“Año de la consolidación de mar de Grau”

UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA

FACULTAD DE MEDICINA ALBERTO HURTADO

Gabinete N°5: Preparación de reactivo de Schif

(PAS – ácido peryódico de Schif)

CURSO : Anatomía Patológica y Citología Exfoliativa

ALUMNO :

DOCENTE : Lic. TM Carlos Mejía Chávez

2016
 I. INTRODUCCIÓN

La tinción de hematoxilina y eosina (he) se utiliza rutinariamente en histopatología para

analizar diferentes tejidos del organismo, incluyendo cortes de piel. Sin embargo, esta técnica
no permite apreciar elementos como fibras elásticas o mastocitos, ni diferencia entre pigmento
melánico y hemosiderina, de modo que obliga a recurrir a tinciones secundarias o especiales,
entre ellas el ácido peryódico de Schiff (PAS), para visualizar microorganismos; la tinción de
Gomori-Grocott (metenamina de plata) para hongos; y las de Ziehl-Neelsen y Kinyoun para
identificar actinomicetos y micobacterias.

Después de HE, la tinción PAS es la más comúnmente utilizada, pues evidencia algunos
polisacáridos (particularmente, glucógeno), así como las mucoproteínas que contienen
mucopolisacáridos neutros. Esta técnica es útil para valorar la degeneración fibrinoide, ya que
tiñe de rojo los depósitos de fibrina y permite visualizar elementos infecciosos como parásitos
y hongos (cuyas paredes de celulosa y quitina contienen polisacáridos). Aun así, no es posible
diferenciar morfológicamente los dermatofitos y otros mohos con la tinción de PAS, de modo
que el cultivo es el único método para identificar el género y la especie del organismo.

Como agente oxidante que rompe algunas cadenas de carbón convirtiéndolas en dialdehídos la
tinción de PAS se considera parte de la histoquímica moderna de mucopolisacáridos,
mucoproteínas y polisacáridos. La reacción se debe a que el ácido peryódico oxida las uniones
carbono-carbono de los carbohidratos donde hay hidroxilos adyacentes y NH2 primarios o
grupos amino secundarios, cediendo aldehídos que pueden reaccionar con el reactor Schiff,
responsable de la coloración roja provocada por la unión de leucofucsina con dialdehído.

La demostración del glucógeno con tinción de PAS tiene valor diagnóstico en casos de
tumor/quiste triquilemal, triquilemoma, hidradenoma de células claras debido al glucógeno
presente en las células de la corteza externa del pelo y en las glándulas tanto ecrinas como
apocrinas. PAS también se utiliza para revelar la membrana basal de epitelios, anexos y vasos,
por lo que es útil para diferenciar o resaltar algunos tipos celulares y la distribución del
colágeno entre células neoplásicas. Por último, la tinción con PAS puede arrojar falsos positivos
en algunas dermatosis al teñir de rojo elementos como paraqueratosis, células
polimorfonucleares o partículas de almidón.
II. PROCEDIMIENTO

1. Pesar 0.5 g de
fucsina básica.

2. Verter 100 ml de
agua destilada en
un matraz.

3. Colocar la
solución al
mechero a punto
de ebullición.
Luego dejar
enfriar hasta
aprox. 50 °C.

4. Verter los 0.5 g de

fucsina básica en
el matraz y
mezclar (color
rojizo).

5. Pesar 1 g de ácido
peryódico.
6. Medir 100 ml de
agua destilada y
mezclarlo con el
ácido peryódico
hasta
homogenizar.

7. Preparar HCl al
1N: 91.6 agua
destilada + 8.4
HCl.

8. Verter 10 ml de
HCl 1N a la
solución de
fucsina básica +
agua destilada
con sumo
cuidado.

9. Pesar 1 g de
Disulfito de Sodio

10. Añadir el Disulfito

de Sodio a la
solución de
fucsina, mezclar
bien hasta
homogenizar.
 11. Mantener en la
oscuridad. El
líquido tarda unos
2 días o a veces
24h en tornarse
de color amarillo
que indica que
está listo para su
uso.

12. Añadir 2g de
carbón activado,
mezclar y filtrar
hasta que
desaparezca el
color.

III. CONCLUSIONES

 La tinción de PAS es de gran utilidad a condición de que el diagnóstico

microbiológico clínico esté bien orientado.

 La tinción de PAS se utiliza en el marco de un procedimiento de tinción especial

que variará en función de los usuarios y puede ser adaptado por el
patólogo/tecnólogo médico que realiza el diagnóstico para alcanzar la
intensidad y la especificidad requeridas.

 Este método es repetitivo y reproducible dentro de los límites del carácter

subjetivo del procedimiento.

 Debido al carácter subjetivo de la tinción, resulta difícil prever los tiempos

exactos de cada etapa.

IV. RECOMENDACIONES

 El tiempo en reactivo de Schiff depende de la temperatura. Incluso se puede

teñir en microondas durante menos de un minuto.

 El reactivo de Schiff puede reutilizarse pero ha de conservarse en nevera y

llevarlo a la temperatura deseada antes de su uso.

 El reactivo de Schiff debe conservar un color amarillento y hay que descartarlo

si se vuelve de color rosado. Si aparece precipitado blanco en el fondo del bote
de reactivo se puede disolver de nuevo.
V. BIBLIOGRAFÍA

 Kligman AM, Mescon H. The Periodic Acid-Schiff Stain for the Demonstration of Fungi
in Animal Tissue. J Bacteriol 1950; 60(4): 415-421.

 Barak O, Asarch A, Horn T. PAS is Optimal for Diagnosing Onychomycosis. J Cutan Pathol
2010; 37(10): 1038-1040.

 Montuenga L, Esteban F, Calvo A. Técnicas en histología y biología celular. 2da Ed.

Barcelona: Elsevier MASSON; 2014. P: 5.