Respuestas 2017

Metabolismo de aminoácidos y proteínas.

Respuestas para el martes a la mañana.

Sabina me pasó la respuesta del caso clínico de PKU.

EJERCICIOS DE RESOLUCIÓN DOMICILIARIA

1) Aspectos nutricionales del metabolismo proteico.

a) ¿Qué es y cómo se calcula el balance nitrogenado? Describa situaciones metabólicas
en las que el balance nitrogenado sea negativo.
Diapo 3

Para los humanos la principal fuente de sustancias nitrogenadas son las proteínas de la dieta.
Las proteínas, a diferencia de los lípidos y los hidratos de carbono, no se almacenan como
reserva, y los niveles de proteínas se regulan por el equilibrio entre anabolismo y catabolismo, es
decir un balance entre biosíntesis y degradación, lo que se conoce como recambio normal de
proteínas. Así, un adulto sano que ingiere una dieta variada y completa se encuentra
generalmente en situación de equilibrio nitrogenado, un estado en el que la cantidad de
nitrógeno ingerida cada día es equilibrada por la cantidad excretada por heces, orina y sudor, sin
que se produzca ningún cambio neto en la cantidad de nitrógeno del organismo. El balance
nitrogenado puede calcularse entonces como:

Balance Nitrogenado= N ingerido – N eliminado = N ingerido – (No + Nh + Np)

No= N urinario
Nh= N heces
Np= N piel

N ingerido= gr proteínas en la dieta / 6,25 (considerando que 1 gr de N proviene de 6,25 gr

proteínas)
Para calcular el N urinario se deben determinar urea en orina de 24 hs y el volumen de orina en
24 hs
No= urea (gr/L) x 0,467 (gr N / gr urea) x vol orina (L)
Nh + Np se estiman en 4 gr / día

Esta fórmula es muy general, se puede ajustar también teniendo en cuenta la edad.
Creo que lo mejor es darles la fórmula del principio y explicarles que además se necesita
conocer los gramos de proteína ingeridos por día y medir el volumen de orina en 24 hs y la urea
en orina de 24 hs. Si el grupo de alumnos los sigue les pueden mostrar las otras cuentas.

Sin embargo, en ciertas condiciones, el organismo se halla en un balance nitrogenado negativo o

positivo. Es positivo cuando la ingesta nitrogenada supera a las pérdidas, como sucede en niños
en edad de crecimiento, puesto que están aumentando su peso corporal e incorporando más
aminoácidos en las proteínas somáticas, embarazo, períodos de recuperación de enfermedades.
Es negativo si la ingesta de nitrógeno es inferior a las pérdidas, tal como ocurre en estados de
desnutrición o inanición, donde las cadenas carbonadas de los aminoácidos son necesarias para
la gluconeogénesis y el N liberado de los aminoácidos es excretado principalmente en forma de
urea y no se reincorpora a las proteínas., anorexia prolongada, postraumatismos, quemaduras, o
en dietas deficientes en algún aminoácido esencial. También puede darse un equilibrio negativo
durante la vejez, la fiebre severa, proteólisis de la diabetes no controlada y, de gran importancia
médica, en neoplasias, donde el catabolismo se encuentra muy aumentado.

1
La determinación del balance de nitrógeno en un paciente es una herramienta útil no sólo para
evaluar si la ingesta de proteínas es adecuada, y también para determinar el grado de
catabolismo inducido por la enfermedad.

b) ¿Qué es un aminoácido esencial? Indique fuentes nutricionales.

Diapo 4

c) ¿Qué entiende por valor biológico de una proteína? De ejemplos.

Diapo 6

d) Esquematice el proceso de digestión de proteínas. Para cada etapa indique las

funciones de las enzimas y secreciones.
Diapos 5 y 6

e) Esquematice la absorción intestinal de aminoácidos. Indique las características de los

mecanismos de transporte.
Diapo 7

f) Los aminoácidos pueden ser utilizados como fuente de energía. Indique en que
situaciones metabólicas y cuál es el destino del grupo amino y de la cadena carbonada.
Diapos 11 y 12

1- Durante la síntesis y degradación de las proteínas, algunos amino ácidos que son liberados
de las proteínas y no son necesarios para la síntesis de nuevas proteínas pueden seguir una
ruta catabólica.
2.- Cuando el individuo sigue una dieta rica en proteínas y la ingesta de amino ácidos excede a
las necesidades corporales para la síntesis de proteínas.
3.- Durante un ayuno prolongado o una diabetes descompensada, donde los carbohidratos no
pueden ser utilizados apropiadamente, las proteínas celulares son utilizadas como combustible.

g) Defina aminoácidos ceto- y glucogénicos. Clasifique los 20 aminoácidos según la

definición.

