Descomposición de urea por ureasa

Denis Alexis Herrera Uchuya

RESUMEN
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Palabras clave:

Decomposition of urea by urease

ABSTRACT
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Keywords:

INTRODUCCION por la difusión, en una superficie catalíticamente

activa. En un segundo paso, el
La observación de la descomposición enzimática complejo enzima-substrato es transformado
de la urea mediante ureasas rápidamente en los productos.
permite tener varios puntos de vista. En primer Además, la reacción puede ser utilizada como
lugar, esta introducción a la cinética de enzimas:
reacción puede servir como ejemplo para una a partir de varias mediciones se puede
reacción de orden cero. Este orden de determinar la velocidad máxima de reacción,
reacción es mostrado en el aumento lineal de la la constante de Michaelis y la concentración de
concentración del producto. enzimas.
En ella se puede observar la cinética de la Como en el curso de la hidrólisis de la urea
catálisis: en primer lugar el sustrato y la
enzima se encuentran en equilibrio con un
complejo de enzima-sustrato. Este
equilibrio ya puede ser comparado con la se produce carbonato de amonio disociado en
acumulación de un sustrato, determinado varios iones, la reacción puede ser
seguida mediante mediciones de conductividad.
La concentración de los productos y
la velocidad de la reacción se calcula a partir de
los datos obtenidos.
MATERIALES Y METODOS
Extracción de ureasas de soya
Se trituro en un mortero 1g de soya y se agregó
20ml de etanol/agua al 30%(v/v). Se vertió en
tubos de ensayo y se centrifugo a 2500 rpm.
Durante 15 min.
Temperatura de actividad máxima de la ureasa
En un beacker de 25ml se agregó 20ml de urea
0.02M. Se llevó a baño maría hasta alcanzar la
temperatura de interés. Finalmente se agregó
0.5ml del extracto y se evaluó la conductividad
cada 10 segundos por dos minutos.
Parametros cineticos
En un beacker de 25ml se agregó 20ml de urea
0.004M. Se llevó a baño maría hasta 40°C.
Finalmente se agregó 0.5ml del extracto y se
evaluó la conductividad cada 10 segundos por dos
minutos. Se repitio el proceso con las
concentraciones 0.008, 0.012, 0.016 y 0.02M.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Temperatura de actividad máxima de la ureasa
No se logro obtener una buena toma de datos
debido a un mal manejo del conductimetro, la
incomodidad de agitar manualmente con poco
volumen y dado que durante el registro, no se
mantuvo la temperatura de la solucion constante
(fig.1).
Fig.1. Gráfica conductividad vs tiempo para cada
temperatura.
La actividad de la ureasa es variable, dado que
depende del tipo de fuente, calidad de la fuente,
metodo de extraccion y tiempo de conservacion,
sin embargo la temperatura de maxima actividad
de la enzima dependera netamente de la misma y
no de los parametros mencionados. (REVISAR
OTROS ENSAYOS y HALLAR TEMPERATURA DE
MAX ACTIVIDAD PARA UREASAS).
A pesar de no lograr obtener una gráfica de
velocidad vs temperatura para determinar la
temperatura de máxima actividad biocatalitica, en
la Fig.1. se observó que un incremento de la
temperatura está asociado a una mayor
conductividad en el medio, lo que se traduce en
que, a mayor temperatura, aumenta la velocidad
de reacción.
(REVISAR RELACION TEMPERATURA-CATALISIS
ENZIMATICA)
Parametros cineticos
En la Fig.2 se puede observar la relacion entre la
concentracion de ureasa y su actividad en el
tiempo.
Fig.2. Gráfica conductividad vs tiempo para cada
concentración.
Fig. 3. Grafica velocidad vs concentración
(SATURACION ENZIMATICA, REVISAR).
La reacción se lleva a cabo bajo catálisis de la
enzima ureasas. El mecanismo puede
ser descrito de la siguiente manera (E: Enzima
ureasas, S: Sustrato urea, ES:
Complejo enzima-sustrato, P: Productos):
La velocidad de reacción de la descomposición de
la urea se rige de acuerdo a la ley
de velocidad:
La reacción es pues de primer orden respecto a
[ES].
Como la enzima E actúa como catalizador, su
concentración total permanece igual
en el curso de la reacción. Cuando la
concentración del sustrato es suficiente se
establece un estado estacionario, en el cual la
velocidad de formación y lla velocidad
de descomposición del complejo enzima-sustrato
tienen el mismo valor:
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REFERENCIAS
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CONCLUSIONES

Se recomienda trabajar con un mayor volumen

de urea y emplear un beacker de mayor volumen
con la finalidad de facilitar el manejo de un
agitador magnetico durante la toma de datos.
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ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS

Investiga la diferencia entre conductividad equivalente y conductividad molar

Investiga por que se utiliza corriente alterna en las mediciones de conductividad de iones en
solución

Realiza una revision hemerografica de las enzimas mas utilizadas en la industria quimica
Investiga que caracteristicas presentan las enzimas termofilas

Investig los diversos mecanismos de inhibicion enzimatica

Investiga en que consiste la cinetica de relajacion y su aplicacion en enzimas

Explica la utilidad de la eccuacion Eadie-Hofstee para la cinetica enzimatica

Investiga el concepto de numero de recambio de una enzima

¿cuales son las enzias alostericas?

Investiga por que este protocolo se realiza sin solucion amortiguadora

Explica la diferencia entre el concepto de unidad enzimatica y el concepto de centro de actividad

catalitica

Investigue el proceso de hidrolisis de urea para produccion de amoniaco a nivel industrial