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TM.

Nelson Herrera 22/03/2017


Microbiología I. Clase número 2.

MORFOLOGÍA Y CITOLOGÍA
BACTERIANA.
Bacterias.
Tipos de células biológicas.
Actualmente se reconocen 3 grandes células Archea, Eubacteria y Eukaryota. Las Archeas son bacterias que hacen
un tiempo atrás, aproximadamente unos 10-15 años atrás se consideraban como bacterias, pero posteriormente
realizando un análisis más fino se logró determinar que estas constituyen un tipo de células que son capaces de vivir
en condiciones extremas de pH (por ejemplo: algunas Archeas son capaces de vivir, multiplicarse y desarrollarse a
pH 1. Este pH es similar al del ácido clorhídrico, el cual podría ser capaz quemar el dedo de un humano al mantener
un contacto con este debido a que su acción es muy fuerte.), de temperatura (por ejemplo: en los geyser algunas
bacterias son capaces de vivir activamente), de concentraciones de sales (por ejemplo: hay bacterias que son
pigmentadas y que logran vivir en salares de Estados Unidos en concentraciones cercanas a la saturación)

Un conjunto de bacterias capaces de sobrevivir en condiciones extremas se denomina extremófilas. Aquellas


que sobreviven a condiciones extremas de temperatura se denominan termófilas.

Las Archeas debido a su característica de extremófilas para poder relacionarse con el ser humano este debería poseer
condiciones extremas, pero todas sus características son intermedias, sin embargo, igual pueden existir. Ejemplo, el
pH del ser humano se encuentra entre 6,5-7, sin embargo en el estómago se puede encontrar un pH enre 1,5 – 2 y
en este lugar se puede desarrollar Helicobacter pylori, la vagina posee un pH cercano a 4,5 – 5 y en este lugar se puede
desarrollar Lactobacillus, bacteria la cual entrega protección a la mujer.
Las Eubacterias son propiamente tal las bacterias y en este grupo se encuentra un número menor al 2% de bacterias
patógenas para el hombre, sin embargo, estas pueden generar un daño bastante grande.
Las Eukaryotas son aquellas células “superiores” como las del hombre, de los vegetales, hongos, los cuales en la
práctica están constituidos por este conjunto de células con características bástate diferentes a las características
que posee una bacteria.

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En esta imagen de
microscopía electrónica se
pueden evidenciar las
características que
permiten diferencias entre
una célula eucarionte y una
procarionte.
Esta diferenciación juega
bastante a favor de las
bacterias, ya que permiten
explicar varias situaciones
a las cuales las bacterias
son capaces de responder.

Citoplasma.
El citoplasma bacteriano posee una serie de organelos, pero a diferencia de las células eucariontes carece de algunos,
como el aparato lisomomal.
Este citoplasma bacteriano posee:
• DNA. (el cual es bastante simple)
• Plasmidios.
• RNA.
• Ribosomas.
• Gránulos de almidón y glicógeno.
• Gránulos metacromáticos (volutina): (Presente por ejemplo en Corynebacterium diphtheriae, son
elementos fosfatos que además de formar parte del DNA bacteriano constituyen citocromos y otras
estructuras necesarias, le proporcionan energía a esta.)
• Inclusiones lipídicas.
• Carboxisomos (Ribulosa -1,5- difosfato carboxilada).
• Vacuolas de gas.
• Gránulos de azufre: (Además de ser gran catalizador es un elemento esencial para que la bacteria sintetice
algunos aminoácidos azufrados como son la cisteína, metionina esenciales para la conformación de algunas
proteínas).

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• Magnetosomos (óxido de fierro).

Varios de estos elementos presentes en el citosol de la bacteria constituyen elementos de reserva para la
alimentación de esta misma, como también para la transformación o síntesis de algunos productos que ayudarán a
la bacteria a combatir contra el hombre cuando entre en un proceso infeccioso como también iniciar un proceso
infeccioso ayudada de estos.

Todas las bacterias para ejercer su poder patógeno requieren de proporción de hierro.