2
2) Excreción de amonio
Describir los pasos necesarios para que el grupo amino sea excretado del organismo:
transaminaciones, desaminación oxidativa (diapos 13 a 19) y ciclo de la urea (diapos 22 a 25).
Importancia del hígado en estos procesos. ¿Cómo se transporta el amonio desde los otros
órganos al hígado? (diapos 20 y 21)

Es muy parecida a la pregunta 2 del aula

Transporte desde tejidos extrahepaticos

Ala y Gln son los aa mayoritarios en plasma porque son los encargados de transportar los
grupos amino desde el músculo y los tej extrahepáticos, respectivamente, hasta el hígado.

Ciclo de la glucosa-alanina
La Ala es la forma no tóxica en la que se transportan grupos amino desde el músculo y otros
tejidos que degradan aa hacia el hígado. En el músculo y TEH que usan aa como combustibles
los grupos amino se juntan en forma de Glu por transaminación. El Glu transamina con piruvato
producto de la glucolisis muscular para dar Ala, que pasa a la sangre y se transporta al hígado.
En el citosol de los hepatocitos la TGP cataliza la reacción inversa y se forma Glu que ingresa a
la mitocondria y es catabolizado por la Glu DH o transamina con oxalacetato para dar Asp.
El piruvato ingresa en la gluconeogénesis y produce glucosa que es liberada a la sangre.

3) Síntesis de compuestos no proteicos a partir de aminoácidos

a) Mencione productos no proteicos que se sinteticen a partir de aminoácidos
b) Elabore un cuadro sinóptico donde resuma los aminoácidos precursores, el/los
tejido/s donde la biosíntesis es más activa, y los principales efectos fisiológicos de las
siguientes sustancias:
b-1) Adrenalina

3
 b-2) Histamina
b-3) Serotonina
b-4) Acetilcolina
b-5) Acido gamma-aminobutírtico
b-6) Purinas y pirimidinas

Amina aa Tejido elaborador Princ. Función biol.

Adrenalina Tirosina SNC, terminales Reacc. al stress. Aumenta
sinápticas, células gasto cardíaco, consumo
cromafines de tej. de O2 y catabolismo, sobre
periféricos y médula todo de glúcidos.
suprarrenal.
Histamina Histidina Células cebadas Vasodilatador. Hipotensor.
(mastocitos) Respuesta alérgica y
anafiláctica.
Serotonina Triptofano SNC, epitelocitos del Neurotransmisor depresor.
intestino.
Acetilcolina Serina SNC y SNP Estimula receptores
colinérgicos tales como la
placa neuromuscular.
Acido - Glutamato SNC Inhibidor de la transmisión
aminobutírico sináptica.
Purinas y Pur (Glu,
pirimidinas Gly, Gln) Pir
(Asp)

4) Síntesis de creatina y creatinina: importancia clínica, enzimas que intervienen.

a) Esquematice la vía de síntesis de creatina indicando sus precursores y distribución tisular.
Diapo 33
La creatina es un ácido orgánico nitrogenado que se sintetiza a partir de Gly, Arg, y metionina, en
forma de S-adenosilmetionina, como dador del grupo metilo. Se sintetiza parte en riñon y parte
en hígado y por vía plasmática llega a los músculos
La creatina se encuentra en músculo esquelético y cardíaco y en células del SN

b) Describa la reacción catalizada por la creatin-fosfo-quinasa (CPK) indicando la función cumple

la fosfocreatina y la importancia clínica de la determinación de su actividad enzimática en
plasma.

4
 La fosfocreatina se forma en la reacción reversible catalizada por la creatina fosfokinasa (CK o
CPK) y es una molécula de reserva energética del músculo. (recordarles los compuestos con
alta capacidad de transferencia de grupos fosfato)
La determinación de la actividad CPK se utiliza en el diagnóstico y seguimiento de patologías
que involucren músculo estriado esquelético y/o cardíaco (especialmente infarto). (recordarles
las 3 isoformas y su distribución tisular MM (ME), MB (MC), BB (cerebro))

c) Describa la síntesis de creatinina indicando cual es la utilidad de su determinación en orina.

La creatinina se forma por ciclación espontánea de la fosfocreatina en el músculo y se elimina
por riñon.

El clearance de creatinina es un examen de laboratorio que compara el nivel de creatinina en la

orina con el nivel de creatinina en la sangre y permite estudiar el funcionamiento de los riñones
(sirve como indicador de la tasa de filtración glomerular).
Los valores normales son:
Hombres: 97 a 137 ml/min.
Mujeres: 88 a 128 ml/min.
Y dependen además de la masa muscular.
Para realizar la medida se necesitan una muestra de sangre (en la que se determina la
creatinina plasmática) y una muestra de orina de 24 hs (de la que se determinan el volumen y la
creatinina urinaria)

