CUANTIFICACION DE LAS MEZCLAS POR ESPECTROFOMETRIA

QUANTIFICATION OF MIXTURES BY ESPECTROFOMETRIA

Autores: Ávila F.J, Bautista G, Del Castillo H.
Corporación tecnológica de Bogotá, Tecnología en química industria
Bogotá, Colombia
Fecha 21 /09/2017
gbautista04@ctb.edu.co

RESUMEN En la curva de calibración se revelaron datos,

La espectrofotometría tiene gran aplicación
en la identificación y determinación de una
enorme cantidad de especies inorgánicas y
orgánicas.
Una de sus múltiples aplicaciones la vemos
en el análisis cuantitativo de mezclas,
utilizando como principio de aditividad de
las sustancias y la ley de beer.
Uno de los objetivos de la practica fue
cuantificar por medio de espectrofotometría
UV visible una mezcla que contenía cierta
concentración de KMnO4 y K2Cr2O7.
También se realizó una curva de calibración
realizando dos soluciones patrones
KMnO4 a concentración 1X10-2
K2Cr2O7M a concentración 1X10-2M, y de
allí se realizaron soluciones diluidas a
diferentes concentraciones, las cuales fueron
clave para realizar el barrido espectral, esto
con el fin de saber el punto máximo de la
longitud onda.
los cuales estuvieron dentro de la ley de beer,
en la gráfica se pudo observar que los valores
tienen un comportamiento lineal, los cuales
nos dan resultado satisfactorio de los
objetivos de la práctica.
Palabras Clave:
Curva de calibración, aditividad, ley de beer.
ABSTRACT
The espectrofotometría has great application
in the identification and determination of an
enormous quantity of inorganic and organic
de species. One of his multiple applications is
y seen by us in the quantitative analysis of
mixtures, using as beginning of additivity of
the substances and the law of beer.
One of the aims of the practice was visible
UV quantified by means of
espectrofotometría a mixture that was
containing certain concentration of KMnO4 ecuación ley de Lambert-Beer (skoog, holler,
and K2Cr2O7. & Nieman, 2001, pág. 322)
Also a curve of calibration was realized Utilizando la técnica espectrofotométrica se
realizing two solutions bosses of KMnO4 to puede cuantificar por diferentes
concentration 1X10-2 and K2Cr2O7M to metodologías como la curva de calibración,
concentration 1X10-2M, and of there there adición patrón y estándar interno, aditividad
were realized solutions diluted to different de absorbancias entre otras. Se conocen
concentrations, which were key to realize the como métodos espectrofotométricos y según
spectral sweep, this in order the maximum sea la radiación utilizada como
point of the length to know wave. espectrofotometría de absorción visible
In the curve of calibration there were (colorimetría), ultravioleta, infrarroja.
revealed information, which were inside the La espectrofotometría se refiere a los
law of beer, in the graph it was possible to métodos, cuantitativos, de análisis químico
observe that the values have a linear que utilizan la luz para medir la
behavior, which give us satisfactory result of concentración de las sustancias químicas. Se
the aims of the practice. conocen como métodos espectrofotométricos
y según sea la radiación utilizada
Keywords: como espectrofotometría de absorción visible
Curve of calibration, additivity, law of beer. (colorimetría), ultravioleta, infrarroja.
La Radiación Electromagnética es una forma
INTRODUCCIÓN de Energía radiante que se propaga en forma
Espectrofotometría UV Þ ondas.

