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“Año de la Inversión para el Desarrollo Rural y la Seguridad Alimentaria”

UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE


GROHMANN
Facultad de Ciencias Agropecuarias

Escuela de Ingeniería en Industrias Alimentarias

DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES POR EL


METODO DE SOMOGYL - NELSON
(PRACTICA 04)

Alumna : Tito Osco, Eva Martha Cód. 2013-38995

Curso : Laboratorio de Análisis Instrumental

Año : tercero

Sección : A

Docente : Prof. Dr. Miguel A. Larrea céspedes

Tacna – Perú

2016
UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

INTRODUCCION
La determinación de azúcares reductores mediante el método de Somogyl-Nelson se

basa en la capacidad de estos azúcares para reducir agentes oxidantes suaves como el

Cu2+.

El Cu2+ se reduce a Cu+, y en presencia de arsenomolibdato amónico forma un complejo

de color azul, a partir del cual podemos conocer mediante espectrofotometría la

cantidad de cobre reducido, y por lo tanto, de azúcar reductor. En el medio existen los

llamados azúcares reductores ya que contienen grupos que son fácilmente oxidables.

En cambio los azúcares que contiene un grupo reductor tienen la posibilidad de ser

oxidados por agentes oxidantes suaves como los iones férrico o cúprico

Los azúcares reductores poseen un grupo carbonilo intacto, y que a través del mismo

pueden reaccionar con otras moléculas. Estos pueden ser oxidados por iones cómo el

férrico (Fe3+) y el cúprico (Cu2+), y en estas reacciones que se producen, el grupo

Carboxilo.

Los carbohidratos son polihidroxialdehidos y... polihidroxicetonas derivados de

alcoholes. Se clasifican de acuerdo al número de carbonos que contiene la cadena

(triosas, tetrosas, pentosas, etc...) y de acuerdo al número de monómeros que posea la

molécula (monosacáridos, disacáridos, polisacáridos, etc...).

El reactivo de Nelson es una solución de Mo+4 que en contacto con un agente reductor.

Entonces ponemos la solución de Somogy, los reductores te reducen el cobre, después

ese cobre reducido es vuelto a oxidar por el manganeso que en estado de oxidación 2

forma un complejo de color azul. Luego lo medir por espectrometría y comparas con

curva de calibración para determinar la concentración del reductor.

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I. OBJETIVOS:

Determinar el contenido de azucares totales en las muestras.


Conocer la técnica y principio de este método de determinación.

II. FUNDAMENTO TEORICO :

La glucosa u otro azúcar reductor reduce el reactivo cúprico alcalino, dando el oxido

cuproso. Este, en presencia del reactivo arsenomolibdico de Nelson, forme un complejo

de óxido de molibdeno de color azul estable, cuya intensidad puede ser medida en el

fotocolorímetro, una vez que sigue las leyes de Lambert y beer.

 REACTIVO ARSENOMOLIBDICO O REACTIVO DE NELSON.

Está compuesto por Molibdato de Amonio, Arsénico disidido 7 H2O, ácido Sulfúrico y

agua destilada. Los iones cuprosos, formados por la acción reductora de los glúcidos, al

reaccionar con el reactivo Arsenomolibdico, el Molibdeno hexavalente se reduce y toma

un intenso color azul que es proporcional a la concentración inicial de azúcar reductor y

que se compara en fotocolorímetro con el color que produce un patrón del mismo azúcar

en iguales condiciones de trabajo.

III. MATERIALES Y METODOS :

a). REACTIVO CUPRICO DE SOMOGYL (𝑺𝑵𝟏 )

4,0 g. de 𝐶𝑢 𝑆𝑂4 o 6,25 g. de 𝐶𝑢 𝑆𝑂4 . 5 𝐻2 O (sulfato de cobre)


24,0 g. 𝑁𝑎2 𝐶𝑂3 (carbonato de sodio anhidrido) o 28,07 g. con una molecul de
agua.
16,0 g. de 𝑁𝑎 𝐻𝐶𝑂3 (bicarbonato de sodio).
12,0 g. de tartrato doble de sodio y potasio.
18 g. de 𝑁𝑎2 𝑆𝑂4 (sulfato de sodio).

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Disolver en un becquer de 1000 ml. Con 600 ml. De agua destilada, acrecentar
los reactivos indicados en el orden indicando anteriormente. transferir para un
balón volumétrico de 1000 ml. Y completar a volumen con agua destilada, dejar
de un día para otro al abrigo de la luz. Guardar en un frasco ámbar.

b). RECTIVO ARSENOMOLIBDICO DE NELSON (𝑺𝑵𝟏 )

 SOL.A :

 50,0 g. de (𝑁𝐻4 ) 6Mo 7O24 (molibdato de amonio) o 53,093g. de molibdato de


amonio 4𝐻2 O en 900 ml. De agua destilada.
 Adicionar 42 ml. De 𝐻2 𝑆𝑂4 concentrado p.a.

 SOL. B

 6,0 g. de 𝑁𝑎 𝐴𝑆 𝑂4 en 50 ml. De agua destilada o 10,06 g. de 𝑁𝑎 𝐴𝑆 𝑂4 . 7 H2 O


(arsenito de disodico).
 Mezclar A y B y mantener a 37ªC en baño maría o estufa por 24 horas. volumen
final a 1000 ml.

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IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL :

1,0 de solución problema más 2,0 ml. Del reactivo 𝑆𝑁1 .

10 min. En baño de agua en ebullición.

Enfriar en baño de hielo.


