UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL

DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS

PRIMER INFORME DE MICROBIOLOGIA SANITARIA I

ALUMNO: OREGON RAMÍREZ ENRIQUE 20170515F

DOCENTE: Ing. JORGE TELLO CEBREROS

Lima Perú
2018
 ÍNDICE

 RESUMEN ………………………………………………………………3

 INTRODUCCION ………………………………………………………………3

 OBJETIVOS ………………………………………………………………4

 MARCO TEORICO ………………………………………………....................4

 RESULTADOS ………………………………………………. ………10

 DISCUSION DE RESULTADOS …………………………………………..21

 CONCLUSIONES ………………………………………………….24

 RECOMENDACIONES ……………………………… 25

 CUESTIONARIO ……………………………………………… 26

 FUENTES DE INFORMACION ………………………………………….. …31

 ANEXOS ………………………………………………..31
1. RESUMEN
En este laboratorio realizaremos tres experimentos el crecimiento de
microorganismos en agar nutritivo, el crecimiento de bacterias en caldo
nutritivo y la formación de colonias de hongos en Agar saboraud de
diferentes ambientes de la facultad. Realizaremos las experiencias en los
medios de cultivo tomando muestras en tubos y placas tanto estériles como
no esteriles.
En el procedimiento A Se puede observar mayor N° de colonias en el CEIA
(36) que en el Laboratorio de Fisicoquímica (23), esto significa que hay
más contaminación en el CEIA. No logró verificar que en la placa N° 3 de
ambos grupo no se observaran bacterias, dado que la placa fue
esterilizada y no fueron expuestas al ambiente.
Se observó que predominan los microorganismos de elevación plana y
caracteres ópticos opacos.
En el procedimiento B Se puede observar que este experimento depende
de la esterilización de los materiales a usar en cada caso.
En el procedimiento C encontramos hongos y levaduras como aspergillus y
penicillium.

2. INTRODUCCIÓN

En este informe realizaremos 3 procedimientos:

Estudiaremos y analizaremos como los microorganismos en este caso:
bacterias y hongos se van desarrollando en los medios de cultivo ya
mencionados, con el objeto de estudiar sus características como
morfología y estructura también conoceremos las condiciones que permiten
su desarrollo comparando los resultados en cada lugar donde realizaremos
la exposición. Aprenderemos a trabajar con los materiales de microbiología
de forma sistemática y cuidadosa evitando en lo posible cometer errores
que nos lleven a resultados inconsistentes.
El aire contiene en suspensión diferentes tipos de microorganismos,
especialmente bacterias y hongos. La presencia de uno u otro tipo
depende del origen, de la dirección e intensidad de las corrientes de aire y
de la supervivencia del microorganismo.
Las bacterias son organismos microscópicos, unicelulares y procariotas
(carentes de núcleo), a veces provistos de órganos locomotores llamados
cilios y flagelos.
Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de
sus características tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser
organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y, mientras
están vivos, no cesan de crecer.
3
3. OBJETIVOS

Objetivo general

Exponer a diferentes ambientes muestras conteniendo agar nutritivo, agar

sabouraud y caldo nutritivo para saber que microorganismos están
presentes en cada ambiente.

Objetivos específicos

 En el procedimiento A conoceremos el crecimiento de bacterias en

agar nutritivo de diferentes ambientes como el CEIA y el laboratorio
de fisicoquímica a partir de 4 tubos con agar nutritivo estéril fundido
a 45 °C a 3 petris estériles y un petri no estéril, esperando que el
agar hay solidificado para destapar el Petri y exponer el agar al aire
por 10 minutos para luego incubar los petris a 37 °C por 48 horas.
 En el procedimiento B conoceremos el crecimiento de bacterias en
caldo nutritivo en las siguientes condiciones: Pipeta estéril, tubo
estéril, pipeta no estéril, tubo estéril, pipeta no estéril, tubo no
estéril.
 Identificaremos hongos en diferentes ambientes como el baño de
varones de la FIA, Biblioteca de la FIA, Aula vacía, Laboratorio de
Microbiología y Sala de tesis de la FIA; determinando el número de
colonias en cada uno de ellos.

4. MARCO TEÓRICO

Microbiología del Aire

Características de las Bacterias

Entre las principales características de las bacterias figuran su tamaño, su

forma, su estructura y su tipo de agrupación. Estas características
constituyen la morfología de la célula. El tamaño de una bacteria es
mensurable con exactitud, no obstante sus dimensiones microscópicas
Según su especie, las bacterias son esféricas, en forma de bastón o de
espiral. En algunas especies, las bacterias se organizan en grupos, siendo
los más comunes de ellos pares, racimos, cadenas y filamentos. Conviene
conocer estas formas de agrupación porque con frecuencia son
característica de un grupo taxonómico. Por ejemplo un género.
Algunas especies de bacterias poseen también apéndices que se ponen de
manifiesto gracias a las técnicas especiales de tinción o por el microscopio
electrónico.

4
Aspectos morfológicos como el tamaño, la forma y la agrupación se
consideran características morfológicas generales de las células
bacterianas.
La célula bacteriana posee una anatomía intracelular característica,
descubrimiento que pudo hacerse mediante el perfeccionamiento de las
técnicas del microscopio electrónico y gracias a la invención de
instrumentos para llevar a cabo cortes sumamente finos en una bacteria.
Las expresiones citología microbiana y anatomía bacteriana se ha vuelto
muy comunes en las obras especializadas en microbiología.

EL TAMAÑO, FORMA Y TIPOS DE AGRUPACIONES BACTERIANAS

TAMAÑO

Las bacterias son de pequeño tamaño, por lo que para su observación es

necesario el microscopio. Su tamaño se mide en micras
(1µm = 10-6m) y oscila entre 0,2µm de algunos cocos y las 5-8µm de largo
por 1,5µm de ancho de los bacilos.
El tamaño es una característica para cada tipo bacteriano y se puede medir
con gran exactitud y fiabilidad.