La espectrofotometria UV es el conjunto de Ley de aditividad.

procedimiento que utiliza la luz en la zona
UV del espectro electromagnético, para
medir concentraciones químicas de distintas
sustancias.
El cálculo de concentraciones de la región
UV- visibles lleva a cabo mediante la
La ley de Beer también se puede aplicar a un
medio que contenga más de una clase de
sustancias absorbentes. Siempre que no haya
interacción entre las distintas especies (es
decir que no reaccionen entre si), la
absorbancia total para un sistema
multicomponentes viene dado por
 disolventes de alta constante dieléctrica).
(1) Desplazamiento hipsocrómico o
desplazamiento hacia el azul, es el
desplazamiento hacia longitudes de onda más
cortas. (González , pág. 10)
Donde los subíndices se refieren a los
componentes absorbentes 1, 2,..., n. (skoog, Influencia del equilibrio.
holler, & Nieman, 2001, pág. 325) Cuando la sustancia problema interviene o
forma parte de un sistema en equilibrio con
Desviaciones químicas otras especies, el desplazamiento del
Se incluyen en este apartado toda una serie equilibrio implica una modificación en la
de desviaciones aparentes de la ley de Beer concentración, y, en consecuencia, en la
producidas como consecuencia de procesos absorbancia. Algunas situaciones que pueden
químicos en los que participan las especies producirse son las siguientes:
absorbentes Dimerizaciones: Cuando una disolución no
tamponada se diluye, ocurre una
Influencia del disolvente. transformación parcial en cromato, como
Como consecuencia de las interacciones consecuencia del equilibrio dímero-
soluto– disolvente se originan con frecuencia monómero
desplazamientos espectrales,
ensanchamientos de bandas y otros Acido–base:
fenómenos que pueden provocar
desviaciones en la ley de Beer. En este
sentido, no es posible hacer predicciones de
forma general. Únicamente mencionar
algunos términos relacionados con los
desplazamientos espectrales: desplazamiento Figura 3. Influencia en el
batocrómico o desplazamiento hacia el rojo, equilibrio Acido –Base
consiste en un desplazamiento del máximo
de absorción hacia longitudes de onda Complejos: Cuando se mide la absorbancia
mayores (este efecto suele producirse en de un complejo, por ejemplo Fe(SCN)6 3–,
para que se cumpla la ley de Beer hay que
mantener constante la concentración de
ligando libre, lo cual se consigue
frecuentemente operando en gran exceso de
ligando respecto al metal. (González , pág. 9)
Desviaciones instrumentales originadas
por la radiación policroomatica
El cumplimiento estricto de la ley de beer
solo se observa cuando la radiación es
realmente monocromática; esta observación
es otra manifestación aun del carácter límite
de la ley. Desafortunadamente, en la práctica
es raro el uso restringido a una sola longitud
de onda debido a que os dispositivos que
aíslan porciones de la señal de salida de una
fuente continua generan una banda de
longitudes de onda mas o menos simétricas
en torno a la deseada (skoog, holler, &
Nieman, 2001, pág. 329)
Figura 3. Efecto de la radiación policromica
sobre la ley de beer
MATERIALES Y MÉTODOS
 Solución stock de KMnO4.
RESULTADOS
Se pesaron 0.158g de KMnO4 en una balanza
analítica, que posteriormente se diluyeron en un
beaker con 30 Ml de agua y se transfirieron
cuantitativamente a un balón aforado de 100 Ml
y se completó al aforo.
 Solución stock de K2Cr2O7
Se pesaron 0.294 g de K2Cr2O7 en una balanza
analítica, que posteriormente se diluyeron en un
beaker con 30Ml de agua y se transfirió
cuantitativamente a un balón aforado de 100 ml y
se completó al aforo.
 Solución de H2SO4
En un beaker se mezclaron en proporción 50:50
H2SO4 y Agua destilada, con mucho cuidado
haciendo baño en frio.
 Soluciones de Trabajo.
Medición en el espectrofotómetro UV-Vis
 Se Midio la absorbancia de los patrones y de
las muestras en el espectrofotómetro, para
esto primero tomo el espectro de la cafeína y
del paracetamol utilizando las soluciones
patrón que tengan una concentración entre 4
y 8 ppm, posteriormente se tomo el espectro
de las muestras problema y compare.
 Se Realizo una cuantificación por adición
estándar tanto para la cafeína como para el
acetaminofén utilizando una de las
soluciones patrón asignadas por el docente
según sea el caso.
Figura 1. Curva de calibración KMnO4 525 nm. Figura 3. Curva de Calibración 525 nm.

