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ESTERILIZACION DE MATERIALES Y PREPARACION DE MEDIOS DE

CULTIVO

Maycol Andrade., Jhojan Mejía., Jazmín Jaramillo., Camilo Obando., Laura Valdes.

Introducción.

Para la esterilización de material no se tiene un procedimiento de esterilización y


desinfección que sea aplicable a todos los instrumentos. El método de esterilización será
seleccionado para cada caso teniendo en cuenta la naturaleza física del objeto y la
naturaleza biológica del contaminante. Como rara vez se conoce la población de
microorganismos sobre un objeto que debe ser tratado, debemos presuponer que se
encuentran presentes las formas microbianas más resistentes.1

Uno de los equipos más utilizados en los laboratorios son las autoclaves de laboratorio,
estos dispositivos sirven como una medida elemental de esterilización del material
utilizado allí mismo. La esterilización puede conseguirse usando calor, productos químicos
y radiación.1 El método para elegir dependerá del material a esterilizar y del equipo e
instalaciones disponibles. Con los objetos de acero inoxidable y de vidrio podemos usar
cualquier método, pero en el caso de los materiales plásticos debemos tener en cuenta su
composición para evitar deformaciones e incluso la destrucción del material.3

Las autoclaves son recipientes metálicos con paredes gruesas que cuentan con un cierre
hermético para trabajar a alta presión y así realizar una reacción industrial, cocción o
esterilización con vapor de agua, en donde la temperatura y el vapor actúan de manera
conjuntamente para producir la coagulación de las proteínas de los microorganismos,
entre ellas las esenciales para la vida y la reproducción de estos, llevándolos así a su
destrucción.2
Para el acondicionamiento y preparación del material de vidrio se necesita realizar de
manera tal que se pueda asegurar la perfecta esterilización de este en todos sus puntos y
evitar la posterior contaminación.1
Otro medio para la esterilización es la vía o calor seco, es una variante de la autoclave en
la que no se usa vapor, al ser menos agresivo se utiliza a más alta temperatura y durante
más tiempo. El calor seco desnaturaliza las proteínas, funde los lípidos de las membranas
y provoca desecación de los microorganismos.3

Para realizar un medio de cultivo apropiado para el crecimiento de microorganismos debe


contener los nutrientes esenciales: por ejemplo, el aislamiento de bacterias el medio debe
estar rico en proteínas o sus derivados, además de carbohidratos y sales minerales. 4
existen diferentes medios tales como: medios generales, son aquellos que permiten el
crecimiento de una gran variedad de microorganismos, medios de enriquecimiento, son
aquellos que favorecen el crecimiento de u determinado tipo de microorganismo sin llegar
a inhibir totalmente el crecimiento de los demás, medios selectivos, son aquellos que
permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos determinado, inhibiendo el
desarrollo de los demás y medios diferenciales, son aquellos en los que se pone de
manifiesto propiedades que un determinado tipo de microorganismos posee.5
Metodología.

Para llevar a cabo esta práctica se estudio la literatura previa sobre esterilización de
materiales, y preparación de medios de cultivo. Para proceder a la práctica, se utilizaron 5
cajas de Petri y 5 pipetas, las cuales se envolvieron en papel kraft y se esterilizo en horno.
Para la preparación del medio de cultivo se utilizo agar disuelto en agua y puesto a auto
clave para luego llevarlo a diferentes lugares y analizar las bacterias obtenidas.

Resultados y discusión.

Resultados.

 Muestra uno: Baño mujeres tercer piso.

En esta muestra de agar se observaron muestras de tres crecimientos, el primero


a la periferia de la caja hacia el centro de color blanco, la segunda de color
amarillo a un lado de la caja y la tercera en el centro de la caja de color banco,
(Imagen 1).

 Muestra dos: Baño hombres tercer piso.

Las muestras observadas en el agar dos fueron tres. La primera está dada por un
crecimiento de dos muestras circulares grandes de color blanco, la segunda de
color amarillo ubicada cerca a la periferia de la caja, y por último seis muestras
circulares pequeñas, dispersas por el agar nutritivo, (imagen 2).

 Muestra tres: Baño hombres cuarto piso.

En el agar nutritivo tres se observaron tres muestras diferentes, la primera se


observa de color café central, con periferia blanca, la segunda es de color amarillo
la cual se encuentra en la periferia de la caja Petri, y también dos muestras
circulares de color blanco, (imagen 3).

 Muestra cuatro: Ascensor.

Este medio de cultivo mostro una muestra bacteriana da color amarillo cerca a la
periferia de la caja Petri, (imagen 4).

 Muestra cinco: Baño mujeres cuarto piso.

Para esta prueba, se obtuvo, un crecimiento circular de color verde, central


rodeado de un color blanco, otro crecimiento circular, de color blanco hacia el otro
extremo de la caja Petri y un crecimiento también circular, de amarillo central,
rodeado de un color blanco hacia la periferia, (imagen 5).
Análisis y discusión.

La diferencia entre las muestras se da debido a que en ninguna materia inerte hay
microorganismos específicos o con una función determinada, el microorganismo puede
desarrollarse en unas zonas inertes mediante dos formas: por las sustancias presentes en
la atmósfera que se adhiere, o a través de las bacterias que posee el huésped y que se
ponen en contacto con la zona inerte y se adhieren a ella. Al originarse un organismo en
una zona inerte se forman más capas de bacterias, llamadas biocapas. Esta adherencia
depende de factores como la interacción entre la superficie de bacterias, la superficie del
sustrato y el entorno que le rodea. En cambio, las bacterias de las zonas inertes que
entran en contacto con el huésped son rápidamente recubiertos por proteínas o
glucoproteínas que se adquieren a través de este.6

Otra de las razones es que se ha estimado que el 45% por ciento de las bacterias proviene
de la tapa de inodoros y urinales por obra de las heces fecales y uno 20% de diversos
aparatos de dispensa de jabón o grifos de agua7 . debido a que las diferentes cajas Petri
solo fue expuesta al aire de los diferentes baños, sin tocar ninguna superficie altamente
patógena por ende no se encontraron gran variedad de bacterias.

Conclusiones.

Bibliografía.

1. http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp3.pdf

2. https://www.quiminet.com/articulos/como-esterilizar-el-material-de-laboratorio-
2637406.htm

3. https://quercuslab.es/blog/esterilizacion-del-material-de-laboratorio/

4. https://books.google.com.co/books?
id=vwB0fgirgN0C&pg=PA117&dq=PREPARACION+DE+MEDIOS+DE+CULTIVO&hl=
es&sa=X&ved=0ahUKEwjNjYDh_ujhAhUHq1kKHZAZBVkQ6AEILjAB#v=onepage&q
=PREPARACION%20DE%20MEDIOS%20DE%20CULTIVO&f=false

5. https://www.ugr.es/~cjl/medios%20de%20cultivo.pdf

6. http://www.iesjuangris.com/index.php?
option=com_attachments&task=download&id=8

7. https://www.huffingtonpost.es/2014/11/30/microbios-aseos-publicos_n_6233112.html

8.