Determinacion de Mercurio

Determinación de mercurio orgánico
e inorgánico en muestras
ambientales
Caroll Edith Cortés Castillo
Universidad Nacional de Colombia

Facultad de Ciencias, Departamento de Química
Bogotá, Colombia
2017
Determinación de mercurio orgánico
e inorgánico en muestras
ambientales
Caroll Edith Cortés Castillo
Trabajo de grado presentado como requisito parcial para optar al título de:
Magister en Ciencias Química
Directora:
Ph.D., Lic Química, Elianna Castillo Serna
Línea de Investigación:
Desarrollo de metodologías analíticas para determinar metales pesados
Grupo de Investigación:
Grupo de Estudios para la Remediación y Mitigación de Impactos Negativos al Ambiente
- Germina
Universidad Nacional de Colombia

Facultad de Ciencias, Departamento de Química
Bogotá, Colombia
2017
A mi familia
Por su amor y apoyo incondicional
A mis amores
Porque siempre serán combustible y motor que guía

mi andar
Agradecimientos
A la Universidad Nacional de Colombia Sede Bogotá y al grupo de investigación ―Grupo

de Estudios para la Remediación y Mitigación de Impactos Negativos al Ambiente‖ –
GERMINA que me permitieron reencontrarme con el ámbito académico e investigativo.
A mi directora la profesora Elianna Castillo Serna del departamento de Química por su

apoyo, guía, enseñanza y amistad.
Al profesor Jesús Alberto Agreda del departamento de Química que con su carácter
reflexivo me ayudo a perfilar el avance de esta revisión.
A todos los estudiantes e integrantes del grupo GERMINA porque desde su quehacer me
enseñaron y ayudaron en el desarrollo de este trabajo.
A mis jefes, mis compañeros y amigos del Laboratorio de Nutrición Animal de la Facultad
de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Sede Bogotá por su
paciencia y apoyo.
Resumen y Abstract IX
Resumen
En este trabajo se presenta una revisión bibliográfica sobre el mercurio en cuanto a sus
características biogeoquímicas, toxicológicas, y metodologías establecidas para la
cuantificación de especies de mercurio, profundizando en los procesos de extracción,
recuperación, análisis y cuantificación de mercurio orgánico (Hgo) y mercurio inorgánico
(Hgi) en muestras ambientales. Como complemento, se realizó una revisión del contexto
normativo en que se encuentra enmarcado el control de mercurio en diferentes tipos de
muestras, en especial de agua y alimentos (fundamentalmente pescado) en Colombia y
el mundo; así como los trabajos de investigación realizados en el país respecto a la
problemática de contaminación por mercurio producto de la minería del oro a pequeña
escala.
Con este trabajo se consiguió tener fundamentación científica suficiente para desarrollar
en el grupo de investigación Germina, una propuesta metodológica que pretende hacer
separación de especies de mercurio: orgánico (Hgo) e inorgánico (Hgi) en muestras
ambientales, mediante la aplicación de estrategias de extracción en fase sólida, y
cuantificación, usando el espectrofotómetro de absorción atómica con fuente continua de
alta resolución del Departamento de Química de la Facultad de Ciencias de la
Universidad Nacional Sede Bogotá.
Palabras clave: Mercurio, Especiación, Mercurio espectrometría de absorción atómica

con vapor frío, mercurio orgánico, mercurio inorgánico
X Determinación de mercurio orgánico e inorgánico en muestras ambientales
Abstract
This work presents a literature review on mercury in terms of its biogeochemical,
toxicological and established methodologies for the quantification of mercury species, in
deepen in the extraction, recovery, analysis and quantification of organic mercury (Hgo)
and inorganic mercury (Hgi) in environmental samples. As a complement, a review of the
regulatory context in which mercury control was framed in different types of samples,
especially water and food (mainly fish) in Colombia and the world; as well as the research
carried out in the country regarding the problem of mercury contamination caused by
small-scale gold mining.
With this work, it was possible to have sufficient scientific basis to develop in the Germina
research group a methodological proposal that intends to separate mercury species:
organic (Hgo) and inorganic (Hgi) in environmental samples, through the application of
solid phase extraction strategies, and quantification, using the atomic absorption
spectrophotometer with high resolution continuous source of the Department of
Chemistry of the Faculty of Sciences of the National University in Bogotá
Keywords: Environmental mercury, Speciation, Mercury, Cold Vapor Atomic Absorption

Spectrometric, mercury organic, mercury inorganic
Contenido XI
Contenido
Pág.
Resumen ..............................................................................................................................IX
Abstract .................................................................................................................................X
Lista de figuras ................................................................................................................ XIII
Lista de tablas .................................................................................................................. XIV
Lista de Símbolos y abreviaturas ................................................................................... XV
Introducción ......................................................................................................................... 1
1. Mercurio: características y prevalencia en el ambiente .......................................... 5

1.1 Mercurio. .............................................................................................................. 5
1.1 Especies químicas del mercurio ......................................................................... 5
1.2 Liberación de mercurio en el ambiente. .............................................................. 7
1.2.1 Mercurio en la atmosfera .......................................................................... 7
1.2.2 Mercurio en Suelo .................................................................................... 8
1.2.3 Mercurio en agua .................................................................................... 10
1.2.4 Mercurio en Biota ................................................................................... 13
1.3 Toxicidad del mercurio ...................................................................................... 13
1.4 Ciclo biogeoquímico del mercurio ..................................................................... 17
1.5 Emisiones de mercurio: Legislación.................................................................. 19
1.6 Contaminación por mercurio en Colombia........................................................ 22
2. Métodos de análisis de mercurio en muestras ambientales................................. 27

2.1 Toma, tratamiento y conservación de las muestras ......................................... 30
2.2 Determinación de especies de mercurio en Suelo y sedimentos .................... 32
2.3 Métodos de Determinación de Mercurio en Agua ............................................ 34
2.4 Métodos de Especiación de Mercurio en Muestras biológicas – Pescado ...... 38
3. Propuesta metodológica para la determinación y especiación de mercurio en

muestras ambientales ....................................................................................................... 43
3.1 Especiación de mercurio en muestras de agua ................................................ 45
3.2 Especiación de mercurio en muestras de suelo y sedimentos ........................ 47
3.3 Especiación de mercurio en muestras de pescado .......................................... 50
3.4 Manipulación de la muestra (salud y seguridad en el trabajo) ......................... 54
4. Conclusiones y recomendaciones ........................................................................... 55

4.1 Conclusiones ..................................................................................................... 55
XII Determinación de mercurio orgánico e inorgánico en muestras ambientales
4.2 Recomendaciones ............................................................................................. 56
A. Anexo A: Normatividad Colombiana. Niveles de mercurio permitidos en

vertimientos líquidos ......................................................................................................... 59
Anexo B: Protocolo de muestreo para pescado ............................................................ 63
Anexo C: Diseño dedales fríos......................................................................................... 65
Bibliografía ......................................................................................................................... 67
Contenido XIII
Lista de figuras
Pág.
Figura 1. Reacción cobalamina con mercurio. Dibujada por el autor .................................. 8

Figura 2.Propuesta de estructuras promedio de Hg complejado por suelo orgánico. ...... 10
Figura 3. Transformaciones del mercurio en ambientes acuáticos. Copiado de: [34] ...... 11
Figura 4.Estructura química del complejo de metilmercurio con el aminoácido cisteína y
estructura de la metionina [47]. .......................................................................................... 16
Figura 5. Emisiones mundiales de mercurio. Copiado de [2] ............................................ 18
Figura 6.Distribución de emisiones antropogénicas de mercurio, recopilado de [2] ......... 19
Figura 7. Estadística de importaciones de mercurio en Colombia 2010-2016, recopilado
de [55] ................................................................................................................................. 23
Figura 8. Países de procedencia del mercurio importado por Colombia, recopilado de [55]
............................................................................................................................................. 24
Figura 9. Representación gráfica de muestreo en pescado. Elaborado por el autor ........ 44
Figura 10. Metodología propuesta para la especiación de mercurio en muestras de agua.
............................................................................................................................................. 46
Figura 11. Metodología propuesta para la especiación de mercurio en muestras de suelo
y sedimentos basada en EPA3200 (parte 2) ..................................................................... 48
Figura 12 Metodología propuesta para la especiación de mercurio en muestras de suelo y
sedimentos basada en Almeida 2016 (parte 1) ................................................................. 49
Figura 13. Etapa de digestión en para la determinación de mercurio total en muestras de
pescado ............................................................................................................................... 51
Figura 14. Etapa de cuantificación de mercurio total en muestras de pescado ................ 52
Figura 15. Metodología para la especiación de mercurio en muestras de pescado ......... 53
Contenido XIV
Lista de tablas
Pág.
Tabla 1. Especies de mercurio [13] ...................................................................................... 6

Tabla 2. Límites máximos admisibles de mercurio aplicables para Colombia (*) .............. 19
Tabla 3. Esquema de extracciones sucesivas de especies de mercurio en suelo y
sedimentos propuesto por Bloom [28]................................................................................ 32
Tabla 4. Fracciones de mercurio que pueden determinarse por el Método US EPA 3200
[68]. ..................................................................................................................................... 33
Tabla 5. Aspectos relacionados a la muestra .................................................................... 43
Tabla 6. Recomendaciones de muestreo y conservación de la muestra antes del análisis
............................................................................................................................................. 44
Contenido XV
Lista de Símbolos y abreviaturas

Símbolo Término
°C Grado Celsius
Å Amstrong
nm Nanómetro
t Toneladas
um micrómetro
v/v volumen a volumen
Abreviatura Término
AAS Espectrometría de Absorción Atómica
ACGIH/EEUU Asociación para la salud ocupacional y
ambiental
AFS Espectrometría de Fluorescencia Atómica
AOAC Association of Official Agricultural
Chemists
ASTM Sección Americana de la Asociación
internacional de prueba de materiales
CG-FAS Cromatografía de gases acoplada a
espectrometría de fluorescencia atómica
con vapor frio
CG-MS Cromatografía de gases con
espectrometría de masas
CIN Comité Intergubernamental de
Negociación
COD Carbono orgánico disuelto
CTQ Centro Toxicológico de Quebec
CV-AAS Espectrometría de absorción atómica con
vapor frio
CV-AFS Espectrometría de fluorescencia atómica
con vapor frio
DCP-AES Espectrometría de emisión atómica con
plasma de corriente continua
DGT Técnica de gradiente difusivo
DIAN Dirección de aduanas e impuestos
nacionales
DLLME Microextración por dispersión liquido-
liquido
ELISA Ensayo por inmunoabsorción ligado a
enzimas
EM Espectrometría de masas
XVI Determinación de mercurio orgánico e inorgánico en muestras ambientales
EPMA Análisis de micro prueba de electrones
ET-AAS Espectroscopía de absorción atómica
electrotérmica
EURL-HM Laboratorio de referencia de la Unión
Europea para metales en alimentos
EXAFS Absorción de rayos X extendida de
estructura fina
FAO Organización de las Naciones Unidas
para la Alimentación y la Agricultura
FDA Agencia de drogas y alimentos de los
Estados Unidos
GC-AFS Espectroscopia de fluorescencia atómica
con cromatografía de gases
GC-ECD Cromatografía de gases con detector de
captura de electrones
GC-MS Cromatografía de gases acoplado a
espectrometría de masas
Hg Mercurio
Hgi Mercurio inorgánico
Hgo Mercurio orgánico
HPLC Cromatografía liquida de alta eficiencia
HPLC-DAD Cromatografía liquida de alta eficiencia
con detector de diodos
ICP Espectrometría de masas de plasma
acoplado inductivamente
ICP-AES Espectrometría de emisión atómica de
plasma acoplada inductivamente
ICP-MS Espectrometría de plasma inductivamente
acoplado a espectrometría de masas
ICP-OES Espectrometría de emisión óptica de
plasma acoplado inductivamente
IDEAM Instituto de Hidrología, Meteorología y
Estudios Ambientales
INS Instituto Nacional de Salud
INVIMA Instituto Nacional de Vigilancia de
Medicamentos y Alimentos
IOMC Inter-Organization Programme for the
Sound Management of Chemicals
IPCS International Programme on Chemical
Safety
IUPAC International Union of Pure and Applied
Chemistry
LC-CV-AAS Cromatografía líquida acoplada a
espectrometría de absorción atómica con
vapor frio
LC-CV-AFS Cromatografía líquida acoplada a
espectrometría de fluorescencia atómica
con vapor frio
LC-ICP-MS Cromatografía líquida acoplada a
espectrometría de masas de plasma
Contenido XVII
acoplado inductivamente
LC-MS Cromatografía líquida con espectrometría
de masas
MAE Extracción asistida por microondas
MDMSPE Microextracción sólida de dispersión
magnética
MIP-AES Espectrometría de emisión atómica de
plasma inducida por microondas
MOD Materia orgánica soluble
MOS Materia orgánica del suelo
MSDS Ficha de datos de seguridad
MSPE Extracción en fase sólida magnética
NAA Análisis de activación de neutrones
ONAC Organismo Nacional de Acreditaci
OMS Organización mundial de la salud
PE Polietileno
PEHD Polietileno de alta densidad
PET Polietilentereftalato
PIXE Emisión de rayos X inducida por protones
PNUMA Programa de las Naciones Unidad para el
Medio Ambiente
POE Procedimiento operativo estándar
PTFE Politetrafluoroetileno
SIMCO Sistema de Información minero
colombiano
SNC Sistema nervioso central
SPE Extracción en fase sólida
SPME Microextracción en fase sólida
SVA Voltamperometría anódica
US-EPA Agencia de protección ambiental de los
Estados Unidos
XAFS Absorción de rayos X de estructura fina
XRF Fluorescencia de rayos X
Introducción
En el contexto mundial, la evaluación de las emisiones de mercurio producto de su ciclo

biogeoquímico y del aporte por parte de las actividades humanas, así como el estudio de
las características toxicológicas, de movilidad y de transformación de este elemento en
los diferentes compartimentos ambientales se ha desarrollado desde los años 50s [1].
Debido a la preocupación internacional sobre el mercurio, el Consejo de Administración

del Programa de las Naciones Unidas para el Medio Ambiente (PNUMA) publicó en el
año 2002 la primera evaluación mundial sobre el mercurio y sus compuestos, en
cooperación con otros miembros del Programa Interinstitucional para la Gestión Racional
de las Sustancias Químicas1 . Como resultado de esta evaluación, se acordó que se
requería una mayor acción internacional para reducir los riesgos sobre la salud y el
medio ambiente [2]. Desde ese momento los esfuerzos locales e internacionales para
regular el uso y comercio de este elemento a nivel mundial se han hecho cada vez
mayores; producto de ello en el año 2013 se planteó el convenio de Minamata cuyo
objetivo es ―proteger la salud humana y el medio ambiente de las emisiones y
liberaciones antropógenas de mercurio y sus compuestos‖[2]
Según el informe quinquenal epidemiológico (2005-2012) del Instituto Nacional de Salud