ADN bacteriano.
Las células en general presentan 2 tipos de DNA:
• ADN cromosomal: Es la estructura genética que presentan todas las bacterias, habitualmente las bacterias
presentan 1 cromosoma, con excepciones de algunas que presetan 2 cromosomas (por ejemplo: Escherichia
coli y otras). Este cromosoma se encuentra ubicado en el citosol o citoplasma bacteriano y tiene la apariencia
de “virutilla”. Carece de membrana nuclear, por ende, está inmerso en el citosol y se encuentra
empaquetado por topoisomerasas tipo II, las cuales alcanzan un gran nivel de compactación el DNA dentro
de la bacteria, permitiendo que el DNA de aproximadamente 1mm logre encontrarse en el cuerpo bacteriano
que no mide más de 1-2 μm.
El hecho de que el DNA se encuentre empaquetado y carezca de membrana nuclear permite que una vez que
es leído por la RNA polimerasa se pueda producir una proteína la cual inmediatamente comienza a actuar, a
diferencia de las proteínas sintetizadas por las células eucariontes, las cuales primero se deben cortar sus
exones e intrones para poder salir del núcleo hacia el citoplasma.
La bacteria inmediatamente empieza a leer debido a estímulos que tiene la célula. Estos estímulos llegan a la
bacteria A partir de la membrana citoplasmática donde se genera un sin número de proteínas que evalúan
las condiciones del medio ambiente y estas son conocidas como proteínas señales. Por ejemplo, hay algunas
bacterias que son móviles y se han hecho experiencias que si a la bacteria se le coloca un citrato o un quimio
táctica la bacteria rápidamente comienza a desplazarse hacia él y si se le coloca algo que no sea agradable
para ella como la corriente, rápidamente cambia de dirección. Otro caso está en la escherichia coli, la cual es
una bacteria anaeróbica facultativa lo que significa que es una bacteria capaz de crecer en presencia como
en ausencia de oxígeno y lo hace a través de estas proteínas señales que captaran la variación de oxígeno.
Cuando se administran dosis sub letales de antibióticos las bacterias inmediatamente lo detectan. Si se quiere
matar a la bacteria debe ser con las concentraciones que corresponden porque si se utilizan dosis sub letales
inmediatamente la bacteria reacciona y empieza a producir mecanismo que le llevan a esta bacteria a ser
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resistente a la actividad antibiótica y sin querer se está transformando una batería sensible y resistente al
tipo de antibiótico.
Existen dos tipos de antibióticos que actúan a nivel de los ARN, uno de la familia de las quinolonas que es la
ciprofloxacina y este antibiótico actúa sobre este ARN cuando la bacteria se está multiplicando. Por un lado,
se dice que el antibiótico se fija encima de la horquilla de replicación y por lo tanto impide que se vaya a abrir
el ADN y pueda replicarse y por lo tanto al no haber replicación del ADN la bacteria no realiza la fisión binaria
y muere por acción del antibiótico. Y el otro es del grupo de las refamisidas* entre ellos la riftamnisida* que
es un antibiótico orientado exclusivamente para dos situaciones: como droga de segunda línea para el
tratamiento de la tuberculosis y el otro es para tratar a personas que han entrado en contacto con pacientes
que están desarrollando una meningitis cerebro-espinal, es muy bueno, pero tiene facilidad para generar
resistencia en las bacterias.
• ADN plasmidial: existen tres tipos de plásmidos, el R, P y Ent.
Es un trozo de ADN que tiene la característica de ser transferido de una célula a otra a través de la
conjugación. Esto significa que se une la célula que tiene el ADN plasmidial con una célula que no tiene ADN
plasmidial y a través de un pilli-f u órgano sexual se transfiere una hebra del ADN del plasmidio y a medida
que ingresa a la célula receptora se va multiplicando la hebra complementaria y así quedan ambas células
con ADN plasmidial. La importancia de esto es que otorga mecanismo de resistencia.

*El profesor hace mención de estos antibióticos pero no se logra entender bien el nombre y los escuchados se buscaron en google sin
éxito, si alguno lo anoto en su cuaderno favor compartir con el resto.

