SOLUCIONES Y DILUCIONES

Sierra Pérez Sharolt Nathalia, Salazar Santos Sarima, Santofimio Villamizar Juan Sebastian
Curso de Genética Básica, Grupo B, Programa de Microbiología, Departamento de Ciencias
Básicas, Universidad de Pamplona

OBJETIVOS:
 Desenvolver el juicio para hacer la previsión necesaria para la obtención de cualquier solución de uso en
procedimientos del laboratorio.
 Evidenciar aptitud en el manejo de los factores de dilución y su interpretación.

1. Marco Teórico d. Normalidad (N)

#𝑒𝑞 − 𝑔
Una disolución, también llamada solución, es una 𝑁=
mezcla homogénea a nivel molecular o iónico de una 𝐿 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
e. Molalidad (m)
o más sustancias, cuyos componentes se encuentran en
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
proporción que varía entre ciertos límites. Describe un 𝑚=
sistema en el cual una o más sustancias están 𝐾𝑔 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒
mezcladas o disueltas en forma homogénea en otra
Una ecuación muy conocida a la hora de preparar
sustancia.
soluciones partiendo de otras soluciones es la
Frecuentemente uno de los componentes es siguiente:
denominado solvente, disolvente, dispersante o medio
𝐶1 ∗ 𝑉1 = 𝐶2 ∗ 𝑉2
de dispersión y los demás solutos.1
Por otro lado, está la dilución, que consiste en la
UNIDADES DE CONCENTRACIÓN
disminución de la concentración de una sustancia
Las unidades de concentración en que se expresa una química en una disolución.2
solución o disolución pueden clasificarse en unidades
En muchos casos se necesita preparar disoluciones con
físicas y en unidades químicas. Están expresadas en
concentraciones extremadamente bajas de un soluto,
función del peso y del volumen, en forma porcentual,
hasta un punto que es difícil o imposible en la práctica
y son las siguientes:
medir la cantidad necesaria de producto sólido o el
Unidades Físicas volumen de solución madre. En esas situaciones es
necesario preparar una solución de mayor
𝑝 𝑔𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
% = ∗ 100 concentración (solución de stock o solución madre) y
𝑝 𝑔𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 hacer diluciones sucesivas a partir de ésta hasta
a. Porcentaje masa a Volumen (%m/v)
alcanzar la concentración deseada.3
𝑝 𝑔 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
% = ∗ 100
𝑣 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 FACTOR DE DILUCIÓN
b. Porcentaje Volumen a Volumen (%v/v)
𝑣 𝑚𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 El factor de dilución (FD) es un número que indica las
% = ∗ 100 veces que debe diluirse una solución para obtener una
𝑣 𝑚𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
de menor concentración. Es frecuente encontrar una
