Biometrologia E Paredes

DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL
“Biometrología y los nuevos desafíos en los

ensayos de laboratorio”
Dr. Esteban Paredes-Osses MSc., PhD.
“Cuarta revolución Industrial. Impactos en las mediciones”

Seminario Día Internacional de la Metrología
Instituto de Salud Pública de Chile
Nuevos Desafíos
Mediciones en: proteínas, ácidos nucleícos, azúcares, lípidos y células
¿Confiabilidad, validez y comparabilidad?

Nuevos Desafíos a nivel internacional
1. Secuencias genómicas
2. ADN / Proteínas interacciones
3. Secuencias de ARN
4. Concentraciones de transcriptos de ARN
5. Locación de transcriptos de ARN
6. Modificación de ADN
7. Secuencias de proteínas
8. Modificación de proteínas
9. Movimientos y locación de proteínas
10. Interacción de proteínas con otras moléculas (Lípidos, ácidos nucleicos, etc.)
11. Actividad celular
12. Recuento celular
¡Mediciones de alta calidad!
- Biometrología esta en una necesidad urgente de desarrollo

- Permitiría mejorar la confiabilidad y validez de los resultados de las medidas en
bioanálisis.

¿Biometrología?
La Biometrología es el campo de la metrología asociado a
la biotecnología moderna.
Se basa fundamentalmente en mediciones en el campo de la biología

molecular y se orienta al desarrollo de patrones de medición o
calibradores analíticos de utilidad para el diagnóstico clínico humano y de
animales, la identificación y cuantificación de microbios y de
microorganismos de interés industrial y en la denominación de origen.
Con trazabilidad al SI o unidades acordadas internacionalmente.
Medidas biológicas: genes, proteínas, ADN, enzimas, anticuerpos, antígenos,

compuestos biológicos, metabolitos, biomembranas, microbios, células, etc.
Valor característico biológico: contenido, secuencia, actividad, estructura, etc.,

con número y unidades específicas determinadas por métodos primarios,
métodos de referencia o procedimientos de referencia.
ADN
La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a

largo plazo de información para construir otros componentes de las
células, como las proteínas y las moléculas de ARN. Los segmentos de
ADN que llevan esta información genética son llamados genes, pero
las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o toman
parte
Instituto de en
Saludla regulación
Pública de Chile del uso de esta información genética.
Método de medición ADN (Cuantitativo)
1. Espectrometría de masa de isotopo diluido – Ultrasónico (IDMS)
Método permite una medida de concentración trazable y precisa

de ADN genómico

Método de medición ADN (Cuantitativo)
2. PCR digital (Reacción en cadena de la polimerasa)
Análisis preciso de cantidad de genes presentes en muestra.

Desarrollo de Sistema Estándar de Medidas
Comparabilidad
Métodos de Procedimientos
Referencia de Referencia
Trazabilidad
de Estándares
Datos de Material de Referencia

Referencia Certificado

Biometrología en el mundo…
China - NIM

El Instituto Nacional de Metrología, China, junto con
BGI y otros institutos y compañías de investigación
BW5201 del genoma, lanzaron el ADN humano RM (BW5201)
El ADN humano material y ADN de E. coli O157 RM (BW5202) en junio de
de referencia chino
2015
BW5202 Fasmidos seleccionados desde librerias de celulas YH
54 4 22
BW5202 54 Fasmidos 4 plataformas de seq 22 set de datos
E. coli O157 ADN  En un futuro se podría requerir más
Material de referencia
secuenciación del genoma completo de celulas
YH.
Unión Europea
JRC

Biometrología en la Comunidad Europea
Cuantificación de Sistemas de Medición

ADN/ de Referencia en Salud
nucleótidos y
proteínas / Internacional
péptidos armonización y
estandarización

USA - NIST

Biometrología en USA
Un nuevo rumbo: Organismos Genéticamente

modificados
Métodos de Referencia y Estándar para OGM
- Modificaciones genéticas en alimentos
- Proteínas expresadas para modificación genética
Actividades que se realizan con USDA/GIPSA – Biotech Grains

- Bio-cultivos, acuerdos de transferencia de material completo
- Workshops y encuestas con GIPSA para encontrar estándar
- Interlaboratorios
- Colaborativos internacionales para desarrollar material referencia
candidatos
Brasil - INMETRO

Biometrología en la región / Brasil (INMETRO)

Argentina - INTI

Biometrología en la región / Argentina (INTI)