Conjugación
Es un mecanismo de resistencia en donde hay un dador o macho y una hembra, ambos con su propio DNA. A través
de la conjugación el dador le transfiere una parte de su DNA a la otra célula, concluyendo el proceso ambas con el
DNA plasmidial. Esto no solo sucede en el laboratorio, sino que también in vivo. En el intestino, zona con mayor
cantidad de bacterias, hay periodos de lentitud o disminución de los movimientos peristálticos en que las bacterias
pueden interactuar entre ellas.
Se probó una sepa A que era sensible a 10 antibióticos en concentraciones bajas, se procedió a unir a otra sepa B que
era resistente a los 10 antibióticos. Como se habló la concentración de resistencia es un número base, pero la sepa A
que era sensible a un antibiótico a 0.5 de concentración, conjugada con la sepa B que era resistente a ese antibiótico,
requería de concentraciones de hasta 500 dosis (μg/ml) la cual es imposible de lograr en el ser humano. Por lo tanto,
por conjugación la bacteria adquiere en un tiempo corto, máximo de 30 minutos, en donde se pasa toda la
información genética, la bacteria receptora es capaz de ser resistente a 5,8 y 10 antibióticos de acuerdo al número
de antibióticos al que la bacteria sea resistente y que por lo tanto a concentraciones imposibles de alcanzar in vivo.
Esta es la importancia de los plasmidios. Transfieren mucha resistencia los plasmidos R.

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Nota: Se ha logrado establecer que por conjugación hoy en la actualidad hay sepas que no son patógenas y se ha visto
sepas de bacterias que han adquirido una toxina muy carecida a la toxina colérica que son capaces de provocar diarrea.
De manera que hay bacterias que comienzan a adquirir un sin número de factores de patogenicidad que antes no los
poseían y que se transfieren a través de este sistema.
Los plasmidios F son factores sexuales. Al haber una conjugación la bacteria no solo recibe resistencia a los
antibióticos o a los metales pesados, sino que también se transfiere la capacidad de sintetizar el pili F y, por lo tanto,
de célula hembra que no poseía la capacidad de transferir, se transforma en célula dadora que es capaz de transmitir
DNA.

Ribosomas

Otra característica diferencial con la célula eucariótica es el tamaño del ribosoma.


La función del ribosoma es leer el RNAm y comienza a sintetizar la proteína. En el
caso de las bacterias, tanto la subunidad mayor como la menor, son de menor
tamaño que el que presenta la célula eucariótica.

Nota: Los 70S, por ejemplo, son unidades de centrifugación.

Membrana citoplasmática

Es una bicapa fosfolipídica con diversas características y funciones, entre algunas de estas funciones hay algunas
que difieren de las que tiene la célula eucariótica.
Posee un conjunto de proteínas integrales, que son estructuras que le dan forma a la membrana.
Además, tiene unas proteínas que son las denominadas porinas, que son proteínas con tres caras iguales, a través
de las cuales se introducen al interior algunos sustratos. Algunas de estas porinas se les denomina de poro
específico que permiten el ingreso de ciertas sustancias, como es el caso de la MALT1 que permite el ingreso de la
maltosa. Otras porinas son de poro inespecífico, las cuales hay de 2 tipos. Habrá algunas de mayor tamaño y otras
de menor tamaño y que se expresarán de acuerdo a la cantidad de nutrientes que hay en el medio. Si es mucha la
cantidad de nutrientes, se expresarán las porinas de poro pequeño, pero si son pocos los nutrientes se expresarán
las porinas de mayor tamaño que lograrán un mayor contacto y así podrá captar las pocas proteínas que están
circulando.
También en la membrana se encontrarán insertas las proteínas señales, todas las proteínas que le permiten a la
bacteria adaptarse. Por ejemplo, en la fiebre tifoidea, una de las características de la trayectoria de la bacteria una
vez que ingresa por vía oral a través de alimentos contaminados hasta llegar a la sangre en donde se ubica en ciertos
lugares como el bazo y otras zonas para multiplicarse, pero al volver a la sangre el organismo la reconoce

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inmediatamente y comienzan a actuar sobre ella los mecanismos de defensa inespecíficos como los macrófagos. Los
macrófagos fagocitan la bacteria interiorizándola a través del fagosoma, el cual se coloca en contacto con el aparato
lisosomal para que vierta sobre el fagosoma lisozimas. Pero cuando comienzan a vaciarse lisozimas, las bacterias
detectan algo que les afectarán, que les romperá su pared celular y que por lo tanto quedarán expuestas a un
ambiente hipertónico siendo lisadas, por lo que informa al DNA y este genera las proteínas necesarias, los
aminoácidos esenciales básicos que le permiten hidrolizar la lisozima. Por lo tanto, la bacteria destruye la lisozima,
destruye el fagosoma, se multiplica en el macrófago y este se convierte en un vector de transporte de la salmonela a
otros sistemas del cuerpo humano.

