Tema 5: Dicroísmo circular

La luz polarizada en un plano se puede descomponer en dos componentes

polarizados circularmente en sentidos opuestos. Ambas componentes están
en fase y son de la misma amplitud.

Luz circularmente polarizada

A la izquierda (LCP)

A la derecha (RCP)
Al pasar por un medio ópticamente activo, cada componente interactúa de
manera diferente con los centros quirales de las moléculas presentes
La diferencia en la absorción de la luz polarizada circularmente a la izquierda
(LCP) y la derecha (RCP) es la base del dicroísmo circular.

Una molécula que absorbe LCP y RCP de manera diferente es ópticamente

activa o quiral.

La luz polarizada plana se convierte en elíptica por efecto de un cromóforo

ópticamente activo
Al atravesar el medio quiral, la luz deja
de estar circularmente polarizada para
definir una elipse

La relación entre los ejes menor y mayor de la elipse

es, por definición, la tangente del ángulo teta θ (azul).

El ángulo θ se llama elipticidad, mientras que el

ángulo OR se llama rotación óptica (α ).

La elipticidad es una consecuencia directa de la

presencia de dicroísmo circular.

Se puede demostrar que la elipticidad es

directamente proporcional al dicroísmo circular:

θ = 32.98 CD
 ER

EL

ER - EL

ER + EL

ER - EL

ER + EL
Entonces como los componentes circularmente polarizados son
absorbidos en diferentes grados por una sustancia quiral, la luz que
pasa a través de la misma estará polarizada elípticamente y se dice que
esta sustancia tiene dicroísmo circular (DC), magnitud expresada en
unidades de elipticidad molecular (θ)
Como los índices de refracción del medio quiral son distintos para cada
componente, se produce un desfasamiento entre ellos que provoca la
rotación del plano de polarización en un ángulo α, dándose un proceso de
dispersión que se conoce como dispersión óptica rotatoria (DOR o ORD).
ORD y CD son manifestaciones diferentes de un mismo fenómeno:
la interacción de la luz polarizada (ER y EL) con moléculas quirales

En ORD, la detección consiste en evaluar el cambio de velocidad de los

haces a través del cambio en el índice de refracción: nR ≠ nL

En CD, la detección consiste en evaluar el cambio en la amplitud (|ER| y

|EL| ) de los haces a través del cambio en la absorción: εR ≠ ε L
Entonces tanto DC como DOR varían con la longitud de onda, pudiéndose
representar la rotación o elipticidad frente a la misma, obteniéndose
espectros de estos fenómenos.

Los espectros de dicroísmo circular se obtienen generalmente en las

regiones del ultravioleta cercano (250 a 350 nm) y lejano (180 a 250 nm) de
la radiación electromagnética.

R-10-Camphorsulfonic acid
Entonces el ámbito de aplicación de la espectroscopia de CD es estudiar la disposición
tridimensional de algunos grupos de cromóforos en una molécula de interés.

Los cromóforos son muy comunes en compuestos biológicos (por ejemplo, el

enlace peptídico de las proteínas o las bases nitrogenadas del ADN), por lo que
la espectroscopía de CD no está restringida a los compuestos cromóforos
quirales de bajo peso molecular
 Aplicaciones

•Determinación configuraciones absolutas de compuestos orgánicos u

organometálicos quirales, tanto en disolución como sólidos (en pastilla de
KBr)

•Determinación de la estructura secundaria de proteínas y de ácidos

nucleicos

•Estudios conformacionales de proteínas y péptidos

•Estudios de desnaturalización química o térmica de proteínas

•Estudios de unión a ligandos

Equipamiento

Espectropolarímetro con lámpara de Xe y sistema de

control de temperatura
Aplicación al estudio conformacional de proteínas
En el UV lejano (180 a 250 nm) absorbe el enlace peptídico

Se refleja el contenido de estructuras secundarias

Absorciones características:
α-hélice: Máximo a 190 nm
Dos Mínimos a 208 y 222nm

Hoja β: Máximo a 195

Mínimo a 217

Estructura desordenada: Mínimo a 195

Máximo a 212 nm
Los espectros de DC de una proteína en el UV lejano son una
combinación lineal de n espectros correspondientes a los diferentes
elementos de su estructura secundaria

Entonces:

Simulador de espectros de dicroísmo circular de proteínas

http://biomodel.uah.es/lab/dc/
Para consultar……
Breve introducción, tutorial , ejercicios :
www.imbjena.de/ImgLibDoc/cd/index.htm

Electromagnetic waves and circular dichroism:

an animated tutorial
http://www.enzim.hu/~szia/cddemo/edemo0.htm

- Methods in Molecular Biophysics. Serdyuk, Zaccai & Zaccai. Capítulo “Optical Activity”
(pp 601-624)

-Spectroscopic Methods for determining protein structure in solution (Ed.H.A. Havel)

Capítulo “ Protein Structure Analysis using CS” (M.G. Mulkerrin) (pp. 5-27)

-Circular dichroism and the conformational analysis of biomolecules. Gerald D. Fasman

(1996). Springer.

-Comprehensive Chiroptical Spectroscopy, Applications in Stereochemical Analysis of

Synthetic Compounds, Natural Products, and Biomolecules. Nina Berova, Prasad L.
Polavarapu, Koji Nakanishi, Robert W. Woody. Ed. John Wiley & Sons, Mar 27, 2012