FORMA

La forma de una bacteria como organismo individual viene dada por la

rigidez de su pared. Es igualmente una característica de cada tipo
bacteriano. Las bacterias suelen adoptar fundamentalmente alguna de las
formas siguientes: esférica, cilíndrica, helicoidal, filamentosa o formas
intermedias de los casos anteriores. Cuando la bacteria tiene forma
esférica recibe el nombre de coco y a su forma se la denomina cocoidea.
En los cocos aislados su esfericidad puede oscilar entre formas esferoides,
ovoides, lanceoladas y reniformes. Cuando la bacteria adopta forma
cilíndrica recibe el nombre de bacilo y a su forma se la denomina bacilar.
Las formas alargadas de los bacilos aislados pueden ser rectas, ahusadas,
ramificadas, curvas y espirales. Muchos autores clasifican dentro de los
bacilos a las bacterias con incurvaciones: las que presentan una sola
incurvación en forma de coma, más o menos alargada y, en ciertas
ocasiones, algo retorcida, los vibrios; y las que presentan varias
incurvaciones, los espirilos.
En general hay muchas diferencias en cuanto a la longitud de este tipo de
bacterias, el número de espiras y la amplitud de cada una de ellas. En
algunos casos son muy pequeñas, con espirales muy apretadas y, en otros
casos, todo lo contrario. Cuando adoptan formas filamentosas suelen
presentar al microscopio óptico un aspecto muy similar al de los hongos.
Estas formas son características de las bacterias llamadas filamentosas.
Las bacterias que presentan formas intermedias entre los cocos y los
bacilos se denominan cocobacilos, que en muchos casos, más que una
forma característica de una u otra especie, corresponden a la etapa inicial
del desarrollo de muchos bacilos, aunque no siempre.

5
 AGRUPACIONES
A las agrupaciones bacterianas las vamos a clasificar en dos grandes
grupos: las agrupaciones microscópicas y las agrupaciones
macroscópicas.

Agrupaciones microscópicas.
Si la forma de una bacteria aislada depende de la rigidez de su pared
celular, la agrupación depende de comose lleva a cabo la fisión binaria
de la célula y que las células descendientes queden unidas o no. Son
visualizables por microscopía y corresponde a lo que realmente se
entiende por agrupación bacteriana, es decir, la tendencia que presentan
los distintos tipos bacterianos para asociar las células del mismo tipo entre
sí formando grupos de 2 o más bacterias. La agrupación microscópica es
frecuentemente característica de un mismo grupo taxonómico, por
ejemplo, de un género. Es importante destacar que no todas las formas
bacterianas forman agrupaciones microscópicas. Por ejemplo, los espirilos
nunca se asocian mientras existen otras especies bacterianas en las que
su agrupación es muy característica y útil a la hora de establecer
clasificaciones taxonómicas, siendo las formas cocoideas las más
frecuentes en este sentido, y en menor proporción las formas bacilares.
Las formas cocoideas se pueden agrupar de la siguiente forma:
Diplococos: cuando se divide la bacteria en un único plano
permaneciendo las dos células hijas formando parejas.
Tétradas: la bacteria se divide en dos planos perpendiculares entre sí
formando grupos característicos de 4células situadas en un mismo plano.
Estafilococos: la división tiene lugar en tres planos diferentes sin tener
necesariamente ninguna relación geométrica entre ellos. Se forman
racimos de cocos
Sarcinas: esta agrupación se forma como consecuencia de la división de
la bacteria en tres planos perpendiculares originando agrupaciones
cuboidales en torno a 8 cocos o más.
Las agrupaciones bacilares son menos frecuentes pero en ocasiones
pueden aparecer como:
Diplobacilos: corresponde a dos bacilos unidos como pareja y originado
por la división en un único plano perpendicular aleje longitudinal del bacilo
Estreptobacilos: agrupaciones de bacilos a modo de cadena
Formas irregulares: en ocasiones los bacilos pueden agruparse en
formas muy irregulares parecidas a letras chinas.

Agrupaciones macroscópicas: colonias.

Estas agrupaciones son visualizadas a simple vista y corresponden al
crecimiento en un punto de una única línea celular hasta formar una
colonia (todas las células que componen la colonia provienen de una única
célula). El cultivo se realiza en un medio de cultivo sólido para formar
colonias que serán distintas y características para cada tipo bacteriano; el
medio sólido impide el posible movimiento de los individuos dela colonia y

6
favorece su agrupamiento. Para obtener colonias bacterianas nunca se
empleará directamente un medio de cultivo líquido. Estas colonias
presentan una morfología macroscópica fácilmente reconocible y variable
en función de las características del medio de cultivo sólido donde se ha
desarrollado la bacteria constituyen un criterio de gran importancia a la
hora de hacer una valoración taxonómica de la misma.
El tipo de bacteria problema: Las bacterias de mayor movilidad presentan
mayor tendencia a dar colonias extendidas y planas frente a las que no
presentan esta característica .Es importante considerar que un mismo tipo
de bacteria puede dar lugar a distintos tipos de colonias dependiendo del
medio de cultivo sólido empleado, e igualmente, distintos tipos bacterianos
pueden crecer formando colonias similares. De cualquier forma la
verificación de las diferentes formas, tamaños y aspectos de las colonias
va a servir como: Un dato más en la tipificación de la bacteria problema.
Una medida de control para una siembra correcta. Lo ideal es que las
colonias se encuentren más separadas que juntas y que en el proceso de
la siembra no haya habido contaminación. Y verificación de que el medio
de cultivo no está contaminado .Los medios sólidos en los que se verifican
las colonias pueden ser en placa o en tubo con agar inclinado, y siempre,
sembrándolo por el sistema de estrías.

Factores que influyen en la flora microbiana del aire

Los principales factores que intervienen, son: Humedad relativa,
temperatura, oxígeno, materia orgánica y radiaciones.

Humedad relativa:
Es el factor más importante. Cuando la humedad relativa del aire decrece,
disminuye el agua disponible para los microorganismos, lo que causa
deshidratación y por tanto la inactivación de muchos de ellos. La
desecación puede causar una pérdida de viabilidad en las capas más bajas
de la atmósfera, especialmente durante el día. A mayores altitudes, las
condiciones son más favorables por la evaporación y algunas esporas
pueden germinar en las nubes. La humedad relativa de la atmósfera varía
de un 10-20 % en las regiones desérticas. El límite menor para el
crecimiento de hongos es del 65 %. Las bacterias requieren una mayor
humedad. Las Gram negativas resisten peor la desecación que las
positivas; esto se refleja en que existe poca evidencia de transmisión por el
aire de bacterias Gram negativas, con la excepción de Legionella (Lidwell,
1990).

