. Hidróxido de sodio 2.0 mol/l Sobrenadante ---- 100 µl
4. Solución Patrón 5.0 mmol/l REFERENCIAS
El patrón y el sobrenadante deben añadirse en la parte 1. Hillman, G., Bayer, G.,J., Clin. Chem and Clin. Bichem
media de la superficie del reactivo para producir una 1967; 5:93
PREPARACION DE REACTIVOS turbidez homogénea. Mezclar cuidadosamente e incubar 2. Henry.R.J., Clin. Chem. Harper and Row. New.York, Sec.
al menos 5 minutos. Medir la absorbancia del patrón y de Edit., 1974:646
Los reactivos están listos para su uso. Estables hasta la las muestras frente al blanco de reactivo. 3. Teitz, N.W. Fundamentals of Clin. Chem. Saunders Phil
fecha de caducidad almacenado entre +15 y +25°C. Sec ed 1976:876
CALCULOS
REACTIVO DE TRABAJO
Concentración del potasio.
Mezclar partes iguales de soluciones 2 y 3 de acuerdo al
numero de muestras que se vayan a procesar. La mezcla Amuestra
mmol/L = x 5.0
es estable por 30 días entre +15 y +25°C o 60 días entre Apatrón
+2 y +8°C.
PROTEINA C REACTIVA 44
Test en placa de aglutinacion en Latex PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Realizar cada dilución de acuerdo al procedimiento
Todos los reactivos y controles están listos para usar y son cualitativo hasta que no se observe ninguna aglutinación.
Cat. No. CP 2488 CP2714 estables hasta la fecha de caducidad cuando se conservan
R1. Reactivo Látex 50 Test 100 Test entre +2 y +8°C.Sin embargo, antes de usar, deben dejarse Determinación semicuantitativa
R2. Diluyente 1 x 50 ml 1 x 100 ml hasta que alcancen la temperatura ambiente. Agitar el La concentración de PCR puede ser estimada de la última
Control Positivo 1 x 1 ml 1 x 1 ml reactivo de látex antes de usar. No congelar ningun reactivo. dilución con aglutinación visible.
Control Negativo 1 x 1 ml 1 x 1 ml
Placa de cristal (Reutilizable) 1 1 PROCEDIMIENTO PCR (mg/l) = Dilución más elevada con reacción positiva
Determinación cualitativa x sensibilidad del reactivo (6 mg/l)
PRINCIPIO En cada uno de los circulos de reacción de la placa colocar.
El reactivo PCR contiene particulas de látex recubierta
Control Control
con antícuerpos que reconocen la PCR humana. Muestra VALORES NORMALES EN SUERO
Positivo Negativo
Cuando el reactivo se mezcla con suero que contiene Se considera Internacionalmente 6 mg/l como limite
PCR a un nivel mayor que 6 mg/l las particulas se Muestra/ superior del rango normal en adultos sanos.
50 µl 50 µl 50 µl
aglutinan. Esto se interpreta como muestra positiva. Control
El reactivo puede ser utilizado también en la semi- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
cuantificación de PCR. Para este fin, la muestra se Dispensar a lado de cada gota de muestra y control. Normalmente, bajo un estimulo inflamatorio fuerte, tal
somete a diluciones seriadas y cada una se analiza como infección, infarto de miocardio u operación quirur-
cualitativamente. El nivel de PCR puede estimarse Reactivo gica, el nivel de PCR aumenta muy significativamente
apartir de la ultima dilución con aglutinación visible. Latex (10 veces mayor y en algunos casos 1000 veces mayor)
sobre el valor indicado para suero de individuos sanos.
MUESTRA Mezclar y extender con una varilla para llenar el circulo
Usar suero sin diluir. La PCR permanece estable durante del test. Rotar la placa y observar si hay alguna agluti- ESPECIFICIDAD
al menos 3 días, conservandose entre '+15 y +25°C y nación, la cual debería ocurrir en 2 minutos. El antisuero es especifico para la PCR humana y se
6 días entre +2 y +8°C. No leer despues de 3 minutos, ya que si se seca el ha visto que no presenta reacciónes cruzadas con otras
Desechar cualquier suero contaminado lipémico o hemo- reactivo podría dar lugar a la apariencia de una falsa proteinas sericas bajo las condiciones de análisis.
lizado y evitar plasma cuyo contenido en fibrinogeno aglutinación. Muestras muy lipemicas o hemoliticas y altos niveles de
pueda causar aglutinación inespecifica. Evaluación cualitativa de los resultados detergentes ionicos pueden interferir con la prueba.
Una aglutinación marcada indica una concentración
REACTIVOS de PCR superior a 6mg/l. Una suspensión lechosa PRECAUCIONES Y AVISOS
homogenea indica una concentración de latex inferior La placa de reacción debe ser enjuagada varias veces
R1.Reactivo Látex (Dispensador Azul) a 6mg/l con agua deionizada o destilada despues de su utilización
(2)
Suspención acuosa de particulas de látex azules Determinación Semicuantitativa ya que restos de detergentes o de muestras anteriores
recubiertas con anticuerpos que reconocen la PCR Tratar la muestra con diluyente 2 de acuerdo a la tabla: pueden afectar el resultado. La placa lavada puede
humana (1 gota de 50µl) secarse con papel lint-free o dejarla secar al aire.
R2. Diluyente
Dilución PCR mg/l muestra sin diluir)
Tampón Glicina NaOH salina pH 8.2 REFERENCIAS
Control Positivo (Dispensador Rojo) 1. Tillet, W.S., and Francis, T.O.; J. Exp. Med.,
Liquido estabilizado que contiene PCR a una 1+1 12 (1930) 52: 561.
concentración de 30 + 6 mg/l (1 gota de 50µl) 1+2 18 2. Hayasni, H., and Longrippo. GA., H Ford Hosp. Med.
Control Negativo (Dispensador Blanco) 1+3 24 J. (1972) 20: 91
Liquido estabilizado que contiene PCR a una 1+4 30 3. Dawson, S.F., Arch. Dis. Child. (1957) 31:454
1+5 36
concentración inferior a 6 mg/l (1 gota de 50µl) 4. Pepys, M.B., et al., Clin. Exp. Immuno I. (1976)31:119
1+6 42
PROTEINAS TOTALES 45
Método de Biuret
Pipetear en la cubeta. LINEARIDAD
Cat. No. El método es lineal hasta una concentración de 13g/dl ó
TP1630A R1. Reactivo de Biuret 2 x 250 ml Reactivo Blanco Patrón Muestra 130g/l. Si la absorbancia de la muestra excede 0.7, diluir
CAL. Patrón 1 x 5 ml 1 + 1 con solución de NaCl al 0.9%. Multiplicar el
PRINCIPIO Agua destilada 20. µl -- -- resultado por 2.
En medio alcalino , los iones cúpricos, interaccionan con Patrón -- 20. µl --
los enlaces peptídico de las proteínas formando un Suero o plasma -- -- 20. µl NOTAS
complejo coloreado. Solución 1 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml Si la lectura no puede llevarse a cabo a Hg 546nm, debe
utilizarse un patrón para calcular la concentración de
MUESTRA Mezclar, incubar durante 30 min entre +20 y +25°C. Medir proteínas totales en la muestra, el blanco de muestra
Suero, Plasma heparinizado, EDTA plasma. la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) para sueros claros o incoloros cuando corresponda,
frente al reactivo blanco. aproximadamente a 0.2 g de proteínas totales/dl, puede
REACTIVOS ser ignorada.
CÁLCULOS
Componentes Concentraciones de las soluciones 1. Cuando la medición se lleva a cabo a Hg 546 nm la PRECAUCIONES
concentración de proteínas totales puede ser calculada Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
R1. Reactivo de Biuret de la siguiente manera. boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Hidróxido sódico 200 mmol/l que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Tartrato Na-K 32 mmol/l Conc. de Prot. Tot. (g/dl) = 19 x Amuestra La solución 1 contiene azida sódica. Evitar su ingestión
Yoduro potásico 15 mmol/l Conc. de Prot. Tot. (g/l) = 190 x Amuestra o el contacto con la piel, lavar inmediatamente el área
Sulfato cúprico 12 mmol/l afectada con agua abundante. En caso de ingestión o
Sulfato cúprico 12 mmol/l 2.Utilizando el patrón: contacto con los ojos llamar inmediatamente a un médico.
CAL. Patrón 50g/l Amuestra
Conc. de Prot. Tot. = x Conc. Patrón REFERENCIAS
Apatrón
1. Weichselbaum, T.E., Amer. J. Clin. Path., 16: 40.
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES 2. Henry, r,j., Cannon, D.C., Winkelman, J.W., "Clinical
R1. Reactivo Biuret VALORES NORMALES EN SUERO(2) Chemistry, principles and Techniques", Harper &
El rectivo R1 esta listo para su uso. Estable a caducidad Row, 2 nd Ed. 1974.
si se conserva entre +15 y +25°C. g/dl g/l
PROCEDIMIENTO(1) Adultos 6.6 - 8.7 66 - 87

