Procesos Bioquímicos Nutrición y Metabolismo

Guía de Prácticas
Práctica de la Unidad II

PRÁCTICA No. 2 “Nutrición Microbiana”

FECHA: GRUPO:

* TIPO PRÁCTICA LABORATORIO FECHA:

30
No DE ALUMNOS POR PRÁCTICA (Máx.) No. DE ALUMNOS POR REPORTE: 5
NOMBRE Y FIRMA DEL
PROFESOR M.A. Isela Prado Rebolledo
NOMBRE (S) DEL ALUMNO (S)

VALOR DE
LA
TIEMPO ESTIMADO 5.0 Hrs. PRÁCTICA CALIFICACION

OBJETIVO
Identificar los efectos de algunos de los factores que intervienen en la nutrición y
desarrollo de los microorganismos.

MATERIAL Y EQUIPO. (Recuerden que ustedes deben poner sólo lo que usaron en la
práctica)
1.- Cuenta colonias.
2.- Autoclave.
3.- Parrilla eléctrica.
4.- Balanza analítica
5.- Incubadora.
6.- Pipetas de diferentes volúmenes.
7.- Cajas Petri.
8.- Mechero Fischer.
9.- Tubos de ensaye con tapón de rosca.
10.- Frascos de vidrio, con capacidad mínima de 150 ml.
11.- Gradilla.
12.- Matraz Erlenmeyer de 250ml.
13.- Espátula o cuchara.

REACTIVOS
1.- Solución desinfectante.
2.- Agar cuenta estándar (CS).
3.- Solución diluyente.
4.- Solución salina (NaCl al 33.3%)
5.- Gasolina.
6.- Agar Mc Conkey (McC)

MUESTRA
1.- Suelo. (Cada equipo tiene su propia muestra).
Procesos Bioquímicos Nutrición y Metabolismo.

DESCRIPCIÓN

Metabolismo Bacteriano.

La multiplicidad de procesos que efectúan los sistemas biológicos se puede seguir, directa o
indirectamente, hasta determinadas reacciones químicas.
Aun la forma de una bacteria depende de tales reacciones, pues está determinada por el
componente péptidoglucano rígido de la pared celular, el cual a su vez está determinado por una
serie de reacciones químicas. Propias de la síntesis celular. El término metabolismo denota todas
las actividades químicas organizadas de una célula, las cuales comprenden dos aspectos
generales, la producción de energía y la utilización de la energía.

La energía faculta para hacer un trabajo, y el de una célula bacteriana es extenso y variado. La
energía se utiliza para construir las partes de una célula o la pared de la membrana. También es
necesaria para la síntesis de las enzimas, ácidos nucleicos, polisacáridos y otros componentes
químicos; lo mismos que para la reparación de daños o simplemente para mantener la estabilidad,
o para el desarrollo y la multiplicación de la especie. Asimismo, para la acumulación de
determinadas sustancias a alta concentración en la célula, mantener a otras fuera de la misma y
para la motilidad. Por ello, se necesitan grandes cantidades de energía para poder desarrollar esas
extensas actividades. Bajo condiciones favorables, algunas bacterias son capaces de metabolizar
una cantidad de sustancias nutritivas equivalente a su propio peso ¡en pocos segundos! Una célula
bacteriana podría representarse por una dínamo de tremenda producción de energía.

REALIZACIÓN
1.- Preparar el material a utilizar:
a) Lavar el material y secar.
b) Al frasco de dilución agregar 90 ml. de solución diluyente.
c) Preparar el medio de cultivo requerido.
2.- Preparar el material para esterilizar (agregar 4 pipetas más: una para el antibiótico, otra para la
gasolina, la solución sanitizante y una más para la solución salina) y esterilizar.
a).- En un tubo esterilizar 10 ml de NaCl al 33.3%.
b).- La solución desinfectante a utilizar es la que usualmente se ocupa para sanitizar el área de
trabajo.
c).- En un tubo de ensaye con tapón de rosca, agregar 10 ml de solución diluyente, esterilizar. En
condiciones estériles agregar una cápsula del antibiótico o una gragea y disolver.
3.- Tomar la muestra en un frasco vacío y estéril, en condiciones adecuadas. Calcular que el
volumen de la muestra sea de aproximadamente 100 gr.
4.- Acondicionar el área de trabajo para trabajar en condiciones estériles.
5.- Marcar las cajas Petri con los siguientes datos:
No. caja
Fecha.
Grupo.
Equipo.
Integrante que realizó el procedimiento.
6.- Tomar 10 gr de la muestra y agregarlos al frasco de dilución, en condiciones estériles y
homogeneizar.
7.- De la dilución anterior tomar 1ml para la caja Petri marcada con el número 1 ó testigo. Agregar
medio de cultivo (CS) a la caja.
8.-. Agregar medio de cultivo (CS) y un ml de la muestra diluida a la caja Petri más un ml. de la
solución salina. (caja No. 2)
9.- Tomar 1 ml. de la muestra del frasco y agregarlo a la caja No. 3. Agregar medio de cultivo (CS)
a la caja Petri más un ml de la solución desinfectante.
10.- Repetir el paso anterior, pero en lugar del desinfectante, agregar 1 ml. de gasolina (caja Petri
No. 4)

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11.- Tomar 1 ml. de la muestra del frasco y agregarlo a la caja No. 5. Agregar medio de cultivo
(McC) a la caja Petri.
12.- Repetir el paso No.9, pero en lugar del desinfectante, agregar 1 ml. de antibiótico (caja Petri
No. 6)
13.- Incubar las cajas Petri a 36°C durante 24 horas.
14.- Tomar 1 ml. de la muestra del frasco y agregarlo a la caja No. 7. Agregar medio de cultivo (CS)
a la caja e incubar a 4ºC durante 24 horas.
14.- Tomar 1 ml. de la muestra del frasco y agregarlo a la caja No.8. Agregar medio de cultivo (CS)
a la caja e incubar a 36ºC durante 24 horas, en condiciones anaerobias.
15.- Cuantificar y analizar los resultados.

CUESTIONARIO
1.- ¿Cómo afecta el desarrollo de los microorganismos los antibióticos?
2.- Numerar los principales nutrientes de los microorganismos.
3.- ¿Cómo afecta la temperatura al desarrollo de los microorganismos?
4.- ¿Cómo se clasifican los microorganismos de acuerdo a las diferentes presiones que
soportan?
5.- ¿Qué requiere la E. colli para desarrollarse? (respecto a nutrientes).
6.- ¿De qué otra manera podrías proporcionar condiciones anaerobias, sino se tiene
una cámara especial en el laboratorio?

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