[3] y el último informe de Planeación Nacional (Caracol, 13 noviembre de 2016) se ha
establecido que, las regiones con mayor contaminación por mercurio en el país y
posiblemente en el mundo, se encuentran ubicadas en el departamento de Antioquia, en
el que se reportaron alrededor de 320 casos de intoxicación entre 2013 y 2015.. En
Colombia se han realizado estudios referentes al contenido de mercurio, en peces y
aguas de la región de la Mojana y del Rio Sinú [5], en aguas, sedimentos y peces del rio
1
Inter-Organization Programme for the Sound Management of Chemicals (IOMC):
http://www.who.int/iomc/en/
2 Introducción
Amazonas [6], en aguas de la Quebrada la pedrera en Bogotá [7], y en procesos

asociados a minería ilegal de oro desarrolladas por la fiscalía general de la nación [8].
El último estudio nacional del agua de 2014 [9], indica que en 2012 se vertieron alrededor
de 205 t de mercurio provenientes del beneficio de plata (27,5%) y del oro (72,5%) a
agua y suelo de los departamentos de Antioquia, Chocó, Bolívar y Caldas, en ese mismo
informe se reportó que las subzonas con mayor afectación por vertimientos de mercurio
asociados al beneficio de oro son las correspondientes a: directos al Magdalena (Brazo
Morales), Bajo Nechí, Sucio, directos al Bajo Nechí, ríos Taraza, Man, Quito, Cajón,
Tamaná y otros directos al San Juan [9].
Si bien, en el país existen diversos institutos, universidades y laboratorios privados que

han desarrollado metodologías de cuantificación de mercurio total principalmente por
técnicas de Espectroscopia de Absorción Atómica con Vapor Frio (CV-AAS) y por
analizadores directos de mercurio, la diferenciación de especies (orgánica e inorgánica)
aún se encuentra en una etapa incipiente en cuanto a laboratorio acreditados para su
determinación. Sin embargo, desde el ámbito académico e investigativo los trabajo
desarrollados por Marrugo y Olivero en el norte del país han incluido la cuantificación del
metilmercurio (mercurio orgánico) que es considerado una de las formas del mercurio
con mayor toxicidad.[10], [11].
Este documento corresponde a un trabajo de revisión bibliográfica; para su desarrollo fue

necesario realizar la búsqueda de información científica (vigilancia tecnológica) en bases
especializadas como Scopus y Science Direct, de orden legal en las páginas de
búsqueda de las entidades relacionadas al sistema de información ambiental nacional
(SINA) y vigilancia en salud tales como el Instituto Nacional de Salud (INS) y el Instituto
Nacional de Vigilancia de medicamentos y alimentos (INVIMA) entre otros, y
adicionalmente como complemento a los aspectos relacionados al mercurio, su control,
cuantificación y especiación en entidades tales como la Agencia de Protección Ambiental
de los Estados Unidos (US-EPA), la organización Mundial de la Salud (OMS), el Código
Alimentario y la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la
Agricultura (FAO).
El énfasis primordial de este documento es en las metodologías de análisis para

especiación de mercurio por métodos no cromatográficos, para generar una propuesta
Introducción 3
metodológica en la que se emplea la CV-AAS como técnica de detección y cuantificación

de mercurio y sus especies en diversas muestras ambientales de acuerdo con las
condiciones actuales de disponibilidad de equipos del Departamento de Química de la
Universidad Nacional de Colombia Sede Bogotá.
1. Mercurio: características y prevalencia en
el ambiente
1.1 Mercurio.
El mercurio es un metal líquido, inodoro, plateado, pesado y ligeramente volátil a
temperatura ambiente, con un peso atómico de 200,59 g/mol. En estado sólido es blanco,
dúctil, maleable y puede cortarse con un cuchillo. Su símbolo (Hg) se tomó de su nombre
en latín: hydrargyrum, que significa plata líquida. Existen una gran cantidad de isótopos
naturales de este elemento: 202 (29,8%), 200 (23,13%), 199 (16,84%), 201 (13,22%),
198 (10,02%), 204 (6,85%) y 196 (0,146%). Se encuentra en la corteza terrestre en una
concentración de 0,5mg kg-1, en combinación con azufre, formando más de una docena
de compuestos diferentes; de esos compuestos, el más importante es el sulfuro rojo HgS,
conocido como cinabrio, el cual contiene 86,2% de Hg y 13,8 % de azufre, a partir de
este mineral se obtiene principalmente el mercurio metálico, ya que tiene una pureza
hasta el 99,9%. Algunos otros minerales de mercurio son: la corderoita (Hg 32+S2Cl2), la
livingstonita (HgSb4S7), la montroidita (HgO), el calomel (HgCl) entre otros.[12]. Su
solubilidad en agua es muy baja (de 20 a 60 μg L-1), mientras que en lípidos es casi mil
veces mayor (5 - 50 mg L-1) [13].
1.1 Especies químicas del mercurio
El mercurio existe en tres estados de oxidación: mercurio metálico (Hg0), mercurio

mercurioso [Hg(I)] y mercurio mercúrico [Hg(II)] (Tabla 1). El mercurio puede formar sales
inorgánicas, como cloruros, nitratos, sulfatos, y compuestos organometálicos [14]. Los
6 Determinación de mercurio orgánico e inorgánico en muestras ambientales
compuestos orgánicos se caracterizan por el enlace del mercurio a uno o dos átomos de
carbono orgánico, además pueden enlazarse con cualquier anión [15].
En compartimentos de la naturaleza, como el suelo, la forma predominante del mercurio

es en sales inorgánicas, siendo las más importantes el cloruro mercurioso (Hg2Cl2) o
calomel, con el que se fabrican electrodos de referencia y que ocasionalmente puede ser
también utilizado en medicamentos; el fulminato mercúrico [Hg(OCN2)2], un detonador en
explosivos, y el sulfuro mercúrico (HgS), pigmento de alto grado para pinturas [16] .
Los compuestos organomercúricos se caracterizan por la formación de enlaces

covalentes C-Hg muy estables, dicha estabilidad parece estar dada más por aspectos
cinéticos que termodinámicos; por otra parte, debido a que la afinidad del mercurio por el
oxígeno (a diferencia de otros metales) es muy baja, normalmente el mercurio presente
en la naturaleza está unido a uno o dos átomos de carbono formando principalmente
monometilmercurio (CH3Hg+) y dimetilmercurio (CH3HgCH3), estas formas químicas
presentan una elevada solubilidad en lípidos y son altamente tóxicas; el
monometilmercurio presenta adicionalmente solubilidad en agua [17].
Tabla 1. Especies de mercurio [13]

0
Mercurio inorgánico: Elemental Hg(0) Hg
2+
Mercurioso Hg(I) Hg2
2+
Mercúrico Hg(II) Hg
Sales inorgánicas de mercurio HgX2
-
X: –OH-, –CN -, –Cl -, –Br, -S2- HgX3
2-
HgX4
+
Mercurio orgánico: Monometilmercurio (MeHg+) CH3Hg
Dimetilmercurio (Me2Hg) (CH3)2Hg
Etilmercurio (EtHg+) CH3CH2Hg+
+
Fenilmercurio (PhHg) C6H5Hg
Capítulo 1 7
1.2 Liberación de mercurio en el ambiente.
Por acción microbiológica y abiótica se producen transformaciones de las especies de

mercurio en la atmósfera y en los ecosistemas terrestres y acuáticos, generándose así un
ciclo global del mercurio.
Se ha establecido que la principal fuente de emisión de mercurio atmosférico (cerca del

50%) es la generada por la actividad volcánica y es considerada una fuente natural, la
otra mitad se le atribuye a emisiones antropogénicos que tienen su origen en fuentes
estacionarias tales como plantas de energía alimentadas con gas o carbón, en la
explotación minera de oro, ferroniquel, carbón y de otros metales no ferrosos, en la
producción de cemento, acero, y también al uso del mercurio como catalizante, fungicida,
herbicida, desinfectante, pigmento y formador de amalgama en la minería de oro a
pequeña escala [18]. Se estima que la producción mundial de mercurio alcanzó su pico
máximo en los años 70´s con cerca de 10000 t, sin embargo, paulatinamente se ha visto
una disminución en su producción evidenciada en cifras que muestran que para los años
80´s la producción se reportó alrededor de 6500 t, en los 90´s bajo a 2000 t
aproximadamente [19], y se ha estimado que para el año 2013 la producción de mercurio
estuvo en las 1882 t siendo China el mayor productor [20].
1.2.1 Mercurio en la atmosfera
El mercurio elemental se encuentra fundamentalmente en la atmósfera en forma de

vapor, su presión de vapor es muy elevada lo que hace que se presenten condiciones de
concentración peligrosas en el ambiente a ciertas temperaturas, las otras formas
presentes son Hg particulado y Hg(II) unido a partículas en suspensión y en forma
gaseosa [21]. De estas tres formas la que mayor tiempo tarda en depositarse es la de
mercurio elemental (cercana a 1 año) seguida por la de Hg(II) particulado, mientras que
la especie Hg(II) gaseoso puede depositarse en horas o meses por medio de los
procesos de precipitación. La química atmosférica del mercurio implica diversas
interacciones con ozono (O3) y con radicales hidroxilo [22] que desencadenan reacciones
en fase gaseosa y en fase acuosa (en gotas de niebla, nubes y partículas de aerosol
delicuescentes), repartición de las especies de mercurio elemental y oxidado entre las
fases gaseosa y sólida y, por último, repartición entre las fases sólida y acuosa en el
caso de material particulado insoluble que se recoge por las gotas de agua de las nubes
[21].
1.2.2 Mercurio en Suelo
En suelo la forma más común de encontrar el mercurio es en estado divalente Hg(II), su

reducción a un estado de oxidación Hg(I) tiene un rango de estabilidad limitada, y la
forma metálica Hg(0), es algo volátil [23]; el mercurio inorgánico puede ser metilado
formando compuestos orgánicos de mercurio, especialmente metilmercurio (CH3Hg+),
proceso en el que se encuentran involucradas bacterias reductoras de sulfatos, a través
de la enzima metilcobalamina responsable de la conversión de Hg(II) en metilmercurio,
mediante la trasferencia de un grupo metilo (-CH3) y su transformación en
hidroxicobalamina como se muestra en la figura 1 [24][25], en general, esta reacción esta
mediada por procesos de óxido-reducción dependientes de condiciones estacionales que
controlan la concentración de metilmercurio en suelo y agua como efecto neto de los
procesos de metilación y desmetilación [26], [27].
H 2O
Figura 1. Reacción cobalamina con mercurio. Dibujada por el autor
La formación de metilmercurio se ve favorecida en condiciones ácidas y concentraciones

relativamente altas de mercurio; adicionalmente, se ha encontrado que la cantidad de
Capítulo 1 9
metilmercurio incrementa proporcionalmente con la concentración de iones sulfuro libres

en suelos o sedimentos, todo ello mediado por bacterias sulfato reductoras de las
especies Clostridium butyricum, Desulfobulbus propionicus, Desulfovibrio desulfuricans,
Desulfococcus multivorans, Desulfobacter sp., Desulfobacterium sp.[16].
Tanto el mercurio inorgánico Hg(II), como el metilmercurio, forman complejos estables

con la materia orgánica del suelos (MOS) y de los sistemas acuáticos, el metilmercurio
constituye solo una pequeña parte de mercurio total en suelo y agua; sin embargo,
presenta una alta toxicidad y grado de bioacumulación, tanto así que se ha establecido
por ejemplo que del 80 al 99% del mercurio total reportado en pescado es metilmercurio
[23].
La coexitencia de especies de mercurio en el suelo, depende de numerosos factores,

entre ellos: el tipo de suelo, el contenido de matería orgánica e inorgánica, la profundidad
de la capa de suelo, la aireación y humedad de este, el tipo de sedimientos, la
concentración de los diferentes ligantes, la evolución de los microorganismos, el pH, el
potencial redox, los contenidos de cloruros, de azufre y el tipo de impacto antropogénico
[16], [28], [29]. En particular, las proporciones relativas de los componentes del suelo
responsables de la retención de Hg (minerales de arcilla, Fe-, Al- y Mn (óxidos
hidróxidos), materia orgánica) varían con las condiciones geoquímicas que a su vez
dependen de la posición topográfica a lo largo del suelo [30].
Los niveles basales de mercurio en diferentes regiones del mundo, varían en un amplio
rango debido a la naturaleza global de la contaminación antropogénica con mercurio,
estableciendo, que la concentración promedio de mercurio en la capa superficial de suelo
no excede los 0,4 mg.kg-1 [28].
En general, la materia orgánica del suelo (MOS) junto con la materia orgánica disuelta
(MOD), juegan un papel fundamental en la movilidad, biodisponibilidad y la toxicidad de
metales traza [28]. Estudios realizados para establecer los sitio de unión del
metilmercurio a los ácidos húmicos usando absorción de rayos X, han mostrado que esta
molécula se enlaza preferentemente a ligantes sulfhidrilo (-SH), y que una vez se saturan
estos ligantes, entonces el CH3Hg+ restante se une a ligantes tipo carboxilo (figura2) [31],
es así como el Hg está complejado por dos grupos S orgánicos reducidos
(probablemente tioles) a una distancia de 2,33 Å en una configuración lineal (figura 2a).
Además, un tercer S reducido (probablemente un sulfuro orgánico) contribuye en la

atracción del mercurio a una distancia de 2,92 a 3,08 Å. Cuando todos los sitios de
afinidad a azufre, que corresponde a un 20-30% del total del S orgánico reducido se
saturaran, se encuentra una estructura que afecta a un grupo carbonilo -O ó amino - N a
2,07 Å y uno carboxilo -O en 2,83 Å en la primera capa, y dos segundas átomos
centrales de C en una distancia media de 3,24 Å, como se muestra en la figura 2b [32],
[33].
Figura 2.Propuesta de estructuras promedio de Hg complejado por suelo orgánico.
(a) Enlazamiento a grupos tiol en la primera capa y (b) Enlazamiento cuando los grupos
tiol ya se han saturado. El átomo de N representa un grupo amino-N o un grupo
carbonilo-O.
1.2.3 Mercurio en agua
En medios acuosos, el mercurio está presente en forma de sales inorgánicas, solo una
porción pequeña de metilmercurio se integra a las aguas por procesos de precipitación,
los niveles de metilmercurio en las aguas son menores que los de mercurio inorgánico
debido a la dificultad de las reacciones de metilación en fase acuosa y a la fácil
descomposición por luz UV solar de los compuestos orgánicos de mercurio (Figura 3)
[34].
Se estima que la concentración de mercurio total en las aguas naturales oscila entre 0,2
y 100 ng.L-1, de los que aproximadamente 0,05 ng.L-1 serían de metilmercurio lo que
representa alrededor del 5 % del mercurio total, porcentaje que aumentaría en áreas
fuertemente industrializadas y en áreas acuáticas de intensa metilación de mercurio
inorgánico. Se ha estimado que la vida media del mercurio en agua puede ser de unos
Capítulo 1 11
pocos minutos a muchos años, dependiendo del tipo de especie de mercurio

presente[13].
En Colombia los estudios desarrollados por Marrugo en la zona de la Mojana han

establecido niveles de mercurio total en agua en el rango de 160 a 460ng.L-1 [35].
DMHg
Hg (0) Hg (II) MMHg Hg (refractario)
DMHg
Hg (0) Hg (II) MMHg Hg (refractario)
Fitoplancton Zooplancton Peces Peces

Almacenamiento Almacenamiento pequeños grandes
de de
Almacenamiento Almacenamiento
2+ 2+ de de
Hg y MMHg Hg y MMHg
2+ 2+
Hg y MMHg Hg y MMHg
DMHg
HgS Hg (II) MMHg Hg (refractario)
Figura 3. Transformaciones del mercurio en ambientes acuáticos. Copiado de: [34]
Todas las transformaciones que sufre el mercurio dependen de diversos factores

medioambientales como la actividad microbiana, la temperatura, la disponibilidad de
carbono orgánico, la presencia de partículas en suspensión, el oxígeno disuelto y el pH
[13], [36].
Si las condiciones son favorables, cualquier forma de mercurio que entra en las aguas
superficiales puede ser convertida a iones metilmercurio principalmente por metabolismo
microbiano; las bacterias reductoras del azufre son las responsables de la mayor parte
de la metilación de mercurio, viéndose favorecida su actividad en condiciones

anaerobias. Levaduras como Candida Albicans y Saccharomyces cerevisiae, cuyo
crecimiento está favorecido por condiciones de bajo pH, son capaces también de metilar
el mercurio y reducir el mercurio iónico a mercurio elemental. Además, los compuestos
de cobalamina metilados producidos por la síntesis bacteriana parecen estar
involucrados en la metilación no enzimática de iones inorgánicos de mercurio. Sin
embargo, niveles altos de carbono orgánico disuelto (COD), reducen la metilación de
mercurio, posiblemente como resultado de la unión de los iones libres de mercurio con el
carbono orgánico disuelto, reduciéndose así su disponibilidad para la metilación. Aparte
de que el carbono orgánico disuelto inhibe en cierta medida la metilación bacteriana [21].
En general, la concentración de Hg 0 es mayor cerca de la interfase aire-agua mientras

que los niveles de Hg(II) y CH3Hg+ son más altos cerca de los sedimentos. En las aguas
dulces continentales no contaminadas, el Hg(II) no se encuentra como ion libre sino
formando complejos con el ión hidróxilo (Hg(OH) +,Hg(OH)2 o Hg(OH)3-), mientras que en
los estuarios y océanos predominan los clorocomplejos (HgCl+, HgClOH, HgCl2, HgCl3-,
HgCl42-) [13].
En ambientes anóxicos que contengan sulfuro y en un pH de 4-9, el mercurio se combina

formando sulfuro mercúrico. Bajo condiciones ácidas, la actividad del ion sulfuro decrece
y de esta forma se inhibe la formación de sulfuro de mercurio favoreciendo la formación
de metilmercurio. En presencia de sulfuro en disolución, también pueden encontrarse
complejos de sulfuro como HgS2H2, HgS2H-, HgS22- [27].
En términos químicos el monometilmercurio se comporta en el medio acuoso como el