5) Metabolismo de aminoácidos y proteínas en diferentes patologías humanas. Indique en

qué situaciones podría producirse un aumento de los niveles de NH4+ en plasma. ¿Cuál es el
mecanismo tóxico?
Diapo 28 y PDF
(Stryer 664, Lehninger 4ed 665)
Hiperamonemia: la síntesis de urea en el hígado es la principal vía para eliminar el NH4+.
Defectos en las enzimas del ciclo de la urea producen una elevación de los niveles de NH4+
sanguíneos (hiperamonemia) y tienen consecuencias muy graves debido a que no hay una ruta
alternativa para sintetizarla. Algunos de estos defectos son evidentes a los pocos días después
del nacimiento y se manifiestan como letargia y vómitos periódicos.
Las fases terminales de la intoxicación por NH4+ en los seres humanos se caracterizan por la
aparición de un estado comatoso acompañado de edema cerebral y aumento de la presión
intracraneal. Los mecanismos por los que se supone causa toxicidad el amonio son varios:

1) Agotamiento del ATP en las células cerebrales: para consumir el exceso de NH4+ pueden
producirse 2 reacciones: la aminación reductora del alfa-cetoglutarato (reacción inversa de
la GDH) para dar Glu, seguida de la conversión de Glu en Gln por la glutamina sintasa.
Esta última reacción es la que consume ATP. Estas 2 enzimas estan presentes en el
cerebro y la síntesis de Gln es la forma de eliminar el amonio.

Recordarles que las dos enzimas catalizan reacciones reversibles (GDH está regulada y es
reversible)

5
2) Hiperosmolaridad y edema: los altos niveles de amonio conducen a niveles elevados de Gln, la
cual es un soluto osmoticamente activo, lo que provoca un aumento en la captación de agua,
hinchamiento de las células y edema. Esto fue observado en los astrositos, células del SNC que
proporcionan nutrientes, sostén y aislamiento a las neuronas.
3) Disminución de neurotransmisores: la reacción de la Gln sintasa consume el Glu, y el Glu y su
derivado gama-aminobutirato (GABA) son neurotransmisores.
Por lo tanto, la particular sensibilidad del cerebro a los excesos de amoníaco podría deberse tanto
a los cambios en el equilibrio osmótico como a la depleción de neurotransmisores.

EJERCICIOS DE RESOLUCIÓN EN EL AULA

1) En un caso de alcoholismo, la malnutrición crónica subyacente provocó que el

paciente perdiera 18 kg de peso, un 6 % de los cuales fueron a expensas de la
proteína corporal.
a) Exprese esta pérdida en términos de Kcal.
b) Analice el estado de su balance nitrogenado.
c) ¿Cómo se modificarán en el tiempo los niveles de aminoácidos circulantes gluconeogénicos?
d) ¿Por qué la administración endovenosa de Ala provoca disminución del β- hidroxibutirato en
sangre y, en cambio, no causa este efecto la infusión de Leu?
e) En los pacientes malnutrido-proteicos se suele recurrir a la administración de aminoácidos
libres (o como sales) directamente en el torrente circulatorio. ¿Por qué no se los puede tratar por
la simple administración de alimentos completos?

Relacionar este problema con el domiciliario 1

a) 4500 Kcal.
b) BN desviado hacia la proteólisis, es decir, francamente negativo por falta de un pool adecuado
de aminoácidos esenciales.
c) Inicialmente aumentarán todos para cubrir las necesidades energéticas extremas. Existe una
captación selectiva de AA de acuerdo con el tejido que se estudie. Esto se ve claramente con la
Ala (mencionar el ciclo Ala-Glucosa).
Los AA ramificados son los últimos en descender y llegarán a aportar hasta el 15 % de las Cal/dia.
Los niveles de Glu y Gln se mantendrán altos debido a la necesidad de compensar la
hiperamoniemia acompañante, aunque, en la etapa caquexica terminarán por descender también
con una abrupta subida del amonio plasmático.

6
d) Ala es glucogénico para el humano pero Leu no lo es, por lo tanto, la disminución de la síntesis
de beta-OH-butirato es consecuencia de un alivio en la biodisponibilidad de glucosa por
gluconeogénesis.
e) La administración inicial de alimentos completos no es aconsejable por la severa falla en la
síntesis de las enzimas que intervienen en su digestión, la absorción también estará obstaculizada
por la deficiencia en los sistemas de permeación y por las fallas en la estructura de la propia
membrana.

2) Principales transformaciones bioquímicas de los aminoácidos.

a) Esquematizar las reacciones están involucradas en la eliminación del grupo α-amino
de los aminoácidos.
Para eliminar el grupo alfa-amino se usan 2 tipos de reacciones, las transaminaciones y las
desaminaciones.
Las transaminaciones en realidad no desaminan directamente (no producen NH4+ libre) sino que
las transaminasas transfieren el grupo amino de los distintos aa al glutamato que si es
desaminado.
Las transaminasas constituyen un sistema “buffer” que compromete los niveles disponibles de
cetoácidos y aminoácidos, y permite una interacción metabólica rápida y fácil entre glúcidos y
proteínas principalmente. Gran versatilidad en el suministro de intermediarios del Krebs (rutas
anapleróticas).
Como ejemplos se pueden escribir las reacciones de la TGO y la TGP, remarcandoles que en las
transaminaciones NO se produce amonio libre.
Recordarles la localizacion subcelular (La TGO citosol/mitocondria y la TGP en citosol) y la
importancia del cociente de De Ritis en la hepatopatías, cardiopatías, etc.