V(mL) [ ] A V(mL) [ ] A
5 1x10-4 0,238 5 1x10-3 0,041
10 2x10-4 0,484 10 2x10-3 0,084
15 3x10-4 0,708 15 3x10-3 0,128
24 4x10-4 1,028 24 4x10-3 0,166
25 5x10-4 1,145 25 5x10-3 0,203
30 6x10-4 1,408 30 6x10-3 0,252
Tabla1. Resultados KMnO4 a 525 nm. Tabla 3. Resultados K2Cr2O7 525 nm

Figura 2. Curva de calibración KMnO4 440nm Figura 4. Curva de calibración K2Cr2O7 440 nm

V(mL) [ ] A V(mL) [ ] A
5 1x10-3 0,095 5 1x10-3 0,42
10 2x10-3 0,191
10 2x10-3 0,847
15 3x10-3 0,309
24 4x10-3 0,406
15 3x10-3 1,34
25 5x10-3 0,508 24 4x10-3 1,664
30 6x10-3 0,618 25 5x10-3 2,149
Tabla 2. Resultados KMnO4 440nm Tabla 4. Resultados K2Cr2O7 440nm
DISCUSIÓN DE RESULTADOS sensibilidad del analito ,donde se empleó la
adición de diferentes volúmenes (1 , 2 , 3 , 4 ,
En la práctica de análisis y cuantificación de 5)ml de una disolución patrón y la muestra
mezclas se pretende adquirir los (2ml), y se evidencio la muestra a dos
conocimientos necesarios acerca de la longitudes de onda , para hallar la
relación existente entre la absorbancia y la concentración se despejo la ecuación de la
concentración en las soluciones empleadas. ley de aditividad con las 2 longitudes de
Para llevar a cabo el análisis es necesario onda y así hallar la concentración en ppm de
conocer la longitud de onda y realizar una la muestra problema, igualmente se utilizó la
etapa de calibración, se representa una ecuación de adición estándar por dos
longitud de onda en la figura 1 y figura 2 y se métodos y se encontró que su
evidencia así, ya que hay una influencia en el comportamiento utilizando las dos
equilibrio, ocurre cuando las especies ecuaciones era igual.
absorbentes están implicadas en un equilibrio Para todos los casos se utilizó el método de
ácido-base. sensibilidad para diferenciar pequeñas
variaciones del analito, una de las ventajas de
Para la obtención de la curva de calibración, este método es la independencia de las
se representan gráficamente las absorbancias unidades de medida de S
de las muestras de concentración conocida a
la longitud de onda de máxima absorbancia Conclusiones
para KMnO4 440nm, 525nm y K2Cr2O7  Se logra cuantificar mediante
525nm y 440nm frente a las diferentes diferentes métodos, una mezcla que
concentraciones de esta forma se obtiene la contenía cafeína y paracetamol
curva, que según la ley de Beer debe mostrar mediante el equipo de UV-VIS.
un comportamiento lineal.  Se logra identificar las longitudes de
En el método de adición estándar se utiliza onda con mayor absorbancia para
para analizar muestras complejas, en cada sustancia específica.
ocasiones la interacción del analito con otros  Es importante la adecuada
componentes de la muestra puede producir preparación y manejo de las celdas,
un aumento o una disminución de la
 equipo y soluciones en los  Se dice que absorbancia es la
procedimientos para evitar al máximo capacidad que tiene algunos
las interferencias que pueden afectar compuestos para absorber la
cada resultado debido a que es una radiación electromagnética, cuando se
técnica muy sensible. realizó esta práctica pudimos
 Utilizando la curva de calibración, observar cómo, dependiendo de la
patrón interno y adición estándar se concentración y la longitud a la cual
logra cuantificar las sustancias se le aplique un rayo, puede alcanzar
correspondientes, aclarando que un punto máximo de absorción.
ciertas técnicas son más precisas que
otras.
 Los procedimientos realizados por los
demás compañeros en la práctica no Bibliografía
fueron claramente reportados para la González , C. (s.f.). scribd. Obtenido de
http://ocw.usal.es/ciencias-
realización satisfactoria de los
experimentales/analisis-aplicado-a-la-
cálculos. ingenieria-
 Se obtuvo gran conocimiento en la quimica/contenidos/course_files/Tem
a_3.pdf
práctica, ya que ahora se conoce la
manera adecuada de utilizar un laboratorio la sante. (s.f.). gestarpharma.
Obtenido de
espectrofotómetro, así como también
http://www.gestarpharma.com.co/dic
se adquirió la noción sobre conceptos cionario/PLM/productos/18578_210.
básicos, como lo es la absorbancia, htm
espectro de absorción, y métodos skoog, d., holler, j., & Nieman, t. (2001).
espectrofotométricos para analizar principios de analisis instrumental
mezclas. (Vol. 5). España: Mc graw-hill.