mercurio inorgánico y se va a encontrar principalmente unido a partículas y a la materia
orgánica disuelta. Además en el medio marino se encuentra formando un complejo con
cloruro (CH3HgCl) y en aguas continentales forma el hidroxocomplejo neutro
correspondiente (CH3HgOH). Análogamente, en presencia de sulfuro forma CH 3HgS-,
pero este complejo tendrá una importancia mucho menor que los complejos sulfúricos del
mercurio inorgánico [21].
Capítulo 1 13
1.2.4 Mercurio en Biota
Un factor muy importante de los efectos del mercurio en el medio ambiente es su

capacidad para acumularse en organismos acuáticos y ascender por la cadena
alimenticia. De las diferentes formas de mercurio que pueden bioacumularse, el
monometilmercurio es una de las que se absorbe y acumula con mayor facilidad como se
mostró en la figura anterior (figura 3). El mercurio tiende a acumularse (bioacumulación),
transferirse (biotransferencia) y magnificar su concentración (biomagnificación) dentro de
los ecosistemas al incrementar el nivel trófico [26].
Los ríos son los ecosistemas que más se afectan por la presencia del mercurio debido a
la formación de rutas de transporte hacia las llanuras aluviales de la cuenca, produciendo
un incremento de la concentración en las zonas bajas, además de potencializar los
procesos de re-suspensión de los sedimentos en cada período de inundación,
permitiendo su ingreso en la biota acuática, en especial en los peces [37].
En general, cuando los organismos están expuestos a la contaminación por mercurio,se

surte un proceso de biomagnificación,; considerando que el consumo mundial de
pescado per cápita se acerca a los 20 kg.año-1[38], los estudios enfocados en la
detección y cuantificación de este metal y sus especies toma cada vez mayor
relevancia[39][14].
1.3 Toxicidad del mercurio
Tanto el mercurio metálico, como sus sales orgánicas e inorgánicas son venenos
protoplásmicos, fatales para humanos, animales y plantas. Los más tóxicos son los
compuestos orgánicos, y de ellos, los derivados alquilados. Los factores que determinan
los efectos tóxicos en humanos, son la velocidad de absorción y la cantidad absorbida,
las propiedades fisicoquímicas de los compuestos y la susceptibilidad del individuo. El
mercurio y sus compuestos pueden ingresar al cuerpo a través de la piel, del tracto
gastrointestinal y del tracto respiratorio[40].
En el caso del mercurio metálico, la principal forma de ingresar al organismo es en forma

de vapor, la cantidad que se absorbe a través de la piel es mínima. Los compuestos
inorgánicos de mercurio, después de que han ingresado al organismo, son absorbidos y

disociados por los fluidos corporales y la sangre, siendo distribuidos al plasma y
eritrocitos. Los aril-compuestos y los alcoxi derivados se descomponen en iones mercurio
y sufren el mismo proceso mencionado arriba [41].
Se ha encontrado que los alquil derivados de mercurio permanecen en el cuerpo debido

a su gran estabilidad y solubilidad; estos compuestos afectan el sistema nervioso central
y se acumulan en el cerebro, siendo eliminados más lentamente del organismo que las
sales inorgánicas y los aril y alcoxi derivados [21].
Las sales solubles en agua producen efectos corrosivos en la piel y membranas

mucosas, provocando náusea severa, vómito, dolor abdominal, diarrea con sangre, daño
a los riñones, una exposición crónica provoca inflamación de la boca, salivación
excesiva, pérdida de los dientes, daño a los riñones, temblores musculares, espasmos de
las extremidades, cambios de personalidad, depresión e irritabilidad. Generalmente los
compuestos de mercurio presentan bajas presiones de vapor, por lo que no contribuyen a
la presencia de vapores tóxicos en áreas de trabajo, lo que si sucede con el mercurio
metálico[42].
La reactividad del ion mercúrico, Hg(II), hace que presente una alta afinidad por muchos
ligantes orgánicos e inorgánicos, especialmente por aquellos que contienen azufre, lo
que explica que se une fuertemente a grupos sulfhidrilo y, en menor grado, a grupos
hidroxilo, carboxilo y fosforilo. De manera que el ion Hg(II) tiende a unirse a
metalotioneínas, ricas en cisteína (aminoácido no esencial que contiene un grupo
sulfhídrilo) [43].
El metilmercurio es el compuesto derivado del mercurio al que más está expuesta la

población especialmente por la dieta; sin embargo, el aire y agua, dependiendo del nivel
de la contaminación, puede contribuir significativamente a la ingesta diaria de mercurio
total[18]. Se ha establecido que en la mayoría de los productos alimenticios, el mercurio
se encuentra en forma inorgánica y en concentraciones inferiores a 20 mg.kg -1 de peso
fresco. En el caso de los peces y sus derivados se considera que son la fuente principal
de metilmercurio en la dieta, reportando niveles mayores a 1200 mg.kg-1 en las porciones
comestibles de tiburón, pez espada, y atún del mediterráneo [18].
Capítulo 1 15
El mercurio elemental y los compuestos de mercurio inorgánico y el metilmercurio son

considerados por US-EPA y OMS como principal fuente de contaminación; y son
responsables de efectos agudos y crónicos tales como afecciones del sistema nervioso
central, daño renal; en el caso del mercurio inorgánico y el metilmercurio se ha
establecido su dosis letal aguda en rangos de 14 a 57 mg.kg -1 y en 20 a 60 mg.kg-1 de
peso corporal respectivamente para una persona con un peso aproximado de 70 kg. En
el caso de la dosis de referencia crónica se establece para mercurio elemental en 0,3
ug.m-3.dia-1, para mercurio inorgánico en 0,3 ug.kg -1.dia-1 y para metilmercurio en 0,1
ug.kg-1.dia-1 [44].
La US-EPA no ha clasificado estos compuestos como cancerígenos debido a que los

estudios realizados hasta ahora son poco concluyentes y por tanto, el mercurio está en el
grupo D ―No carcinogénico‖, mientras que el mercurio inorgánico y el metilmercurio
pertenecen al grupo C ―posible carcinógeno humano‖. [44].
La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que los seres humanos pueden
llegar a tener un consumo diario de alrededor de 2,4 mg de metilmercurio proveniente de
todas las fuentes y una absorción diaria de aproximadamente 2,3 mg. La ingesta diaria
total de todas las formas de mercurio se ha estimado en 6.7 mg, con una carga adicional
de 3,8 a 21 mg de vapor de mercurio de las amalgamas dentales en los casos en que
están presentes. El nivel de mercurio en los peces, incluso para los seres humanos que
sólo consumen pequeñas cantidades (10-20 g de pescado-día), puede afectar
notablemente la ingesta de metilmercurio. El consumo de 200 g de pescado que contiene
500 mg.kg-1 de mercurio, se traducirá en la ingesta de 100 mg de mercurio
predominantemente metilmercurio.
Desde el punto de vista bioquímico, se ha establecido que al consumir alimentos

contaminados con compuesto de mercurio, el 95% del metilmercurio presente, se
absorbe por el tracto gastrointestinal y en exposiciones a vapores de este compuesto el
80% se absorben por inhalación. El metilmercurio es transportado por los glóbulos rojos
mediante la formación de una asociación de este a una proteína plasmática, de esta
manera penetra fácilmente a membranas y por tanto se puede distribuir por todo el
cuerpo, sin embargo, se ha establecido que la mayor acumulación se da en el sistema
nervioso central (SNC), en donde permanece en forma orgánica, en otros tejidos como
hígado y riñón se convierte y almacena como mercurio inorgánico, todo esto favorecido
por el hecho de que esta molécula tiene la capacidad de formar un complejo

metilmercurio-cisteína que tiene una estructura análoga a la metionina (figura 4),
adicionalmente, posee una velocidad de metabolización muy lenta, considerando que la
vida media del metilmercurio en sangre y en cerebro puede superar los 50 días [45].
El metilmercurio atraviesa fácilmente la placenta, encontrándose niveles mayores en el

cordón umbilical del feto que en la sangre materna. Un informe de Dutczak et al. (1991)
citado por Nabi en 2014, proporciona datos de ensayos realizados en cobayas, hámsters,
y un mono macaco indicando una gran absorción de metilmercurio por la vesícula biliar y
su ciclo biliar hepático [18], [45]. Los datos disponibles sugieren que el metabolismo de
metilmercurio es similar en animales y humano [46].
Figura 4.Estructura química del complejo de metilmercurio con el aminoácido cisteína y

estructura de la metionina [47].
La excreción del metilmercurio ocurre principalmente por las heces en forma de mercurio
inorgánico como resultado de la excreción biliar del compuesto y la conversión a la forma
inorgánica por la flora intestinal, parte del metilmercurio excretado por la bilis puede ser
reabsorbido, creando de ese modo la circulación enterohepática de la forma orgánica;
menos de 1% de la carga corporal de metilmercurio se excreta a diario, el metilmercurio
también se secreta en leche materna con concentraciones alrededor del 5% del
metilmercurio, además, también se puede eliminar a través de la exhalación, saliva y
sudor en forma de mercurio inorgánico [18], [45].
Capítulo 1 17
1.4 Ciclo biogeoquímico del mercurio
La contaminación por mercurio plantea riesgos para la salud humana y el medio

ambiente en todo el mundo y a pesar de que el mercurio está naturalmente presente en
el medio ambiente, la quema de carbón junto con otras actividades industriales y de
minería en pequeña escala, ha aumentado en un factor de tres a cinco veces la cantidad
de mercurio que cicla entre la tierra, la atmósfera y el océano[1].
Se estima que cerca de 500 Mg.año-1 es la cantidad de emisiones atmosféricas naturales

primarias de este elemento producto de los procesos naturales de vulcanismo y
desgasificación gradual de los sistemas de suelo. (Fitzgerald y Lamborg, 2004; Selin,
2009 citados por[48]), el mercurio viaja por todo el mundo antes de oxidarse a una forma
que se deposite en los ecosistemas [1]. La figura 5 muestra las características de emisión
de mercurio por fuentes naturales y antropogénicas haciendo tangible el hecho de que
cada vez las emisiones de origen antropogénico (2000 Mg.año -1) son casi el 75% de la
totalidad del presupuesto de mercurio global y por tanto desencadenando un
desequilibrio del balance natural del mercurio en los diversos compartimentos
ambientales; el modelamiento de estos fenómenos ayuda a ilustrar los principales
compartimentos y vías ambientales que son importantes en el ciclo global del mercurio y
las formas en que las emisiones naturales y antropogénicas a la tierra y al agua se
mueven entre estos mismos, además de evidenciar que las emisiones al aire no solo
provienen de fuentes naturales y fuentes antropogénicas, sino que también de re-
emisiones de mercurio previamente depositadas por el aire sobre suelos, aguas
superficiales y vegetación [1], [49].
Figura 5. Emisiones mundiales de mercurio. Copiado de [2]
Las actividades desarrolladas por el hombre han modificado el ciclo natural del mercurio
bien sea de manera intencional al hacer explotación minera del metal o al usarlo en
proceso de extracción minera (extracción de oro) e inclusive al incorporarlo en procesos
industriales (plantas de fabricación de cloro-alcalis entre otras industrias), en cuanto a las
modificaciones no intencionales se encuentran las emisiones de mercurio producto de
combustión de carbón para producir energía, la industria de cementos y la pirametalurgia
ya que trazas de Hg se liberan al someter esa clase de materiales a altas temperaturas
[48]. El mercurio continúa circulando en la atmósfera, los océanos y el sistema terrestre
durante siglos y hasta milenios antes de que regrese a los sedimentos de los océanos
profundos, donde se han reportado cálculos de tiempo de vida del mercurio que van
desde los 3000 hasta los 10000 años [1].
La estimación de emisiones atropogénicas primarias totales de mercurio están en el

rango de 1960 a 2800 Mg.año-1, los aportes a esta emisión se le atribuyen principalmente
a Asia con un aporte cercano a los 777 Mg.año -1, seguida por África con 330 Mg.año -1 y
Sudamérica con 245 Mg.año-1, como se muestra en la figura 6 [2].
Capítulo 1 19
31%
40% Asia
Africa
Sudamerica
resto planeta
12%
17%
Figura 6.Distribución de emisiones antropogénicas de mercurio, recopilado de [2]
1.5 Emisiones de mercurio: Legislación
Debido a la amplia evidencia referente a la toxicidad del mercurio y sus efectos

perjudiciales para la salud humana y el medio ambiente (incidente de Minamata,
reconocimiento oficial en 1956) [50], la mayoría de los países desarrollados han
establecido normativas referentes a los límites máximos permitidos en diferentes fuentes,
agua, aire, suelo y alimentos, en el caso de Colombia se han acogido dichos
lineamientos internacionales, y estos se resumen en la tabla 2.
Tabla 2. Límites máximos admisibles de mercurio aplicables para Colombia (*)

Matriz de mercurio Limite Observación Fuente/referencia
bibliográfica
Limites en agua
-1
Agua potable 0,001 mg.L Resolución 2115/07
-1
Agua uso pecuario 0,01 mg.L Agua para uso pecuario Decreto 1594/84
-1
Agua residual 0,01 mg.L Vertimiento de red de Resolución 3957/09
acueducto Bogotá
-1
Agua residual 0,00025 mg.L Vertimiento de corriente Resolución 3956/09
principal Bogotá
Limites en aire
-1
Hg exposición no 0,001 mg.L EPA
laboral
-3
Hg en aire de zonas 10-20 ng.Hg m aire Decreto 602/1998
urbanas
-3
Hg en aire de zonas 6 ng Hg.m aire Decreto 602/1998
suburbanas
-3
Límite máximo < 1 ug.m Mercurio inorgánico 1 Resolución 610/10
permisible año de exposición Colombia
(Norma calidad de aire o
nivel de inmisión en
condiciones de
referencia)
-3
Lugar de trabajo 0,025 mg.m ACGIH/EE.UU. (valor
TLV), 1994
Limites en alimentos
-1
Consumo humano (Hg 1,6 mg.kg peso Consumo máximo FAO/OMS 2007
orgánico) corporal (PC) semanal de Hg orgánico
-1
Consumo humano 5 ug.kg PC Consumo máximo FAO/OMS 2007
semanal de Hg total
-1
Pescado 0,5 ug Hg.g Límite máximo de Codex Alimentarius
metilmercurio en
pescado no depredador
para consumo humano
-1
0,50 mg.Hg.kg Productos de la pesca y Resolución No. 122 de
carne de pescado 2012
-1
1,00 mg Hg.kg Atún y peces
depredadores
Limites biológicos
-1
Sangre ≤20ug.L Centro toxicológico de
Expresado como Quebec (CTQ 2011)
-1
Orina ≤50ug.L mercurio total CTQ 2011
-1
Cabello ≤5ug.L OMS 2011
2
Limites en biosólidos
Tipo A o B con Hg de
-1 - -1 Tasa máxima de Resolución 1287 de
10 mg kg y 20 mg kg 0,85 kg Ha-año
1 aplicación 2014
respectivamente
(*)
Modificado de: OPS/OMS, 2011 Cooperación técnica entre Brasil, Bolivia y Colombia: teoría y práctica para el
fortalecimiento de la vigilancia de salud de poblaciones expuestas a mercurio.
De forma complementaria a la normatividad ya listada se encuentra la resolución 631 de