Funciones
• Permeabilidad selectiva y transporte de solutos
➢ Difusión facilitada (glicerol)
➢ Por proteínas ligadoras de sustrato
➢ Transporte quimiostático impulsado
➢ Translocación de grupo (proteína fosforilada + azúcar)
Al estar hablando de las porinas se está hablando de que cumple una función de solubilidad que permitirá el ingreso
de nutrientes, la eliminación de desechos, etc. Y la difusión se realiza a través de un mecanismo que se denomina
transporte activo, donde existen varios tipos pero que como característica general necesitan energía para que se
produzcan.
• Transporte de electrones y fosforilación oxidativa.
Todas las enzimas que participan en la cadena respiratoria o en la llamada fosforilación oxidativa, están
ubicadas en la membrana citoplasmática .
La bacteria produce 38 ATP al degradar una glucosa, ya que todo el proceso de oxidación de NADP reducido
ocurre en la pared celular, pues no hay mitocondria. Los 2 NADP reducido que se producen como sustrato de
la transformación de glucosa 6 fosfato a piruvato, gastan un ATP cada uno para poder ingresar a la
mitocondria, esto no pasa en la bacteria de ahí que sean 38 y no 36.
• Excreción de exoenzimas hidrolíticas
• Biosíntesis
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➢ Enzimas de síntesis de pared celular: todos los elementos que forman la pared celular y los receptores
específicos donde actúan los antibióticos son sintetizados en la cara interna de la membrana
citoplasmática y de ahí son eliminados hacia el exterior.
➢ lípidos transportadores.
• Sistemas quimiotácticos.
➢ Asiento de receptores específicos de sustancias diversas
➢ Existen bacterias que para resistir a la acción de antibióticos producen B-lactamasa, la función de
esta enzima es inhibir la acción de los antibióticos betalactamicos como las penicilinas,
cefalosporinas, cefamicinas, etc. Entonces al ingresar el antibiótico que viene con el factor activo,
anillo betalactamico, no pueda anclarse en los sitios blancos de los receptores de la proteína
betalactamasa.
La bacteria a pesar de ser una estructura muy pequeña debe hacer un sin número de actividades metabólicas que
requieren de energía, por consiguiente, la membrana citoplasmática no es lisa, presenta miles de invaginaciones
denominadas mesosomas que permiten aumentar la superficie de contacto con el medio ambiente y por lo tanto
tener una mayor cantidad de nutrientes. Existe una estructura denominada mesosoma central que permite que al
llegar el aviso biológico de división celular, generalmente cada 20-25 minutos, empieza a provocarse una
estrangulación y el DNA se abre de manera que cada hebra va asentándose en uno de los extremos y el DNA empieza
a multiplicarse y a sintetizar cada una de ellas la hebra complementaria y finalmente la bacteria se divide en dos
células iguales.

Pared Celular
Importancias de la pared celular:
• Bacteria: es una estructura que otorga protección ante las condiciones del medio ambiente, otorga la forma
a la bacteria, evita que la batería se lise por los cambios de presión.
• Mundo biológico: permite clasificarlas en dos grupos, Gram positivas y Gram negativas, unas se unas se
tiñen rojo y las otras de azul . Existen antibióticos de reducido espectro, es decir que solo actúan sobre un
tipo de bacterias, por ejemplo la penicilina benzatina o sódica, en cambio la ampicilina es un antibiótico de
alto espectro actúa sobre bacterias gram positivas y gram negativas, el problema con este tipo de antibióticos
es que también elimina bacterias de la flora intestinal y puede producir la muerte del paciente.

La pared celular esta constituida por dos hidratos de carbono, N-acetilglucosamina que esta unido a través de un
enlace beta1-4 a N-acetilurano esto va formando una hebra, un glucopeptido. Esta estructura es bien compacta
solamente esta esté compuesto el glucopeptido que se denomina ureina, saco de muerina, grupo péptido,etc, es
importante porque de aquí emergen muchas estructuras como los ácidos teicoicos.
El ácido teicoico, es una estructura larga qe si se dividiese en 3 partes, la parte antigénica más profunda es muy bien
conservada, la media medianamente conservada y la de arriba es altamente inmunogénica y está siendo
constantemente cambiada.

