Laboratorio Biología Práctica

CÓDIGO: FO-DOC-112
UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

VERSIÓN: 01 PÁGINA: 1 de 8
PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016
LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

UNIDAD ACADEMICA: Programa de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
CURSO: Biología Celular.
PRACTICA Nº 7: Transporte a través de Membrana
1. OBJETIVOS
1. Estudiar los fenómenos de difusión (osmosis, difusión y diálisis) que ocurren en las membranas
citoplasmáticas.
2. Analizar y describir el efecto de soluciones hipotónicas, isotónicas e hipertónicas sobre eritrocitos
humanos
2. CONSULTA PREVIA - PREINFORME

1. Indique al menos cuatro procesos biológicos de sistemas vivientes relacionados con el mecanismo de
osmosis.
2. Qué importancia representa los mecanismos de ósmosis, diálisis y transporte activo en los requerimientos
nutricionales de la célula
3. FUNDAMENTO TEORICO
Las membranas biológicas pueden ser diferentes en cuanto a estructuras y función, sin embargo tienen en
común ciertas propiedades, por ejemplo su estructura laminar de naturaleza fluida, su composición lipo-
proteíca, con partes hidrofílicas e hidrofóbicas. La bicapa lipídica obstaculiza el fluido de moléculas polares.
Entre los lípidos se encuentran los fosfolípidos, glucolípidos y el colesterol. Las proteínas sirven de compuerta,
receptores, transductores de energía y enzimas. Estas responden a la mayoría de los procesos dinámicos que
se llevan a cabo en las membranas, y así las membranas biológicas que ejercen funciones diferentes poseen
proteínas diferentes
Las membranas poseen la propiedad funcional de permeabilidad selectiva, por ser permeables a algunas
sustancias y a otras no dependiendo fundamentalmente de su tamaño, composición química y concentración.
Tal permeabilidad puede verse afectada por cambios de temperatura, tóxicos, solventes orgánicos y la
composición química del medio que rodea a la célula.
La ósmosis Es un proceso físico-químico en el cual el agua, tiende a moverse a través de una membrana
sempermeable, desde una solución de baja concentración de soluto hacia una alta de concentración, proceso
denominado flujo osmótico. Las bicapas fosfolipídicas son esencialmente impermeables al agua pero la mayoría
de las membranas celulares contienen proteínas canales de agua que facilitan el movimiento rápido de agua
hacia adentro y hacia afuera de la células.
La difusión sustancias que se mueven de una región de mayor concentración a menor se mueven a favor de
un gradiente, la difusión es a favor de un gradiente. Las sustancias que se difunden resultan distribuidas
uniformemente. La palabra isotónica fue acuñada para describir dos o más soluciones que tienen el mismo
número de partículas disueltas por unidad de volumen y, por tanto el mismo potencial hídrico. Comparando
soluciones de distinta concentración, la concentración que tiene menos soluto (y, por tanto, un potencial hídrico
mayor) se conoce como hipotónica, y la que tiene más soluto (menor potencial hídrico) se conoce como
hipertónica.
Un medio Hipertónico tiene mayor concentración de soluto en el medio externo, por lo que una célula en dicha
solución pierde agua (H2O) debido a la diferencia de presión, es decir, a la presión osmótica, llegando incluso a
morir por deshidratación. Un medio Isotónico: la concentración de soluto es igual fuera y dentro de una célula.
Un medio Hipotónico: tiene menor concentración de soluto en el medio exterior en relación al medio interior de
la célula, es decir, en el interior de la célula hay una cantidad de sal mayor que de la que se encuentra en el
medio en la que ella habita.
ACTUALIZADO POR: CARGO: FECHA:

Andrea Morales Rozo MSc Docente ocasional 4 de Abril 2018
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Una célula sumergida en una solución con una concentración más baja de materiales disueltos, está en un
ambiente hipotónico; la concentración de agua es más alta (a causa de tener tan pocos materiales disueltos)
fuera de la célula que dentro. Bajo estas condiciones, el agua se difunde a la célula, es decir, se produce
ósmosis de líquido hacia el interior de la célula
Célula
vegetal
Célula
animal
La diálisis es el proceso por el cual se separan macromoléculas y cristaloides utilizando las diferencias en sus
tasas de difusión a través de una membrana semipermeable
4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos
 Caja de petri  Elodea una planta por
 Tubos de ensayo, probetas todo el grupo de  Sacarosa al 10%
 Beakers
laboratorio  Agua destilada
 Papa 1 por grupo  NaCl 0,9%
 Pipetas
 Uvas o ciruelas pasas,  Glicerol 0.6 molar
 Goteros
5 por grupo
 Pantalla de hemolisis  Etanol 0.6 molar
 Agua de charca
 Jeringa de 5 ml  Benedit
 Papel milimetrado
 Laminas portaobjetos  Lugol
 Papel celofán
 Laminas cubreobjetos  Nitrato de plata
 Azúcar
 Papel secante
 Almidón
 Sangre humana
 Sal