Niños hasta 6 años 5.6 - 8.5 56 - 85
Longitud de onda: Hg 546 nm (530 - 570nm) Neonatos 5.3 - 8.9 53 - 89
Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura: 20 a 25°C
Medición: Frente a reactivo blanco CONTROL DE CALIDAD
Multisueros Normal y Elevado ensayados
Para un control de reproducibilidad:
Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
PROTEINAS EN ORINA 46
Método Rojo de Pirogalol
Cat. No. PROCEDIMIENTO LINEARIDAD

El método es lineal hasta una concentración de 5 g/l
UP 1570A R1.Reactivo Colorante 1 x 100ml Longitud de onda: 600 nm las muestras con valores más altos deben ser diluidas
1 x 100 ml CAL. Patrón 1 x 5ml Temperatura 25/30/37°C) 1 + 2 con solución NaCl al 0.9% y repetir la prueba.
Medición: frente a reactivo blanco Multiplicar el resultado por 3.
UP 1570 R1.Reactivo Colorante 3 x 100ml
3 x 100 ml CAL. Patrón 1 x 5ml Pipetear en tubos de ensayo: PRECAUCIONES
Reactivo blanco Patrón Muestra boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
PRINCIPIO(1,2,3) que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Agua bidestilada 25 µl ---- ----
El rojo de pirogalol se acompleja con proteinas en un Patrón ---- 25 µl ---- El reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o
médio acido que contiene iones molibdato. El complejo Orina o C.S.F ---- ---- 25 µl el contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
azul resultante presenta una absorción máxima a R1.Reactivo 1500 µl 1500 µl 1500 µl el área afectada con agua abundante. En caso de
600 nm. La densidad optica a 600 nm es directamente ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente
proporcional a la concentracion de proteinas totales de Mezclar, incubar durante exactamente 10 min a 25°C ó a un médico
las muestras. 5 minutos a 37°C. Leer la absorbancia de la muestra
(Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco. La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
MUESTRA tuberias, lo que podría producir azidas explosivas.
CALCULOS
Orina de 24 horas, fluido cerebroespinal El patrón de albumina de este kit es de origen humano.
Concentración de proteinas en la muestra (g/l) Cada lote ha sido analizado y encontrado negativo para
REACTIVOS anticuerpos HIV (HTLV III) y para el antigeno de
Amuestra
superficie de la hepatitis B. Sin embargo los patrones
= Apatrón x concentración del Patrón
Componentes Concentraciones en la prueba deben manejarse como si fueran capaces de transmitir
infeccion y desechados conforme a esto.
R1.Reactivo Colorante
Rojo de pirogalol 60 µmol/l VALORES NORMALES REFERENCIAS
Molibdato disódico 41 µmol/l 1. Watanabe, N., Kamei, S., Ohkubo, A., Yamanaka, M.,
(1)
Acido succínico 150 mmol/l Orina 0.028 - 0.141 g/24 hrs Ohsawa, S., Makino K., and Tokuda, K., Clin. Chem.,
(4)
Oxalato sódico 0.84 mmol/l C.S.F. 0.150 - 0.450 g/l 1986: 32/8: 1551.
Benzoato sódico 3.5 mmol/l 2. Orsonneau, J., Dowet, P., Massoubre, C.,
CAL. Patrón Lustenberger, P., and Bernard, S., Clin. Chem., 1989;
Proteína 1 g/l CONTROL DE CALIDAD 35/11:2233.
3. Henry, R.J., Cannon, D.C., Winkelman, J.W., "Clinical
Para un control de exactitud y reproducibilidad: Chemistry Principles and Techniques" Harper & Row,
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Multisueros Normal y Elevado ensayados. 2nd Ed. 1974.
Para un control de reproducibilidad: 4. Teitz, N.B., Saunders Company, 1970 Philadelphia.
Listo para usar. Estables hasta la fecha de caducidad Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
cuando se conservan entre +15 y +25°C.
PRUEBA DE EMBARAZO (CASETE) 47
Método Inmunocromatográfico
Para Orina y Suero
Cat. No. ESQUEMA DEL PROCEDIMIENTO ALMACENAMIENTO.-