Colombia - INM

Biometrología en la región / Colombia (INM)

Chile – ISP-INN

Biometrología en Chile / ISP
Material de Referencia Microbiológico
1. Recuento Staphylococcus aureus en leche

2. Detección de Listeria monocytogenes en leche
3. Detección de Salmonella sp. en leche.
Ensayos de aptitud Material control
Proyecciones.
1. Identificación y recuento molecular de especies bacterianas en muestras de
Material de Referencia para asignación de valor
2. Estudios de nuevos microorganismos para elaborar nuevos MR en distintas
matrices
3. Estudio de necesidades país, para la elaboración de material genético de
referencia
Estudios pilotos Procariotas (CAGW)
• Quantification of Escherichia coli in Enumeración E. coli en agua

drinking water
2017 se propuso el estudio
2018 se amplió el alcance
2018 Se discutieron diferencias regulatorias entre países
• Propuesto por NIM China, y coordinado
con BAM Características
Cepa CICC 10389 de E. coli liofilizada, caracterizada
• Diseño por China- Chile fenotípicamente, determinación del número de células
por vial, 10-100 UFC por vial.
El número de células viables (UFC) se midió según ISO
9308 (método de filtración por membrana: incubación
de membranas en medios selectivos a 35-37 ° C y
recuento de colonias después de 24 h, basado en la
producción de ácido de lactosa o la producción de la
enzima β-galactosidasa).
China dispone de los datos sobre la homogeneidad de
15 viales, la incertidumbre a corto plazo (hasta 14 días a
-20°C) y la estabilidad a largo plazo (hasta 6 meses a
-80°C).
Los resultados muestran que el nivel de homogeneidad y
la estabilidad a corto plazo pueden ajustarse al objetivo
de la comparación. El valor del material de referencia
basado en 8 laboratorios diferentes utilizando el método
ISO 9308.
Asignación del valor por Citometría de flujo

12
Conclusiones

Conclusiones
• La Biometrología es una ciencia que esta en progreso constante y

debe ser parte de las estrategias que todo país desarrollado o en vías
de desarrollo debe considerar.
• La Biometrología permite estandarizar y desarrollar materiales de

referencia en los nuevos procesos biotecnológicos que el mundo esta
produciendo.
• La mayoría de los Institutos Nacionales de Metrología (NMI) cuentan

con un área dedicada a la Biometrología y al desarrollo de nuevos
estándares, MR y/o MRC
• Chile se encuentra expandiendo su área de Biometrología. El ISP es el

laboratorio designado internacional para el desarrollo de material de
referencia
Instituto microbiológico.
de Salud Pública de Chile
“Biometrología y los nuevos desafíos en los
ensayos de laboratorio”
Dr. Esteban Paredes-Osses MSc., PhD.
“Cuarta revolución Industrial. Impactos en las mediciones”

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“Biometrología y los nuevos desafíos en los

“Cuarta revolución Industrial. Impactos en las mediciones”

Mediciones en: proteínas, ácidos nucleícos, azúcares, lípidos y células

¿Confiabilidad, validez y comparabilidad?

- Biometrología esta en una necesidad urgente de desarrollo

Instituto de Salud Pública de Chile

Se basa fundamentalmente en mediciones en el campo de la biología

Medidas biológicas: genes, proteínas, ADN, enzimas, anticuerpos, antígenos,

Valor característico biológico: contenido, secuencia, actividad, estructura, etc.,

La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a

Método permite una medida de concentración trazable y precisa

Instituto de Salud Pública de Chile

Análisis preciso de cantidad de genes presentes en muestra.

Instituto de Salud Pública de Chile

Datos de Material de Referencia

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BW5202 Fasmidos seleccionados desde librerias de celulas YH

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Cuantificación de Sistemas de Medición

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Un nuevo rumbo: Organismos Genéticamente

Actividades que se realizan con USDA/GIPSA – Biotech Grains

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1. Recuento Staphylococcus aureus en leche

Ensayos de aptitud Material control

• Quantification of Escherichia coli in Enumeración E. coli en agua

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• La Biometrología es una ciencia que esta en progreso constante y

• La Biometrología permite estandarizar y desarrollar materiales de

• La mayoría de los Institutos Nacionales de Metrología (NMI) cuentan

• Chile se encuentra expandiendo su área de Biometrología. El ISP es el

“Cuarta revolución Industrial. Impactos en las mediciones”

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