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5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
OSMOSIS EN CELULAS VEGETALES
ELODEA
 Prepare un montaje húmedo, usando agua de charca, con una hoja de elodea, teniendo cuidado que el
haz este dirigido hacia arriba. Enfoque el borde de la hoja con menor y mayor aumento.
 Observe el arreglo general de las estructuras celulares como : Membrana celular, pared celular,
cloroplastos. Etc.
 Como la célula está en su medio natural la cantidad de agua que sale y entra a la célula es
aproximadamente igual, por lo que el volumen celular permanece constante. Realice un esquema de
una de las células bajo estas condiciones y úselo como control para las futuras observaciones.
 Prepare un nuevo montaje reemplazando el agua de charca por una solución de sacarosa al 10%
 Escriba el tiempo en el que inicia la observación después de haber agregado la sacarosa. A partir de
este momento realice observaciones con mayor y menor aumento permanentemente sobre la célula
hasta que note la separación de espacios entre la pared celular y la membrana plasmática. En este
momento en la célula se ha llevado a cabo el fenómeno denominado PLASMÓLISIS.
En este mismo montaje. Retire la solución de sacarosa, sin levantar la lámina cubre-objeto, utilizando el papel
absorbente por un extremo, al tiempo que por el lado opuesto agrega gota a gota agua destilada hasta lograr
que la solución que rodea a la célula disminuya su valor hasta ser igual al valor osmótico celular. Observe como
después de un tiempo, la membrana citoplasmática vuelve a adherirse a la pared celular (DESPLASMÓLISIS).
PAPA
 Corte tres pedazos de papa de ½ cm de espesor y de 3x3 cm.
 En tres cajas de Petri, adicione a cada una de ellas solución de sacarosa 10 y 20% y agua destilada,
procurando que la solución ocupe las ¾ partes de la caja de Petri.
 Coloque tres trozos de papa en cada una de las cajas de Petri de manera que queden completamente
sumergidas en las soluciones.
 Después de una hora saque los trozos colóquelos uno a uno en el vidrio que cubre el papel milimetrado y
mídalos
UVAS PASAS
 En una probeta mida el volumen determinado de agua destilada (V1). Tenga en cuenta este volumen
 Sumerja dentro del volumen anterior, 5 uvas o ciruelas pasas. Anote este nuevo volumen ( V2)
 Retire las uvas o ciruelas pasas y deposítelas en un Beaker que contenga suficiente agua destilada hasta
cubrirlas. Déjelas allí durante dos horas.
 Retírelas y vuelva a medir su volumen colocándolas nuevamente en la probeta inicial con el mismo
volumen de agua inicial (V1). Anote este nuevo volumen (V3).
 SI V3 mayor que V2 esta diferencia corresponde al aumento de volumen de las células por ósmosis.
 Halle el volumen (V4) buscando la diferencia entre V3 y V2

El volumen de agua absorbida por cada uva o ciruela pasa se puede determinar dividiendo V 4/5
OSMOSIS EN CÉLULAS ANIMALES

 ERITROCITOS HUMANOS
Limpie con algodón empapado de alcohol la yema de un dedo. Pinche usando lanceta estéril.
Coloque una gota de sangre sobre una lámina porta-objetos a lo que previamente ha colocado una gota de

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NaCl 0,9% (solución isotónica para eritrocitos).
Observe con menor y mayor aumento. Realice esquemas de los eritrocitos y note la forma característica de
ellos.
Coloque una nueva gota de sangre de NaCl 0.4% (solución hipotónica para eritrocitos). Realice un esquema de
los eritrocitos en esta situación.
Coloque una nueva gota de sangre de NaCl 2% (solución hipertónica para eritrocitos) realice un esquema de los
eritrocitos en esta nueva situación.
DIALISIS EN CELULAS ANIMALES