PG 2942 30 CASETE Ventana de Muestra Zona central El cassette deberá ser almacenado entre +2 y 8°C y será
estable hasta la fecha de caducidad del equipo
INTRODUCCION: C T
hCG hCG hCG ESPECIFICIDAD.-
Gonadotrofina corionica humana (hCG) es una hormona El uso de anticuerpos monoclonales en esta prueba
liberada por células de la placenta en desarrollo. un grado de especificidad para la fracción beta de la hCG.
En la primera semana despues del embarazo los niveles Adicionar 4 gotas (100-125 ul) de muestra clara dentro de la ventana redonda No se presenta reacción cruzada con la hormona
de hCG son detectables en orina y suero siendo esta Esperar de 3 a 5 minutos
Luteinizante humana hasta 1000 mlU/ml
hormona un excelente marcador para el diagnostico
temprano del embarazo. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO:
La prueba de embarazo de Randox esta dirigida a la 1. Otras condiciones tales como el coriocarcinoma, lunares
fracción beta de hCG y tiene una sensibilidad de 25 IU/L (+) (-) invalida invasivos e hiatidiformes conducen a niveles elevados
en suero y orina (basados en WHO 3 rd 75 / 537) esta de hCG y pueden, por lo tanto, dar resultados falsos
prueba permite la detección temprana de embarazo 7-10 positivos
días despues de la concepción y antes de la fecha en que 2. Se recomienda usar la primera orina de la mañana por
se espera la menstruación. que esta contiene las concentraciones más altas de hCG.
Sin embargo si la primera - prueba resulta negativa esta
deberia repetirse algunos días después a menos de que 3. Anticuerpos monoclonales pueden interferir en la prueba
ocurra la menstruación. y es posible que aparezca en muestras de individuos que
Línea Si ninguna han recibido para diagnostico o tratamiento preparaciones
Solo la
MUESTRA: Línea control azul banda conteniendo estos anticuerpos.
banda azul
Debe usarse suero claro fresco, libre de turbidez o control aparece en C
aparece en
muestras de orina que hayan sido colectadas en azul C más C la zona de REFERENCIAS:
la zona de
reacción la
recipientes limpios de vidrio o plástico. Las muestras Banda test T
reacción
T prueba es
1. Robert O. Hussa: The Clinical Marker hCG. Praegeer
Línea test T
son estables por 1 ó 2 días entre 2°C y 8°C. Para rosa/rojo rosa/rojo es invalida Publishers, New York 1987.
almacenamiento las muestras deben ser congeladas visible 2. Siegfried Schwartz, Peter Berger and Georg Wick: The
Cuando realice el ensayo asegure que la muestra este Antigenic Surface of Human Chorionic Gonadotropin as.
descongelada y llevarla a temperatura ambiente antes Mapped by Murine Monoclonal Antibodies. Endocrinolog
de usarla. 118 (1). (1996) 189-197.
INTERPRETACION DE RESULTADOS
PROCEDIMIENTO: NEGATIVO.-
1. Sacar el casete de la bolsa Solo una banda de color azul aparece a traves de la
2. Colocar 4 gotas ó 100-125 ul de suero claro u orina en ventana de control.
la ventana cicular. POSITIVO.-
Leer. Después de 3 a 5 minutos (dependiendo de la Ademas de la banda de control, aparece una banda
concentración de hCG, los resultados positivos pueden rosa en la misma ventana.
ser observados en menos de 1 minuto. NOTAS.-
Cualquier línea ó color que aparezca después de 5 min.
no tiene valor diagnóstico. Si la línea de control no
aparece la prueba no es valida; lo que significa que no
hay deterioro del reactivo ó el procedimiento fue incorrecto.
PRUEBA DE EMBARAZO 48
Método de Aglutinación en Látex
Cat. No. hasta 72 horas. Para una larga conservación las muestras
pueden conservarse un año a -20°C. Una vez Muestra Control Control
PG 2735 1. Reactivo Látex 100 Pbas descongeladas las muestras tienen que agitarse bien y Negativo Positivo
2. Control Positivo 1 x 1 ml tirarse despúes del análisis.
3. Control Negativo 1 x 1 ml Muestra o Control 60 µl 60 µl 60 µl
Placa de reacción (reutilizable) REACTIVOS (1 gota) (1 gota) (1 gota)
Pipetas agitadoras desechables 1. Reactivo-latex (cuentagotas azul)
Es una suspensión acuosa de esferas de látex verdes Añadir entonces:
Esta prueba directa de embarazo permite una recubiertas con el anticuerpo monoclonal anti-hCG
determinación cualitativa de la hormona gonadotropina (1 gota = 30 µl). Reactivo Latex 30 µl 30 µl 30 µl
corionica humana (hCG) y se basa en la reaccion de 2. Control Positivo (tapón rojo) (1 gota) (1 gota) (1 gota)
aglutinación de las esferas de látex, las cuales están Es una solución estabilizada que contiene hCG a
recubiertas de anticuerpo monoclonal. una concentración de al menos 0.2 Ul/ml Mezclar y extender con la parte plana de la pipeta para
3. Control Negativo (tapón blanco) recubrir toda la superficie del circulo. Hacer girar la placa
INTRODUCCION Es una solución estabilizada libre de hCG y observar si hay aglutinación, la cual debe comenzar a
hCG es una glicoproteina secretada por las células detectarse, dado el caso, al cabo de dos minutos.
externas de la placenta poco despúes de la implantación PREPARACION DE REACTIVOS Una aglutinación importante es indicativa de un resultado
del embrión en las paredes del útero. Su concentración Tanto el reactivo-latex como los controles están listos positivo.
en la orina aumenta y puede detectarse a los pocos días para ser utilizados y son estables hasta la fecha de Si al cabo de dos minutos no hay aglutinación, el resultado
de la primera falta. La concentración continua aumentando caducidad si se conservan entre +2 y +8°C. debe considerarse como negativo.
y alcanza un pico de 100-300 Ul/ml a los 2-3 meses, Sin embargo, tienen que volver a ponerse a temperatura
para luego estabilizarse alcanzando un nivel medio de ambiente justo antes de ser utilizados. No congelar los LIMITACIONES
5Ul/ml. hCG es en consecuencia un excelente marcador reactivos, agitar suavemente el reactivo latex antes de Otras condiciones tales como el coriocarcinoma, lunares
para una pronta confirmación del embarazo. usar. No mezclar los cuentagotas. invasivos e hiatidiformes conducen a niveles elevados de
Las pipetas desechables pueden utilizarse támbien como hCG y pueden, por lo tanto, dar resultados falsos positivos
PRINCIPIO agitadores y tienen que tirarse despúes de cada utilización. La concentración de hCG puede decaer o estar reducida
Está basado en la reacción de hCG, presente en la orina en casos de embarazo ectópico, toximia, riesgo de aborto
de la embarazada y los anticuerpos monoclonales anti- SENSIBILIDAD o muerte del feto.
hCG que recubren las esferas de látex. Esta reacción La sensibilidad del reactivo-latex es de 0.2 Ul/ml. Un Si a causa de un tratamiento diurético o por una toma
induce la formación de enlaces cruzados entre esferas resultado positivo es así posible 2 días despúes de la elevada de líquido la orina es demasiado diluida, los
adyacentes, facilmente visualizable por la aparición de falta de reglas. Si una primera prueba resultara negativa, niveles de hCG pueden disminuir impidiendo su detección.
una aglutinación. repetir una segunda vez 5 días despúes. La prueba tendria que repetirse con las primeras orinas
de la mañana al cabo de unos cuantos días.
En la ausencia de niveles detectables de hCG, no se ESPECIFICIDAD Para una confirmación final de embarazo, los resultados
establecen enlaces cruzados y por tanto no se observa En el reactivo-latex están presentes dos anticuerpos de varios análisis deben correlacionarse con sintomas
aglutinación. monoclonales B-especificos diferentes lo que da lugar a clínicos típicos.
una alta especificidad. No se detecta ninguna reacción
MUESTRA cruzada con otras hormonas relacionadas tales como la PRECAUCIONES
Es preferible que sea una orina de la mañana temprano lutéinica (LH), tireotropa (TSH) o la foliculo estimulante Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la
aunque también puede utilizarse una orina de cualquier (FCH) boca, respetar las precauciones normales necesarias,
hora del dia. Las muestras turbias deben centrifugarse o que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
dejarse sedimentar. Las muestras tienen que ser PROCEDIMIENTO
analizadas lo más pronto posible, pero si el annálisis se Usar una pipeta nueva cada vez y colocar sucesivamente REFERENCIAS
atrasa, las orinas pueden conservarse de +2 a +8°C. en los circulos de la placa de reacción: 1. Norman, R.J. Buck, R.H. & de Medeiros, S.F., Ann.Clin
Biochem. 1990; 27: 183-194.
SIFILIS RPR 49
Prueba en placa rapida de reaginas en plasma