2015 del Ministerio de Ambiente y Desarrollo que establece límites máximos de emisión
por tipo de industria y/o fuente de emisión. (Anexo A)
Teniendo en cuenta que los efectos tóxicos de sustancias, como el mercurio, tienen
incidencia a nivel mundial por sus características de migración biogeoquímica y
considerando que el uso del mercurio sigue siendo muy amplio a pesar de las
2
De acuerdo con la resolución 1287 de 2014, art.3, un biosolido se define como el ―producto resultante de la estabilización
de la fracción orgánica de los lodos generados en el tratamiento de aguas residuales municipales, con características
físicas, químicas y microbiológicas que permiten su uso. No son biosólidos las escorias y cenizas producto de la oxidación
o reducción térmica de lodos, así como los residuos que se retiran de los equipos e instalaciones de la fase preliminar del
tratamiento de aguas residuales, ni los provenientes de dragados o de limpieza de sumideros.‖
Capítulo 1 21
limitaciones y prohibiciones que ha establecido cada país, especialmente por la

comercialización ilegal del mismo para minería de oro a pequeña escala, el Consejo de
Administración del Programa de las Naciones Unidad para el Medio Ambiente (PNUMA),
estableció un Comité Intergubernamental de Negociación (CIN) para que definiera
lineamientos de carácter mundial en el tema de uso, transporte y comercialización del
mercurio y que tuviese características jurídicamente vinculantes, de donde se establece
el Convenio de Minamata (enero de 2013) [2], cuyo objetivo es «Proteger la salud
humana y el medio ambiente de las emisiones y liberaciones antropogénicas de mercurio
y sus compuestos» y dentro de sus aspectos más destacados se encuentra la prohibición
de nuevas minas de mercurio, la eliminación gradual de las existentes en un plazo no
mayor a 15 años, medidas de control de emisiones a la atmósfera, y la regulación
internacional del sector informal para la extracción de oro artesanal y en pequeña escala
[2].
Si bien, Colombia es uno de los países firmantes aún no ha ratificado dicho Convenio,
por tanto no está vigente en el país, sin embargo se han adelantado procesos legislativos
por parte del Congreso de la Republica con la expedición de la Ley 1658 de 2013 y "por
medio de la cual se establecen disposiciones para la comercialización y el uso de
mercurio en las diferentes actividades industriales del país, se fijan requisitos e incentivos
para su reducción y eliminación y se dictan otras disposiciones", en ella se establece la
necesidad de un registro de usuarios de mercurio, el control de las importaciones de este
metal y la disminución y eliminación de su uso, además propone su erradicación en todos
los procesos industriales y productivos en un plazo no mayor a diez (10) años y para la
minería en un plazo máximo de cinco (5) años [51].
Por otra parte, el año pasado el Ministerio de Comercio expidió el Decreto 2133 del 22 de
diciembre de 2016, a través del cual se ponen reglas a la importación de mercurio, y se
da cumplimiento al artículo quinto de la Ley 1658 del 2013 que ordena al Ministerio de
Comercio, Industria y Turismo, en conjunto con el de Ambiente y Salud y con la Dirección
de Aduanas e Impuestos Nacionales (DIAN), hacer seguimiento y controlar la importación
y comercialización del mercurio [52].
En este decreto el Ministerio determinó un cupo de importación anual de 63 toneladas,

de las cuales, 40 toneladas podrán ingresar al país desde que se publique el decreto en
el Diario Oficial hasta el 15 de junio de 2017 y las 23 toneladas restantes deberán
ingresar entre el 16 de junio y el 15 de septiembre de 2017, fecha desde la cual no podrá

ingresar mercurio para uso en la minería [52].
Entre el 16 de septiembre del 2017 y el 15 de septiembre de 2020, el cupo de

importación será de dos toneladas anuales, las que se podrán usar en actividades
diferentes a la minería. Este cupo será administrado por el Instituto Nacional de Vigilancia
de Medicamentos y Alimentos (INVIMA) y el Ministerio de Comercio, Industria y Turismo,
cada uno desde el marco de sus competencias. Por otra parte se establece que la Dian,
en máximo 45 días a partir de la expedición del decreto, definirá los lugares por los
cuales se podrá importar el mercurio; al respecto, la Dian ha generado un proyecto de
resolución que establece que “el mercurio identificado con la subpartida arancelaria
2805.40.00.00 deberá ingresar e importarse exclusivamente por las jurisdicciones de los
puertos y aeropuertos de las Direcciones Seccionales de Cartagena, Buenaventura y
Medellín, y bajo ninguna circunstancia podrá autorizarse el Régimen de Tránsito
Aduanero para ésta mercancía, con excepción de la modalidad de transbordo‖ [53],
aunque a la fecha no ha sido emitido formalmente.
En cuanto a la reducción en el uso de mercurio se encuentra la resolución 159 de 2015,

de la Secretaria Distrital de Salud de Bogotá y que ―establecen los lineamientos que
deben cumplir los Prestadores de Servicios de Salud de Bogotá, D.C. para la eliminación
de productos y dispositivos con contenido de mercurio y la sustitución por alternativas
seguras y tecnológicamente no contaminantes‖[54].
1.6 Contaminación por mercurio en Colombia.
En el contexto colombiano se ha establecido que en el departamento de Antioquia están

localizados los municipios con mayor contaminación por mercurio del país y
posiblemente del mundo reportando altos índices de intoxicación por este metal. [3] [4]
Como se muestra en la figura 7 y de acuerdo con las cifras del Ministerio de Comercio,
Colombia ha importado en los últimos años un promedio de 100 t de mercurio por año
para el desarrollo de su actividad minera [55], lo que demuestra que a pesar de la firma
del convenio de Minamata en 2013 y del establecimiento de normativa para regular el
uso de mercurio en el país, estas medidas no han tenido suficiente alcance para que se
presente una disminución significativa en el uso de este elemento, a pesar de estar a
Capítulo 1 23
puerta de cumplirse el plazo de reducción y eliminación de la minería de oro a pequeña

escala.
140 133,2
127,1
120 113,3
101,3 99,9
100 95,1
84
Toneladas
80
60
40
20
0
2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016
Año
Figura 7. Estadística de importaciones de mercurio en Colombia 2010-2016, recopilado

de [55]
Las importaciones de mercurio que realiza Colombia provienen principalmente de México

(25%), España (21%), Países Bajos(20%), Estados Unidos (17%) y Alemania (9%) entre
otros (8%) [55], [56]. (figura 8).
Otros
Alemania México
Estados Unidos
España
Paises Bajos
Figura 8. Países de procedencia del mercurio importado por Colombia, recopilado de [55]
De acuerdo con Tognelli (2016) en el Libro ―Estado de Conservación y Distribución de la

Biodiversidad de Agua Dulce en los Andes Tropicales‖, en Colombia la cuenca
Magdalena- Cauca produce el 93% de la producción nacional de minerales metálicos y el
90% de minerales no metálicos y la extracción de oro en el periodo 2003-2014 de la
cuenca del nor-occidente de los Andes fue de alrededor de 846 t, dentro de la cual se
realizó la disposición no adecuada de muchos desechos contaminantes en los sistemas
acuáticos, presentando como ejemplo de su magnitud que para el año 1996 se vertieron
a rios y quebradas por cada tonelada de oro producida cerca de seis toneladas de
mercurio [57], lo que a cifras actuales de producción de oro (alrededor de 62 t en 2016 de
acuerdo a lo reportado por el Sistema de información Minero Colombiano-SIMCO) podría
significar un vertimiento de 372 t de mercurio.
En Colombia, existen diversas investigaciones sobre la bio-acumulación de metales

pesados en los peces de la región de la Mojana y del Rio Sinú [5], [35], [58] y su impacto
en las poblaciones humanas expuestas [35], [43], [59], particularmente en las cuencas
del rio Sinú, San Jorge y Magdalena-Cauca. Estos estudios muestran que la
concentración del mercurio dentro del tejido está asociada con la dieta del pez, así las
Capítulo 1 25
especies carnívoras (Hoplias malabaricus) son las que tienen las mayores
-1
concentraciones, 1,39 ± 0,69 μg.g de peso húmedo, seguidas por las omnívoras
(Leporinus muyscurum), 0,40 ± 0,11 μg.g-1 de peso húmedo y por último de las
detritivoras (Cyphocharax magdalenae), 0,15 ± 0,02 μg.g-1 de peso húmedo, por tanto los
peces carnívoros presentan concentraciones de mercurio superiores a los permitidos
para consumo humano (0,5 mg.kg-1) [57], lo cual es coincidente con los reportes en la
Amazonia colombiana en donde se encontró que el 30% de los pescados estudiados
presentaban contenido de mercurio total superiores a las concentraciones normalizadas
con valores de hasta 2,0 mg.kg-1 [6], también se encuentran reportes de los contenidos
de mercurio en aguas de la Quebrada la pedrera en Bogotá [7], y en procesos asociados
a minería ilegal de oro desarrolladas por la fiscalía general de la nación [8].
De acuerdo con los registros encontrados en la lista de laboratorios ambientales

acreditados por el Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales-IDEAM
consolidada a 31 de diciembre de 2016, en Colombia, existen 33 laboratorios registrados
que realizan análisis de mercurio fundamentalmente en la matriz agua (alrededor de 29) ,
y algunos de ellos también incluye matrices como suelo, sedimentos, residuos peligrosos
y aire, por otra parte, al revisar el directorio oficial de acreditación del Organismo
Nacional de Acreditación de Colombia-ONAC, se encontró que solo hay siete laboratorios
con acreditación en la norma ―Requisitos generales para la competencia de los
laboratorios de ensayo y de calibración‖ (ISO/IEC 17025:2005) y de los cuales solo tres
también están registrados ante el IDEAM, en esta misma base se encontraron dos
laboratorios acreditados para muestras diferentes al agua; uno, para determinación de
mercurio total en carbón y otro para determinación de mercurio en productos derivados
del pescado y en semillas y harinas de trigo.
La mayoría de ellos se localizan en Bogotá (15), seguidos por ciudades como Medellin
(6), Cali (3), Barranquilla (4) y otras ciudades (5)
2. Métodos de análisis de mercurio en
muestras ambientales
En este aparte se presentan los métodos de análisis de mercurio aplicados en específico
a muestras ambientales: suelo, sedimentos, agua y pescado.
La espectrometría de absorción atómica con vapor frio (CV-AAS) puede considerarse

como la metodología más popular para la determinación de mercurio en prácticamente
cualquier tipo de muestra, ya que el mercurio es un elemento metálico que tiene una
presión de vapor muy alta a temperaturas relativamente bajas y puede introducirse
cuantitativamente en el espectrómetro como vapor sin dificultad. La absorción a 253,7 nm
en la región ultravioleta se ha medido con el uso de lámparas de vapor de mercurio así
como lámparas de cátodo hueco como fuente de luz [1], [60]–[64].
La forma de liberar el mercurio de las muestras acuosas o digeridas es la reducción

medida por el uso de cloruro de estaño o de boro hidruro de sodio seguida de la
volatilización e introducción del mercurio mediante la ayuda de una corriente de gas. Los
procedimientos para eliminar la interferencia han sido importantes en la determinación
del mercurio en matrices inorgánicas en las que la descomposición completa es difícil
incluso con el uso de ácidos fuertes. Se han adoptado dos métodos para eliminar las
interferencias causadas por los vapores orgánicos: la amalgamación con oro para
purificar el vapor de mercurio y un método de corrección de fondo óptico para la
espectrometría. El método de amalgamación del oro se basa en la adsorción selectiva de
una superficie de oro a temperatura ambiente, posteriormente se purgar el vapor
orgánico, y el mercurio se libera de la trampa por calentamiento y luego se introduce en
el espectrómetro. Esta estrategia no solo funciona para purificar el mercurio sino que
ayuda a mejorar la sensibilidad del análisis. Según el reporte técnico de Morita y
colaboradores en 1998, el uso de una lámpara de cuarzo y la línea de resonancia de
184,9 nm en la región UV de vacío proporcionó un aumento de la sensibilidad sobre la
línea comúnmente empleada de 253,7 nm. La precisión mejorada para CV-AAS se

obtuvo utilizando la línea de resonancia de 184,9 nm resonancia presentado un límite de
detección para Hg 30 veces menor que cuando se utiliza la línea de 253,7 nm [19].
Por otra parte, la extracción de las especies de mercurio incluye procesos que pueden ir
desde tratamiento de la muestra con ácidos fuertes [65], [66] como es el caso de suelos,
sedimentos, aguas y residuos líquidos; extracción alcalina [67], usada principalmente en
muestras biológicas y de sedimentos o en otros casos procesos de extracción secuencial
aplicada en el análisis de suelos y sedimentos [10], [68] aunque no proporcionan
información específica sobre la composición de los compuestos extraídos, cada una de
las fracciones extraídas contiene un conjunto de compuestos de mercurio con estrecha
similaridad en sus parámetros de movilidad físicoquímica y de disponibilidad biológica
[69].
La determinación de niveles traza de mercurio requiere un paso de preconcentración

dentro de esta estrategia se emplean la extracción en fase sólida (SPE) [65], la pirolisis
[69], la preconcentración con amalgamador de oro, la extracción en punto de nube [61],
[70] y la extracción liquido – liquido. En el caso de la SPE la ventaja de su uso reside en
que genera menos residuos, disminuye el efecto matriz, la fase sólida es fácilmente
recuperable y presenta mayores índices de recuperación además de no requerir el uso
de solventes tóxicos, recientemente se emplea la extracción en fase sólida con sorbentes
como plata o algodón de plata, con resinas de quelatación que contienen
ditiocarbamatos, azul de metiltimol, mercaptobenzotiazoles, carbón activado, silica-C18
modificada [71], además de otras estrategias de concentración como el uso de sistemas
ternarios compuesto de agua- antipirina y ácido sulfosalicílico [72] y amberlita [65].
La detección de las especies de Hg se hace en algunos casos con métodos altamente

sensibles como la espectrometría de fluorescencia con vapor frío, además del uso de la
espectrometría de masas de plasma acoplado inductivamente (ICP-MS) muy usada en el
análisis de especiación [34] o en otros casos por técnicas no menos sensibles como la
espectrometría de absorción atómica con vapor frio (CV-AAS)[60], [65].
Si bien, establecer las concentraciones de mercurio total es importante, al considerar las

características toxico cinéticas de su forma orgánica, se hace más relevante establecer
metodologías de especiación, y como parte de ello la comunidad científica ha empleado
Capitulo 2 29
dicha palabra para referirse a aspectos variados de las condiciones de una determinada
sustancia ligados a aspectos tales como su movilidad, estado de oxidación e interacción
con otras sustancias, de esta manera la International Union of Pure and Applied
Chemistry (IUPAC) define el análisis de especiación como ―el análisis de compuestos
químicos que difieren en composición isotópica, conformación, oxidación o estado
electrónico, o en la naturaleza de su sustituyentes acomplejados o en unión covalente,
que se pueden considerar como especies químicas distintas‖[73].
En las últimas décadas se han desarrollado metodologías de especiación del mercurio,

que usan tecnologías como la cromatografía líquida con espectrometría de masas (LC-
MS), cromatografía gaseosa con espectrometría de masas (CG-MS) y cromatografía
gaseosa con detector de captura de electrones (GC-ECD) [60], [74], la espectrometría de
emisión óptica de plasma acoplado inductivamente (ICP-OES) y la espectrometría de
plasma inductivamente acoplado a espectrometría de masas (ICP-MS), también se
reporta el análisis por absorción de rayos X especialmente aplicada a análisis de
especies de mercurio en suelo [23], y los métodos electroquímicos [19], [75], [76].
También se ha logrado avances en el desarrollo de sistemas híbridos y sistemas on-line,

con énfasis en tecnologías que combinan separaciones cromatográficas y detección por
métodos espectroanalíticos, como, por ejemplo, LC-CV-AAS, LC-ICP-MS, LC-CV-AFS,
CG-AFS [60].
El uso de sistemas híbridos amplifica en muchas órdenes de magnitud la sensibilidad

para cuantificar el mercurio y mejoran la capacidad de especiación. Sin embargo, exigen
la necesidad de acoplarse a tecnologías de excelente separación y tecnologías
espectroanalíticas, hecho que prácticamente duplica los costos para adquirir y desarrollar
este tipo de metodología. Nuevamente, el uso de estas metodologías demanda costos.
Se están perfeccionando los sistemas que usan cromatografía líquida o gaseosa
acoplados a espectrómetros de masa. Estos han demostrado alta versatilidad para
identificar y cuantificar especies organomercuriales (metilmercurio, etilmercurio,
dimetilmercurio, fenilmercurio, etc.)[77]. Sin embargo, su adquisición y mantenimiento
involucran costos elevados, en comparación con metodologías que usan GC-ECD,
equipos comercialmente disponibles a bajo costo. No obstante, el uso de GC-ECD, a
pesar del menor costo de adquisición de tecnologías, exige etapas más trabajosas de
extracción y separación de las muestras; se usa principalmente para cuantificar el

metilmercurio. Otro aspecto metodológico importante es la necesidad de que las
muestras para análisis se encuentren disueltas en fluidos para cuantificación en la
mayoría de estas tecnologías. Es decir, exigen etapas de extracción delicadas y cuyas
pérdidas pueden ser significativas [74].
2.1 Toma, tratamiento y conservación de las muestras
El riesgo de contaminación de la muestra debida a los materiales y recipientes de

almacenamiento puede ser considerable, además algunas formas del mercurio son
volátiles o tienen afinidad por los materiales de los recipientes de almacenamiento [78].
Por lo tanto, la recolección apropiada de muestras, el pretratamiento, y los
procedimientos de almacenamiento son críticos.
En la recolección, pretratamiento y almacenamiento de muestras ambientales son

populares los elementos polímericos, de vidrio, acero inoxidable y aluminio. Se ha
reportado el uso de contenedores de polietileno (PE) en la recolección y almacenamiento
de muestras de agua, sin embargo, los contenedores PE no se recomiendan en el
análisis de especiación del elemento, debido a la rápida degradación del mercurio
orgánico, los procesos de interconversión y lo fenómenos de adsorción superficial [79].
Otros materiales como el polietilen tetrafluoroetileno (PTFE/teflón), Polietileno fluorinado