ANEXO 1

ECUACION 1
A(273)= A cafeína +A paracetamol= (E ca(273nm) *bca*Cca ) + (Epa(273)*bpa*Cpa)
ECUACION 2
A(255)= A cafeína +A paracetamol= (E ca(255nm) *bca*Cca ) + (Epa(255)*bpa*Cpa)

Se despeja C Cafeína en la Ecuación 1 y se obtiene la ECUACIÓN 3

𝐴(273) − [𝐸𝑝𝑎(273) ∗ 𝑏𝑝𝑎 ∗ 𝐶𝑝𝑎]
𝐶𝑐𝑎𝑓𝑒𝑖𝑛𝑎 =
𝐸 𝑐𝑎(273) ∗ 𝑏𝑐𝑎
Sustituyendo la ECUACIÓN 3 en la ECUACIÓN 2 tenemos la ECUACIÓN 4
𝐴(255) = 𝐴𝑐𝑎𝑓 + 𝐴𝑝𝑎𝑟
𝐴(273) − [𝐸𝑝𝑎(273) ∗ 𝑏𝑝𝑎 ∗ 𝐶𝑝𝑎]
= (𝐸𝑐𝑎(255) ∗ 𝑏𝑐𝑎 ∗ ) + [𝐸𝑝𝑎(255)
𝐸 𝑐𝑎(273) ∗ 𝑏𝑐𝑎
∗ 𝑏𝑝𝑎 ∗ 𝐶𝑝𝑎
De la ecuación 4 despejamos Cpa

𝐴255 ∗ [𝐸𝑐𝑎𝑓(273) ∗ 𝑏] + 𝐸𝑝𝑎(273)

𝐶𝑝𝑎 =
[𝐸𝑝𝑎(255) ∗ 𝑏 ∗ 𝐸𝑐𝑎(255) ∗ 𝑏 ∗ 𝑏 ∗ 𝐴273]
0.878 ∗ [0.0555 ∗ 1] + 0.063
𝐶𝑝𝑎 =
[0.0861 ∗ 1 ∗ 0.0305 ∗ 1 ∗ 1 ∗ 0.674]
0.112
𝐶𝑝𝑎 =
[0.00177]
𝐶𝑝𝑎 = 63.27 𝑝𝑝𝑚
Para encontrar Ccafeina se sustituye Cpa en la ECUACIÓN 3

𝐴255 ∗ [𝐸𝑝𝑎(273) ∗ 𝑏] + 𝐸𝑐𝑎(273)

𝐶𝑐𝑎 =
[𝐸𝑐𝑎(255) ∗ 𝑏 ∗ 𝐸𝑝𝑎(255) ∗ 𝑏 ∗ 𝑏 ∗ 𝐴273]

0.878 ∗ [0.063 ∗ 1] + 0.0555

𝐶𝑐𝑎 =
[0.0305 ∗ 1 ∗ 0.0861 ∗ 1 ∗ 1 ∗ 0.674]