Unidades químicas dilución expresada, por ejemplo, de la forma siguiente:
c. Molaridad (M) 1/5, 1/10, 1/100, etc. ¿Qué significa esto?
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 Simplemente indica que, para obtener una solución
𝑀= con la concentración deseada, se debe diluir la
𝐿 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
1
solución madre las veces que indica el denominador de
la fracción nombrada.4
12% ∗ 45𝑚𝑙 𝑔
𝑔= = 5,4 ⁄𝑚𝑙 𝑎𝑧ú𝑐𝑎𝑟
El objetivo de esta práctica es realizar una serie de 100%
diluciones en función de un determinado factor de
3.2 A) 38 ml de NaCl 8% p/v
dilución.
8% ∗ 38𝑚𝑙 3,04𝑔
2. Metodología 𝑔= = 𝑁𝑎𝐶𝑙
100% 𝑚𝑙
La práctica se inició resolviendo ciertos cálculos, con B) 15 de NaCl 0,145M
ayuda de determinadas unidades de concentración 𝑚𝑜𝑙
expuestas por el SI (M, N, %masa/masa, 𝑀=
𝐿
%volumen/volumen, %masa/volumen) determinando 0,145𝑚𝑜𝑙
cómo preparar eficientemente cuatro soluciones 𝑚𝑜𝑙 = ∗ 0,015𝐿
𝐿
descritas en la guía de laboratorio. Posteriormente se = 2,175𝑥10 − 3𝑚𝑜𝑙 𝑁𝑎𝐶𝑙
llevó a cabo una dilución seriada a partir de 1mL de 58𝑔 𝑁𝑎𝐶𝑙
Azul de metileno (Stock) el cual se encontraba a un 2,175𝑥10 − 3𝑚𝑜𝑙 𝑁𝑎𝐶𝑙 ∗
1 𝑚𝑜𝑙
factor de dilución de 1/3. Con ayuda de una = 0,126𝑔 𝑁𝑎𝐶𝑙
micropipeta (P1000) se empezó la dilución tomando el C) 20 ml de NaCl 0,25 N
volumen adecuado (300 μL, volumen anteriormente #𝑒𝑞 − 𝑔
determinado a partir de cálculos específicos 𝑁=
proporcionados por el libro guía) del recipiente en 𝐿 𝑠𝑙𝑛
58
donde estaba la solución Stock hacia un nuevo #𝑒𝑞 − 𝑔𝑁𝑎𝑐𝑙 = = 58
recipiente previamente suministrado con el volumen 1
𝑔
exacto de agua destilada (700 μL) para poder llegar a #𝑒𝑞 − 𝑔 = 0,25𝑒𝑞 − ∗ 0,02𝐿
un volumen de solución total de 1000 μL (1 mL) , que 𝐿
= 5𝑥10 − 3𝑒𝑞 − 𝑔 𝑁𝑎𝐶𝑙
en este caso hizo las veces de solvente, se agitó y a
58𝑔 𝑁𝑎𝐶𝑙
continuación, se tomó de este segundo tubo eppendorf 5𝑥10 − 3 𝑒𝑞 − 𝑔 ∗ = 0,29𝑔 𝑁𝑎𝐶𝑙
otro volumen de 300 μL para añadirlo en un tercer tubo 1 𝑒𝑞 − 𝑔
con 700 μL de agua destilada (se empleó para cada
dilución una punta diferente en la micropipeta). Y así
se siguió el mismo proceso de dilución para los
3.3 250 ml de cloruro de calcio 50 mM
siguientes 4 tubos, observando la disminución de la
concentración del soluto (colorante) debido a la acción 1𝑀
del solvente (agua destilada). Las formulas empleadas 50 𝑚𝑀 ∗ = 0,05 𝑀
1000 𝑚𝑀
en los resultados fueron las siguientes: 𝑚𝑜𝑙
𝑚𝑜𝑙 = 0,05 ∗ 0,25𝐿
𝐿
= 0,0125𝑚𝑜𝑙 𝐶𝑙2𝐶𝑎
𝑚𝑜𝑙 𝑠𝑙𝑡𝑜 𝐸𝑞−𝑔 𝑠𝑙𝑡𝑜 𝑔 𝑠𝑙𝑡𝑜
𝑀= 𝑁= %𝑚/𝑣 = 𝑚𝐿 𝑠𝑙𝑛 140𝑔𝐶𝑙2𝐶𝑎
𝐿 𝑠𝑙𝑛 𝐿 𝑠𝑙𝑛 0,0123𝑚𝑜 ∗ = 1,75𝑔 𝐶𝑙2𝐶𝑎
1𝑚𝑜𝑙
3.4 100 ml de una solución de Acrilamida: Bis-
Acrilamida (29:1) al 30% (p/v).
3. Resultados 𝑝 𝑚 𝑠𝑙𝑡𝑜
% =
Se presenta la solución de los siguientes cálculos, para 𝑣 𝑣 𝑠𝑙𝑛
preparar soluciones específicas del procedimiento: 𝑝
% 𝑣 × 𝑣 𝑠𝑙𝑛