Temperatura:
Está muy relacionada con la humedad relativa, por lo que es difícil separar
los efectos que producen ambas. La temperatura en la troposfera varía de
40° C cerca de la superficie, a –80° C en las capas altas, alcanzándose
temperaturas de congelación entre 3-5 Km. La congelación no destruye los

7
microorganismos pero no pueden multiplicarse. Diversos estudios muestran
que el incremento de la temperatura disminuye la viabilidad de los
microorganismos (Mohr, 1997).

Oxígeno:
Se ha observado una correlación negativa entre la concentración de
oxígeno y la viabilidad, que aumenta con la deshidratación y el tiempo de
exposición. La causa de la inactivación podría ser los radicales libres de
oxígeno.

Materia orgánica:
La atmósfera contiene muy poca concentración de materia orgánica, y en
la mayoría de los casos, es insuficiente para permitir el crecimiento
heterotrófico. El agua disponible es escasa por lo que, incluso el
crecimiento de microorganismos autótrofos está limitado.

Radiaciones
La inactivación que producen en los microorganismos depende de la
longitud de onda e intensidad de la radiación. Las de longitud de onda corta
(rayos X, rayos (γ) contienen más energía, son ionizantes y alteran o
destruyen el DNA de los microorganismos. Otros factores, como la
humedad relativa, concentración de oxígeno y la presencia de otros gases,
influyen en el efecto que producen las radiaciones sobre los
microorganismos. La forma de interacción es poco conocida, pero la
desecación y congelación pueden proteger a los organismos de las
radiaciones.
La exposición a radiaciones de corta longitud de onda, como la luz
ultravioleta, es la principal causa de pérdida de viabilidad de los
microorganismos que entran en la atmósfera. Las radiaciones ultravioletas
aumentan con la altura, debido a una menor retención, lo que causa
mutaciones y la muerte de los microorganismos. Algunos se protegen de
los efectos letales de la radiación por los pigmentos que producen, así
como por el polvo y las gotas de saliva y moco, debido al escaso poder de
penetración de la luz ultravioleta.
En la estratosfera hay una capa con una gran concentración de ozono que
mata a los microorganismos, pero al mismo tiempo, actúa absorbiendo la
radiación ultravioleta. Por todas estas razones, la estratosfera constituye
una barrera para los microorganismos vivos procedentes de la troposfera
(Atlas y Bartha, 2002).

Otros factores:
Diversos estudios mostraron que el aire atmosférico producía un mayor
grado de inactivación que el aire inerte obtenido en el laboratorio. La causa
podría ser las reacciones entre el ozono y las olefinas debido a una
combinación de factores que incluyen concentración de contaminantes e
iones en el aire, humedad y fluctuaciones de la presión, al conjunto de los
cuales se les llama factores del aire abierto (Mohr, 1997).

8
Medios de cultivos de Microorganismos:

Agar nutritivo:
El agar Nutritivo garantiza el crecimiento de todos los microorganismos de
importancia clínica tanto grampositivos como gramnegativos, hongos y
levaduras, además de proporcionar una herramienta para el mantenimiento
y confirmación de aislamientos primarios El agar Nutritivo se prepara a
partir del medio de cultivo deshidratado, materia prima producida por la
casa BBL y tiene la siguiente composición en g/l
Extracto de carne...............................................................................3.0 g
Peptona........ .....................................................................................5.0 g
Agar............................................................................................... 15.0 g

Agar Nutritivo (Concentración: 20 g en 1 litro)

Se utilizó 2.76 g de agar en 120 ml de agua.

Caldo Nutritivo:
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de
microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. Está descripto
en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y otros
materiales de importancia sanitaria. Contiene pluripeptona (una mezcla de
partes iguales de peptona de carne y de caseína) y extracto de carne que
constituyen la fuente de carbono y nitrógeno necesarias para el adecuado
desarrollo bacteriano. Puede ser utilizado además, como
preenriquecimiento en la búsqueda de Salmonella spp. a partir de
alimentos, ya que permite recuperar células dañadas, diluir metabolitos
tóxicos y sustancias inhibitorias. Composición ( gr /litro)

Pluripeptona...............................................................................................5.0
Extracto de
carne..................................................................................................... 3.0.
pH final: 6.9 ± 0.2

Caldo Nutritivo (Concentración: 8 g en 1 litro)

Se utilizó 1.08 gr de caldo en 135 ml de agua.
Agar Sabouraud:

Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de hongos

patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de levaduras.
Recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente
los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo). En el medio de cultivo,

9
 la peptona, la tripteína y la glucosa son los nutrientes para el desarrollo de
microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de
cloranfenicol y el pH ácido, inhiben el desarrollo bacteriano y favorecen el
crecimiento de hongos y levaduras. El agar es el agente solidificante.
Puede ser suplementado con otros agentes selectivos de crecimiento.
Glucosado Composición (en gramos por litro)
Peptona...................................................................................5.0.
Tripteína..................................................................................5.0.
Glucosa.................................................................................40.0.
Cloranfenicol......................................................... .............0.05.
Agar.................................................................................... 15.0.
pH final: 5.6 ± 0

Agar Sabouraud (Concentración: 65 g en 1 litro)

Se utilizó 4.875 g de agar en 75 ml de agua.

5. RESULTADOS

Procedimiento A Crecimiento de bacterias en agar nutritivo

Grupo N° 2
Tabla 1
Ambiente Biblioteca
Características La placa se colocó al fondo, con
pocas personas a su alrededor.