(FLPE), polietilentereftalato (PET) y los recipientes de vidrio y cuarzo son los más
recomendados para el almacenamiento de muestras de mercurio, siendo el PTFE el más
empleado por sus bajo costo, su carácter reciclable, y porque no se rompen fácilmente
en comparación con los envases de vidrio; además, las técnicas de conservación de
muestras tales como pretratamiento de muestras, adición de varios conservantes y
pretratamiento de envases, lavado en ácido se recomiendan ampliamente para reducir al
mínimo la perdida de analito durante el tiempo de almacenamiento [63].
La muestra de agua generalmente se filtra con membranas de 0,45 μm para eliminar el

material partíiculado y luego se acidifican con HNO 3 [65] o HCl [80] para preservar los
analitos y para prevenir el crecimiento de microorganismos. En diversos artículos se
indica que en general, el almacenamiento y la temperatura correcta para las muestras
Capitulo 2 31
ambientales deben ser en la oscuridad y a 4°C, respectivamente. En los últimos años, la

micro extracción en fase solida (SPME) y la técnica de gradiente difusivo (DGT) han sido
mostradas como estrategias promisorias para el almacenamiento de Hg en el análisis de
muestras ambientales ya que en estas técnicas, los analitos son adsorbidos y
estabilizados sobre los materiales sólidos directamente en campo haciendo más fácil su
transporte y almacenamiento en comparación con una fase líquida y de esta manera,
minimizar la pérdida de analito.[71], [81].
En el caso de las muestras de sedimento y suelo pueden ser almacenadas de manera

diferente usando contenedores de PE previamente limpiados con ácido en los cuales se
deposita la muestra se homogeniza y se congelan hasta el análisis.[80], [82], el pre
tratamiento de las muestras con soluciones ácidas ayuda a conservar los analitos y evita
la interconversión de especies. Por otra parte las muestras de sedimentos deben cubrirse
con una capa delgada del sitio de donde fueron extraídos y luego sellarlos evitando dejar
espacios de cabeza vacíos.
En cuanto al tratamiento en el laboratorio para las muestra de suelo se reportan procesos

de secado, homogenización, tamizaje y almacenamiento en recipientes de polietileno de
alta densidad (PEHD); considerando que la temperatura de secado puede influir en el
contenido de mercurio en las muestras de suelo en general se recomienda el secado por
liofilización [83].
En el caso de muestras biológicas, en especial pescado, se ha estudiado la influencia del

tiene el método de secado y el tipo de metodología de extracción encontrando que los
porcentajes de recuperación de las especies de mercurio es mayor cuando el secado se
realiza a temperaturas no mayores a los 40°C por un tiempo de 48 horas en comparación
con el proceso de liofilización y que el mejor medio de digestión para determinar mercurio
total es el que emplea ácido nítrico concentrado (HNO 3 al 63%) o ácido clorhídrico (HCl
37%) y que en el caso de requerir especiación se recomienda las extracción alcalina
[84][85].
2.2 Determinación de especies de mercurio en Suelo

y sedimentos
Los métodos de determinación de mercurio en suelo y sedimentos más comúnmente

usados incluyen la extracción secuencial [86], pirolisis, y la cuantificación por
espectrometría de vapor frio (CV-AAS), espectrometría de fluorescencia de vapor frio
(CV-AFS), espectrometría de emisión óptica de plasma acoplado inductivamente (ICP-
OES), espectrometría de plasma inductivamente acoplado a espectrometría de masas
(ICP-MS), e ICP-MS acoplado a HPLC para separar las especies, también se reporta el
análisis por absorción de rayos X (principalmente XAFS y EXAFS) [23], [87], además de
diversas publicaciones que emplean la determinación directa por amalgamación y
posterior desorción térmica (DMA) [88]. Los métodos de extracción son más
frecuentemente empleado en la investigación de especies de mercurio en suelo y
sedimentos, aunque no proporcionan información específica sobre la composición de los
compuestos extraídos. Cada una de las fracciones extraídas contiene un conjunto de
compuestos de mercurio con estrecha similitud en sus parámetros de movilidad
físicoquímica y de disponibilidad biológica[69].
En la tabla 3 se resume uno de los métodos de extracción de compuestos de mercurio

empleado en el análisis de suelos y sedimentos y que reporta un límite de detección en
0,1-5 mg.kg-1 para todas las facciones de mercurio analizadas.
Tabla 3. Esquema de extracciones sucesivas de especies de mercurio en suelo y

sedimentos propuesto por Bloom [28].
Etapa Reactivo extrayente Fraccion macerada Compuesto de Hg

característico
1 Agua desionizada Solubles en agua HgCl2, HgSO4
2 HCl 0,01M + AcOH 0,1 M, pH2 Solubles en ácido HgO
3 KOH 1 M Complejos orgánicos con Hg-humatos, Hg2Cl2
compuestos orgánicos
4 HNO3 12 M Enlazados fuertemente Intersticial en el mineral,
0
Hg2Cl2, Hg
5 HCl: HNO3 (3:1) Residual (sulfhidrilos) HgS, HgSe, HgAu
Tomada de: Journal of Analytical Chemistry, 2011, Vol. 66, No. 2, pp. 119–124.
En general, esta secuencia de extracción ha venido siendo reemplazada por la

metodología de fraccionamiento dinámico usando columnas giratorias en espiral las
cuales permiten disminuir el tiempo de extracción del orden de más de 20 horas a cerca
Capitulo 2 33
de 1 hora por cada paso de extracción, además presenta una recuperación del 96–100%,
en comparación con la extracción secuencias que tiene una recuperación de solo 72–
84% [69].
La US-EPA publicó en el 2005 el método estándar 3200 para determinación de

fracciones de mercurio en suelos y sedimentos usando extracción asistida por
microondas y extracción selectiva por solventes y/o extracción en fase sólida, con esta
metodología es posible discriminar las especies que se listan en la tabla 4.
Tabla 4. Fracciones de mercurio que pueden determinarse por el Método US EPA 3200 [68].
Fracciones de mercurio definidas Especies de mercurio Reactivo extrayente y

operacionalmente individual condiciones de extracción
Mercurio total Análisis directo según método
US-EPA7473
Mercurio extraíble Mercurio CH3HgCl La extracción se realiza por
orgánico CH3CH2HgCl sonicación con mezcla de HCl
extraíble 2% y metanol al 10%
Mercurio HgCl2 La separación de la fracción
inorgánico Hg(OH)2
orgánica e inorgánica se realiza
extraíble Hg(NO3)2
HgSO4 por extracción en fase sólida
HgO usando fibra de algodón
2+ a
Hg complexes
0
Mercurio no extraíble Mercurio semi- Hg Con el residuo remanente de la
0 b
móvil Hg -M extracción anterio se puede
2+ a
Hg complexes determinar de forma directa
Hg2Cl2 (menor)
según método US-EPA7473 el
Mercurio no- Hg2Cl2 (mayor)
mercurio no extraíble.
móvil HgS
HgSe Si se quieren diferencias las
fracciones se lava el residuo
hasta fin de cloruros y se
somete a digestión con 5 mL de
HNO3 2 M a 95°C por 20 min,
se lava con agua y se cuantifica
para determinar el mercurio
semimovil
El residuo final se analiza
directamente siguiente el
método US-EPA7473 para
determinar el mercurio no móvil
a. Ciertos complejos inorgánicos de mercurio pueden estar presentes tanto en las fracciones extractables
orgánicas como inorgánicas
b. Esto represente una amalgama mercurio-metal
Otro método de determinación de especies de mercurio en suelo y sedimentos es el

reportado por Neculita y colaboradores en 2005 y posteriormente modificado por
Tazisong y colaboradores en 2012 que incluye la extracción del mercurio en cuatro
fracciones identificadas como Solubles en Agua (FI) usando agua disionizada,

intercambiable (F2) usando una solución 0,5 M de Acetato de sodio-EDTA y 1 M de
cloruro de calcio, orgánico (F3) haciendo extracciones sucesivas con hidróxido de sodio
0,2 M y ácido acético al 4% v/v, y por último, la fracción residual (F4) correspondiente a la
tratada con ácido nítrico (HNO3), ácido sulfúrico (H2SO4) y ácido perclórico (HClO 4) [89],
o por combustión directa a 750 °C [90].
Como complemento a lo anterior el trabajo de Reis y colaboradores en 2015, indica que

es posible conocer los diferentes especies químicas del mercurio en suelo aplicando la
técnica de termo desorción en la cual, al incrementar la temperatura logra la liberación de
las especies de mercurio en el siguiente orden: HgCl2 = Hg asociado a Fe2O3 < Hg
asociado con ácidos húmicos <HgS <HgO, adicionalmente al evaluar el tamizaje
encontraron que al usar un tamiz <2mm permitía una mejor homogeneidad de la
muestras, además de que la muestra debía ser rápidamente analizada ya que después
de 10 días a temperatura ambiente el Hg0 no era posible de detectar [87].
Como se mencionó previamente, las concentración de mercurio en muestras de suelos y

sedimentos son también determinadas por CV-AAS y por espectrometría de
fluorescencia atómica, en estos métodos se oxida la totalidad del mercurio presente a
Hg2+ y posteriormente se reduce a Hg 0 empleando una solución de cloruro de estaño(II),
seguido de una purga y amalgación con oro para posteriormente desorberlo
térmicamente en el espectrofotómetro; cuando se requiere realizar un estudio de
mercurio en suelo es necesario considerar y cuantificar también la materia orgánica y el
tamaño de partícula ya que juegan un papel importante en el control y distribución de
este elemento tanto en el suelo como en los sedimentos afectando, por tanto, los
procesos de sorción, transporte y retención del mercurio en sistemas acuáticos [88].
2.3 Métodos de Determinación de Mercurio en Agua
El análisis del mercurio y de sus especies en la matriz agua no solo está enmarcado en
el interés per se de conocer su concentración, sino que permite establecer las
Capitulo 2 35
características de deposición y migración del mercurio, las principales especies de

mercurio en aguas naturales están conformadas por el Hg (II) y por metilmercurio, la
determinación de mercurio en agua dará una idea de la acumulación de mercurio en las
especies de peces allí presentes [13]; se ha establecido que el factor de
bioconcentración, es decir, la relación de la concentración de metilmercurio en el tejido
de los peces con respecto a la del agua, se encuentra entre 10000 y 100000 [81], [91].
Las metodologías de determinación directa de mercurio en muestras de agua incluyen el

uso de la espectroscopia de absorción atómica electrotérmica (ET-AAS), usando
vaporización en un atomizador de dos etapas con un vaporizador purgado, con límites de
detección de 0,24 o 0,024 ug.L-1 para agua potable a un volumen de muestra de 100 uL
[92], otra metodología reportada es la voltamperometria anódica (SVA) con electrodo de
grafito en el que el mercurio fue acumulado a –1,4 V por 30 s mostrando un
voltamperograma con un pico de la oxidación de mercurio en la región de 0,00–0,10 V,
además se estableció una concentración mínima detectable de 0,008–0,012 ug.L-1 en
muestras de nieve [72].
Cairns y colaboradores reportaron en el año 2008 el desarrollo de una nueva

metodología para análisis de aguas naturales en el cual se colocaban microcolumnas
para eliminación de interferencias de matrices de agua de mar (altamente complejas) y
las cuales sirven para concentrar las especies de mercurio, para ser porteriormente
analizadas y cuantificadas en un sistema acoplado LC-ICP-MS, dicho trabajo reportó
límites de detección de 0,07 ng.L-1 para mercurio inorgánico y 0,02 ng.L-1 para
metilmercurio [67], otra alternativa de análisis es en la que se realiza una extracción
asistida por microondas y para la detección de las especies de mercurio se emplea
electroforesis capilar acoplado a ICP y espectrometría de masas (MS), para esta técnica
se reportaron límites de detección en el orden de 1-32 ng.L-1 para MeHg, EtHg y Hg (II)
[93].
Por su parte, desde las aplicaciones biotecnológicas se ha reportado el uso de

biosensores y sistemas de detección con anticuerpos monoclonal específicos (mAb)
basados en ensayos indirectos de inmuno absorción enzimática (ELISA) [94], en
biosensores portátiles de célula completas [95][96], en nanoparticulas de oro
funcionalizadas con DNA [97] entre otros.
En cuanto a los métodos de análisis estándar para la cuantificación de mercurio en agua

propuesto por la US-EPA y la ASTM se encuentran el método US EPA 245.1 y el método
ASTM D3223 que aplica para la determinación de mercurio total en agua de consumo,
agua superficial, ambiental, de océanos, y en aguas producto de residuos industriales y
domésticos para los cuales se emplea una cantidad de muestra de agua que se
transfiere a una botella de demanda bioquímica de oxígeno y se somete a digestión en
una solución diluida de permanganato de potasio y persulfato de potasio durante dos
horas a 95°C, posteriormente el mercurio se reduce con cloruro de estaño y se cuantifica
en donde la cuantificación se realiza por espectrometría de absorción atómica con vapor
frio (CV-AAS) la diferencia primordial entre los métodos mencionados corresponde al
límite inferior del rango de cuantificación que reportan, siendo de 0,2-10,0 µg.L-1 0,5 a
10,0 µg L-1 respectivamente [98].
Para el año 2012 la US-EPA desarrolló los métodos 1630 y 1631, Revisión E, que
corresponden a la determinación de metilmercurio mediante procesos de destilación y
etilación acuosa con posterior cuantificación por espectrometría de fluorescencia atómica
con vapor frío (CV-AFS), y la determinación de mercurio (Hg) en agua no filtrada por
oxidación, purga, trampa y desorción detectada por la misma técnica respectivamente; y
con rangos de determinación de Hg de 0,5-100 ng.L-1[99] y para CH3Hg en el intervalo de
0,02-5 ng.L-1[100]; ambos métodos se acompañan del método US-EPA 1669 que
establece las directrices de muestreo de agua ambiental para la determinación de
metales traza. De forma similar se encuentra el método US-EPA 245.7 que también usa
detector CV-AFS para medir niveles bajos de mercurio, sin embargo, este último hace
separación gas-líquido y emplea un tubo de secado para aislar el analito a diferencia del
método US-EPA 1631 que usa aislamiento con purga y trampa de oro [101].
El método US-EPA 7473 para la determinación de mercurio total (orgánico e inorgánico)

en sólidos y soluciones es un método integrado de preparación de muestras y
cuantificación que se compone de descomposición térmica, amalgamación y
espectrometría de absorción atómica, una de las principales bondades de este método
se le atribuye a la disminución en el tiempo de análisis, a la versatilidad de su uso en
campo o en laboratorio y su amplio espectro de aplicación dentro de lo que se incluye
suelos, sedimentos, lodo, así como en residuos acuosos y aguas subterráneas, todo ello
Capitulo 2 37
sin pre tratamiento químico de la muestra además también puede emplearse en

muestras que hayan sido sometidas a procesos de descomposición total como los
sugeridos por la serie 3000 de las normas EPA [102] y también por el Standard Methods
SM3112B [103].
Considerando la importancia que tiene establecer diferencias entre el mercurio inorgánico

y el mercurio orgánico se han desarrollado diversos trabajos en los que desarrollo de las
metodologías está encaminado principalmente a la fase de separación y pre
concentración encontrando por ejemplo la adsorción e inmovilización del metilmercurio y
de mercurio inorgánico en una muestra acuosa acidificada a pH 1 en una columna
empacada con ditizona inmovilizada en cristales de naftaleno, reportando como reactivo
de elución ácido clorhídrico 7mol.L-1 y un factor de pre concentración de 200 [104],
también se ha encontrado reportes de columnas rellenas de lana de plata acopladas a
CV-AAS en las que se encontraron límites de detección de 3 ng.L -1 y un rango lineal de
10-250 ng.L-1, con la ventaja de que iones metálicos comunes como K +, Na+, Cu2+, Pb2+,
Fe3+, Ni2+ y Mn2+, no presentaron interferencia con el método y además fue aplicable a
muestras de aguas naturales y aguas residuales [71].
Con el interés creciente en lo referente a diferenciar las especies de mercurio en 2010