Dentro de las desaminaciones hay de 2 tipos: oxidativas y no oxidativas:

Las desaminaciones no oxidativas ocurren en aminoácidos donde el R tiene OH (Ser y Thr) o

SH. Las enzimas son la serina deshidratasa y treonina deshidratasa
Serina ---- piruvato + amonio
Treonina ---- alfa-cetobutirato + amonio
Insistir en que las reacciones de desaminación pueden darse tanto a expensas de -OH (oxidrilo)
como –SH (sulfidrilo).

Las desaminaciones oxidativas pueden ser catalizadas por aminoácido-oxidasas que llevan a
la formación del alfa-cetoácido

7
 O por deshidrogenasas, donde la más importante es la Glu deshidrogenasa

Recordarles que esta reacción reversible está regulada.

La glutámico-deshidrogenasa es la desaminasa de mayor importancia fisiológica en el organismo
humano. Su actividad específica más alta se localiza en mitocondrias de hígado y riñón.
Remarcarles que cataliza una reacción reversible pero regulable (un caso excepcional). Puede
usar como cofactores NADH Y NADPH.
Esta reacción funciona cerca del equilibrio en el hígado y la dirección en la que transcurre
depende de las concentraciones de reactivos y productos:

Tiene un rol fundamental en la regulación del nivel de cetoácidos intermediarios del Krebs (citar
el ejemplo clásico del secuestro de cetoácidos por elevación del amonio durante el coma
amoniacal).

b) ¿Cuáles son los posibles destinos de los productos de desaminación de los

aminoácidos?

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c) Describa una reacción de transaminación indicando su importancia metabólica.
Explique por qué estas reacciones tienen Keq cercanas a 1. Ejemplifique.

Recordarles que catalizan reacciones reversibles.

d) Describa una reacción de desaminación, mecanismo y cofactores. Indique que

requisito estructural diferencia a los aminoácidos que sufren desaminación oxidativa o
no-oxidativa. Mencione ejemplos.
Resuelta en inciso a)
e) Explique por qué la glutamato-deshidrogenasa es la desaminasa de mayor

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importancia biológica.
Resuelta en inciso a)

e-1) ¿En qué órganos se expresa? ¿Por qué?

e-2) Escriba la reacción que cataliza.
e-3) ¿Cómo es su regulación? Explíquela mediante un esquema.

f) Describa una reacción de decarboxilación. Mencione ejemplos de interés biológico.

3) Destino metabólico del amonio.

a) Los 20 aminoácidos necesarios para la síntesis de proteínas están presentes en el

plasma en diferentes concentraciones. Explique por qué la alanina y la glutamina se
encuentran en mayor proporción que el resto.
Diapos 20 y 21
Ala y Gln son los aa mayoritarios en plasma porque son los encargados de transportar los grupos
amino desde el músculo y los tej extrahepáticos, respectivamente, hasta el hígado.

b) Esquematice el ciclo de la glucosa-alanina. ¿Qué función cumple?

Diapo 21
Ciclo de la glucosa-alanina: la Ala es la forma no tóxica en la que se transportan grupos amino
desde el músculo y otros tejidos que degradan aa hacia el hígado. En el músculo y TEH que usan
aa como combustibles los grupos amino se juntan en forma de Glu por transaminación. El Glu
transamina con piruvato producto de la glucolisis muscular para dar Ala, que pasa a la sangre y se
transporta al hígado. En el citosol de los hepatocitos la TGP cataliza la reacción inversa y se forma
Glu que ingresa a la mitocondria y es catabolizado por la Glu DH o transamina con oxalacetato
para dar Asp.
El piruvato ingresa en la gluconeogénesis y produce glucosa que es liberada a la sangre.

Explique por qué la síntesis de glutamina no es la vía preferencial del transporte de amonio
del músculo al hígado.
Glutamina sintasa se expresa principalmente en cerebro, hígado y riñones

c) Describa la reacción catalizada por la glutamina sintasa, la utilidad de la glutamina y la

función de la glutaminasa. Indique distribución tisular e importancia biológica.
Glutamina sintasa: Diapo 20
Glutaminasa: hígado
Glutamina: forma de transporte de grupos NH2 desde TEH al hígado

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d) Describa en detalle el ciclo de la urea esquematizando sus etapas. Indique: d-1) Función.
d-2) En que órgano y compartimiento intracelular tiene lugar. d-3) Escriba la fórmula de la
urea identificando en la vía metabólica el origen de cada uno de sus átomos. d-4) Describa
en detalle la regulación. d-5) ¿Cuál es la importancia del N-acetil glutamato para esta vía
metabólica? d-6) ¿Cuál es el costo energético para sintetizar una molécula de urea? ¿De
qué manera se compensa? d-7) Realice un diagrama que relacione el ciclo de la urea con el
ciclo de Krebs e identifique el metabolito que relaciona ambos ciclos.

diapos 22 a 25
La urea presenta ciertas características que favorecen su formación como molécula para eliminar
NH4+: a) es una molécula pequeña, b) casi el 50% de su peso es nitrógeno (28 gr / 60 gr), c) se
necesita poca energía para su síntesis (1,5 molec de ATP teniendo en cuenta la recuperación en
Krebs) y d) es soluble en agua por lo que se disuelve en plasma y se elimina por vía renal.