Adicionar 2 ml. Del reactivo 𝑆𝑁2 .

Esperar 5 minutos.
Completar a volumen para 25 ml. De agua destilada.

Leer la absorbancia a 540 nm.

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V. CURVA PADRON DE GLUCOSA

 Pesar 30 mg. De glucosa pura anhídrida y diluir en agua destilada hasta un


volumen de 100 ml. En balón volumétrico. Cada ml. De esta solución debe
contener 0,3 mg. De glucosa.

NUMERO PADRON 𝑯𝟐 O REACTIVO REACTIVO CONCENTRACION ABSORVANCIA


DE TUBO DE (ml.) S-N-1 ml. S-N-2 ml. mg. (540 nm.)
GLUC.
(ml.)

1 0,10 0,90 2,0 2,0 0,03 0.1020

2 0,20 0,80 2,0 2,0 0,06 0.2100

3 0,30 0,70 2,0 2,0 0,09 0.2635

4 0,40 0,60 2,0 2,0 0,12 0.3252

5 0,50 0,50 2,0 2,0 0,15 0.3907

6 0,60 0,40 2,0 2,0 0,18 0.4301

7 0,70 0,30 2,0 2,0 0,21 0.5206

8 0,80 0,20 2,0 2,0 0,24 0.5902

9 0,90 0,10 2,0 2,0 0,27 0.6305

10 1,00 0,00 2,0 2,0 0,30 0.6901

blanco ……… 1,00 2,0 2,0 ……… 0.00

 Después de adicionar el reactivo de 𝑆𝑁1 colocar los tubos en baño maría en


ebullición por 10 min.

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 Enfriar en baño de hielo y colocar el reactivo de 𝑆𝑁2 .

 Esperar 5 min. Completar el volumen para 25 ml. Con agua destilada y leer la
absorbancia a 540 nm.

VI. PREPARACION DE LA MUESTRA

5.0 g. de miel

Disolución

Enrasa a 100 ml.

Filtración

Filtrado (liquido) Residuo (descartar)

50 ml. / 100

1,0 ml. / 100

Tomar 1,0 ml.

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VII. RESULTADOS :
 𝑎 = 0.0820
 𝑏 = 2.0452
 𝑟 = 0.9981

 Ecuación de la recta:

𝑌= 𝑎 + 𝑏𝑋
𝑌 = 0.0820 + 2.0452𝑋
0.3975 = 0.0820 + 2.0452𝑋

0.3975 − 0.0820
𝑋=
2.0452

𝑋 = 0.1543 𝑚𝑔

0.1543 mg ____________1 ml
X ____________100 ml
15.43 mg _____________1 ml
X _____________ 100 ml
1543mg _____________50 ml
X _____________100 ml
3086 mg _____________ 5 g
X ______________ 100 g

X =61720 mg/ 100 g

X =61.72 % de Azúcar reductor

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VIII. CONCLUSIONES :

El reactivo de Somogyl está formado por dos soluciones: la primera es un


complejo cupro tartárico en medio alcalino, capaz de oxidar el azúcar reductor
para formar óxido de cobre y una mezcla de lactosas γ y δ provenientes del ácido
adónico; la segunda es una solución salina con predominio en sulfato sódico que
facilita las reacciones incrementando el flujo de electrones y regulando el
equilibrio químico del sistema, a la vez que minimiza la entrada de oxígeno
atmosfé- rico a la solución y evita la desoxidación del óxido cuproso.
El reactivo de Nelson corresponde a un complejo amarillo del ácido molibdo
arsénico que oxida el ácido aldónico a una aldosa con un átomo de carbono
menos y da origen a un complejo azul de molibdeno Como en condiciones
adecuadas los iones arsenato, fosfato y silicato forman complejos amarillos de
ácido molibdoarsénico, molibdofosfato y molibdosilícico, respectivamente,
compuestos todos que pueden reducirse para producir un complejo azul de
molibdeno, es entonces viable la sustitución del arsenato de sodio por fosfatos o
silicatos, desde el punto de vista químico.
El reactivo de Nelson presenta una elaboración relativamente estándar, mientras
que el reactivo de Somogyl varía en cuanto a composición y técnica de
preparación; por tanto, del primero puede depender la sensibilidad del método y
del segundo la longitud de onda a la cual se lee la absorbancia.

IX. RECOMENDACIONES:

Es recomendable en la práctica anotar las observaciones ya que esto depende


unos buenos resultados al final del proceso.

X. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS :
ASIF ALI, M. RAZA, H. AZAM, K. M, HUSSAIN, M. 2004. EFFECT OF DIFFERENT
PERIODS OF AMBIENT STORAGE ON CHEMICAL COMPOSITION OF APPLE FRUIT.
INSTITUTE OF HORTICULTURAL SCIENCES, UNIVERSITY OF AGRICULTURE,
FAISALABAD-38040, PAKISTAN. INT. J. AGRI. BIOL. 6 (2): 568-571.
BERNAL DE RAMIREZ, L. 1994. ANALISIS DE LOS ALIMENTOS. BOGOTA, EDITORA
GUADALUPE LTDA. 86-87 pág.
BETANCURT, P, GIOSCIA, D, BENTANCOR, J , ARCIA, P. 2008. PRODUCTOS A BASE
DE JUGO DE MANZANA: APROVECHAMIENTO AGROINDUSTRIAL DE UN
EXCEDENTE. DEPARTAMENTO DE PROYECTOS AGROALIMENTARIOS,
LABORATORIO TECNOLOGICO DEL URUGUAY (LATU)- (2).

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