3.1 25 ml de azúcar 12% (p/v) 𝑚 =
100 %
𝑝 𝑔 𝑠𝑡𝑜
% ⁄𝑣 = ∗ 100 30 𝑔/𝑚𝐿 × 100 𝑚𝐿
𝐿 𝑠𝑙𝑛 𝑚 = = 30 𝑔 𝐶3𝐻5𝑁𝑂
100 %
2
3.5 500 ml de una solución de Acetato de sodio 5,2
M y EDTA 10mM
3.8 125 ml de una solución que contenga: 50 mM
5,2𝑚𝑜𝑙 glucosa; 25 mM Tris-HCl (pH 8.0); 10 mM EDTA
∗ 0,5𝐿 = 2,6𝑚𝑜𝑙
𝐿 (pH 8.0).
82,03𝑔𝐶2𝐻3𝑁𝑎𝑂2
∗ 𝑚𝑜𝑙 = 0,05𝑚𝑜𝑙 ∗ 0,125𝐿
1𝑚𝑜𝑙
= 213,28𝑔 𝐶2𝐻3𝑁𝑎𝑂2 180𝑔
= 6,25𝑥10 − 3𝑚𝑜𝑙 ∗
10 0,01𝑚𝑜 1𝑚𝑜𝑙
= ∗ 0,5𝐿 = 1,125𝑔 𝐶6𝐻12𝑂6
1000 𝐿
292,24𝑔𝐸𝐷𝑇𝐴 0,025𝑚𝑜𝑙
= 0,005𝑚𝑜𝑙 ∗ 𝑚𝑜𝑙 = ∗ 0,125𝐿
1𝑚𝑜𝑙 𝐿
= 1,46𝑔𝐸𝐷𝑇𝐴 = 3,125𝑥10 − 3𝑚𝑜𝑙
121,14𝑔
3.6 35 ml de una solución 0.2 N NaOH y 1% (p/v) ∗
1𝑚𝑜𝑙
SDS. = 0,378𝑔 𝑇𝑟𝑖𝑠 − 𝐻𝐶𝑙
40 0,01𝑚𝑜𝑙 292,24𝑔
𝑒𝑞 − 𝑔𝑁𝑎𝑂𝐻 = = 40 𝑒𝑞 − 𝑔 𝑚𝑜𝑙 = ∗ 0,125𝐿 = 0,0125𝑚𝑜𝑙 ∗
1 𝐿 1𝑚𝑜𝑙
𝑔
𝑔 = 40 𝑒𝑞 − ∗ 0,035𝐿 = 3,653𝑔 𝐸𝐷𝑇𝐴
𝐿
40𝑔𝑁𝑎𝑂𝐻
= 1,4𝑒𝑞 − 𝑔 ∗
1𝑒𝑞 − 9
3.9 Realice los cálculos para diluir una solución de
= 56𝑔𝑁𝑎𝑂𝐻
NaCl al 0.145 mol/l para obtener: a) 1,0 ml de una
35𝑚𝑙
𝑔 = 1% ∗ = 0,53𝑔/𝑚𝑙 solución 0.12 mol/l de NaCl; b) 1,5 ml de una
100 solución 0.045 mol/l de NaCl, y c) 0,8 ml de una
solución 0.033 mol/l de NaCl.
𝐶1𝑉1 = 𝐶2𝑉2
3.7 180 ml de una solución que contenga: 4 M 𝐶2𝑉2
𝑉1 =
Tiocianato de guanidina; 25 mM citrato de sodio; 𝐶1
0,12𝑀∗1𝑚𝑙
0.5% (w/v) Lauril sarcosianato de sodio y 0.1 M de a) 𝑉1 = 0,14𝑀 = 0,82𝑚𝑙
mercaptoetanol. 0,045𝑀∗1,5𝑚𝑙
b) 𝑉1 = = 0,465𝑚𝑙
0,145𝑀
4𝑚𝑜𝑙 118,6𝑔 0,033𝑀∗0,8𝑚𝑙
𝑚𝑜𝑙 = ∗ 0,18𝐿 = 0,72𝑚𝑜𝑙 ∗ c) V1= = 0,18𝑚𝑙
𝐿 1𝑚𝑜𝑙 0,145𝑀
= 85,07𝑔 𝑡𝑖𝑜𝑐𝑖𝑎𝑛𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑢𝑎𝑛𝑖𝑑𝑖𝑛𝑎 d)
0,025𝑚𝑜𝑙
𝑚𝑜𝑙 = ∗ 0,18𝐿 A continuación, se dispone la imagen del resultado de
𝐿
258,6𝑔 las diluciones seriadas:
= 4,5𝑥10 − 3𝑚𝑜𝑙 ∗
1𝑚𝑜𝑙
= 0,714𝑔 𝑐𝑖𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜
5% ∗ 180𝑚𝐿
𝑔=
100%
= 0,9𝑔
/𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑟𝑐𝑜𝑠𝑖𝑎𝑛𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜
0,1𝑚𝑜𝑙 78,13𝑔
𝑚𝑜𝑙 = ∗ 0,18𝐿 = 0,018𝑚𝑜𝑙 ∗
𝐿 1𝑚𝑜
= 1,406𝑔 𝑚𝑒𝑟𝑐𝑎𝑝𝑡𝑜𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
3
 de metileno) y 0,7 mL de solvente (agua destilada), se
determinó que a la dilución de 1/2187 en el sexto tubo,
el colorante fue diluido por completo mostrando la
ausencia del mismo. Además, se estableció que la
concentración final de la dilución fue de 5.71 ×
10−4 %𝑚/𝑣.
El factor de dilución representa el número de veces que
una solución concentrada es diluida, tal como se
observó en la práctica realizada en donde la
concentración de azul de metileno dejó de ser visible
por los analistas. Este paso no es más que una dilución
en serie, lo que es una reducción progresiva, paso a
0,3 mL 0,3 mL 0,3 mL 0,3 mL 0,3 mL paso, de la concentración de una sustancia en
0,3 mL disolución (Azul de metileno). Por lo general, el factor
de dilución en cada paso es constante, lo que da como
resultado una progresión geométrica de la
0,7 mL