Regulación: diapo 26

Coste energético: diapo 27

e) Indique la importancia del riñón en el metabolismo del nitrógeno.

Excreción de urea

4) Un animal en ayuno es alimentado con alanina uniformemente marcada [14C].

Al cabo de unas horas, el análisis de sangre muestra la presencia de glucosa [14C].
a) Explique esta observación esquematizando las reacciones que le permiten justificarla.
b) Indique si se detectaría glucosa [14C] en sangre si bajo las mismas condiciones se
suministrara:
b-1) Fenilalanina [14C]
b-2) Cisteína [14C]
b-3) Leucina [14C].
c) En uno de los casos anteriores se detectan grandes cantidades de acetoacetato en

11
orina, ¿En cuál?

a) alanina --- piruvato --- gluconeogénesis

- La reacción de alanina a piruvato que la escriban con fórmulas y nombrando la enzima
- Preguntarles qué carbonos de la glucosa estarán marcados? Rta: Todos

TGP:
citosol

b) Fenilalanina: gluconeogénico, entra como fumarato y cetogénico, entra como acetoacetil-CoA

Cisteina: gluconeogénico, entra como piruvato

Leucina: cetogénico, entra como acetil-CoA o acetoacetil-CoA

La pregunta de la guia no esta clara. Glucosa marcada se puede producir con los 3 aa (porque el
acetil-CoA generado por la leucina puede combinarse con oxalacetato), pero síntesis neta de
glucosa solo se produce con los gluconeogénicos.
Para que los alumnos no se confundan pueden plantearles que tengan en cuenta la situación
metabólica (ayuno) y la hormona predominante (glucagón), que en esas condiciones se realiza
gluconeogénesis y no hay oxalacetato disponible, asi solo darían glucosa marcada los 2
gluconeogénicos.

c) Leucina

5) Reacciones de transaminación.
a) Escriba las reacciones de transaminación de cada uno de los siguientes aminoácidos
utilizando al α -cetoglutarato como aceptor nombrando las enzimas correspondientes:
a-1) Alanina
a-2) Aspartato
a-3) Leucina
a-4) Fenilalanina
a-5) Tirosina.

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b) ¿A partir de cuál de estos aminoácidos no puede sintetizarse glucosa en forma neta?
c) Explique por que la Aspartato aminotransferasa tiene la actividad específica más alta
de todas las aminotransferasas hepáticas en mamíferos.

Aclararles los sinónimos a los alumnos: transaminasa = aminotransferasa

TGO: aspartato aminotransferasa
TGP: alanina aminotransferasa
a) Reacciones de transaminación con α -cetoglutarato:
Los compuestos son: a) piruvato. b) oxalacetato. c)  -cetoisocaproato. d) fenilpiruvato. e) p-
hidroxifenilpiruvato. (ver Stryer pag 717)

Alanina: da piruvato. TGP

Aspartato: da oxalacetato. TGO

TGP:
citosol

TGO: citosol y
mitocondria

Leucina: da cetoisisocaproato

Fenilalanina: da fenilpiruvato

Tirosina: da p-hidroxifenilpiruvato. Tirosina aminotransferasa.

b) Leucina. Exclusivo cetogénico

c) La aspartato aminotransferasa (TGO) cataliza la reacción de transaminación del Glu

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El aspartato generado es el donor del segundo grupo amino durante la síntesis de urea. Entonces
la mitad de los grupos amino excretados en forma de urea pasan por esta reacción de la TGO, lo
que hace que esta sea la aminotransferasa más activa

6) Si se adiciona ácido glutámico marcado con 14C en el carbono 2 y con 15N en el

grupo amino a un homogenato de hígado. ¿Dónde aparecerán los isótopos en las
siguientes moléculas?:
a-1) Urea
a-2) Succinato
a-3) Arginina
a-4) Citrulina
a-5) Ornitina
a-6) Aspartato
b) Cuando se añade 15NH4+ a un homogenato de hígado se detecta urea marcada con 15N
en un solo átomo de N a los pocos minutos. A tiempos más largos aparecen marcados
los dos átomos de N. Escriba las reacciones que explican por qué no aparecen los dos
átomos de N marcados desde el principio.