Día de exposición 28 de Agosto 2018

Hora 13:30-13:45 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 7 días
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 (el encargado de la muestra)
Temperatura 19°C (Temperatura de ambiente)

10
Grupo 2: Agar nutritivo Tabla 2
Placa
Placa N°1 Placa N°2 Placa N°4
Grupo N°3
Estéril Estéril NO Estéril
Estéril
Ambiente: Sector C Sector D
Sector A Sector B
2 biblioteca
Pelo Huella
I. Estéril I. NO NO abrir NO abrir
primer piso estéril
N° de
23 20 13 1 3 4 42
Colonias
X1=2mm
X2=3mm X1=0.5mm X22=1mm
X1=3mm
X3=3mm X2=0.5mm X23=1mm
X2=1mm
X4=1mm X3=0.5mm X24=1mm
X3=0.5mm
X5=2mm X4=1mm X25=1mm
X4=4mm X1=3mm
X6=3mm X5=1mm X26=1mm
X5=Irregu. X2=2.5mm
X7=4mm X6=1mm X27=1mm
X6=4mm X3=Irregular
X8=4mm X7=1mm X28=1mm
X7=2mm X4=2mm
X9=2mm X8=1mm X29=1mm
X8=1mm X5=1mm
X10=3mm X1=3mm X9=1mm X30=1mm
X9=1mm X6=2mm X1=3mm
X11=5mm X2=1mm X10=1mm X31=1mm
X10=1mm X7=1mm X2=4mm
Tamaño X12=1mm X1=3mm X3=1mm X11=1mm X32=1.5mm
X11=1mm X8=4mm X3=4mm
X13=7mm X4=2mm X12=1mm X33=1.5mm
X12=1mm X9=1mm
X14=2mm X13=1mm X34=1.5mm
X13=1mm X10=1mm
X15=2mm X14=1mm X35=1.5mm
X14=1mm X11=1mm
X16=8mm X15=1mm X36=2mm
X15=1mm X12=1mm
X17=3mm X16=1mm X37=2mm
X16=1mm X13=2.5mm
X18=2mm X17=1mm X38=2mm
X17=1mm
X19=1mm X18=1mm X39=2mm
X18=1mm
X20=4mm X19=1mm X40=3mm
X19=1mm
X21=2mm X20=1mm X41=3mm
X22=3mm X21=1mm X42=4mm
X23=4mm

Lisos: x1, x3,

x11, x20, x23, Lisos: x1, x2,
Liso: x1, x8 Lisos: x1, x2, x3, x4, x9, x10, x11, x12,
x22, x21, x19 x3, x8, x9, x10,
Liso: x2, x13, x14, x15, x16, x17, x18, x19, x20, x30,
lobular:x7, x11, x12, x13,
Margen o Ondulantes: x3 Lisos: x1, x31, x32, x33, x34, x35, x36, x37, x38, x39,
x2, x5, x6, x10, x14, x15, x16, Liso:x1
borde x2, x4, x5, x6, Ondulante x2, x3, x4 x40, x41, x42.
x12, x15, x16 x17, x18, x19, x20
x7, x9, x10, s:x1 Ondulantes: x5, x6, x7, x8, x21, x22, x23,
ondulante:x8 Ondulantes:
x11, x12, x3 x24, x25, x26, x27, x28, x29.
, x13, x4, x9, x4, x6, x7
x14, x17, x18
Plano: x7, x1,
x2, x3, x4, x5, Plano: x1, x2,
Plano: x1, x2, x3, x4, x9, x10, x11, x12,
x6, x9, x10, x3, x4, x8 Plano: x1, x2,
Plano: x3 x13, x14, x15, x16, x17, x18, x19, x20, x5, x6,
x14, x15, x17, Cóncavo: x6, x4, x5, x6, x7,
Plano: Cóncavo x7, x8, x21, x22, x23, x24, x25, x30, x31,
Elevación x18, x19, x22 x7, x9, x10, x11, x8, x9, x10, Plano:x1
x1, x2, x3 : x1, x2, x32, x33, x34, x35, x36, x37, x38, x39, x40,
Cóncavo: x8, x12, x13, x14, x11, x12, x13
x4 x41, x42.
x23, x20, x8, x15, x16, x17,
Cóncavo: x26, x27, x28, x29.
x13, x12, x16, x18, x19, x20
x21
Crema: x1,
Crema: x1, x5,
x3, x4, x5, x10,
x6, x7, x11, x12,
x14, x15, x17, Crema: x1, x2, x3, x4, x9, x10, x11, x12,
x13, x14 x15. x16,
x18, x19, x20, x13, x14, x15, x16, x17, x18, x19, x20, x5, x6,
x17, x18, x19, Todas Todas
Pigmentaci x21, x22, x23. Todas son Crema: x7, x8, x21, x22, x23, x24, x25, x28, x29,
x20. son son
ón Anaranjado: cremas x1 x30, x31, x32, x33, x34, x35, x36, x37, x38,
Anaranjado: cremas crema
x6, x7, x8, x9. x39, x40, x41, x42.
x2, x3, x4.
Amarillo: x2, Amarillo: x26, x27.
Amarillo: x8,
x11, x12, x13,
x9, x10.
x16.
Todas Todas Todas
Todas son Todas son Todas son
C. Óptico son son son Todas son opacas
opacas opacas opacas
opacas opacas opacas

Nota: Los resultados se vieron 7 días después de la preparación.

11
 Placa N° 1 Placa N° 3 Placa N° 4
GRUPO Placa N° 2 estéril
estéril estéril no estéril

Centro de ZONA B ZONA C ZONA D

ZONA A
4 estudiantes (huella (inoculador (inoculador NO ABRIR NO ABRIR
( Pelo)
(FIA) dactilar) estéril) no estéril)

Número de
35 3 5 1 1 - 3
colonias
X1=6.5 X19=6
X2=9 X20=3
X3 =6 X21=13
X4=1 X22=1.4
X5=8 X23=1.2
X6=3 X24=1.9
X7=2 X25=4
X8=4.5 X26=1
X9=2.3 X27=2,2 X1=4.5
X1=3
X10=5 X28=25 X2=2.5
X1=3 X2=3.5
X11=2 X29=2 X3=2 X1=6 X1 =6.5 mm -
Tamaño X2=3.5 X3=2.5
X12=3 X30=4.2 X4=3
X3=3
X13=1.8 X31=2 X5=2.7
X14=3 X32=7
X15=1 X33=1.1
X16=2.3 X34=3
X17=2.9 X35=1
X18=4.5