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Una gran parte de las bacterias tiene esta estructura, pero una de las más importantes es el Streptococcus pyogenes
en los cuadros de faringitis. A través de esta estructura se adhiere a receptores específicos de la faringe y comienza
a multiplicarse, y al aumentar la cantidad el organismo se comienza a defender y activa el sistema inmunológico
inespecífico (complemento, etc.). La bacteria, al tener muy cerca el sistema de complemento y macrófagos, muta y se
va renovando y las estructuras quedan libres. Los macrófagos comienzan a “perseguir” a las estructuras que andan
libres, alejándose del foco infeccioso, lo que le permite a la bacteria multiplicarse lo suficiente como para desarrollar
una infección.

Los glucopeptidos se llaman así porque son esas dos estructuras unidas (N-acetilglicosamina y Ácido N-
acetilmurámico) forman una red compacta a través de puentes de pentaglicina. Esto hace que esta unión se
transforme en una estructura isométrica que provoca una torsión en la molécula y por lo tanto una protección.

De manera que, el
gram + tiene una
gran cantidad de
estos elementos, lo
que hace que se
constituya una
estructura muy
compacta yque se
generen, entre una y
otra, pequeños
espacios.

Esta es la membrana de una gram (-), estas tienen la misma


membrana citoplasmática, pero hacia el exterior tienen una gran complejidad, tienen un peptidoglicano muy
pequeño comparadp con las gram +, además algo muy importante es que estas bacterias tienen un espacio
periplasmático. Las gram + para hacerse resistente a las penicilinas tiene que producir una gran cantidad de
betalactamasa para que haga efecto, en cambio las gram (-) en el espacio periplasmático concentran la
betalactamasa, por lo que cuando ingresa el antibiótico lo hidroliza ahí mismo y la transforma en ácido peniciloico
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sin ninguna actividad química, por lo tanto, utiliza menos cantidad de bectalatamasa, no porque sea más activa, sino
porque con sus estrcuturas es capaz de concentrarla con enzimas. Esto también ocurre con proteínas como la acetil
transferasa, la cual actúa sobre el cloranfenicol.

La membrana de las gram (-) tienen lipopolisacáridos (LPS), es una estructura formada por una secuencia de 5 a 6
azúcares distintos y se usa en bacteriología y epidemiología, porque permite clasificar los serotipos (E. coli O157H7,
produce Síndrome Hemolítico Urémico y recibe ese nombre por el azúcar que tiene, también existen otros tipos).

Debajo de la
membrana externa
Síndrome Hemolítico Urémico: patología que se generó alrededor del año 1987 por
se observa una
consumo de hamburguesas en Estados Unidos y se caracteriza porque provoca diarrea
pequeña hebra,
acuosa y que algunas veces elimina sangre. Es peligrosa en pacientes pediátricos y
esta hebra es
ancianos, ya que produce toxinas que pasan al sistema circulatorio y provocan
importante y es
coagulaciones intravasculares que obstruyen los glomérulos, y si el paciente no es tratado
una endotoxina.
a la brevedad con una diálisis genera una insuficiencia renal crónica.
Por ejemplo,
cuando se utiliza

La biopelícula ha adquirido importancia en estos últimos años porque en algunas clínicas las sondas acumulan
bacterias y elementos (como un ateroma), donde llega un momento en el que se suelta y entra en el organismo del
enfermo, por lo que si él/ella tiene el sistema inmunitario débil, se puede provocar una patología. Estas bacterias
logran adherirse y acumularse en la sonda producto de esta biopelícula, la cual se suelta cuando la fuerza del líquido
supera a la fuerza de agarre de ésta.

un betalactámico en un cuadro de sepsis de fiebre tifoidea en el cual hay una gran cantidad de Salmonella typhi
circulando, se rompe la pared celular y libera esta endotoxina y si no se atiende rápido se genera un shock
endotóxico.