[105] se propuso un método de microextracción por dispersión liquido –líquido (DLLME),
acoplado a cromatografía liquida de alta eficiencia con detección de diodos (HPLC-DAD),
en esta metodología se propone un proceso de acomplejamiento con ditizona de las
diferentes especies de mercurio (Hg 2+, metilmercurio (MeHg+) y fenilmercurio (PhHg+)),
para formar quelatos hidrófobo que posteriormente se extraen en las finas gotas de
disolvente de extracción dispersadas en la muestra acuosa y se analizan por HPLC-DAD,
en este caso el disolvente de extracción empleado fue hexafluorofosfato de 1-hexil-3-
metilimidazolio ([HMIM] [PF6])y como solvente dispersivo metanol con ditizona (0,02%,
m/v) a pH 4, los límites de detección de Hg2+, MeHg+ y PhHg+ fueron 0,32, 0,96 y 1,91
g.L-1 respectivamente, y en muestras reales de agua (agua de grifo, agua de río y agua
de lago) se obtuvieron recuperaciones relativas de 89,6-101,3%, 85,6-102,0% y 81,3-
97,6%, para Hg2+, MeHg+ y PhHg+ respectivamente.[105], también se reporta el uso de
sílice magnética modificada químicamente con grupos tiol para la extracción en fase
sólida magnética (MSPE) de trazas de Hg+2 en muestras ambientales [106].
En Iran se han desarrollado trabajos de nanotecnología, que proponen el uso de un

método de micro extracción sólida de dispersión magnética (MDMSPE), en donde se
utiliza una mezcla de disolvente de extracción, disolvente dispersante y nanomagnetita
(Fe3O4) empleando como agente quelante 1-(2-etoxifenil)-3-(4-etoxifenil) triazeno fundido
con nanotubos de carbono de múltiples paredes con concha de sílice, como adsorbente,
este material es sumergido en la muestra de agua y después del tiempo de contacto
apropiado, el nano-adsorbente se separó de la fase acuosa aplicando un campo
magnético y se transfiere a otro vial con el disolvente de elución, luego de ello se
cuantifica el mercurio en la solución residual usando espectroscopia de absorción
atómica de vapor frío, este estudio indica que los datos de equilibrio de adsorción
obedecieron a los modelos isotérmicos de Langmuir y los datos cinéticos fueron
adecuados para el modelo de pseudo-segundo orden, además de revelar la naturaleza
endotérmica del procedimiento, para este procedimiento se estableció un límite de
detección para Hg (II) de 1,5 ± 0,27ng.mL-1 y reportaron un límite de cuantificación
(LOQ) de 5,0 ± 0,32ng.mL-1 (n = 5). El intervalo lineal de la curva de calibración fue 9 ±
0,51 - 1000 ± 0,03ng.mL-1 con un coeficiente de correlación de 0,9994 [107].
De la misma manera se ha reportado un método para la determinación de mercurio traza

en el agua, en el cual se extrae primero el mercurio inorgánico (Hg2+) con líquidos iónicos
(ILs), tales como N-octilpiridinio ([OPy]+). Tetrafluoroborato de N–octilpiridinio y
trifluorometilsulfonato de N-octilpiridinio y luego se realiza la detección y cuantificación
de mercurio en medios orgánicos con voltametría de separación de pulso diferencial
(DPSV) con electrodo de disco de oro, para este método se encontró un enriquecimiento
de mercurio de 17 veces y una reducción de iones interferentes de dos órdenes de
magnitud en los medios orgánicos en condiciones óptimas [76].
.
2.4 Métodos de Especiación de Mercurio en Muestras

biológicas – Pescado
En el caso de las muestras biológicas y en particular del pescado el interés en diferenciar

el contenido de mercurio orgánico del inorgánico fue posterior al desarrollo de las
Capitulo 2 39
metodologías en agua, por tanto, la mayoría de las metodologías existentes son producto
de modificaciones de aquellas establecidas para análisis de agua.
En el desarrollo de están metodologías juega un papel fundamental los aspectos

relacionados a la adecuada conservación de la muestra en frascos de vidrio a una
temperatura menor a -15°C previa homogenización con molino de acero y su posterior
secado por liofilización para poder almacenar la muestra en un ambiente de poca
humedad, máximo durante 1 año [108].
Dentro de los métodos que se reportan para la extracción de mercurio en muestras de

pescado se describen los asociados a digestiones ácidas con ácido clorhídrico (HCl), o
con ácido nítrico (HNO3), en algunos casos acompañados del uso de peróxido de
hidrógeno (H2O2), también se reportan digestiones alcalinas en metanol usando hidróxido
de tetrametilamonio (TMAH) o hidróxido de potasio (KOH) y en menos medida la
extracción con detergentes como el dodecil sulfato de sodio (SDS), en el trabajo de
Cabañero (2002), se compararon estas metodologías y se determinó que los mejores
porcentajes de recuperación se alcanzan con las extracciones ácidas, de la misma
manera se evaluó el efecto del método de secado de la muestra comparando el secado
en horno, secado en horno microondas y la liofilización como estrategias de
conservación, reportando que el método más recomendado es el de secado en horno a
40°C por 48 horas, además se estableció que el método más sencillo, rápido y con
menos pasos para la determinación de compuestos de organomercurio es la extracción
ácida con un porcentaje de recuperación mayor al 95%, permitiendo una extracción
cuantitativa del mercurio total e inorgánico y a su vez permitiendo en un paso muy
sencillo la extracción con solventes como diclorometano, para la posterior especiación de
monometilmercurio, dimetilmercurio y etilmercurio por cromatografía de gases acoplada a
espectroscopia de fluorescencia atómica [78], [84].
En la actualidad, la mayoría de artículos relacionados a la cuantificación de mercurio total

en pescado reportan el uso de digestión asistida con microondas empleando ácido nítrico
con peróxido de hidrogeno como lo reporta el método estándar AOAC 2015.01 [66], y de
forma alterna al microondas se reportan estudios de extracción en los que se emplea la
técnica de ultrasonido [109], [110].
Otra propuesta metodológica reportada corresponde a un procedimiento simple y rápido

de preparación de muestras incluyendo lixiviación ácida y etilación y extracción in situ
para la determinación de metilmercurio en muestras biológicas, de esta manera se
empleó cromatografía de gases (GC) acoplada a una serie de sistemas para el análisis
de la especiación del mercurio, incluyendo espectrometría de emisión atómica de plasma
inducida por microondas (MIP-AES), espectrometría de masas de plasma acoplada (ICP-
MS), espectrometría de absorción atómica (AAS) y espectrometría de masas (EM). [111],
también a la cuantificación mediante espectrometría de absorción atómica con
generación de hidruros [112].
El paso clave de la preparación de la muestra es la liberación y aislamiento de los

compuestos de la matriz usando un protocolo de extracción óptimo y eficiente, en ese
sentido, se han realizado varios estudios que comparan la extracción asistida por
microondas (MAE) (principalmente en términos de las recuperaciones y duración) con
otras técnicas de extracción. Sin embargo, la extracción de especies de mercurio de una
matriz compleja está limitada por extracción incompleta, transformación de especies,
contaminación de muestras o pérdidas de analitos que ocurren durante el tratamiento de
la muestra [113].
En el año 2012 el laboratorio de referencia de la Unión Europea para Metales en

Alimentos (EURL-HM), organizó un interlaboratorio para validar una metodología para la
determinación del metilmercurio en mariscos, dicho método se basó en una doble
extracción líquido-líquido con un solvente orgánico y con una solución acuosa de
cisteína, en el método al cuantificación final se realizó con un analizador elemental de
mercurio y se usaron muestras para cubrir la concentración de 0,013 a 5,12 mg.kg-1, lo
cual cumple con los requisitos establecidos por legislación europea [114].
La Agencia de Drogas y Alimentos de los Estados Unidos (FDA), considerando que una
de las mayores fuentes de contaminación por mercurio en humanos está dada por el
consumo de pescado y de alimentos de origen marino, ha establecido el método
estándar 4.5, en el cual se realiza la extracción de mercurio empleando digestión ácida
asistida por microondas en dos pasos en los que la digestión se lleva de forma
controlada desde temperatura ambiente hasta 130 °C con una potencia de 300 W y luego
hasta 200 °C a una potencia de 1200 W, y posteriormente se realiza la detección por CV-
Capitulo 2 41
AAS, este método reporta un límite de detección de 0,86 ug.kg-1[115], con el desarrollo
de las técnicas analíticas y ante la necesidad de disminuir los límites de detección de
mercurio y otros elementos de interés toxicológico en alimentos la AOAC, propuso el
método 2015.01 para la determinación de metales pesados en alimentos por ICP-MS,
esta metodología ha sido diseñada para la determinación de elementos como arsénico,
cadmio, plomo y mercurio a nivel traza en muestras de bebidas y alimentos incluyendo
chocolate, jugos de frutas, pescado, formulas infantiles y arroz usando digestión asistida
por microondas, en esta metodología se usa como reactivos de digestión ácido nítrico
concentrado y peróxido de hidrogeno (relación 4:1) [116].
3. Propuesta metodológica para la
determinación y especiación de mercurio
en muestras ambientales
Una vez presentadas las consideraciones de índole ambiental, toxicológico, legal y
analítico frente a la importancia que tiene la determinación de mercurio de muestras
ambientales y la diferenciación entre mercurio orgánico e inorgánico, a continuación se
presenta la propuesta metodológica para la determinación de este elemento
considerando las condiciones de infraestructura y equipos con que actualmente cuenta el
Departamento de Química de la Universidad Nacional de Colombia Sede Bogotá.
En la tabla 5 se presentan los aspectos más relevantes relacionados con el tratamiento

de la muestra que deben considerarse al momento de realizar el montaje de las
metodologías propuestas.
Tabla 5. Aspectos relacionados a la muestra
Tratamiento de las muestras

Antes Durante Después
Protocolo de recolección y Recepción, aceptación y Tratamiento de los datos y
conservación de las registro de las muestras evaluación de los controles
muestras Protocolo de conservación Generación de resultados
hasta análisis
Protocolo de manipulación Informe de Análisis y
de la muestra (salud y aceptación por parte del
seguridad en el trabajo) solicitante
Procedimiento operativo de Conservación de
extracción del mercurio contramuestra o extractos
por un tiempo determinado
Procedimiento operativo de Tratamiento y disposición
cuantificación de residuos químicos
Ya que en la mayoría de los casos son los usuarios quienes llevan a cabo el proceso de
muestreo es necesario que desde el laboratorio de análisis se den unas instrucciones
básicas para asegurar que las condiciones de muestreo favorezcan la idoneidad de las
características composicionales de la muestra y en especial de las especies de mercurio.
De esta manera, en la tabla 6 se presentan las recomendaciones mínimas según el tipo

de muestra que se vaya a recolectar.
Tabla 6. Recomendaciones de muestreo y conservación de la muestra antes del análisis
Agua Suelo y sedimentos Pescado y alimentos

Recipientes Teflón o vidrio pírex, no se debe usar recipientes de polietileno
Cantidad de 500mL mínimo 100-200g 50-100g
muestra
requerida
Tratamiento en el Acidificación a pH <2 Ninguno Ver figura 9 y revisar
sitio de muestreo con HNO3 anexo B
concentrado
doblemente destilado
si se va a realizar Hg
total.
Para las fracciones
orgánicas o para Hg
disuelto tomar la
muestra, refrigerar y
llevar al laboratorio
en el menor tiempo
posible
Refrigeración, A 4°C en oscuridad y transporte en el menor tiempo posible (<48h)
almacenamiento y manteniendo la refrigeración
transporte
En el laboratorio Almacenar en congelador a -18°C
Figura 9. Representación gráfica de muestreo en pescado. Elaborado por el autor

Capítulo 3 45
En el caso especifica de las muestras de pescado la figura 9 es una representación

esquemática del pez, cuyo objeto es mostrar la zona recomendada para realizar el
muestreo del musculo, la cual está ubicada en la parte superior entre la aleta dorsal y la
aleta caudal, adicionalmente se recomienda tomar tanto la longitud total como el peso del
pez completo y en el Anexo B se incluye el protocolo de muestreo completo.
Por otra parte, debe señalarse que las metodologías presentadas en este trabajo son
producto de la revisión de los diferentes artículos y material bibliográfico disponible e
incluye las condiciones que presentaban mejores resultados en el tratamiento, extracción
y/o separación de las especies de mercurio.
Para realizar la diferenciación entre el mercurio inorgánico (Hgi) y orgánico (Hgo) en

muestras ambientales, de acuerdo a las condiciones de infraestructura y equipos con que
cuenta el Departamento de Química y el grupo de investigación Germina enfocados
principalmente a la detección por espectrometría de absorción atómica con vapor frío.
(CV-AAS), se han seleccionado los siguientes procedimientos de análisis:
3.1 Especiación de mercurio en muestras de agua3
La figura 10 que se presenta a continuación corresponde El diagrama de flujo que

resume la metodología propuesta para cuantificar no solo la cantidad de mercurio total
sino también diferenciar entre mercurio soluble, mercurio inorgánico y mercurio orgánico.
3
En la etapa de extracción en fase sólida se sugiere el uso de Amberlyst 36 por ser una resina de
intercambio aniónico con ácido sulfónico (marca DOW) disponible comercialmente.
Figura 10. Metodología propuesta para la especiación de mercurio en muestras de agua.

Capítulo 3 47
3.2 Especiación de mercurio en muestras de suelo y

sedimentos4
Debido a la complejidad de esta matriz en este aparte se proponen dos metodologías de

especiación una basada en la US-EPA3200 (figura 11) y otra basada en el trabajo de
Almeida 2016 (figura 12)
Figura 11 Metodología propuesta para la especiación de mercurio en muestras de suelo y sedimentos
4
Se presenta modificación del método original reemplazando algodón por amberlyst 36 disponible
comercialmente usado para la SPE

y sedimentos basada en EPA3200 (parte 2)5
5
La reducción del mercurio en cada uno de los casos (recuadros azules) se realiza con una
solución de NaBH4 al 2% en NaOH 0.1% y la detección por CV-AAS.
Capítulo 3 49
Figura 12 Metodología propuesta para la especiación de mercurio en muestras de suelo y

sedimentos basada en Almeida 2016 (parte 1)

y sedimentos basada en Almeida 2016 (parte 2)
3.3 Especiación de mercurio en muestras de pescado
En el caso de las muestras de pescado se considera que un punto crítico en su

procesamiento es la digestión para la determinación de mercurio total y de especies de
mercurio, por tanto a continuación se presentan las metodologías de bloque de digestión
o de baño ultrasonido para la etapa de digestión (figura 13) y posteriormente el proceso
de cuantificación (figura 14)
Capítulo 3 51
Figura 13. Etapa de digestión en para la determinación de mercurio total en muestras de

pescado
* Se usan dedales fríos para realizar la digestión en bloque con capacidad de 20 tubos en
comparación con el baño ultrasonido que solo digiere un tubo a la vez. El diseño y
dimensiones de dichos dedales se encuentra reportado en el trabajo de Ferreira de 2013
y se muestra en el anexo C [117].
Figura 14. Etapa de cuantificación de mercurio total en muestras de pescado
En el caso de la especiación de mercurio se propone una determinación secuencial de

acuerdo a lo que se presenta en la figura 15 y está basado en el trabajo de Ubillius, 2000.
Capítulo 3 53
Figura 15. Metodología para la especiación de mercurio en muestras de pescado
** La solución oxidante: 1 g de K2Cr2O7 + 20 mL de HNO3 concentrado y llevar a volumen

de 100 mL con agua destilada y desionizada
3.4 Manipulación de la muestra (salud y seguridad

en el trabajo)
Considerando las características toxico cinéticas del mercurio y sus especies químicas,
se deben tomar medidas de protección tales como el uso de guantes de nitrilo, mascara
de seguridad con filtros especiales para vapores de mercurio, cuyas características
deben cumplir con ser eficientes en la remoción de más del 95% de material particulado
de acuerdo a lo recomendado por la OSHA [118].
Los métodos estándar para determinación de mercurio en diferentes muestras

ambientales publicados por la US-EPA indican que ―aunque la toxicidad y
carcinogenicidad de cada reactivo propuesto en las diferentes metodologías no ha sido
plenamente establecida, es necesario que sean considerados como un riesgo potencial
para la salud y minimizar la exposición a estos compuestos‖ [98] [101] [119].
En general, se recomienda que el laboratorio cuente con un manual de seguridad que

incluya las ficha de seguridad de las sustancias químicas (SMSD) empleadas, además
del uso en todo momento de gafas de seguridad, protección facial y de ser posible,
campana extractora en especial cuando se manipulen los ácidos concentrados por
ejemplo el ácido nítrico y el ácido clorhídrico ya que son moderadamente tóxicos y
extremadamente irritantes para la piel y las mucosas [68], [98].
En cuanto al manejo de los residuos químicos, estos se deben segregar en la fuente