Este ejercicio sirve para que los alumnos entiendan el ciclo de la urea con fórmulas (y no solo
palabras)

a) La molécula que se adiciona al homogenato de hígado es:

La marca aparece en:

Urea: en ambos N por acción de la glutamato deshidrogenasa y de la TGO
Succinato: el Glu por transaminacion produce alfa-cetoglutarato marcado en el C carbonílico que
ingresa a krebs y da succinato marcado en el C1 (y C4, es simétrico)
Arginina: queda marcada en los N de la cadena del aa. Es el N del NH4+ liberado por la glutamato
deshidrogenasa
Citrulina: queda marcada en el N de la cadena del aa. Es el N del NH4+ liberado por la glutamato
deshidrogenasa.
Ornitina: no se marca
Aspartato: marcado en alfa amino por la TGO. El libro indica también marcados los grupos COOH,
supongo que es porque a partir del succinato marcado se puede generar oxalacetato que por la
TGO da Asp marcado en los C

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b) Se marca primero el que se incorpora directamente como N para dar carbamoil-P. para que se
marque el segundo necesitamos que el N este incorporado en el Asp (o en alguna molécula
orgánica que pueda generarlo)

7) Ayuno. En un estudio se hizo ayunar a ratas de corta edad y luego se les suministró una
sola comida completa en aminoácidos pero sin arginina. A las 2 h los niveles de amonio
sanguíneo aumentaron desde un nivel normal de 18 g/L a 140 g/L y las ratas mostraron los
síntomas clínicos de toxicidad del amonio. Un grupo control alimentado con una dieta
completa en aminoácidos o una dieta completa en aminoácidos en la que se había
sustituido la arginina por ornitina no mostraron sintomatología.
a) ¿Cuál era el objetivo del ayuno en el experimento?
b) ¿Qué es lo que hizo aumentar los niveles de amonio? ¿Es la arginina un aminoácido
esencial para las ratas? Justifique
c) ¿Por qué se puede sustituir arginina por ornitina?

Esta en el Lehninger

a) El ayuno es necesario para estar en situación de hipoglucemia y así al administrar la dieta se

catabolizan los aa glucogénicos.
b) La desaminación oxidativa durante el catabolismo de aa aumenta los niveles de NH4+ y la
ausencia de arginina, un intermediario del ciclo de la urea, impide la conversión del amonio en
urea aumentando los niveles de amonio en plasma. Dado que el amonio se eleva casi 10 veces se
puede suponer que las ratas no pueden sintetizar arginina para suplir esta deficiencia en la dieta y
por lo tanto sería un aa esencial para estos animales.
c) Porque si adicionamos ornitina esta se transforma en arginina en el ciclo de la urea

8) Los 3 carbonos del lactato y de la alanina presentan el mismo estado de oxidación y los
animales pueden usar uno u otro como fuente de energía, indistintamente.
Compare el rendimiento en moles de ATP/ mol de sustrato para la oxidación completa a
CO2 y H2O del lactato y de la alanina teniendo en cuenta el gasto energético producido
por la excreción del NH4

Está en el Lehninger

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Usen este ejercicio para mostrarles donde se gasta ATP durante la síntesis de urea y remarcarles
la relación entre el ciclo de la urea y el ciclo de Krebs.

Lactato: 15 moles de ATP

lactato a piruvato: 1 NADH
piruvato a acetil-CoA: 1 NADH
acetil-CoA en Krebs: 3 NADH + 1 FADH2 + 1 GTP
5 NADH= 12,5 ATP
1 FADH2= 1,5 ATP
1 GTP= 1 ATP

Alanina: 11 moles de ATP (el libro dice 13, hay 2 que no encuentro!)
Ala a piruvato
piruvato a acetil-CoA: 1 NADH
acetil-CoA en Krebs: 3 NADH + 1 FADH2 + 1 GTP
hasta aca van 12,5 ATP
Glu a ciclo de la urea: gasta 4 ATP (2 para formar carbamoil-P y dos en el paso del ciclo porque se
produce AMP) y produce fumarato
Fumarato en Krebs: 1 NADH

9) En un paciente con insuficiencia hepática:

a) ¿Qué espera que suceda con el ciclo de la urea?
b) ¿Qué formas alternativas emplea el organismo para controlar el incremento de
amonio en sangre?
c) ¿Cuál es el nivel aceptable de urea en sangre humana? ¿De qué manera influirá la
dieta en este valor?

a) Su funcionamiento estará disminuido porque el hepatocito es el principal lugar donde ocurre

esta ruta (riñón e intestino producen cantidades de urea no significativas metabólicamente
hablando).
b) Utilizarlo para la biosíntesis de Glu, Gln y Asn.
c) Uremia en nuestro medio (dieta cárnica): 0.16 a 0.30 gr./lt. Urea en orina: unas 10 veces la
concentración medida en plasma.