1 mL

1 mL
1 mL

1 mL
1 mL

1 mL

concentración, en forma logarítmica.

Teniendo en cuenta los valores obtenidos en el grupo,
se observaron variaciones considerables entre las
1 1 1 1 1 1 1 concentraciones obtenidas, estas variaciones se
3 9 27 81 243 729 2187 pueden deber a las cantidades de soluto y solvente que
se tomaron para llevar a cabo las diluciones, también
1 1 1 1 1 se debe tener en cuenta que cada uno de los analistas
1
3 3 3 3 3 realizó un manejo independiente de la micropipeta
3
Soluto para llevar a cabo las diluciones, por ende, se pudo
Dilución =
Solución generar errores en la toma de cantidades,
0,3 𝑚𝐿 3 homogenización y obtención de las soluciones finales.
Dilución = = = 0,3
1 𝑚𝐿 10 5. Conclusiones
Cantidad de soluto en mL, -
suministrado a cada tubo.
6. Referencias Bibliográficas
𝑆𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
𝐹𝐷 = 1. Beleño Camino (20 de febrero, 2013) Solución
𝑆𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 y dilución. SlidShare. Recuperado de:
1 𝑚𝐿 10 https://es.slideshare.net/CamiloBeleo/solucion
𝐹𝐷 = = = 3,3
0,3 𝑚𝐿 3 -y-dilucion
2. Anónimo (28 de octubre, 2015) Fundamentos
de química general. Recuperado de:
Hallada la dilución en la cual desapareció el color del http://quimicageneralfundamentos.blogspot.co
colorante se procedió a determinar la concentración m/2015/10/blog-post_28.html
final de dicha dilución: 3. INNOVARTE (11 de marzo, 2014) Diluciones
1 seriadas. Cuaderno de laboratorio. Recuperado
× 1.25% = 5.71 × 10−4 %𝑚/𝑣
2187 de:
http://www3.uah.es/cuadernolab/p/index.php/
diluciones-seriadas/
4. Análisis 4. Gabriel Bolívar. Factor de dilución: en qué
A partir de la dilución seriada que se realizó en el consiste, cómo se saca, ejemplos. Lifeder.com.
laboratorio, en donde se utilizó 0,3 mL de soluto (azul
4
 0.8 𝑔 𝑁𝑎𝑂𝐻
Recuperado de: %p/v = * 100 = 0.16%
500 𝑚𝐿
https://www.lifeder.com/factor-de-dilucion/
40 g  1 Eq-g
Anexos 0.02 Eq-g NaOH
0.8 g  x
• ¿Cuál es la normalidad de una solución que contiene
𝐸𝑞−𝑔 0.02 𝐸𝑞−𝑔
250 g de CaCl2 en 1500 mL de solución? 𝑁= 𝑁= = 0.04𝑁 NaOH
𝐿 0.5 𝐿
250g CaCl 1500 mL sln  1.5 L • ¿Cómo prepararía 1 litro de una solución para disolver
110.98 g  2 Eq-g ADN conteniendo 10 mM Tris-HCl pH 8, 1 mM EDTA? Si
4.5 Eq-g CaCl se dispone de: 1 M Tris-ClH pH 8, 0.5 M EDTA.
250 g  x
10∗10−3 𝑀∗1000𝑚𝐿
𝐸𝑞−𝑔 4.5 𝐸𝑞−𝑔 1. 𝑉1 = =
𝑁= 𝑁= = 3𝑁 1𝑀
𝐿 1.5 𝐿
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑇𝑟𝑖𝑠 − 𝐻𝐶𝑙
• ¿cuál es la molaridad de una solución que contiene
25.0 g de K2CrO4 disueltos en cantidad de agua 1∗10−3 𝑀∗1000𝑚𝐿
suficiente para tener 300 mL de solución? ¿Cuál su 2. 𝑉1 = = 2 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝐸𝐷𝑇𝐴
0.5𝑀
normalidad?
• Se necesitan preparar 50 ml de una solución para lisar
300 mL  0.3 L bacterias conteniendo NaOH 0.2 N y SDS 1 % p/v. Se
1 𝑚𝑜𝑙 dispone de: NaOH 10 N, SDS 10 % p/v.
25g K2CrO4 194 𝑔 𝐾2𝐶𝑟𝑂4 = 0.128 mol
0.2𝑁∗50𝑚𝐿
𝑛 0.128 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 K2CrO4 1. 𝑉1 = = 1𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑁𝑎𝑂𝐻
M =  M = = 0.43 𝑚𝑜𝑙/𝐿 10𝑁
𝐿 0,3 𝐿 𝑃
K2CrO4 1% ∗50𝑚𝐿
𝑉
2. 𝑉1 = 𝑃 = 5𝑚𝐿
10%
194 g  1 Eq-g 𝑉
0.13 Eq-g K2CrO4
25.0 g  x • Se tiene una proteína cuya concentración se desea
𝐸𝑞−𝑔 0.13 𝐸𝑞−𝑔
obtener. Para ello se elige un método espectrofotométrico
𝑁= 𝑁= = 0.4𝑁 K2CrO4 usando la siguiente dilución: 10 μl de solución proteica +
𝐿 0.3 𝐿
990 μl de buffer. Se mezclan y se determina una
• ¿Cuántos ml de H2SO4 2 M se necesitan para concentración de 20 μg/ml (método de Lowry). ¿Cuál es la
preparar 1500 ml de una solución de H2SO4 2 mM? concentración de la solución proteica original?
H2SO4 2 mM  0.002 M μg
20 𝑚𝐿 ∗ 100μl μg
C1 = 2 M 𝐶1 = = 200
10μl 𝑚𝐿
C2 = 0.002 M • Describir la preparación de 400 ml de la siguiente
V2 = 1500 mL solución: Tris-HCl 20 mM, NaCl 100 mM, Cl2Ca 5 mM,
Cl2Zn 10 μM, Brij 0.005 %. En el laboratorio hay: Tris-
0.002𝑀∗1.5𝐿
𝑉1 = 2𝑀
= 1.5 ∗ 10−3 L  1.5 mL H2SO4 HCl 1M, NaCl 5M, Cl2Ca 1M, Cl2Zn 10 mM, Brij 1%.
20∗10−3 𝑀∗400𝑚𝐿
• ¿Cuántos gramos de NaOH sólido se requieren para 1. 𝑉1 = = 8 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑡𝑟𝑖𝑠 −
preparar 500 ml de una solución 40 mM? b) Expresar 1𝑀
la concentración de la solución en N y % p/v. 𝐻𝐶𝐿
n = 𝑀 ∗ 𝐿  n = 0.04 𝑀 ∗ 0.5𝐿 = 0.02 𝑚𝑜𝑙 NaOH 100∗10−3 𝑀∗400𝑚𝐿
2. 𝑉1 = = 8 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑁𝑎𝐶𝑙
5𝑀