Liso (18)
Margen Lobular (6) Liso Liso Liso Liso - Liso
Nodular(11)

Convexa (7) /
Elevación Planas Planas Planas Planas - Planas
Plana (5)
Amarillo (3)
Crema (13) Anaranjado
Anaranjado
Amarillo (12) Amarillo (1) (2)
Pigmentación (1) Amarillo Amarillo -
Anaranjado (5) Crema (2) Crema (1)
Crema (1)
Blanco (5)

Caracteres
opacas opacas opacas opacas opacas - Opaco
ópticos

12
 Tabla 4
Ambiente Biblioteca
Características La placa se colocó al fondo, con
pocas personas a su alrededor.

Día de exposición 28 de Agosto 2018

Hora 13:30-13:45 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 7 días
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 (el encargado de la muestra)
Temperatura 19°C (Temperatura de ambiente)

Procedimiento B Crecimiento de bacterias en caldo nutritivo

Grupo 1
Tabla 5
Grupo N°1 Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril
Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril
Cantidad de crecimiento Sin crecimiento Moderado Abundante
Distribución de Sin crecimiento Turbidez Película
crecimiento
olor Imperceptible Imperceptible Pútrido

Fig 1

13
 Grupo 3

Tabla 6

N° 1 N° 2 N° 3

Grupo N°3 Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril

Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril

Cantidad de Moderado Escaso Abundante

crecimiento

Distribución de Sedimento Turbidez Película

crecimiento

Olor Pútrido Imperceptible Imperceptible

Grupo 5
Tabla 7
Grupo N°5 Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril
Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril
Cantidad de crecimiento escaso abundante moderado
Distribución de Transparente película Turbidez
crecimiento
olor aromático pútrido pútrido

14
 Procedimiento C
Se observaran colonias de hongos en Agar Saboraud
Tabla 8

Grupo N° 1
ambiente Baño de varones 2° piso
N° de hongo 4
Tipo de hongo - penicillium (3)
- aspergillus (4)
- candida spp (1)
- levadura (2)
Algunas características - penicillium: forma circular oscura con
bordes bancos.
- aspergillus: de un color verde oscuro.
- candida spp: de un color blanco circular.
- levadura: de color rojizo y blanco.

Día de exposición 28/08/18

Tiempo de exposición / días de 15 minutos / 6 días

reproducción

Hora / temperatura 1:49 pm – 2:04 pm / 18°C

Condiciones Poca luz solar.

Dos personas.
Poca ventilación.
Olor desagradable.
Puerta abierta.

15
 Fig 2

Grupo 2:
Tabla 9

Grupo 2

Ambiente Laboratorio de Fisicoquímica

Tiempo de exposición: 15 minutos

Fecha de exposición 28/08/18
Numero de hondos observados 8 hongos
Tipos de hongos Penicillium spp (3), levaduras (5)

 Levaduras: Son de forma circular, de

color blancos y de tamaño pequeño a
Características mediano.
 Penicillium spp: Forma circular, de
contextura algodonosa, con bordes
blancos y centro gris verdoso

16
 Tabla 10
Ambiente Laboratorio de Fisicoquímica
Características La placa se colocó al medio. El
lugar estaba ventilado y sin polvo.
Día de exposición 28 de agosto 2018
Hora 13:30-13:45 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 7 días
Tipo de Agar Agar Sabouraud
Cantidad de personas 1 (el encargado de la muestra)
Temperatura 21°C (Temperatura de ambiente)

 Grupo N° 3
Tabla 11

Ambiente Aula vacía 2 piso

Número de hongos 2

Tipos de hongos Aspergillus (1), Candida (1)

Características Aspergillus: Tiene forma concéntrica,

núcleo verde oscuro.

Cándida: Colonia pequeña de color

blanco sin forma definida.

17
Factores de crecimiento del procedimiento C:

Tabla 12

Ambiente Aula vacía 2 piso (161)

Día de exposición 28/08/18

Hora 1:50 pm – 2:05 pm

Tiempo de exposición/días de 15 minutos / 6 dias

reproducción

Cantidad de personas 0 personas

Características del lugar donde se Puerta a medio abrir, había 1 ventana

dejó la muestra. abierta.

18
 Grupo 4

Observación: estuvo expuesto al Ambiente: Laboratorio de Microbiología

Ambiente durante: 15min

Tiempo de cultivo: 168 horas

Hora de exposición : 2:04 pm--2:19pm
Temperatura 20°C
Fecha de exposición 27/08/18
Numero de hondos observados 14
Tipos de hongos penicillium spp(5), penicillium cándida
(2) levadura(7)

Características 5 hongos de color negro

2 hongos de color blanco
6 levaduras de color crema
1 levadura de color naranja
Tabla 13

Fig 4

19
 Grupo 5
Factores de crecimiento del procedimiento C:
Ambiente
Día de exposición
Hora
Tiempo de exposición/días de
reproducción
Temperatura
Ubicación de la muestra
Cantidad de personas
Características del lugar donde
se dejó la muestra.
Tabla 14
Biblioteca sala de tesis/ 2° piso
28/08/18
2:05 pm – 2:20 pm
15 minutos / 6 dias
22 °C
Al centro de la sala de tesis, en una mesa ceerca al
pasillo de salida
8 personas en mesas
3 personas en computadoras
1 personas en recepción
1 persona tomando la muestra
Puerta completamente abierta
Seis ventanas cerradas
Ordenado y aparentemente limpio
20
 Crecimiento de bacterias en agar sabourand:
Tabla 15
Grupo N° 5
ambiente Sala de tesis
N° de hongo 2

Tipo de hongo Aspergillus-niger

% de cada hongo
Algunas caracteristicas
levaduras
Aspergillus ocupa 75% de la superficie
Levadura ocupa 75% de la profundidad
Tamaño: grande
Forma: filamentosa
Superficie: umbilicada
Borde: irregular(espiculado)
Levaduras: verde opaco
Colonias blancas con micelio aéreo de
color negro