separándolos e identificándolos por tipo de peligrosidad, y siguiendo los procedimientos
establecidos por el Sistema de Integrado de Gestión – UN, y la oficina de gestión
ambiental de la Sede Bogotá [120].
4. Conclusiones y recomendaciones
4.1 Conclusiones
La búsqueda de información científica (vigilancia tecnológica) en bases

especializadas como Scopus y Science Direct, permitió realizar una aproximación
más efectiva en lo referente a la diferenciación y cuantificación de mercurio
orgánico (Hgo) e inorgánico (Hgi) en muestras ambientales, evidenciando la
tendencia actual al uso de técnicas analíticas acopladas (ej.LC-CV-AAS, LC-ICP-
MS, LC-CV-AFS, CG-AFS) a fin de realizar separaciones selectivas de las
especies de mercurio con límites de detección muy bajos (del orden de ng kg-1)
A partir de la revisión realizada se pudo establecer que en Colombia, los

laboratorio de análisis (alrededor de 29), tienen metodologías aplicadas
fundamentalmente a la determinación de mercurio total en agua, y que solo unos
pocos grupos de investigación han incluido técnicas de especiación de mercurio
dentro del desarrollo de sus investigaciones, por tanto, establecer una
metodología para la determinación de mercurio de otras matrices ambientales y
realizar la diferenciación entre mercurio orgánico e inorgánico es un aspecto que
debe ser abordado, lo antes posible, por las implicaciones tanto ambientales
como comerciales, que en el corto y mediano plazo tendrá el cumplimiento de los
estipulado en el Convenio de Minamata.
Aunque existen normas muy bien establecidas para la diferenciación, detección y

cuantificación de las especies de mercurio en diversas matrices, la puesta a punto
de estas normas no siempre son viables, principalmente por la disponibilidad de
equipos en el país, por esta razón, en este trabajo se logró seleccionar una
metodología de análisis de especies de mercurio, en las condiciones disponibles
en el Departamento de Química de la Universidad Nacional de Colombia
empleando una etapa previa de separación por extracción en fase solida con
Amberlyst 36 para muestras de agua, suelo y sedimentos, y por digestiones
diferenciales en medio ácido o básico en el caso del pescado para posteriormente
realizar la cuantificación del mercurio (total, orgánico o inorgánico) con el
espectrofotómetro de absorción atómica con fuente continua de alta resolución
ContrAA® 700 de Analytic Jena y el módulo de generador de hidruros para el
análisis por vapor frío.
Si bien la tendencia actual en la determinación de las especies de mercurio

corresponde al uso de técnicas cromatográficas acopladas a detectores de
fluorescencia o de masas, la espectrometría de absorción atómica con vapor frío
(CV-AAS), es una técnica selectiva para determinación de mercurio y en
combinación con estrategias de pretratamiento de las muestras (SPE) permite la
cuantificación de mercurio orgánico e inorgánico, además el límite de detección
reportado para esta metodología se encuentra por debajo de los niveles
establecido por la normatividad en cuanto a las concentraciones de mercurio
permitido en las diversas matrices ambientales.
4.2 Recomendaciones
Teniendo en cuenta que el alcance de este trabajo corresponde a una revisión y

recopilación de información llegando únicamente hasta la propuesta
metodológica, se recomienda realizar las pruebas de laboratorio para establecer
la pertinencia y factibilidad de la implementación de estas metodologías de
análisis.
En el futuro se recomienda considerar la adquisición de un equipo de

cromatografía liquida acoplado a un espectrofotómetro de fluorescencia atómica,
el cual permitirá hacer la separación de las especies de mercurio in situ
alcanzando límites de detección más bajos que los reportados con CV-AAS.
A. Anexo A: Normatividad
Colombiana. Niveles de mercurio
permitidos en vertimientos líquidos
NORMA EXPEDIDA OBJETO OBSERVACIONES RESPECTO A MERCURIO EN
NACIONAL POR AGUA
Ley 9 de Congreso Dicta medicas Art 3- 9. Control sanitario del uso del agua
1979 de la sanitarias Art 10. Residuos Líquidos
República Art 21. Para preservación y conservación del agua
el Min salud tendrá en cuenta lo establecido en los
artículos 134 y 135 del Dec. Ley 2811 de 1974 en
lo referente a protección de agua para consumo
humano
Título II. Suministro de agua. Art 51 -79
Decreto Ministerio Usos del agua Capítulo IV. Criterios de calidad para destinación
1594 de de y Residuos del recurso hídrico
1984 Agricultura Líquidos Art.38 - 39. Criterios de calidad admisibles para la
destinación del recurso para consumo humano y
Ministerio doméstico. Hg 0,002 mg.L-1
de Salud Art 40. Criterios admisibles para la destinación del
recurso para uso agrícola. Hg no establecido
Art. 41. Criterios de calidad admisibles para la
destinación del recurso para uso pecuario. Hg 0,01
mg.L-1
Art. 42 y 43. Los criterios de calidad admisibles
para la destinación del recurso para fines
recreativos mediante contacto primario y contacto
secundario. Hg no están determinados
Art. 74. Concentraciones para el control de la
carga de sustancias de interés sanitario. Hg 0,02
-1
mg.L
Capitulo XIV. Métodos de análisis y de la toma de
muestras
Art.155. Métodos de análisis oficialmente
aceptados
Para cadmio y mercurio la técnica es Absorción
atómica
Resolución Ministerio Por medio de Art. 5. Características químicas de sustancias que
2115 de de la cual se tienen reconocido efecto adverso en la salud
2007 ambiente, señalan humana.
vivienda y características, Hg valor máximo aceptable 0,001 mg.L-1
desarrollo instrumentos
territorial básicos y
frecuencias
Ministerio del sistema de
de la control y
protección vigilancia para
social la calidad del
agua para
consumo
humano
Resolución Ministerio Por la cual se Capitulo V. Parámetros fisicoquímicos y sus

631 de de establecen los valores límites máximos permisibles en los
2015 Ambiente y parámetros y vertimientos puntuales de Aguas Residuales
Desarrollo los valores Domésticas, (ARD) y de las Aguas Residuales
Sostenible límites (ARD –ARnD) de los prestadores del servicio
máximos público de alcantarillado a cuerpos de aguas
permisibles en superficiales.
los
vertimientos Aguas residuales domésticas (ARD), y aguas
puntuales a residuales no domésticas -ARND de los
cuerpos de prestadores del servicio público de alcantarillado,
aguas con una carga mayor a 625,00 kg.día-1 y menor o
superficiales y igual a 3000,00 kg.día-1 DBO5
a los sistemas Hg 0,02 kg.día-1
de
alcantarillado Aguas residuales domésticas (ARD), y aguas
público y se residuales no domésticas - ARnD de los
establecen los prestadores del servicio público de alcantarillado,
parámetros con una carga mayor a 625,00 kg.día-1 y mayor a
objeto de 3000,00 kg.día-1 DBO5
análisis y Hg 0,02 mg.L-1
reporte por
parte de las Capítulo VI. Parámetros fisicoquímicos y sus
actividades valores límites máximos permisibles en los
industriales, vertimientos puntuales de Aguas Residuales no
comerciales o Domésticas (ARnD) a cuerpos de aguas
servicios. superficiales.
1. Agroindustria
Procesamiento de hortalizas, frutas, legumbres,
raíces y tubérculos; Beneficio de café(clasificación
de la federación nacional de cafeteros – FNC/
CENICAFÉ), producción ecológica o tradicional:
no está determinado
Procesos poscosecha de plátano y banano,
producción de azúcar y derivados a partir de caña
de azúcar y extracción de aceites de origen
vegetal: no está determinado
Producciones pecuarias: cerdos, aves, ganado,
equinos, caprinos y ovinos: no está determinado
2. Actividad minera
Extracción de carbón de piedra y lignito, extracción
de minerales de hierro, extracción de oro y otros
metales preciosos, extracción de minerales de
níquel y otros minerales metalíferos no ferrosos,
Anexo A. Normatividad Colombiana. Niveles de mercurio permitidos en vertimientos líquidos 61
extracción de minerales de otras minas y canteras:

Hg 0,002 mg.L-1
3. Hidrocarburos
Exploración (upstream), Producción (upstream),
Refino
venta distribución (downstream)
Hg 0,01 mg.L-1
4. Alimentos y bebidas
Elaboración de productos alimenticios, elaboración
de alimentos preparados para animales,
elaboración de maltas y cervezas, elaboración de
productos lácteos, elaboración de aceites y grasas
de origen animal y vegetal, elaboración de café
soluble: Hg 0,01 mg.L-1
5. Fabricación y manufactura de bienes

Fabricación de productos derivados del tabaco: Hg
no está determinado
Fabricación de productos textiles, fabricación de

artículos de piel, curtido y adobo de pieles: Hg no
está determinado
Fabricación de papel y cartón -plantas integradas

de pulpa blanqueada (maderables y no
maderables), fabricación de papel y cartón a partir
de fibras recicladas, fabricación de abonos y
compuestos inorgánicos nitrogenados, Fabricación
de sustancias y productos químicos, fabricación de
pigmentos inorgánicos de azul ultramar,
fabricación de pigmentos inorgánicos de óxidos de
hierro: Hg 0,01 mg.L-1
Fabricación de ácidos inorgánicos y sus sales

fabricación de plásticos en formas primarias, de
formas básicas y artículos de plástico fabricación
de sabores y fragancias: Hg 0,01 mg.L-1
Fabricación de surfactantes, fabricación de

plaguicidas y otros productos químicos de uso
agropecuario fabricación de pinturas, barnices y
-1
revestimientos similares: Hg 0,01 mg.L
Fabricación de productos farmacéuticos,

sustancias
químicas medicinales y productos botánicos de
uso farmacéutico, fabricación de vidrio, productos
de vidrio, cemento, cal y yeso fabricación de
productos cerámicos: Hg 0,01 mg.L-1
Fabricación de surfactantes, fabricación de

plaguicidas y otros productos químicos de uso
agropecuario, fabricación pinturas, barnices y
revestimientos similares: Hg 0,01 mg.L-1
Fabricación de productos farmacéuticos,

sustancias químicas medicinales y productos
botánicos de uso farmacéutico, fabricación de
vidrio, productos de vidrio, cemento, cal y yeso,
fabricación de productos cerámicos: Hg 0,01mg.L-1
Tratamiento y revestimiento de metales,

fabricación de pilas, baterías y acumuladores
eléctricos, fabricación de equipos eléctricos de
iluminación: Hg 0,01 mg.L-1
Fabricación de maquinaria y equipos

(recubrimientos electrolíticos) : Hg 0,01 mg.L-1
Fabricación de vehículos automotores, remolques

y semirremolques, fabricación de autopartes : Hg
0,01 mg.L-1
Imprentas y litografías, elaboración de bebidas

alcohólicas,
mezcla y formulación de bebidas: Hg 0,01 mg.L-1
6. Actividades asociadas con servicios y otras

actividades
Generación de energía eléctrica: Hg 0,005 mg.L-1
Tratamiento y disposición de residuos: Hg 0,01

mg.L-1
Reciclaje de materiales plásticos y similares :Hg

0,02 mg.L-1
Actividades de atención a la salud humana -

atención médica con y sin internación, actividades
de atención a la salud humana - hemodiálisis y
diálisis peritoneal, pompas fúnebres y actividades
relacionadas: Hg 0,01 mg.L-1
Capítulo VII. Actividades industriales,

comerciales o de servicios diferentes a las
contempladas en los Capítulos V y VI con
vertimientos puntuales a cuerpos de agua
superficiales
Hg 0,002 mg.L-1
Anexo B: Protocolo de muestreo
para pescado
A continuación se describe el proceso de muestreo en peces, este protocolo se basa en

las recomendaciones publicadas por Persistent Organic Pollutants (POPs) del Gobierno
canadiense.
Para llevar a cabo el muestreo se debe contar con los siguientes elementos.
Hoja de datos de campo

Bolsas de polietileno, frascos y un kit de disección
Kit de disección limpia
Guantes de nitrilo
Agua destilada
1. Siempre use equipo limpio y guantes nuevos para cada pez, se debe registrar las
medidas del pez en cuanto a longitud y peso.
2. La muestra de musculo se colecta del lado izquierdo del pez, por encima de la
línea lateral, y entre la aleta dorsal y la aleta caudal. En este proceso se debe
tener especial cuidado para evitar contaminación con los contenidos de la cavidad
abdominal. La primera incisión debe comenzar justo debajo de la aleta dorsal
(superior) de los peces, y correr justo por encima de la línea lateral.
3. Luego haga dos incisiones desde la primera incisión lateralmente hacia la cola del
pez: una justo por encima de la línea lateral y la segunda cerca de la parte
superior del pez.
4. Retire la piel con un par de pinzas y el bisturí. Se recomiendo evitar la
manipulación del musculo con los guantes. Solamente usar las pinzas para su
manipulación.
5. Haga incisiones alrededor del área disectada para liberar el músculo del pez.
6. Retire con cuidado la muestra de tejido muscular de los peces, asegurándose de
que no haya piel ni escamas en la muestra.
7. Se debe asegurar de recoger una cantidad suficiente de tejido (normalmente 50 -
100g).
8. Transferir la muestra a un frasco limpio, teniendo cuidado de no tocar la muestra
con las manos o cualquier objeto extraño.
9. Realizar la identificación de la muestra incluyendo :
Ubicación del muestreo
Fecha
Análisis solicitados
Nombre de la organización
Tipo de muestra (músculo, hígado)
10. Se recomienda en la tapa incluir la identificación de la muestra
11. Llevar a refrigeración y congelación a una temperatura menor a -18°C
12. Se recomienda en la tapa incluir la identificación de la muestra
13. Llevar a refrigeración y congelación a una temperatura menor a -18°C
Anexo C: Diseño dedales fríos
A continuación se presenta la representación gráfica de los dedales fríos sugeridos para

la digestión de muestras de pescado en bloque de calentamiento.
En la figura (a) Tubo de dedo frío. (b) Tubo de digestión. (c). Tubo de dedo frío acoplado
al tubo digestivo.
Bibliografía
[1] N. E. Selin, ―Global Biogeochemical Cycling of Mercury: A Review,‖ Annu. Rev.
Environ. Resour., vol. 34, no. 1, pp. 43–63, 2009.
[2] Unep, ―Global Mercury Assessment 2013: Sources, Emissions, Releases, and
Environmental Transport,‖ Unep, p. 42, 2013.
[3] INS, ―Vigilancia epidemiologica de enfermedades crónicas en Colombia, 2005 a

2012.,‖ Bogotá, 2013.
[4] N. Caracol, ―En Colombia están dos de las poblaciones más contaminadas con
mercurio del mundo,‖ Caracol Noticias, pp. 1–5, 2016.
[5] J. Marrugo-Negrete, A. Navarro-Frómeta, and J. Ruiz-Guzmán, ―Total mercury

concentrations in fish from Urrá reservoir (Sinú river, Colombia). Six years of
monitoring,‖ Rev.MVZ Cordoba, vol. 20, no. 3, pp. 4754–4765, 2015.
[6] G.-M. B. Nuñez-Avellaneda M, Agudelo Cordoba E., ―Un análisis descriptivo de la

presencia de mercurio en agua, sedimento y peces de interés socio-económico en
la amazonia colombiana,‖ 2015.
[7] L. J. Dominguez Marin, ―Modelo conceptual del comportamiento del mercurio en la

cuenca de la quebrada La Porquera, Bogotá. Colombia,‖ Universidad Nacional de
Colombia, 2012.
[8] I. F. Segovia Quintero and L. Ka. Eulegelo Romero, ―Determinacion de uso del
mercurio en la actividades de mineria ilicita y su incidencia en componentes
ambientales de agua, sedimientos e ictiofauna en al cuenca media del Rio
Caqueta,‖ Policia Nacional, Direccion NAcionald e Escuelas, Escuela de
Postgrados de Policia, 2015.
[9] IDEAM, Estudio Nacional del Agua. Bogotá, 2015.

