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REPUBLICA DE PANAMÁ

UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE PANAMÁ

FACULTAD DE INGENIERÍA CIVIL

LICENCIATURA EN INGENIERÍA AMBIENTAL

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

INFORME N°3

TEMA: PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS Y

MICROORGANISMOS EXISTENTES EN EL MEDIO AMBIENTE

INTEGRANTES:

EDUARDO ABAD 8-937-2246

JUAN CARLOS OSORIO 8-850-1884

EMMANUEL CEDEÑO 8-902-2441

GRUPO: 1IB-132

FACILITADORA: DANNA VILLAREAL

1ER SEMESTRE
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Introducción

Las técnicas que se utilizan para utilizar los medios de cultivo pueden
presentarse en diferentes estados de la materia. En esta experiencia de los
numerosos ingredientes comunes que existen manejamos un agar para medios
sólidos. Uno de los sistemas más importantes para la identificación de
microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que
crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo.

Se han preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las
bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión
de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un
medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares

en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de
muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la
que se añadirán otros ingredientes.
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Índice

Marco teórico ...................................................................................................................................... 4

Objetivos ............................................................................................................................................. 5
Materiales ........................................................................................................................................... 6
Procedimiento ..................................................................................................................................... 8
Análisis y Resultados ......................................................................................................................... 11
Conclusión ......................................................................................................................................... 13
Recomendaciones ............................................................................................................................. 14
Bibliografía ........................................................................................................................................ 15
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Marco teórico

La preparación de medios de cultivos es una metodología de rutina usada en los

laboratorios para el crecimiento de microorganismos deseados. Los medios de
cultivo son preparaciones sólidas, líquidas o semisólidas que poseen todos los
nutrientes necesarios para el desarrollo de una población microbiana.

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el

crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la
especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían
considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien
en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que
necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.

No existe un medio de cultivo general o universal, ya que la composición de este

varía en función de las necesidades del microorganismo de interés. Algunas
bacterias pueden desarrollarse en cualquier medio de cultivo, pero otras
poseen requerimientos especiales. Para nuestra experiencia utilizamos dos
tipos de Agar para preparar los medios de cultivo:

1.El agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para
todo tipo de bacteria. Es muy útil porque permanece sólido incluso a
relativamente altas temperaturas. Además, el crecimiento bacteriano en este
agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias
pequeñas

2.El agar papa dextrosa es un medio de cultivo nutritivo sólido, no selectivo. En

él pueden crecer especies bacterianas y fúngicas, pero su uso está indicado
especialmente para el aislamiento de hongos filamentosos y levaduras. También
es conocido como medio PDA por la expresión en ingles Potato Dextrosa Agar.

El agar papa dextrosa es un medio de cultivo nutritivo sólido, no selectivo. En él

pueden crecer especies bacterianas y fúngicas, pero su uso está indicado
especialmente para el aislamiento de hongos filamentosos y levaduras. También
es conocido como medio PDA por la expresión en ingles Potato Dextrosa Agar.

Es particularmente útil para el aislamiento de hongos fitopatógenos, es decir,

aquellos que afectan a los vegetales. Para sembrar las muestras provenientes
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de vegetales infectados se pueden usar otros medios como el agar Sabouraud o

malta- agar, sin embargo, para el uso rutinario se prefiere el agar papa
dextrosa por obtenerse mayor esporulación.

Objetivos
 Que el estudiante adquiera la técnica para la preparación de medios de
cultivos a partir del medio deshidratado.
 Observar la contaminación por microrganismo en el área de trabajo del
laboratorio.
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Materiales

Materiales Imagen

Placas Petri

Agar nutritivo y

Papa dextrosa

Balanza analítica

Vasos químicos

Policial

Probeta

Matraz Erlenmeyer
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Papel toalla

Lysol

Guantes

Plancha
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Procedimiento

Para la preparación de medios de cultivos primero se pesó en la balanza

analítica 3.488 gramos de Agar nutritivo y 6.24 gramos de papá dextrosa.

Mientras se pesaba las cantidades a usar de Agar, en otra mesa se procedió a

medir 160 ML de agua destilada en una probeta para el Agar nutritivo y la
misma cantidad de agua destilada en otra probeta para la papa destroza.

Luego se procedió a disolver cada muestra en 160 ML de agua destilada,

utilizando de vasos químicos y policial,
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al diluir completamente, cada muestra se colocó en un matraz Erlenmeyer y se

pusieron a calentar sobre la plancha por 30 minutos aproximadamente. Al
finalizar el calentado de las soluciones, se retiran de la plancha y se dejan
enfriar a temperatura ambiente.

Para la experiencia utilizamos 4 placas Petri esterilizadas y rotuladas estás

placas se distribuyeron así: 2 placas Petri con 20 ML aprox. de Agar nutritivo y
2 placas Petri con 20 ML aprox. de papa dextrosa. Después de verter las
respectivas soluciones en cada placa Petri se tapan y se dejan por unos minutos
hasta que el Agar solidifique.
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Luego de esto obtuvimos nuestros 4 medios de cultivos.

Cada medio de cultivo fue contaminado con los dedos de un compañero del
grupo, el cual de forma delicada tocó con sus dedos la superficie del medio de
cultivo. Seguido se tomó una placa de Agar y una de papá dextrosa y se le
aplicó a forma de rocío Lysol en aerosol. Una vez terminado este procedimiento
se colocaron los medios de cultivos en la incubadora por 24 horas a 37°C, para
luego examinar y hacer un detalle cualitativo de cada medio de cultivo.
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Análisis y Resultados
Los cultivos después de estar sometidos a 72 horas aproximadamente en la
incubadora con una temperatura de 37°C, se procedió a sacarlas para observar
sus características.

En la imagen el medio de cultivo que esta en la parte superior izquierda es el

agar nutritivo que se le introdujo los dedos, en la parte superior derecha es el
agar nutritivo que se le roció Lysol, en la parte inferior izquierda es el agar
papa dextrosa que se le roció Lysol y en la parte inferior derecha es el agar de
papa dextrosa que se le introdujo los dedos delicadamente.

Después de sacar las cuatro muestras de medio de cultivo de la incubadora se

colocó en el contador de colonias para así visualizar mejor y contar las colonias.
se observó detalladamente.
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En la siguiente imagen se observo que se produjo una especie de hongo con

colore blanquecino y amarillentos.

En la siguiente imagen se observo que se cultivo bacterias en forma circular de

colonias aproximadamente 56 colonias de color amarillas y anaranjadas.
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Conclusión

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el

crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la
especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían
considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien
en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que
necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.
Tras esterilizar los medios – usando una autoclave – se dejan enfriar. Estos
deben ser manipulados en un ambiente libre de microorganismos, lo más común
es trabajar con un mechero encendido que asegura un ambiente aséptico en sus
cercanías.

La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad de medios de

cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para
todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias con exclusividad.
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Recomendaciones

Es aconsejable comprar los medios en cantidades pequeñas de tal manera que

sean utilizados dentro de los 6 meses, una vez abiertos.

El medio de cultivo debe prepararse en lotes de un tamaño tal que todo sea
utilizado en menos de una semana.
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Bibliografía

https://www.lifeder.com/15reparación-medios-cultivo/

https://www.lifeder.com/agar-papa-dextrosa/

Laboratory Exercises in Microbiology. Pelczar and Chan IV Edición 1977.

Microbiología. Pelczar/Reid/chan. Cuarta Edición 1982.

Microbiología. Geneve gray Young. IV Edición 1961.