PREPARACION DE LAS SOLUCIONES 3. Con la misma punta de pipeta mezclar la salina y la
Los reactivos estan listos para usar una vez que alcancen muestra 5 ó 6 veces y transferir 50µl a la salina del
Cat. No. la temperatura ambiente (25-30º). segundo círculo.
SY 1478 100 Test La suspensión de antígeno debe homogenizarse, transferir 4. Llevar una serie de diluciones de la misma manera
1. Suspension de Antigeno carbón 1 x 2 ml el contenido al frasco de plástico y adaptar la aguja sumi- hasta el ultimo círculo descartar 50 µl de circulo final.
2. Control positivo 1 x 0.5 ml nistrada. Los reactivos deben conservarse entre +2 - 8°C. 5. Usar la parte plana de la pipeta desechable para
3. Control Negativo 1 x 0.5 ml cada espécimen, extender la muestra diluida sobre el
4. Frasco dispensador 1 PROCEDIMIENTO área de cada círculo, iniciando con la menor dilucíon.
5. Aguja dispensadora (16µl) 1 A. PRUEBA CUALITATIVA: (circulo No. 5)
6. Placas de prueba 10 1. Usando una pipeta desechable dispensar una gota 6. Continuar como en la prueba cualitativa del No. 3 en
7. Pipetas desechables 100 (50 ul de suero ó plasma en cada circulo de la placa de adelante. Figura 1
prueba). 50 µl de muestra
PRINCIPIO: 2.Usando la parte plana de la pipeta extender la muestra
Es una prueba de aglutinación en suero o plasma con un sobre toda el area del circulo.
mezclar
antígeno de cardiolipinas para la detección y titulación de 3. Mezclar el frasco dispensador invirtiendolo suavemente
1 2 3 4 5
reaginas (anticuerpos circulantes producidos como para remover las burbujas de aire que se encuantran en
resultado del daño al tejido causado por la enfermedad). la tapa de la aguja. 50 µl de salina
50 µl 50 µl 50 µl 50 µl Descartar
4. Colocar la aguja del frasco de reactivo RPR en posición 50 µl
MUESTRA: perpendicular a la placa de prueba y dispensar una
mezclar mezclar mezclar mezclar
Usar plasma o suero gota de antigeno en cada circulo de prueba.
1:2 1:4 1:8 1:16
muestras contaminadas o hemolisadas no son propias 5. Rotar la placa de prueba en un agitador rotatorio 1:32
para el ensayo. (80-100rpm) durante 8 min Diluciones
suero conservado entre +2 - 8°C mantiene la estabilidad 6. Medir los resultados macroscopicos con buena luz. INTERPRETACION DE RESULTADOS
2 días. La ultima dilucion que contiene agregados macroscópicos
LECTURA E INTERPRETACION indica el titulo de la muestra. Si la ultima dilución da
REACTIVO: resultado positivo extender la serie de diluciones.
OBSERVACION INTERPRETACIÓN
1. Suspensión de antígeno RPR 1 x 2 ml
Suspension de cardiolipina, contiene microparticulas Agregados grandes en el LIMITACIONES DE LA PRUEBA
REACTIVA
de carbon. Contiene timerosal centro o en la periferia del area Algunas enfermedades como la lepra, el paludismo y
2. Suero control positivo (tapon rojo) 1 x 0.5 ml Agregados pequeños en el DEBILMENTE mononucleosis infecciosa, pueden causar reacciones
Control liquido estabilizado, con antigeno RPR reactivo area de prueba REACTIVA positivas. Por lo cual es importante que todos los
2. Suero control negativo (tapon blanco) 1 x 0.5 ml No agregados de aspecto gris especimenes reactivos sean confirmados por otras
NO REACTIVA
Control liquido estabilizado, con antigeno RPR no reactivo homogeneo en apariencia pruebas serologicas treponema específicos tales como
TPHA ó FTA - ABS.
ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO B. PRUEBA CUANTITATIVA:
La caja interna que contiene la suspensión de antígeno 1. Usando una pipeta automatica dispensar 50 µl de salina REFERENCIAS
RPR y los sueros control debe mantenerse refrigerada fisiologica en circulos del 1 al 5 de la placa sin extender la 1. McGrew, B.E. et al., Amer. J. Clin. Path., 1968; 50; 52
entre +2 a 8°C. Estable hasta caducidad. gota. 2. Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 1962; 77:
Las placas de prueba deben mantenerse a temperatura 2. Con la pipeta automatica tomar 50 µl de muestra 645
ambiente, evite tocar los círculos con los dedos. (suero ó plasma) para ser titulada con la salina del primer 3. Stevens, R.W. & Stroebel, E., Amer. J. Clin. Path,.1970
circulo (ver fig. 1) 53; 32.
SODIO 50
Método Enzimático Colorimetrico
Cat. No. PREPARACION DE LAS SOLUCIONES Mezclar, incubar a 30/37°C durante 1 minuto. Leer la
NA 3851A R1a. Tampón 1 x 20 ml R1. Tampón /Enzima/Sustrato absorbancia A1. Incubar durante otros 2 min, y leer la
R1b. Enzima / Sustra 1 x 20 ml Transferir el contenido del frasco de enzima R1b. A absorbancia A2.
R2a. Diluyente 1 x 9 ml un frasco de tampon R1a y disolverlo sin agitación hasta ∆A del patrón o muestras = A2 - A1
R2b. Enzima 1 x 9 ml que el contenido este completamente disuelto. Evitar
Cal1.Patrón CAL1. 1 x 2 ml la formación de espuma. La solución es estable por 2 CALIBRADORES
Cal2.Patrón CAL2. 1 x 2 ml semanas entre +2 a +8°C. 1. El ensayo debe realizarse empleando los patrones de
NA 7167A R1a. Tampón 2 x 45 ml R2. Enzima/Diluyente sodio bajo y alto
R1b. Enzima / Sustra 2 x 45 ml Disolver el contenido de un frasco de enzima R2b con 2. Construir una curva de calibración graficando los
R2a. Diluyente 1 x 39 ml una porsion del diluyente R2a. Trasferir el contenido valores de absorbencia de los patrones con la
R2b. Enzima 1 x 39 ml entero del diluyente R2a al frasco de enzima R2b. concentración de sodio correspondientes.
Cal1.Patrón CAL1. 1 x 2 ml Suavemente sin formar burbujas hasta que el contenido 3. La concentración de sodio de la muestra es leida de
Cal2.Patrón CAL2. 1 x 2 ml este completamente disuelto. Estable por 4 semanas la curva de calibración
1
PRINCIPIO entre +2 a +8°C.
El sodio se determina enzimáticamente a traves de CAL1/2. VALORES NORMALES
la actividad de β-galactosidasa dependiente de sodio Listos para usar, estables hasta la fecha de caducidad 136 - 146 mmol/l (313 - 336 mg/dl)
con ONPG como sustrato. cuando se almacena entre +2 y +8 °C
La absorbancia del producto O-nitrofenil a 405 nm CONTROL DE CALIDAD
es proporcional a la concentracion de sodio. PROCEDIMIENTO Se recomiendan los multisueros ensayados Nivel 2 y
Na+ Nivel 3 para el control de calidad diario. Se debera de
ONPG > o - nitrofenol + galactosa Longitud de onda 405 nm analizar dos niveles distintos de controles cada día. Los
β-galactosidasa
Cubeta 1 cm path length valores obtenidos deberan encontrarse dentro del rango
ONPG = o - nitrofenil -β-D-galactopiranosa Temperatura 30/37° C especificado.
MUESTRA Medición Frente a blanco de reactivo
Suero , plasma tratado con heparinato de litio. LINEARIDAD
este método es lineal a una concentración de sodio entre
Blanco Patrón Muestra 84 y 180 mmol/l
REACTIVO
Componentes Concentraciónes en la prueba Agua bidestilada 20 µl --- --- PRECAUCIONES
R1. Tampón/Enzima/Sustrato Patrón --- 20 µl --- Unicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con
Tampon Tris 450 mmol/l, pH 9.0 Muestra --- --- 20 µl la boca respetar las precauciones normales necesarias
Cryptand 5.4 mmol/l R1.Tampón/Enzima/Sustrato 500 µl 500 µl 500 µl que se requieran al manejar reactivos de laboratorio.
β-galactosidasa >0.8 U/ml
R2. Enzima/Diluyente Mezclar, incubar durante 5 min a 30/37°C después adicionar REFERENCIAS
Tampon Tris 10.0 mmol/l, pH 9.0 1. Berry, M.N. Et al., (1988) Clin. Chem. 34,2295.
o-nitrofenil galactosido 5.5 mmol/l R2. Enzima/Diluyente 200 µl 200 µl 200 µl 2. Tietz, N.W. (1983) Clínica guide to Laboratory
Cal1.Patrón CAL1. Lot. Especifico en el inserto Tests, p384 W.B. Saunders Co., Philadelphia.
Cal2.Patrón CAL2. Lot. Especifico en el inserto
SUERO CONTROL HUMANO 51
Ensayados Nivel II y III
Cat. No. CARACTERISTICAS