Cápsula
Es una estructura que presenta la bacteria, que se encuentra por fuera de la pared celular, que es la cápsula, de
naturaleza polisacárida que:
• Protege a la bacteria de la fagocitosis.
• Protege a la bacteria ante la acción de fármacos o virus.
El mejor ejemplo es el Streptococcus pneumoniae. Esta bacteria está presente en la flora sin cápsula, pero luego de
diversas exposiciones, el Streptococcus pneumoniae se vuelve patógeno y desarrolla la cápsula para evitar la
fagocitosis, generando una neumonía.
Esta cápsula se puede presentar de dos formas:
• Una que se encuentra muy pegada a la bacteria, de naturaleza polisacárida muy compacta, denominada
propiamente cápsula, o glicocálix.
• Otra que es una capa mucho más laxa, blanda, menos pegada al cuerpo celular de la bacteria, denominada
capa mucosa, que es lo que forma la biopelícula (lo que cubre las piedras en la playa).

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Muestra biológica de expectoración de un paciente con neumonía por Streptococcus pneumoniae. Lo blanco que se
ve que rodea al cuerpo celular es la cápsula, y esto hace que una bacteria que normalmente NO presenta cápsula,
cuando desarrolla la cápsula es capaz de provocar un cuadro de neumonía.

Pili F o pili sexual


Esta es una fotografía con microscopía electrónica con compuesto
radiactivo, que está mostrando dos células que están en proceso de
conjugación, permitido por el pili f.

Flagelo
Otra de las estructuras que tiene la bacteria es el flagelo, que corresponde a un órgano de locomoción, sin embargo,
en el caso de Vibrio cholerae, permite que vaya hidrolizando la mucosa del intestino delgado, permite que la bacteria
se vaya desplazando hasta encontrar so receptor específico a nivel de los enterocitos y permita que se produzca la
incorporación del cuadro diarreico de cólera.

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Por lo tanto, el flagelo no es solamente un órgano de locomoción, sino que es un órgano que se considera como factor
de patogenicidad, ya que permite conducir a la bacteria a lugares donde debiera adherirse para provocar el cuadro
infeccioso.
Las bacterias pueden ser de dos tipos: flagelados móviles, o inmóviles (sin
flagelo). Las que tienen flagelo se clasifican en:
• Células monótricas (A): con un solo flagelo, como el Vibrio cholerae.
• Lofótricas (B): “un mechón de pelo en uno de los polos”, un ejemplo de ella es
la Pseudomonas aeruginosa.
• Anfítrica (C): tiene flagelos en ambos polos. No es como si uno tirara hacia un
lado y otro hacia el otro lado, sino que se mueve como “pajarito”.
• Perítrica (D): tiene flagelo en todo el cuerpo celular
Ej: Salmonella tifoidea. Patógeno estricto del hombre, solo les afecta a ellos. Dura entre
14 a 21 días la manifestación de la sintomatología.
➢ Los Flagelos están constituidos por la proteína flagelina.

Cilios o fimbrias
Estructuras pequeñas, “como pelitos”, son considerados como órganos de adherencia, permite a la bacteria adherirse en
distintas partes o a receptores específicos. Son de naturaleza proteica (cilina o fibrina).
(Ampítricas tienen un flagelo a cada lado)

Esporas
Son estructuras de resistencia (calor, esta resistencia se da gracias a su estructura, que emula al asbesto que se denomina
bipicolinato de calcio*, desecación) y solo germina cuando las condiciones le son propicias para la bacteria. Hace 10 años se
encontró en una momia egipcia esporas. Son pocas las bacterias que forman esporas:
• Bacilos: el basillus anthracis afecta al ganado, se utiliza como guerra biológica. A las 24 horas de contacto con ella si no
se trata el paciente, muere.
• Clostridium: son bacterias anaerobias.
o Clostridium botulinum: provoca el botulismo (intoxicación alimentaria) por una toxina que es la toxina
boltulinica, 1 microgramo mata a 30 mil ratas de laboratorio, considerado como elemento de guerra bilógica.
o Clostridium tetáni: agente etiológico del tétanos.
o Clostridium perfringens: agente etiológico de la gangrena.
o Clostridium difficile: afecta a adultos mayores y es difícil de matar. Provoca enterocolitis pseudomembranosa.

*Busqué en internet su definición y sale “picolinato de calcio” cualquier duda el audio de micro 22 en minuto 1:34:36.

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