6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

PROCEDIMIENTO A:

a) Grupo2: (Laboratorio de Fisicoquímica)

 En la placa N° 1 la cual fue expuesta en el laboratorio de fisicoquímica se

observa la presencia de 23 colonias cuyos tamaños varían de 1 mm a 8 mm, con
un tipo de margen liso, lobular y ondulante, de elevación plana y cóncava ,
cromogénesis crema y anaranjada con caracteres ópticos opaco.
 Para la placa N°2 la cual se dividió en 4 sectores A, B, C y D se observó lo
siguiente, para el sector A (cabello), se encontró la formación de 20 colonias, en
el sector B (Huella dactilar) se encontraron 13 colonias, en el sector C
(inoculador estéril), se observó 1 colonia, y para el sector D (inoculador no
estéril), se encontraron 3 colonias.
 Para la placa N°3 (placa estéril) se observaron 4 colonias no verificándose que
no existan microorganismos por lo cual el procedimiento debe repetirse.

21
 Para la placa N°4 se observó la presencia 42 colonias, con las siguientes
características morfológicas predominantes: En tamaño predominan las de
1mm, de margen liso, elevación plana, cromogénesis crema y caracteres ópticos
opacos.

b) Grupo4:(Centro de Estudiantes)
 En la placa N° 1 expuesta en el Centro de Estudiantes se observó la formación
de 35 colonias de microorganismos cuyos tamaños varían de 1mm a 6.5mm,
con margen liso predominante, de elevación plana, de cromogénesis crema,
naranja y blanco, y de carácter óptico opaco.
 En la placa N°2, para el sector A (cabello) se observaron la formación de 3
colonias, para el sector B (huella) se observaron 5 colonias, para el sector C
(inoculador estéril), se observó la presencia de 1 colonia, en el sector D
(Inoculador no estéril), se observaron 1 colonia.
 Para la placa N°3 se observaron 3 colonias
 Para la placa N°4 no se tomaron datos

PROCEDIMIENTO B:

a) Grupo 1:

 En el tubo N°1 no se observó ningún crecimiento de bacterias verificándose

el experimento ya que se tenía una pipeta estéril y un tubo no estéril con un
olor casi imperceptible
 En el tubo N° 2 se notó una moderada cantidad de bacterias, con distribución
de crecimiento túrbida y imperceptible, esto se debió por el uso del tubo no
estéril.
 En el tubo N° 3 se notó una abundante cantidad de bacterias con distribución
de crecimiento película, con un olor pútrido esto debido al uso de la pipeta
no estéril.

b) Grupo 3:

 En el tubo N°1 se observó una moderada formación de bacterias con una

distribución de crecimiento en película y olor pútrido no se verifica el
experimento ya que se utilizó un tubo estéril y una pipeta estéril se debe
repetir la experiencia
 En el tubo N°2 se notó escasa presencia de bacterias, con distribución de
crecimiento turbio con olor imperceptible , dado a que se utilizó un tubo no
esterilizado

22
  En el tubo N°3 se observó una abundante presencia de bacterias con olor
imperceptible y una distribución de crecimiento en película, debido al uso de
la pipeta no estéril.

c) Grupo5

 En el tubo N°1 se observó una escasa formación de bacterias con una

distribución de película y olor aromático.
 En el tubo N°2 se notó una abundante presencia de bacterias, con
distribución de crecimiento en película con olor pútrido , dado a que se
utilizó un tubo no esterilizado
 En el tubo N°3 se notó un moderado crecimiento de bacterias con una
distribución de crecimiento turbia uniforme y olor ligeramente pútrido esto
debido a que se utilizó una pipeta no esterilizada.

PROCEDIMIENTO C:

a) Grupo 1: Baño
Se observaron 10 hongos: 3 penicillium, 4 aspergillus, 1 candida y 2
levaduras.
b) Grupo 2: Laboratorio de Fisicoquimica
Se observaron 8 hongos: 3 penicillium spp y 5 levaduras.
c) Grupo 3: Aula Vacía
Se observaron 2 hongos: 1 aspergillus y 1 candida.
d) Grupo 4: Laboratorio de Microbiología
Se observaron 14 hongos: 5 penicillium spp, 2 candidas y 7 levaduras.
e) Grupo 5: Sala de tesis
Se observó 1 hongo el aspergillus.

23
7. CONCLUSIONES
Procedimiento A:
“Colonias de bacterias desarrolladas en placas en medio agar nutritivo”:

 Se puede observar mayor N° de colonias en el CEIA (36) que en el

Laboratorio de Fisicoquímica (23), esto significa que hay más
contaminación en el CEIA , y esto se debe a la cantidad de personas
dentro del Centro de Estudiantes, como también por factores como la
limpieza, la ventilación, el orden la hora y el día.
 No logró verificar que en la placa N° 3 de ambos grupo no se observaran
bacterias, dado que la placa fue esterilizada y no fueron expuestas al
ambiente, hubieron algunos fallos que se tuvieron al momento de realizar
el experimento como por ejemplo el contacto con el medio ambiente.
 Se observó que predominan los microorganismos de elevación plana y
caracteres ópticos opacos.
.
Procedimiento B:
“Crecimiento de bacterias en caldo nutritivo”:

 Observamos que este experimento depende de la esterilización de los

materiales a usar en cada caso.

Procedimiento C:
“Cultivos de hongos en placas con agar sabouraud”:

Cuando se colocó el agar sabouraud en todos los ambientes se lograron

encontraron levaduras y hongos.