10) Caso clínico 6: Fenilcetonuria como una de las patologías que forman parte del screening
neonatal.
Sol, lactante de 4 meses de edad recién llegada de la Unión Soviética, de padre ruso y madre
argentina, fue normal en su nacimiento. Sin embargo, en las últimas semanas ha estado menos
atenta que lo normal al medio que la rodea, presentando además un retraso aparente de madurez
psicomotriz y temblor en sus extremidades. Cuando su madre la encontró en la cuna realizando
fuertes movimientos espasmódicos la llevó al servicio de urgencias del hospital. Un pediatra la
examinó e inmediatamente notó un olor rancio en el pañal húmedo de Sol. Se le tomó una muestra
de sangre del talón que dio positiva para un exceso de fenilalanina (Phe) en sangre.
a) ¿Qué patología puede tener Sol? Fundamente su respuesta.
Fenilcetonuria (PKU): es un error congénito del metabolismo debido a la falta de la enzima
fenilalanina hidroxilasa hepática, que cataliza la transformación de Phe en Tyr.

16
En esta patología la Phe se acumula en todos los líquidos corporales debido a que no puede
transformarse en Tyr.

Stryer:

Para corroborar el diagnostico se evaluó la actividad enzimática de la fenilalanina hidroxilasa

(PHA) obtenida de muestra del paciente y se la comparó contra una muestra control.
b) ¿Qué reacción cataliza esta enzima? Ver más abajo que esta la reacción con el cofactor THB

Gráfico de la actividad de PAH. Muestra control (círculos); muestra paciente (cuadrados).

17
c) Interprete el gráfico de actividad enzimática y saque conclusiones respecto del diagnóstico.
Mencione posibles causas que justifiquen la diferencia de actividad en ambas muestras. Teniendo en
cuenta este resultado, indique la base molecular de la PKU.
Rta: la muestra del paciente presenta una caída significativa en la actividad PAH respecto de la
muestra control, lo cual refuerza el diagnostico de PKU. Las diferencias entre ambas curvas
sugieren una anomalía a nivel enzimático que puede darse por mutaciones en la PHA.

La PKU está incluida en el programa de screening neonatal de nuestro país y, considerando que los
requisitos para que una patología sea incluida en este programa son:
-Causar daños graves e irreversibles.
-Carecer de signos clínicos en el período neonatal.
-Poseer un tratamiento efectivo ante la instalación precoz.
-Poseer una prevalencia lo suficientemente alta como para justificar su investigación.
-Existir un conocimiento acabado del curso clínico de la enfermedad.
-Contar con métodos bioquímicos de diagnóstico y confirmación sensibles, específicos, sencillos y
de bajo costo.
-Contar con un sistema adecuado de recolección, transporte y almacenamiento de muestras.

d) Justifique la incorporación de la Fenilcetonuria dentro del screening neonatal analizando:

d.1.¿Cuál es su prevalencia?
d.2.Considerando que se trata de una enfermedad metabólica, ¿qué metabolito se acumula? ¿Existen
otras vías metabólicas alternativas?
d.3.¿Cómo se diagnostica la enfermedad?
d.4.¿Cuáles son los signos clínicos?
d.5.¿Cuál es el tratamiento?

Marco teórico para las respuestas:

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Base molecular de la PKU, prevalencia y metabolismo
El metabolismo del aminoácido Phe se realiza, sobre todo, por la hidroxilación a Tyr catalizada por
la enzima fenilalanina hidroxilasa (PAH) y empleando el cofactor tetrahidrobiopterina (BH4). PAH
se expresa en hígado y riñon. La fenilcetonuria clásica (PKU) es causada por mutaciones en el gen
que codifica la enzima PAH, ubicado en el cromosoma 12, produciéndose una proteína inestable y
truncada.
La hiperfenilalaninemia PKU y no-PKU se produce por más de 100 mutaciones de distinto tipo (de
sentido erróneo, sin sentido, inserciones, deleciones) en el gen de PAH.
La actividad de PAH varía desde menos del 1% de lo normal en pacientes con PKU clásica hasta un
máximo de un 35 % de lo normal en aquellos con una forma no-PKU de hiperfenilalaninemia, tal
como un defecto en la producción de BH4.
d-1) Prevalencia: La hiperfenilalaninemia se define como una concentración de Phe plasmática
superior a 150 umol/L (2,5 mg/dL), debida a la incapacidad de convertir Phe en Tyr. La PKU es una
enfermedad de tipo autosómico recesivo, con una prevalencia en la población general de 1/9200
nacimientos (en algunas poblaciones puede ser mayor, como en la escocesa, con una prevalencia de
1/5400 nacimientos).
La Tyr formada por actividad PAH a partir de Phe puede seguir tres rutas metabólicas: dos rutas
sintéticas, una de catecolaminas (DOPA) y otra de melanina; y una ruta catabólica, que la degrada a
acetoacetato y fumarato.
Concentraciones de Phe superiores a 600 umol/L causan graves lesiones neuronales, proporcionales
a la concentración de Phe. (En la PKU severa la concentración de Phe es superior a 1.800 umol/L,
en individuos homocigotas). Debido a la elevada concentración de Phe cobran importancia otras
rutas menores del metabolismo de la Phe, como la formación de derivados cetónicos (fenilpiruvato)
y de ácidos (fenil-lactato, fenilacetato y o-hidroxifenilacetato). Estos metabolitos se eliminan por
orina, donde pueden ser detectados y producen un olor característico “a ratón”. (y color verde al
reaccionar con FeCl3)
d-4) Signos clínicos: en los primeros meses de vida el niño con PKU tiene un desarrollo normal
pero a partir de los dos años se observa un retraso mental que puede ser muy grave y que puede
estar acompañado por episodios convulsivos, hiperactividad y trastornos psiquiátricos de tipo
esquizofrénicos.
En resumen, las principales causas de las alteraciones neurológicas por hiperfenilalaninemia son:
1- Se produce una competencia en el transporte de L- aa al cerebro, alterando la distribución de
los metabolitos. Entre los metabolitos afectados se destaca la disminución cerebral de Tyr (ver pie
de pagina).
2- Esta inhibida la síntesis de mielina y de neurotransmisores, como serotonina, dopamina y
noradrenalina, lo que causa alteraciones neurológicas (la deficiencia de adrenalina provoca
hipoglucemia y la de dopamina hiperprolactinemia).
3- Se acumula el fenilacetato, compuesto neurotóxico, entre otros.
4- La Phe es un inhibidor competivo de la tirosinasa, enzima que inicia la síntesis de melanina,
lo que produce hipopigmentación.
Se puede observar en neonatos una hiperfenilalaninemia transitoria por retraso en la madurez de la
PAH hepática o hijos de madres fenilcetonúricas (sin elevación de la Tyr), o por alteraciones
metabólicas, como la tirosinemia.

d-3) Diagnóstico bioquímico de las hiperfenilalaninemias

El diagnóstico temprano de esta patología es esencial para evitar alteraciones cerebrales
irreversibles. Por ello forma parte del Programa de detección precoz de patologías en recién nacidos
(screening neonatal).

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En general se obtiene sangre del talon 4-5 días después del nacimiento y la concentración de Phe en
suero se determina por métodos cromatográficos como HPLC o espectrometría de masas,
estableciéndose un límite de referencia de 150 umol/L, con una relación Phe/Tyr superior a 2,5.
También se determinan los ácidos orgánicos derivados de Phe en la orina, como fenilpirúvico,
fenilacetato y fenil-lactato. Como prueba de confirmación de PKU en individuos con
hiperfenilalaninemia se determina la actividad de PAH en biopsia hepática. Por último, se pueden
hacer pruebas genéticas al individuo portador y a padres y hermanos, para la detección de
portadores.
d-5)Tratamiento de las hiperfenilalaninemias
Actualmente el tratamiento se basa en la restricción dietética de Phe y en algunos pacientes
(aquellos que responden a la recarga con BH 4, recordar que la hiperfenilalaninemia, en el menor de
los casos, puede deberse a deficiencias en la síntesis de BH 4 y no a la de PAH, en la PKU no
clásica), en la administración de BH4.
Existen en el mercado alimentos sintéticos a los cuales se les ha eliminado la Phe.
Un tratamiento dietético de instauración rápida y eficaz en un recién nacido fenilcetonúrico impide
el deterioro mental. Se recomienda entonces un seguimiento semanal hasta los 6 meses de edad,
quincenal hasta los 24 meses y, posteriormente, mensuales. El control de Phe no evita el retraso
mental en las deficiencias de BH4, pero la administración de ciertos precursores puede comportar
cierto beneficio.
Las mujeres embarazadas con PKU deben controlar estrictamente las concentraciones de Phe, ya
que si esta se encuentra aumentada puede causar malformaciones en el feto, microcefalia y retraso
mental. Para ello debe seguir una dieta aún más restrictiva en Phe.
Por las dudas que pregunten: en 2007 se aprobó el Kuvan (Dihidrocloruro de sapropterina), que es
una compuesto sintético biosimilar a la BH4, que favorece el metabolismo de Phe.

Esto queda como adicional (el año pasado se dió en integración metabólica)

Catabolismo de aa de cadena ramificada: aunque la mayor parte del catabolismo de aa ocurre en

el hígado, los 3 aa con cadenas ramificadas (Leu, Ile y Val) se oxidan como combustibles
principalmente en el músculo, tej adiposo, riñon y cerebro. Estos THE contienen una
aminotransferasa, ausente en el hígado, que transforma estos aa en los cetoácidos. Luego actua
el complejo de la alfa-cetoácido de cadena ramificada deshidrogenasa que produce la
descarboxilación oxidativa de los 3 alfa-cetoácidos, liberando el grupo COOH como CO2 y
produciendo el derivado acil-CoA correspondiente (es una reacción análoga a la de la PDH).

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