HN 2612 Control Nivel II 5 x 5 ml * Liofilizado, de matriz 100% humana
* Método -, Instrumento- y valores obtenidos a tempertatura especifica
HE 2613 Control Nivel III 5 x 5 ml * Aporta rango analitico.
* Aporta valores por métodos de referencia para calcio, cloro, colesterol, sodio,
QUIMICA CLINICA GENERAL creatinina, glucosa, litio, magnesio, potasio, proteinas totales, trigliceridos.
Sueros Humanos Ensayados * Variedad de tamaños de viales de acuerdo a las necesidades del laboratorio.
* Compatible para usar en la mayoria de los analizadores clínicos
Ofrece un producto liofilizado de alta calidad para 70 parametros clinicos a 2 niveles.
En los Controles Humanos Ensayados se incluyen parametros especiales como son Los métodos de referencia son considerados los mas excactos para la determina-
ción de un analito y son utilizados para la traceabilidad de estandares internacio-
ANALITOS nales, incluyendo para la estandarización interlaboratorio.
Drogas: Digoxina, Gentamicina, Paracetamol (Acetaminofen), Salicilato,
Teofilina, Tobramicina.
Electrolitos: Bicarbonato, Calcio, Cloro, Cobre, Hierro, Litio, Magnesio, Fosforo PREPARACION
Inorganico, Potasio, Sodio, Zinc. PROCEDIMIENTO
Electroforesis: a-2-globulin, a-1-globulina, b-1-globulina, Albumina.
Enzimas: Fosfatasa Acida Prostatica, Fosfatasa Acida Total, Aldolasa, 1. Abrir el frasco muy cuidadosamente, evitando cualquier perdida de material
Fosfatasa Alcalina, Amilasa Total, Amilasa Pancreatica, Lipasa, LAP. 2. Reconstituir cada vial de suero liofilizado con exactamente 5 ml de agua bidestilada
Lipidos: NEFA, Fosfolipidos, Colesterol Total, Lipidos Totales, Trigliceridos. de 20°C a 25°C
Proteinas: Albumina, Apo A1, Apo B, IgA, IgG, IgM, Proteina Total, PSA, 3. Volver a colocar el tapón , cerrar el frasco y dejar reposar durante 30 min.
Transferrina. 4. Asegurarse de que el contenido esta completamente disuelto girando suavemente
Sustratos: Bilirrubina Directa, Bilirrubina Total, Creatinina, D-3-Hidroxibutirato, el frasco.
Glucosa, Lactato, Urea, Acido Urico. 5. Al cabo de 30 minutos invertir el frasco para asegurar de que toda traza de material
Otros: Acidos Biliares, Cortisol, Folato, T4, T4 Libre, T3, Osmolaridad, TIBC seco ha sido disuelta.
TSH, Vitamina B12. 6. No agitar el frasco, evitar la formación de espuma.
Utilizando unicamente este procedimiento de reconstitución el suero puede usarse para
En los sueros ensayados cada parametro tiene asignado un rango promedio pruebas manuales o para automatización.
de +/- 2SD generado por 1400 laboratorios independientes en todo el mundo.
Los valores obenidos son cuidadosamente clasificados de acuerdo al método,
temperatura y valores especificos por instrumento para los 70 parametros. AVISO/PRECAUCIONES
Este suero ha sido analizado para los anticuerpos HIV, Hbs Ag y HCV se ha encontrado
ESTABILIDAD con que no es reactivo con métodos aprobados por la FDA ( FOOD AND DRUG
* Producto liofilizado estable hasta la fecha de caducidad ADMINISTRATION) sin embargo dado que ningun método puede ofrecer seguridad
* Reconstituido es estable 7 días @+2°C a +8°C, y un mes cuando se almacena total de ausencia de agentes infecciosos este material y todas las muestras de paciente
@ -20°C. (referirse a las caracteristicas del inserto para algunas excepciones) deberán ser manejadas como transmisores de infecciones.
TRIGLICERIDOS (Reactivo Liofilizado) 52
Método GPO-PAP
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS 2. Utilizando factor
Cat. No. R1a. Tampón
TR 210 R1a. Tampón 1 x 100 ml Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Concentración Triglicéridos
6 x 15 ml R1b. Reactivo Enzima 6 x 15 ml cuando se conserva entre +2 y +8°C. Longitud de onda mmol/l mg/dl
TR 211 R1a. Tampón 2 x 50 ml
2 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 2 x 50 ml R1b. Reactivo enzima Hg 546 nm 11.95 1048
TR 212 R1a. Tampón 4 x 50 ml Reconstituir un vial de reactivo enzima R1b Cat. TR210 500 nm 8.47 743
4 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 4 x 50 ml con 15 ml de tampón R1a..
TR 213 R1a. Tampón 10 x 50 ml Reconstituir un vial de reactivo enzima R1b Cat. TR213 VALORES DE REFERENCIA
10 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 10 x 50 ml con un pequeño volumen de tampón R1a y despues Se recomiendan los siguientes limites para establecer el
Cada juego de reactivos incluye Patrón transferir todo el contenido al frasco R1a, enjuagando el factor de riesgo de hipertrigliceridemia:
vial R1b varias veces. Los reactivos son estables durante
MÉTODO COLORIMETRICO 21 días entre +2 + 8ºC o 3 días entre +15 y +25ºC Sospechado a partir de: 1.71 mmol/l ó 150 mg/dl
Los triglicéridos se determinan a partir de la hidrólisis protegidos de la luz. Aumentado a partir de: 2.29 mmol/l ó 200 mg/dl
enzimatica con lipasas. El indicador es una quinoneimina
formada por hidrógeno peróxido, 4-aminofenazona y CAL. Patrón
4-clorofenol, bajo la influencia catalítica de peroxidasa. Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad CONTROL DE CALIDAD
cuando se conserva entre +2 y +8°C. Para un control de exactitud y reproducibilidad
PRINCIPIO(1,2,3) Multisueros normal y elevado ensayados.
Triglicéridos + H2O lipasa
> glicerol + ácidos grasos PROCEDIMIENTO Para un control de reproducibilidad.
Glicerol + ATP GK
> glicerol -3-fosfato + ADP Multisueros, bajo, normal y elevado.
Glicerol -3-Fosfato O2 GPO
> dihidroxiacetona + H2O2 Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm
2H2O2 + 4-aminofenazona + 4 clorofenol POD
> quinoneimina + HCL + 4H2O Cubeta: 1 cm de espesor LINEARIDAD
Temperatura de reacción: 20-25°C ó 37°C El método es lineal hasta una concentración triglicérica
MUESTRA Medición: Frente a reactivo Blanco de 11.4 mmol/l ó 1000 mg/dl. Muestras con valores
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma superiores a dicha concentración, deberán ser diluidas
1 + 4 con solución NaCl al 0.9%. Multiplicar el resultado
REACTIVOS Reactivo Blanco Patrón Muestra por 5.
Muestra ---- ---- 10 µl NOTAS
R1a. Tampón Patrón ---- 10 µl ---- Para calculo de trigliceridos libre de glicerol, substraer
Tampón pipes 40 mmol/l, pH 7,4 Reactivo 1000 µl 1000 µl 1000 µl 0.11 mmol/l (10 mg/dl) del valor de triglicéridos calculado