0.111
𝐶𝑐𝑎 =
[0.00177]
𝐶𝑐𝑎 = 62.71 𝑝𝑝𝑚
ANEXO 2

Ecuación 1
Para que el método adición estándar sea aplicable se debe escribir que
𝐾𝑉𝑠𝐶𝑠 𝐾𝑉𝑥𝐶
𝐴= + de igual forma puede representarse como esta otra ecuación
𝑉𝑡 𝑉𝑡

Donde K es la constante de proporcionalidad, la representación de S,

en función de Vs, es una línea recta de la forma

Donde la pendiente m y la ordenada en el origen b viene dadas por

Y
Para determinar m y b puede utilizarse un tratamiento por mínimo de cuadros; Cx se puede
obtener a partir de la relación entre estas dos cantidades y valores conocidos de Cs, Vx y Vs ,
así

o (skoog, holler, & Nieman, 2001, pág. 17)

𝑏𝐶𝑠
𝐶𝑥 =
𝑚𝑉𝑥

Concentración de cafeína a una longitud de onda 273

0,6222 ∗ 100
𝐶𝑐𝑎𝑓𝑒𝑖𝑛𝑎 =
0,0555 ∗ 2

𝐶𝑐𝑎𝑓𝑒𝑖𝑛𝑎 = 560,5 𝑝𝑝𝑚

Concentración de cafeína a una longitud de onda 255
0.8129 ∗ 100
𝐶𝑐𝑎𝑓𝑒𝑖𝑛𝑎 =
0.0305 ∗ 2

𝐶𝑐𝑎𝑓𝑒𝑖𝑛𝑎 = 𝟏𝟑𝟑𝟐, 𝟔 𝒑𝒑𝒎

Concentración de paracetamol a una longitud de onda 273

𝟎, 𝟔𝟓𝟐𝟏 ∗ 𝟏𝟎𝟎
𝑪𝒑𝒂𝒓𝒂𝒄𝒆𝒕𝒂𝒎𝒐𝒍 =
𝟎, 𝟎𝟔𝟑 ∗ 𝟐

𝑪𝒑𝒂𝒓𝒂𝒄𝒆𝒕𝒂𝒎𝒐𝒍 = 𝟓𝟏𝟕. 𝟓 𝒑𝒑𝒎

Concentración de paracetamol a una longitud de onda 255

𝟎, 𝟖𝟓𝟐 ∗ 𝟏𝟎𝟎
𝑪𝒑𝒂𝒓𝒂𝒄𝒆𝒕𝒂𝒎𝒐𝒍 =
𝟎, 𝟎𝟖𝟔𝟏 ∗ 𝟐
𝑪𝒑𝒂𝒓𝒂𝒄𝒆𝒕𝒂𝒎𝒐𝒍 = 𝟒𝟗𝟒. 𝟕 𝒑𝒑𝒎

Otro método que se puede utilizar es por la extrapolación de la recta

Ecuación 2
(𝑽𝒔)𝟎𝑪𝒙
𝑪𝒙 =
𝑽𝒙
En la cafeína a una longitud de onda 273
11.21 ∗ 100𝑝𝑝𝑚
𝑪𝒙 =
2𝑚𝑙

𝐶𝑥 = 560.5𝑝𝑝𝑚

En la cafeína a una longitud de onda 255

26.65 ∗ 100𝑝𝑝𝑚
𝐶𝑥 =
2𝑚𝑙
 𝐶𝑥 = 1332.5 𝑝𝑝𝑚

En la paracetamol a una longitud de onda 273

10.35 ∗ 100𝑝𝑝𝑚
𝐶𝑥 =
2𝑚𝑙

𝐶𝑥 = 517,5 𝑝𝑝𝑚
En la paracetamol a una longitud de onda 255
4.89 ∗ 100𝑝𝑝𝑚
𝐶𝑥 =
2𝑚𝑙
𝐶𝑥 = 494,5 𝑝𝑝𝑚