 ERITROCITOS HUMANOS
En soluciones hipertónicas de glicerol y etanol los eritrocitos pueden ser hemolizados, lo que se traduce como la
salida de hemoglobina a través de la membrana celular de los eritrocitos, cuando las propiedades de esta se
modifican.
La hemolisis se puede reconocer por la aparición de una solución roja transparente en lugar
de la suspensión turbia característica de los glóbulos rojos.
 Para el siguiente experimento disponga de una pantalla de hemolisis de 20 x 20 cm, que posee una
perforación central atravesada por un hilo negro. Toda la pantalla está cubierta por papel blanco
transparente.
 Tome tres tubos de ensayo, numérelos y agregue a cada uno de ellos lo siguiente:
 Tubo N° 1 : 2 mililitros de agua
 Tubo N° 2: 2 mililitros de glicerol 0.6 molar
 Tubo N° 3: 2 mililitros de etanol 0.6 molar
 Usando tinta china roja (para simular sangre) y una fuente luminosa realice estos experimentos
haciendo un montaje como se indica a continuación.
DIALISIS EXPERIMENTO
 Prepare el montaje que se ilustra a continuación
 Agregar en una bolsa de papel celofán que contiene agua, las siguientes sustancias: azúcar, almidón,
sales en proporciones iguales y se sumerge la bolsa en agua destilada en un beaker (este montaje se
debe hacer con 24 horas de antelación al experimento).
 Pasadas las 24 horas, tome 1 mil del agua del beaker para cada tubo, y tome un 1ml del reactivo para
realizar la prueba para identificación de azúcares, almidones y sales.
 Prueba para azúcares: Benedith
 Prueba para almidón: Lugol
 Prueba para sales: Nitrato de plata

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6. RESULTADOS
OSMOSIS EN CELULAS VEGETALES
Elodea en agua de charca
Aumento:
Observaciones:
Elodea en solución de sacarosa al 10% PLASMÓLISIS.
Aumento:
Observaciones:
Elodea en agua destilada DESPLASMÓLISIS.
Aumento:
Observaciones:

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OSMOSIS EN CÉLULAS ANIMALES
Eritrocitos humanos con NaCl 0,9%
Aumento:
Observaciones:
Eritrocitos humanos con NaCl 0,4%
Aumento:
Observaciones:
Eritrocitos humanos con NaCl 2%
Aumento:
Observaciones:

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Describa los resultados al hacer la prueba para cada soluto (cambios en color, etc), el resulado es positivo?
Negativo?, cual es la función del papel celofan?
·Prueba para azúcares ·Prueba para almidón ·Prueba para sales
7. INFORME FINAL
 Cuanto tardo en presentarse el fenómeno de plasmólisis?

__________________________________________________________________
 Explique brevemente porque ocurrió?

__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
 Que tiempo tardo en presentarse el fenómeno en el montaje de sacarosa al 20%

_________________________________________________________________
_____________________________________________________
 Explique el porqué de las diferencias con el montaje anterior, si se llegaron a dar

___________________________________________________________________________________
_
____________________________________
 Finalmente al agregar agua gota a gota al anterior montaje sucede el fenómeno de
___________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________
 Que estructura celular juega papel importante en la regulación de dicho fenómeno

_____________________________________________________________________________
___________________________________________
MONTAJE DE PAPA

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TAMAÑO INICIAL TAMAÑO FINAL
MONTAJE DE UVA
Escriba el valor que obtuvo de volúmenes
V1:
V2:
V3:
V4:
El volumen de agua absorbida por cada uva, que ocurrió en estas muestras? Que tipo de transporte?:
Explique brevemente cual es la función del papel celofan y describa los cambios ocurridos, justifique su
respuesta
Explique en que consiste el fenómeno de dialisis en células animales.
8. BIBLIOGRAFIA
 Campbell, N., & Reece, J. (2007). BIOLOGIA (Septima ed.). Madrid, España: Medica Panamericana
S.A.
 Curtis, Barnes, Schnek, & Flores. (2006). Invitación a la Biología (Sexta ed.). Argentina: Medica
panamericana.
 Karp, G. (2009). Biologia Celular y Molecular (Quinta edición ed.). Mexico: The McGraw Hill Companies


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OSMOSIS EN CÉLULAS ANIMALES

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DIALISIS EN CELULAS ANIMALES

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Elodea en agua de charca

Elodea en solución de sacarosa al 10% PLASMÓLISIS.

Elodea en agua destilada DESPLASMÓLISIS.

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Eritrocitos humanos con NaCl 0,9%

Eritrocitos humanos con NaCl 0,4%

Eritrocitos humanos con NaCl 2%

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·Prueba para azúcares ·Prueba para almidón ·Prueba para sales

 Cuanto tardo en presentarse el fenómeno de plasmólisis?

 Explique brevemente porque ocurrió?

 Que tiempo tardo en presentarse el fenómeno en el montaje de sacarosa al 20%

 Explique el porqué de las diferencias con el montaje anterior, si se llegaron a dar

 Que estructura celular juega papel importante en la regulación de dicho fenómeno

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Explique en que consiste el fenómeno de dialisis en células animales.

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