4-clorofenol 5.4 mmol/l previamente. Concentraciones de hemoglobina hasta
Iones de Magnesio 5.0 mmol/l Mezclar incubar durante 10 minutos a 20 - 25°C ó 5 minutos 150 mg/dl o bilirrubina hasta 20 mg/dl. No interfieren en
ATP 1.0 mmol/l a 37°C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del este método.
Peroxidasa > 0.5 U/ml patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco antes de 60 minutos.
Glicerolkinasa > 0.4 U/ml REFERENCIAS
Glicerol-3-Fosfato oxidasa > 1.5 U/ml CALCULO 1. Jacobs N J, VanDenmark, PJ., Arch Biochem
Azida Sódica 0.05% 1. Utilizando el patrón: Biophys 1960; 88: 250-255
R1b. Reactivo Enzima Amuestra 2. Koditschek L K, Umbreit, W W., J Bacteriol
Conc. Trigliceridos = x 200 = mg/dl
4-aminoantipirina 0.4 mmol/l Apatrón 1969; 98; 1063-1068.
Lipasa > 150 U/ml 3. Trinder P., Ann Clin Biochem 1969; 6; 24-27.
Azida Sódica 0.05%
CAL. Patrón 2.29 mmol/l (200 mg/dl)
TRIGLICERIDOS (Reactivo Liquido) 53
Método GPO-PAP R1b. Reactivo Enzima CALCULO DE LA CONCENTRACIÓN
4-aminoantipirina 0.4 mmol/l Concentración de triglicéridos
Cat. No. Lipasa > 150 U/ml 1. Utilizando el patrón:
TR1695 R1a. Tampón 1 x 100 ml Azida Sódica 0.05% Amuestra
Conc. Trigliceridos = x 200 = mg/dl
1 x 100 ml R1b. Reactivo Enzima 1 x 1.7 ml CAL. Patrón 2.29 mmol/l (200 mg/dl) Apatrón
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS VALORES DE REFERENCIA
TR1696 R1a. Tampón 2 x 100 ml Transferir el contenido de un frasco de reactivo enzima R1b Se recomiendan los siguientes limites para la
2 x 100 ml R1b. Reactivo Enzima 2 x 1.7 ml a una botella de Tampón R1a, enjuagando la botella R1b determinación del factor de riesgo hipertrigliceridemia:
CAL. Patrón 1 x 5 ml varias veces, o para un numero reducido de pruebas,
pipetear 250 µl de reactivo Enzima R1b en 15 ml de Tampón Sospechoso a partir de: 1.71 mmol/l ó 150 mg/dl
TR1697 R1a. Tampón 4 x 100 ml R1a y mezclar. El reactivo de trabajo es estable durante 3 Aumentado a partir de: 2.29 mmol/l ó 200 mg/dl
4 x 100 ml R1b. Reactivo Enzima 4 x 1.7 ml semanas entre +2 y +8°C ó 3 días entre +15 y +25°C
CAL. Patrón 1 x 5 ml protegido de la luz. CONTROL DE CALIDAD
NOTA Para un control de exactitud y reproducibilidad
MÉTODO COLORIMETRICO Antes de usar, dejar el reactivo de trabajo reposar Multisueros normal y elevado ensayados.
Los triglicéridos se determinan a partir de la hidrólisis durante al menos 15 minutos a temperatura ambiente Para un control de reproducibilidad.
enzimatica con lipasas. El indicador es una quinoinemina Multisueros, bajo, normal y elevado.
formada por hidrógeno peróxido, 4-aminofenazono y CAL. Patrón
4-clorofenol, bajo la influencia catalítica de peroxidasa. Patrón triglicéridos listo para usar. Estable hasta la LINEARIDAD
fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y El método es lineal hasta una concentración triglicérica
PRINCIPIO(1,2,3) +8°C. de 11.4 mmol/l ó 1000 mg/dl. Muestras con valores
lipasa
Triglicéridos + H2O > glicerol + ácidos grasos superiores a dicha concentración, deberán ser diluidas
Glicerol + ATP GK
> glicerol -3-fosfato + ADP PROCEDIMIENTO 1 + 4 con solución NaCl al 0.9%. Multiplicar el resultado
GPO
Glicerol -3-Fosfato O2 > dihidroxiacetona + H2O2 por 5.
POD
2H2O2 + 4-aminofenazona + 4 clorofenol > quinoneimina + HCL + 4H2O Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm
Cubeta: 1 cm de espesor NOTAS
MUESTRA Temperatura de reacción: 20-25°C ó 37°C Para calculo de trigliceridos libre de glicerol, substraer
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma Medición: Frente a reactivo Blanco 0.11 mmol/l (10 mg/dl) del valor de triglicéridos calculado
Solo se requiere un reactivo blanco por serie previamente. Concentraciones de hemoglobina hasta
REACTIVOS 150 mg/dl o bilirrubina hasta 20 mg/dl. No interfieren en
este método.
Reactivo Blanco Patrón Muestra PRECAUCIONES
R1a. Tampón Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
Tampón pipes 40 mmol/l, pH 7,4 Muestra ---- ---- 10 µl boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
4-clorofenol 5.4 mmol/l Patrón ---- 10 µl ---- que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Iones de Magnesio 5.0 mmol/l Reactivo 1000 µl 1000 µl 1000 µl
ATP 1.0 mmol/l REFERENCIAS
Peroxidasa > 0.5 U/ml Mezclar incubar durante 10 minutos a 20 - 25°C ó 5 1. Jacobs N J, VanDenmark, PJ., Arch Biochem Biophys
Glicerolkinasa > 0.4 U/ml minutos a 37°C. Medir la absorbancia de la muestra 1960; 88: 250-255
Glicerol-3-Fosfato oxidasa > 1.5 U/ml (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco 2. Koditschek L K, Umbreit, W W., J Bacteriol 1969; 98;
Azida Sódica 0.05% al cabo de 60 minutos. 1063-1068.
3. Trinder P., Ann Clin Biochem 1969; 6; 24-27.
UREA ALTA SENSIBILIDAD 54
Método GLDH
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES VALORES NORMALES
Cat. No. R1a. Tampón
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad Suero4 1.7 - 8.3 mmol/l 10 - 50 mg/dl
UR 454 R1a. Tampón 2 x 50 ml cuando se conserva entre +2 y 8°C. Orina
5
333 - 583 mmol/24hrs 20 - 35 g/24 hrs
2 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 2 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima
UR 455 R1a. Tampón 4 x 50 ml UR 456 6x15 ml
4 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 4 x 50 ml Reconstituir un vial de reactivo Enzima R1b con 15 ml de CONTROL DE CALIDAD
UR 456 R1a. Tampón 1 x 100 ml tampón R1a estable durante 4 semanas entre +2 y +8°C, Para un control de exactitud y reproducibilidad:
6 x 15 ml R1b. Reactivo Enzima 6 x 15 ml ó 2 días entre +15 y +25°C. Multisueros Normal, Elevado ensayados.
UR 457 R1a. Tampón 10 x 50 ml UR 455 4x50 ml, UR 457 10x50 ml Para un control de reproducibilidad:
10 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 10 x 50 ml Reconstituir el contenido de un frasco de reactivo Multisueros Bajo, Normal y Elevado.
Cada juego de reactivos incluye Patrón Enzima R1b con una parte de tampón.R1a y luego
transferir todo el contenido a la botella R1a, enjuagando LINEARIDAD
METODO U.V.(1,2) la botella R1b varias veces estable durante 4 semanas El método es lineal hasta 50.0 mmol/l (300 mg/dl) suero ó
La urea se hidroliza en presencia de agua y ureasa entre +2 y +8°C, ó 2 días entre +15 y +25°C. plasma, y 1050 mmol/l (6300 mg/dl) en orina. Para
