Universidade Metodista de Piracicaba/SP

Roteiro de Aula Prática

 Curso: Farmácia
 Aula Prática – Urocultura
 Microbiologia Clínica/2019

INFORMAÇÕES GERAIS:

UROCULTURA
OBJETIVO- A finalidade da urocultura é o diagnóstico das infecções urinárias, através do isolamento, identificação
e quantificação de agentes microbianos presentes na urina.

MICROBIOTA- A urina é um líquido biológico sem microbiota. Qualquer microrganismo isolado, é portanto,
considerado patógeno, associando a sintomatologia, a presença de bacteriúria e piócitos.

AMOSTRA- Pode ser utilizada urina colhida por micção espontânea (jato médio), punção suprapúbica, e cateter ou
de sonda uretral. A amostra ideal é a primeira urina da manhã, após higienização. Caso não seja possível, deve-se
aguardar pelo menos 3 horas para a próxima micção.

MATERIAL- MacConkey e Cled

COLETA- A coleta deve ser realizada em frasco esterilizado de boca larga ou com auxílio de coletores infantis
esterilizados. Os coletores infantis devem ser substituídos a intervalos máximos de uma hora caso não seja obtida
a micção. Nos pacientes quem fazem uso de cateter, a urina deve ser coletada com seringa e agulha perfurando-se
o cateter, após limpeza, na proximidade do mesmo com o tubo de drenagem.

Procedimento - O paciente deverá receber verbalmente e por escrito as seguintes instruções:

1- Lavar bem a região genital externa com água e sabão neutro.
2- Enxaguar bem e secar com compressas de gazes esterilizadas.
3- Desprezar o primeiro jato de urina e colher, diretamente no frasco, a porção intermediária.
4- Fechar bem a tampa e enviar o material para o laboratório em até 30 minutos para que o
processamento ocorra em até 1h. Caso não seja possível, a amostra deve ser enviada deve ser
mantida em geladeira e enviada em isopor envolta em cubos de gelo.

ESTABILIZAÇÃO E ARMAZENAMENTO- A urina que não for transportada ao laboratório em até meia hora ou
semeada dentro de uma hora após a coleta, deve ser refrigerada até o momento do semeio, podendo permanecer
nestas condições por até 18 horas.

PROCEDIMENTO- Para a cultura quantitativa de urina, utilizar alça calibrada de 0,001mL (1:1000) ou 0,01mL
(1:100). Após homogeneização da amostra, proceder o semeio: Ágar Sangue e Ágar Teague (ou MacConkey); ou
Cled e Teague, CPS. Incubar as placas semeadas por 24 horas a 35-37°C. Após o período de incubação, analisar as
características das colônias que se desenvolverem e proceder a identificação.

CONTAGEM DE COLÔNIAS- Caso seja utilizada a alça calibrada de 0,001 mL, o número de UFC/mL será dado pela
contagem das colônias de mesmo aspecto na placa, multiplicado por 1.000. Caso seja utilizada a alçade 0,01 mL, o
número de UFC/mL será dado pela contagem das colônias de mesmo aspecto na placa, multiplicado por 100.

INTERPRETAÇÃO- O desenvolvimento de uma ou duas espécies bacterianas em contagem superior a 10 5 UFC/mL

deve ser valorizado (identificação + antibiograma). Desenvolvimento de três ou mais espécies é considerado
contaminação e deve ser solicitada nova amostra. Caso haja desenvolvimento de uma ou duas espécies em
contagens entre 10 4 e 10 5 UFC/mL se o paciente for assintomático e não tiver piúria, solicitar segunda amostra.
UROPATÓGENOS MAIS FREQUENTES

· Enterobactérias ++++
· Staphylococcus saprophyticus +++
· Staphylococcus aureus +++
· Enterococcus sp. ++
· Pseudomonas aeruginosa ++

INTERFERENTES- O uso de antibióticos e diuréticos pode diminuir sensivelmente a contagem de colônias. Amostras
colhidas inadequadamente poderão apresentar contaminação bacteriana pela microbiota da uretra e/ou da região
vaginal. Amostras não refrigeradas poderão apresentar um sobre crescimento de bactérias contaminantes,
colaborando para resultado falso positivo.

Questionário:

1. Quais são os cuidados durante a coleta da amostra? E durante op processamento da amostra?

2. Quais são as características químicas dos meios de cultura utilizados? Quais são os
microrganismos que podem crescer em cada um deles?
3. Descreva as análises realizadas com a fita de avaliação química da amostra.
4. Quais resultados podem estar interligados com a presença de microrganismos na urina? (ex:
pH / Nitrito / Esterase Leucocitária).
5. Após o crescimento das colônias quais provas bioquímicas seriam pertinentes para a
identificação do microrganismo?
6. Qual a importância da realização do antibiograma para o tratamento?