Los Hongos encontrados son:

o Aspergillus (Baño de hombres, aula vacía , sala de tesis )

o Penicillium (Baño, biblioteca, Laboratorio de Microbiología )
o Candida (Aula vacia)
o Levaduras(Baño, biblioteca, Laboratorio de Microbiología)

24
 8. RECOMENDACIONES

 No agitar los tubos de ensayo al momento de observar los resultados, pues ya

no se distingue adecuadamente la distribución del crecimiento (anillo o
sedimento).
 No contaminar los materiales ya esterilizados como las pipetas, placas ,tubos
de ensayo,etc
 Procurar mantener selladas las placas Petri, para evitar el ingreso de
microorganismos.
 Hacer un control riguroso de los tiempos requeridos en los experimento para
evitar complicaciones posteriores.
 Realizar bien la medición del peso de los medios de cultivo, así como del
volumen de agua destilada, para llevar a cabo los experimentos de manera
exitosa
 Al momento de hacer el trasvase del agar nutritivo hacia los recipientes de
prueba demorar el menor tiempo posible, ya que si la temperatura de este baja
de 45° tiende a solidificarse.
 Se debe asegurar la correcta ubicación de las placas Petri en el ambiente a
tomar las muestras, a fin de obtener resultados óptimos en condiciones
identificadas previamente.
 Se debe tomar en cuenta la vida media de los microorganismos, los cuales
viven aproximadamente 48 horas luego de ser cultivados, pasado ese tiempo
su identificación y su estudio no daría resultados óptimos.

25
9. CUESTIONARIO
1. ¿Qué factores influyen en la flora microbiana del aire?
En el aire no hay suficientes nutrientes para el desarrollo bacteriano, por ello, no
es muy buen medio para los microorganismos. Además, la inadecuada
disposición de la basura y las excretas expuestas al medio aire son algunos de
los emisores más importantes de microorganismos, quistes, esporas, polen, etc,
que pueden estar adheridos al polvo.
Los factores son:
 Humedad Relativa
Una humedad relativa muy elevada favorece el crecimiento de los
microorganismos, en especial aquellos que se encuentran en la
superficie. Por ejemplo la deshidratación/secado es utilizada desde
hace tiempo como técnica de conservación de alimentos. Sin embargo
su almacenaje debe efectuarse en condiciones de baja humedad
relativa, en caso contrario, la humedad (agua) presente en la atmosfera
tarde o temprano acabara por aumentar la cantidad de agua del
alimento, aumentando asi el riesgo de proliferación microbiana.
 Temperatura
La temperatura es uno de los factores más relevantes en el crecimiento
de los microorganismos. Si los relacionamos con la seguridad
alimentaria termina siendo el más importante de todos. Con respecto a
las toxinfecciones de origen alimentario, el utilizar una temperatura
inadecuada en el procesado de alimentos se apunta como la principal
causa de toxiinfecciones.
 Tamaño de las partículas
Los microorganismos se fijan en el aire depositándose con mayor
rapidez las adheridas a las partículas mayores.
 Ventilación
Las bacterias permanecen en el aire durante lapsos variables
dependiendo de la velocidad de las corrientes es por ello que un
ambiente activo contiene más bacterias que otro seco.
 Aerosoles
Los aerosoles producto de la captación hacen que se formen bacterias
 Lluvia
Cuando hay lluvia los microorganismos disminuyen por el lavado del
aire.
 Radiación
La acción directa de los rayos solares tiene efectos perjudiciales en los
microorganismos.

26
2. Explique cuatro enfermedades transmitidas por el aire
Entre algunas enfermedades citare:
Tuberculosis
El agente etiológico de la tuberculosis es el Mycobacterium tuberculosis o
comúnmente llamado bacilo de Koch. Esta enfermedad se propaga por el
aire de una persona a otra. Si no se trata adecuadamente, la enfermedad
de la tuberculosis puede ser mortal. Puede que las personas infectadas por
bacterias de la tuberculosis, y que no estén enfermas necesiten tratamiento
para prevenir la enfermedad de tuberculosis en el futuro.
Este agente Mycobacterium tuberculosis puede sobrevivir durante varios
meses por el esputo de una persona infectada en un lugar fresco y oscuro
también en materiales como alfombras, papel y ropa; es muy sensible a la
luz solar pero resistente al frio.
Neumonía
Producido por el Streptococcus pneumoniae. Esta enfermedad inflama los
sacos aéreos de uno o ambos pulmones. Los sacos aéreos se pueden
llenar de líquido o pus ( material purulento), lo que provoca tos con flema o
pus, fiebre, escalofríos y dificultad para respirar.
Difteria
Causada por el Corynebacterium diphtheriae que se propaga a tarves de
las gotas respiratorias como las que se producen por la tos o estornudos
de una persona infectada o de alguien que porta la bacteria pero no
presenta síntomas. Entre sus síntomas observamos fiebre y escalofríos,
dolor de garganta, ronquera.
Faringitis
Causada por la bacteria Streptococcus pyogenesis que se transmite a
través del aire, generando un dolor muy doloroso en la garganta. Entre sus
síntomas están sequedad en la garganta, fiebre, dolor de cabeza,
erupciones cutáneas.

3. ¿Qué grupo de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades

respiratorias?
Hongos (algunos de ellos), virus y bacterias. Estos provocan diferentes tipos
de enfermedades que pueden llegar a hacer mortales.

27
4. Menciona las características principales de: Rhizopus nigricans ,
Alternaria, sacharomyces cerevisae