para producir amoniaco y dióxido de carbono. El CAL. Patrón concentraciónes superiores diluir la muestra 1+ 1 con una
amoniaco producido en la primera reacción se combina Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad solución de NaCl al 0.9% y repetir la prueba, multiplicar el
con α-oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato cuando se conserva entre +2 y 8°C. resultado por 2.
deshidrogenasa para producir glutamato y NAD+
PROCEDIMIENTO NOTAS
PRINCIPIO Puede utilizarse cualquier anticuagulante excepto amonio-
Ureasa
Urea + H2O >2NH3 + CO2 Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm ó Hg 365 nm) heparinato.
2-αoxoglutarato +2 NH4 + 2NADH+ GLDH
> Cubeta: 1 cm de espesor
+
2L-glutamato + 2NAD + 2H2O Temperatura: 37°C PRECAUCIONES
Medición: Frente a reactivo blanco Únicamente para diagnostico in vitro. No pipetear con la
MUESTRA boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
Sangre, suero, plasma heparinizado, EDTA plasma Pipetear en la cubeta: que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
u orina. Diluir la orina a 1+20 con agua destilada. El reactivo contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el
Multiplicar el resultado por 21. Reactivo blanco Patrón Muestra contacto con la piel y mucosas lavar inmediatamente
el área afectada con agua abundante. En caso de
REACTIVOS Agua destilada 10 µl . 10 µl . ---- ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a
Patrón ---- . ---- . ---- un médico
Componentes Concentracion de las soluciones Muestra ---- . ---- . 10 µl La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
Reactivo 1000 µl . 1000 µl . 1000 µl tuberias, lo que podría producir azidas explosivas.
R1a. Tampón
Tampón tris 150 mmol/l, pH 7.6 Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 30 segundos REFERENCIAS
R1b. Reactivo Enzima y empezar a cronometrar simultáneamente. Leer de nuevo 1. Kassier, J.p. New Eng. J. Med. 1971; 285;385
Ureasa > 15 u/ml al cabo de 1 minuto. 2. Tietz, N.W., Fundementals of Clinical Chemistry W.B.
GLDH > 1 u/ml Saunders Company, 1970 Philadelphia
NADH 0.28 mmol/l CALCULOS ∆Amuestra 3. Young. D.S., Pestaner, L.C., Gibbermann, V. Clin. Chem
Adeosina-5-bifosfato 2.45 mmol/l Concentración de Urea = ∆Apatrón x concentración de 1975; 21: 1D.
α-oxoglutarato 11.7 mmol/l (mmol/l) patrón 4. Mackay, E.M., and L Mackay (1927). J. Clin invest. 4;295
CAL Patrón 13.3 mmol/l (80 mg/dl)
UREA BERTHELOT 55
Método Berthelot Modificado
ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO DE CONTROL DE CALIDAD
Cat. No. TRABAJO R1 Para un control de exactitud y reproducibilidad:-
UR107 R1a. Ureasa 5 x 1 ml Añadir un vial de Ureasa R1a. a un vial de Támpon Fosfato Multisueros normal y elevado ensayados
R1b. Tampón Fosfato 5 x 100 ml R1b. Estable durante 1 mes cuando se conserva a una Para un control de reproducibilidad:-
R2. Hipoclorito 1 x 100 ml temperatura de +2 a +8°C protegido de la luz. Multisueros bajo, normal y elevado.
PROCEDIMIENTO LINEARIDAD
METODO COLORIMETRICO(1,2) El método es lineal hasta 33.3 mmol/l (200 mg/dl) en suero
Longitud de onda: 600 nm (Hg 578 nm - Hg 623 nm) o plasma y 700 mmol/l (4195 mg/dl) en orina. Para
PRINCIPIO Cubeta: 1 cm de espesor muestras con valores superiores a dichas concentraciones
El método se basa en la reacción siguiente: Temperatura: 25°C, 37°C diluir 1 + 1 con NaCl al 0.9% y repetir la prueba. Multiplicar
Medición: Frente a reactivo blanco el resultado por 2.
Urea + H2O
ureasa
> 2 NH3 + CO2
Pipetear en tubos de ensayo: NOTAS
El salicilato y el hipoclorito del reactivo reaccionan con Utilizar materal de vidrio libre de iones amonio. El reactivo
los iones amonio para formar un complejo verde Reactivo Blanco Patrón Muestra 2 puede ser diluido 1+4 con agua bidestilada (estable
(2,2 dicarboxilindofenol). durante 6 meses entre +2 y +8°C). En este caso se utiliza
Patrón ---- 10 µl ---- 1 ml de Reactivo 2 en la prueba. El volumen final de
MUESTRA Muestra ---- ---- 10 µl reacción es de 2 ml y la linearidad de 50 mmol/l (3 g/l).
Suero, plasma heparinizado o citrado, EDTA plasma u Reac. de Trabajo (R1) 1000 µl 1000 µl 1000 µl
Orina. Diluir la orina 1 + 20 con agua destilada. PRECAUCIONES
Multiplicar el resultado por 21. Mezclar, incubar durante al menos 3 minutos a 37°C ó Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la
durante 5 minutos a 20-25°C. boca. Respetar las precauciones normales necesarias
REACTIVOS que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Hipoclorito (R2) 200 µl 200 µl 200 µl La solucion 1 y el patrón contiene azida sódica evitar su
Componentes Concentraciones en la prueba ingestión o contacto con la piel y mucosas. En caso de
Mezclar, incubar durante al menos 5 minutos a 37°C. ó contacto con la piel, lavar inmediatamente el área
R1a. Ureasa >5000 U/l durante 10 minutos a 20-25°C. Leer la absorbancia del afectada con agua abundante. En caso de ingestión o
R1b. Tampón Fosfato 120 mmol/l pH 7.0 patrón (Apatrón) y de la muestra (Amuestra) frente al reactivo contacto con los ojos llamar inmediataemente a un
Salicilato sódico 63.4 mmol/l blanco en las 2 horas siguientes. médico.
Nitroprusiato Sódico 5.00 mmol/l La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las
EDTA 1.5 mmol/l CALCULOS tuberías, lo que podria producir azidas explosivas.
R2. Hipoclorito 18 mmol/l Cuando se tire este reactivo enjuagar abundantemente
Hidróxido sódico 750 mmol/l Amuestra con agua para evitar la formación de estás azidas. Las
Concentración de Urea = x 8.33
CAL. Patrón 8.33 mmol/l (50 mg/dl) (mmol/l) Apatrón superficies metálicas que hayan sido puestas en contacto
con la azida sódica deben ser lavadas con hidróxido
Amuestra sódico al 10%.
Concentración de Urea = x 50
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES (mg/dl) Apatrón
Ureasa R1a. Tampón Fosfato R1b, Hipoclorito Sódico REFERENCIA
R2 y CAL. Patrón se suministran listos para usar. VALORES NORMALES 1.Fawcett, J.K., and Scott, J.E., J., clin. Path., 1960;13:
Estables hasta la fecha de caducidad cuando se Suero o plasma: 2.5 - 7.5 mmol/l (15 - 45 mg/dl) 156-159
conservan entre +2 y +8°C Orina: 338 - 538 mmol/24 h (20 - 35 g/24 h) 2. Patton, C.J., Crouch, S.R., Anal. Chem. 1977: 49:
464-469.