1 mol  40 g 5∗10−3 𝑀∗400𝑚𝐿

0.8 g NaOH 3. 𝑉1 = = 2 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝐶𝑙2 𝐶𝑎
0.02 mol  g 1𝑀
5
 10∗10−6 𝑀∗400𝑚𝐿
4. 𝑉1 = =
10∗10−3 𝑀
0.4 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝐶𝑙2 𝑍𝑛
0.005%∗400𝑚𝐿
5. 𝑉1 = = 2 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝐵𝑟𝑖𝑗𝑖
1%

• Se necesita calcular la concentración de una proteína.

Para ello se realizó una dilución: 0.3 ml de la solución
proteica + 0.9 ml de agua bidestilada. Se determinó que
0.5 ml de esta dilución contienen 3 mg de proteína
(método de Bradford). Calcular cuál es la concentración de
proteína en la solución original.
0,5ml ---------- 3mg
12ml ------------- x

12 ∗ 3
𝑥= = 72𝑚𝑔
0,5

1𝑔
72𝑚𝑔 ∗ = 0,72𝑔
100𝑚𝑔

𝑝 0,72𝑔
% = ∗ 100 = 6
𝑣 12𝑚𝑙

𝑃
6% 𝑉 ∗ 12𝑚𝐿 𝑃
𝐶1 = = 240%
0,3𝑚𝐿 𝑉