Rhizopus nigricans:
Es un tipo de moho inofensivo, se halla en crecimiento en el pan, conocido por
"moho del pan". Es un miembro del género Rhizopus. Puede causar infecciones si
no se tiene cuidado. Puede causar reacciones concretas alérgicas. Rhizopus
nigricans posee esporas que flotan alrededor en el aire.Presentan el aspecto de una
suave pelusa grisácea o verdosa que se desarrolla en la superficie de la materia
orgánica en descomposición sobre la que viven. Vistos al microscopio presentan un
micelio formado por abundante cantidad de hifas blanquecinas y sin tabiques.
En el extremo de algunas hifas se desarrollan los esporangios de forma y número
variado según las especies. Las esporas contenidas en los esporangios son
generalmente negras o verdosas. Cuando quedan libres dan origen a la formación
de nuevos micelios.
Alternarias:
Es un hongo ascomiceto .Las diferentes especies de este género son uno de los
mayores patógenos de plantas. Son conocidas comúnmente como alérgenos en los
humanos, y, dentro de casa, pueden causar rinitis alérgica o reacciones de
hipersensibilidad que, en ocasiones, pueden producir ataques de asma. Sus
esporas son las causantes de la alergia, y, al igual que los pólenes, son
transportadas por el aire hasta la nariz o bronquios del alérgico, causando la rinitis
o asma. Existen esporas de alternaria todo el año y, por lo tanto, causan patología
alérgica perenne; aunque varíe la intensidad según las estaciones, suele haber más
en primavera y verano. También aparecen infrecuentemente entre las infecciones
oportunistas en personas inmunodeprimidos, como por ejemplo, en personas
afectadas por el sida. Hay cuarenta y cuatro especies conocidas, pero puede haber
cientos de ellas aún por descubrir. Son una especie omnipresente en el ambiente y
parte fundamental en la flora de hongos en cualquier sitio. Son agentes activos en
la descomposición. Sus esporas están en suspensión en el aire, sobre el suelo,
sobre los objetos y en el agua, tanto fuera, como dentro de casa. Las esporas se
pueden distribuir de una en una, o en largas cadenas, y pueden crecer en colonias
visibles, de color negro o gris.
Al menos el 20% de las pérdidas de la agricultura, están causadas por alguna
especie de la Alternaria, y muchos trastornos de salud en el hombre, pueden ser
causados por estos hongos, que crecen en la piel y en las mucosas, en especial en
el globo ocular, y en el tracto respiratorio.
Saccharomyces cerevisiae:
La levadura de cerveza es un hongo unicelular, un tipo de levadura utilizado
industrialmente en la fabricación de pan, cerveza y vino. Tiene forma elíptica u
ovoide se reproduce de forma asexual por gemación, también tiene alta capacidad
fermentativa pero no fermenta ni asimila lactosa.

28
5. ¿Cuáles son los ingredientes del agar nutritivo, caldo nutritivo y agar
Saboraud? ¿Qué clase de nutrientes proporciona cada uno de los
Ingredientes?

Agar Nutritivo

A principios de 1900 la APHA (American Public Health Association) sugirió

esta formulación como un medio de cultivo estándar para el análisis de
agua. El Agar Nutritivo se encuentra descrito en los Métodos

Estándar de la APHA y de la AOAC (Association of Oficial Analytical

Chemists) para el análisis de agua, leche y sus derivados, alimentos y otros
materiales.

El Agar Nutritivo sigue siendo un medio ampliamente utilizado para el cultivo

de microorganismos no fastidiosos.

En este medio el extracto de carne y la peptona aportan la fuente de

nitrógeno, vitaminas y carbono. El agar es adicionado como agente
solidificante.

Agar Nutritivo Cantidad

Extracto de carne 3g
Peptona 5g
Agar 15g
Agua 1000ml

Caldo Nutritivo

Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de

microorganismos con escasos requerimientos nutricionales.

Su uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis de

alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.

Caldo Nutritivo Cantidad

Extracto de carne 3g
Peptona 5g
Agua 1000ml

29
 Agar Sabouraud

Es un medio para el cultivo de hongos y levaduras. El Agar Sabouraud es

una modificación del Agar de Dextrosa. Este medio es usado para el cultivo
de hongo patógenos, particularmente de aquellos asociados con
infecciones de la piel. La alta concentración de dextrosa y la acidez del pH
hacen a éste un medio selectivo para hongos. Con la adición de
cicloheximida, estreptomicina y penicilina, se obtiene un excelente medio
para el aislamiento primario de dermatofitos.

Agar Cantidad
Sabouraud
Pluripeptona 10g/l
Cloranfenicol 0.05g/l
Glucosa 40g/l
Agar 15g/l

30
10. FUENTES DE INFORMACIÓN

1.- Michael Madigan,John Martinko,Jack Parker ,Biología de los

microorganismos ,Madrid, Editorial Pearson ,2004. Páginas: 37, 38.

2.-Michael J.Pelczar, Microbiología, 2da edición al español México,

Editorial Mc-Graw Hill. 2007. Páginas. 65, 66,117, 118, 247,248

3.- Mª Concepción Casado González, Medios de cultivo en un laboratorio

de Microbiología. [Consulta: 12 de setiembre 2018] Disponible en:
https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-
un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

4.- Atlas, R., y Bartha, R (2002): Ecología microbiana y Microbiología

ambiental. Ed Pearson Educación Madrid. Páginas 99,178.

11. ANEXOS

PROCEDIMIENTO-CARACTERÍSTICAS:

PROCEDIMIENTO A :

1.- Se tienen 4 tubos a 45° con Agar nutritivos previamente preparados

.Flamear en el mechero y verter el contenido en 4 placas Petri de la siguiente
manera :

4 tubos con Agar nutritivo a 45°

Placas petri estériles :

N° 1 , N°2 , N° 3

Placa Petri no estéril :

N° 4 .

31
 2.- Llevar a experimentación las cuatro placas
Placa N° 1 : Grupo 2 : Laboratorio de Fisicoquímica
Grupo 4 :Centro de estudiantes FIA por 15 minutos.

Placa N° 2 : Dividir la placa de la siguiente manera

- Placa N° 3: Placa estéril no abrir.

Placa N° 4: Placa no estéril, no abrir.

3.- Después de realizar la recolección de muestras, invertir las placas y llevar a la

incubadora a una temperatura de 37° por un periodo de 48 horas .Después de
este tiempo llevarlas a refrigerar.

PROCEDIMIENTO B

1.- Se prepara el caldo nutritivo y se extrae del autoclave, para después con pipeta
extraer el medio en otras 3 pipetas distribuidas de la siguiente manera:
Pipeta estéril- Tubo estéril, pipeta no estéril- tubo estéril, pipeta estéril- tubo no
estéril.
2.- Las pipetas se colocan en la incubadora a 37° por un espacio de 48 horas, y
luego con cuidado y sin agitar se llevan a la refrigeradora.

32
 PROCEDIMIENTO C

1.- En una placa estéril se vierte Agar Sabouroud especial para hongos, y cada
grupo lo deriva a diversos ambientes de la siguiente manera :
Grupo 1 :Baño
Grupo 2: Laboratorio de Fisicoquímica
Grupo 3 : Aula Vacía
Grupo 4: Laboratorio de Microbiología
Grupo 5: Sala de tesis

Las placas se dejan en el ambiente por 15 minutos

33