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Central de Diagnostica e Insdustria S.A de C.V.

Representante exclusivo en México de la marca Randox Laboratories Ltd.

PRESENTACION DE LA EMPRESA VISION

de salud, que apoyen al medico a emitir un correcto

Cat. No. PREPARACION DE LAS SOLUCIONES UTILIZANDO UN FACTOR

Mètodo Verde de Bromocresol y Biuret

Método de Verde de Bromocresol

PRINCIPIO Longitud de onda 578 nm ó 620 nm LINEARIDAD

REACTIVO DE TRABAJO: A 2.5 ml de reactivo R1a, Acido LINEARIDAD

Cat. No. 3. Reactivo blanco CONTROL DE CALIDAD

PREPARACION DE LAS SOLUCIONES

Cat. No. Pipetear en la cubeta: Para un control de exactitud y reproducibilidad:

Componentes Concentraciòn de las soluciones Pipetear en la cubeta: PRECAUCIONES

Método Arzenazo III

PREPARACION DE LAS SOLUCIONES

METODO UV1 R1b. Enzimas / Coenzima / Sustrato para CK Total

Fosfato de Creatina + ADP CK

MUESTRA: Longitud de onda: 546 nm INTERPRETACION CLINICA

Esteres de colesterol Colesterol esterasa Colesterol + Acidos grasos PROCEDIMIENTO: INTERFERENCIAS:

CH 2657A Reactivo enzimático R1 2 x 30 ml Reactivo enzimático R1: CALCULOS:

REACTIVOS Pipetear en tubos de ensayo: NOTAS

R1. Tampón Muestra 0.20 ml 0.10 ml PRECAUCIONES

Componentes Concentraciónes en la prueba Agua destilada 10 µl --- --- PRECAUCIONES

Cat. No. R1b. Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato VALORES NORMALES EN SUERO

PREPARACION DE LAS SOLUCIONES U/l = 1746 x ∆A 340 nm/min REFERNCIAS

Cat. No. Patrón

Pipetear en tubos de ensayo: VALORES NORMALES

Cat. No. R1b. Enzima/Coenzima/α-oxoglutarato VALORES NORMALES EN SUERO

Tubo No. GPT U/l PRECAUCIONES

Cat. No. PREPARACION DE LAS SOLUCIONES VALORES ESPERADOS EN SUERO HUMANO

Conc Hemoglobina= Abs muestra x 36.77 (g/dL)

Cat. No. PREPARACION DE LOS REACTIVOS Referencia Muestra

5. Solución de Hierro Amuestra

Cat. No. PROCEDIMIENTO VALORES NORMALES EN SUERO(2)

Cat. No. 2. Tampón CONTROL DE CALIDAD

Cat. No. PROCEDIMIENTO: LINEARIDAD

PROCEDIMIENTO(1) Adultos 6.6 - 8.7 66 - 87

Método Rojo de Pirogalol

Cat. No. PROCEDIMIENTO LINEARIDAD

Cat. No. ESQUEMA DEL PROCEDIMIENTO ALMACENAMIENTO.-

Prueba en placa rapida de reaginas en plasma

Ensayados Nivel II y III

Cat. No. CARACTERISTICAS

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