[10] J. Pinedo-Hernández, J. Marrugo-Negrete, and S. Díez, ―Speciation and

bioavailability of mercury in sediments impacted by gold mining in Colombia,‖
Chemosphere, vol. 119, pp. 1289–1295, 2015.
[11] J. Olivero Verbel, ―Efectos de la minería en Colombia sobre la salud humana,‖

Univ. Cart., pp. 5–13, 2013.
[12] M. L. T. Cossio et al., ―Hoja de seguridad Mercurio y sales de mercurio,‖ Uma ética
para quantos?, vol. XXXIII, no. 2, pp. 81–87, 2012.
[13] L. Boszke, G. Głosińska, and J. Siepak, ―Some Aspects of Speciation of Mercury in

a Water Environment,‖ Polish J. Environ. Stud., vol. 11, no. 4, pp. 285–298, 2002.
[14] S. Torres Escribano, ―Bioaccesibilidad de Arsénico y Mercurio en Alimentos con

potencial riesgo toxicológico,‖ Universidad de Valencia, 2011.
[15] A. Dube, R. Zbytniewski, T. Kowalkowski, E. Cukrowska, and B. Buszewski,

―Adsorption and Migration of Heavy Metals in Soil,‖ Polish J. Environ. Stud., vol.
10, no. 1, pp. 1–10, 2001.
[16] L. Boszke et al., ―Environmental factors affecting speciation of mercury in the

bottom sediments; an overview,‖ Polish J. Environ. Stud., vol. 12, no. 1, pp. 5–13,
2003.
[17] J. E. Heimlich, ―Mercury,‖ The Ohio State University Extension, Ohio, pp. 1–3,
2008.
[18] S. Nabi, Toxic Effects of Mercury, First. India: Springer India, 2014.
[19] M. Morita, J. Toshinaga, and J. Edmonds, ―the Determination of Mercury Species

in Environmental and Biological Samples,‖ Pure Appl. Chem, vol. 70, no. 8, pp.
1585–1615, 1998.
[20] Indexmundi, ―Mercury Production by Country-2013,‖ 2013.
[21] M. Moreno Jiménez, Desarrollo de métodos analíticos para especiación de

mercurio y su aplicación a la comarca de almadén. 2008.
[22] C. Seigneur, K. Vijayaraghavan, and K. Lohman, ―Atmospheric mercury chemistry:

Bibliografía 69
Sensitivity of global model simulations to chemical reactions,‖ J. Geophys. Res.,

vol. 111, no. D22, p. D22306, Nov. 2006.
[23] T. Karlsson, Complexation of Cadmium , Copper and Methyl Mercury to Functional

Groups in Natural Organic Matter. 2005.
[24] H. E. Louise, ―Speciation of Mercury by Chromatography with Atomic

Spectrometry,‖ 2000.
[25] G. Compeau and R. Bartha, ―Effects of sea salt anions on the formation and
stability of methylmercury,‖ Bull. Environ. Contam. Toxicol., vol. 31, no. 4, pp. 486–
493, 1983.
[26] E. . Zillioux, D. B. Porcella, and J. M. Benoit, ―Freshwater Wetland Ecosystems,‖

Environ. Toxicol. Chem., vol. 12, pp. 2245–2264, 1993.
[27] J. M. Benoit, R. P. Mason, and C. C. Gilmour, ―Estimation of mercury-sulfide

speciation in sediment pore waters using octanol-water partitioning and
implications for availability to methylating bacteria,‖ Environ. Toxicol. Chem., vol.
18, no. 10, pp. 2138–2141, 1999.
[28] N. S. Bloom, E. Preus, J. Katon, and M. Hiltner, ―Selective extractions to assess

the biogeochemically relevant fractionation of inorganic mercury in sediments and
soils,‖ Anal. Chim. Acta, vol. 479, no. 2, pp. 233–248, 2003.
[29] T. Frohne, J. Rinklebe, U. Langer, G. Du Laing, S. Mothes, and R. Wennrich,

―Biogeochemical factors affecting mercury methylation rate in two contaminated
floodplain soils,‖ Biogeosciences, vol. 9, no. 1, pp. 493–507, 2012.
[30] S. Guedron, S. Grangeon, B. Lanson, and M. Grimaldi, ―Mercury speciation in a

tropical soil association; Consequence of gold mining on Hg distribution in French
Guiana,‖ Geoderma, vol. 153, no. 3–4, pp. 331–346, 2009.
[31] and B. W. F. Yoon, S.-j., Diener, L.M., Bloom, P.R., Bleam, Nater E.A.,
―Methylmercury Binding Sites in Humic Substances : An X-ray Absorption Study,‖
Geol. Environ. Sci., no. 2–55, pp. 54–55, 2005.
[32] U. Skyllberg, P. R. Bloom, J. Qian, C.-M. Lin, and W. F. Bleam, ―Complexation of

Mercury(II) in Soil Organic Matter: EXAFS Evidence for Linear Two-Coordination
with Reduced Sulfur Groups,‖ Environ. Sci. Technol., vol. 40, no. 13, pp. 4174–
4180, 2006.
[33] S. J. Yoon, L. M. Diener, P. R. Bloom, E. A. Nater, and W. F. Bleam, ―X-ray

absorption studies of CH3Hg+-binding sites in humic substances,‖ Geochim.
Cosmochim. Acta, vol. 69, no. 5, pp. 1111–1121, 2005.
[34] M. Leermakers, W. Baeyens, P. Quevauviller, and M. Horvat, ―Mercury in

environmental samples: Speciation, artifacts and validation,‖ TrAC - Trends Anal.
Chem., vol. 24, no. 5, pp. 383–393, 2005.
[35] J. Marrugo-Negrete, L. N. Benitez, and J. Olivero-Verbel, ―Distribution of mercury in

several environmental compartments in an aquatic ecosystem impacted by gold
mining in northern Colombia,‖ Arch. Environ. Contam. Toxicol., vol. 55, no. 2, pp.
305–316, 2008.
[36] C. H. Conaway, S. Squire, R. P. Mason, and A. R. Flegal, ―Mercury speciation in

the San Francisco Bay estuary,‖ Mar. Chem., vol. 80, no. 2–3, pp. 199–225, 2003.
[37] M. Roulet et al., ―Spatio-temporal geochemistry of mercury in the waters of the

Tapajós and Amazon rivers, Brazil,‖ Limnol. Oceanogr., vol. 46, no. 5, pp. 1141–
1157, 2001.
[38] FAO, ―El estado mundial de la pesca y la acuicultura,‖ 2016. [Online]. Available:
http://www.fao.org/news/story/es/item/423048/icode/.
[39] I. R. Schultz, E. L. Peters, and M. C. Newman, ―Toxicokinetics and disposition of

inorganic mercury and cadmium in channel catfish after intravascular
administration,‖ Toxicol.Appl.Pharmacol., vol. 140, pp. 39–50, 1996.
[40] OMS, ―Elemental mercury and inorganic mercury compounds: human health
aspects,‖ World Heal. Organ. Libr., p. 68, 2003.
[41] H. Gibb and K. G. O’Leary, ―Mercury Exposure and Health Impacts among
Individuals in the Artisinal and Small-Scale Gold Mining Community: A
Bibliografía 71
Comprehensive Review,‖ Environ. Health Perspect., vol. 122, no. 7, p. 25, 2014.
[42] J. Poulin, H. Gibb, A. Prüss-Üstïm, and Organización Mundial de la Salud,

―Mercurio: evaluación de la carga de morbilidad ambiental a nivel nacional y local /
editado por Annette Prüss-Üstün,‖ vol. Serie Carg, p. 2pp, 2013.
[43] J. Olivero and B. Jhonson, ―El lado gris de la mineria de oro: la contaminacion con
mercurio en el norte de Colombia,‖ El lado gris la minería oro, p. 138, 2008.
[44] U.S. EPA, ―Organic Mercury,‖ EPA Arch. Doc., vol. 1, 2015.
[45] T. W. Clarkson, L. Magos, and G. J. Myers, ―The Toxicology of Mercury — Current

Exposures and Clinical Manifestations,‖ N Engl J Med, vol. 34918349, pp. 1731–7,
2003.
[46] I. Kitowski, R. Kowalski, A. Komosa, and A. Sujak, ―Total mercury concentration in

the kidneys of birds from Poland,‖ Turkish J. Zool., vol. 39, no. 4, pp. 693–701,
2015.
[47] Z. F. Anual, ―Exposure assessment for mercury and other metals in commonly
consumed fish of west Peninsular Malaysia,‖ University of Canberra, 2014.
[48] J. E. Sonke, L.-E. E. Heimbürger, and A. Dommergue, ―Mercury biogeochemistry:

Paradigm shifts, outstanding issues and research needs,‖ Comptes Rendus -
Geosci., vol. 345, no. 5–6, pp. 213–224, 2013.
[49] Programa de Naciones Unidas Para el Medio Ambiente (PNUMA), ―Analisis de

flujo del comercio y revisión de prácticas de manejo onales de productos
conteniendo cadmio, plomo y mercurio en América Latina y el Caribe,‖ Análisis del
flujo del Comer. y revisión prácticas manejo Ambient. Racion. Prod. conteniendo
cadmio, plomo y Mercur. en América Lat. y el Caribe, p. 409, 2010.
[50] División de la Salud y Seguridad Medioambiental, ―Enseñanzas de la Enfermedad

de Minamata y el Manejo del Mercurio en Japón,‖ Minist. del Medio Ambient.
Japón, 2013.
[51] C. de Colombia, ―Ley 1658 / 15 de Julio de 2013. Disposiciones para la

comercialización y el uso de mercurio en las diferentes actividades industriales del

pais, se fijan requisitos e incentivos para su reducción y eliminación y otras
disposiciones.,‖ Repub. Colomb. - Gob. Nac., pp. 1–9, 2013.
[52] ―Decreto 2133 de 2016,‖ 2016.
[53] Departamento de Impuestos y Aduanas Nacionales - DIAN,

―Proyecto_Resolucion_Importacion_Mercurio,‖
Proyecto_Resolucion_Importacion_Mercurio, 2017. [Online]. Available:
http://www.dian.gov.co/descargas/normatividad/2017/Proyectos/Proyecto_Resoluci
on_Importacion_Mercurio.pdf.
[54] S. distrital de salud de B. SIC, Resolución159 de 2015. Por medio de la cual se

establecen los lineamientos que deben cumplir los Prestadores de Servicios de
Salud de Bogotá, D.C. para la eliminación de productos y dispositivos con
contenido de mercurio y la sustitución por alternativas. 2015.
[55] ITC, ―International Trade Centre Market Analysis and Research Section,‖ 2017.
[Online]. Available: http://legacy.intracen.org/marketanalysis/TradeMap.aspx.
[56] Ministerio de minas, UPME, and Universidad de Cordoba, ―Estudio de la Cadena

del Mercurio en Colombia con Enfasis en la actividad minera de oro: Tomo 1,‖ p.
287, 2014.
[57] M. F. Tognelli, C. A. Lasso, C. A. Bota-Sierra, L. F. Jiménez-Segura, and N. A.

Cox, Eds., Estado de Conservación y Distribución de la Biodiversidad de Agua
Dulce en los Andes Tropicales, no. October. Gland, Suiza, Cambridge, UK y
Arlington, USA: UICN. xii + 199 pp., 2016.
[58] L. J. Lancheros Ascencio, ―Contenido de mercurio en músculo de algunas

especies ícticas de interés comercial presentes en ocho sitios de muestreo de la
cuenca (baja, medio y alta) del Rio Magdalena,‖ no. Dma 80. Bogotá, pp. 1–14,
2013.
[59] J. L. Marrugo-Negrete, I. D. Urango-Cardenas, S. M. B. Núñez, and S. Díez,

―Atmospheric deposition of heavy metals in the mining area of the San Jorge river
basin, Colombia,‖ Air Qual. Atmos. Heal., vol. 7, no. 4, pp. 577–588, 2014.
Bibliografía 73
[60] L. N. Suvarapu and S. O. Baek, ―Recent Developments in the Speciation and

Determination of Mercury Using Various Analytical Techniques,‖ Anal. Methods
Chem., vol. 2015, pp. 1–18, 2015.
[61] M. de Almeida Bezerra, M. A. Zezzi Arruda, and S. L. Costa Ferreira, ―Cloud Point
Extraction as a Procedure of Separation and Pre‐Concentration for Metal
Determination Using Spectroanalytical Techniques: A Review,‖ Appl. Spectrosc.
Rev., vol. 40, no. 4, pp. 269–299, 2005.
[62] K. Srogi, ―A Review: Application of Microwave Techniques for Environmental

Analytical Chemistry,‖ Anal. Lett., vol. 39, no. January 2011, pp. 1261–1288, 2006.
[63] M. Amde, Y. Yin, D. Zhang, and J. Liu, ―Methods and recent advances in
speciation analysis of mercury chemical species in environmental samples: A
review,‖ Chemical Speciation and Bioavailability, vol. 28, no. 1–4. 2016.
[64] A. Gonzalvez, M. L. Cervera, S. Armenta, and M. de la Guardia, ―A review of non-

chromatographic methods for speciation analysis,‖ Anal. Chim. Acta, vol. 636, no.
2, pp. 129–157, 2009.
[65] A. R. Türker, D. Çabuk, and Ö. Yalçınkaya, ―Preconcentration, Speciation, and

Determination of Mercury by Solid Phase Extraction with Cold Vapor Atomic
Absorption Spectrometry,‖ Anal. Lett., vol. 46, no. 7, pp. 1155–1170, 2013.
[66] a P. Nascimento Neto, L. C. S. Magalhães Costa, a N. S. Kikuchi, D. M. S.

Furtado, M. Q. Araujo, and M. C. C. Melo, ―Method validation for the determination
of total mercury in fish muscle by cold vapour atomic absorption spectrometry,‖
Food Addit. Contam. Part A. Chem. Anal. Control. Expo. Risk Assess., vol. 29, no.
4, pp. 617–24, 2012.
[67] W. R. L. Cairns et al., ―Speciation analysis of mercury in seawater from the lagoon
of Venice by on-line pre-concentration HPLC–ICP-MS,‖ Anal. Chim. Acta, vol. 622,
no. 1–2, pp. 62–69, 2008.
[68] U.S. EPA, ―Method 3200. Mercury species frationation and quantification by
microwave assted extraction, selective solvent extraction and/or solid phase
extraction,‖ in Mercury species frationation and quantification by microwave assted

extraction, selective solvent extraction and/or solid phase extraction, 2005, vol. 0,
p. 28.
[69] E. Y. Savonina, P. S. Fedotov, and T. G. Laperdina, ―Dynamic fractionation of

mercury species in soils and bottom deposits using rotating coiled columns,‖ J.
Anal. Chem., vol. 66, no. 2, pp. 119–124, 2011.
[70] H. İ. Ulusoy, ―Determination of Trace Inorganic Mercury Species in Water Samples

by Cloud Point Extraction and UV-Vis Spectrophotometry,‖ J. AOAC Int., vol. 97,
no. 1, pp. 238–244, 2014.
[71] H. Zavvar Mousavi, A. Asghari, and H. Shirkhanloo, ―Determination of Hg in water

and wastewater samples by CV-AAS following on-line preconcentration with silver
trap,‖ J. Anal. Chem., vol. 65, no. 9, pp. 935–939, 2010.
[72] S. V Temerev, ―Determination of mercury in aquatic ecosystems,‖ J. Anal. Chem.,

vol. 63, no. 3, pp. 292–296, 2008.
[73] World Health Organization (WHO), ―Methylmercury,‖ Geneva, 1990.
[74] Organización Panamericana de la Salud OPS, ―COOPERACIÓN TÉCNICA

ENTRE BRASIL , BOLIVIA Y COLOMBIA : Teoría y Práctica para el
Fortalecimiento de la Vigilancia de la Salud de Poblaciones Expuestas a Mercurio,‖
2011.
[75] M. Zaib, M. M. Athar, A. Saeed, and U. Farooq, ―Electrochemical determination of

inorganic mercury and arsenic-A review.,‖ Biosens. Bioelectron., vol. 74, pp. 895–
908, 2015.
[76] Z. Li, S. Xia, J. Wang, C. Bian, and J. Tong, ―Determination of trace mercury in
water based on N-octylpyridinium ionic liquids preconcentration and stripping
voltammetry,‖ J. Hazard. Mater., vol. 301, pp. 206–213, 2016.
[77] B. Buckley, ―Speciation of mercury in environmental samples by chromatography

coupled with mass spectrometry.‖ pp. 1–31, 1995.
[78] P. Houserova, V. Kuban, P. Spurny, and P. Habarta, ―Determination of total

Bibliografía 75
mercury and mercury species in fish and aquatic ecosystems of Moravian rivers,‖
Vet. Med., vol. 51, no. 3, pp. 101–110, 2006.
[79] H. F. V. Braaten, H. a. de Wit, C. Harman, U. Hageström, and T. Larssen, ―Effects

of sample preservation and storage on mercury speciation in natural stream water,‖
Int. J. Environ. Anal. Chem., vol. 94, no. 4, pp. 381–384, 2014.
[80] J. E. Gray, P. M. Theodorakos, E. a. Bailey, and R. R. Turner, ―Distribution,

speciation, and transport of mercury in stream-sediment, stream-water, and fish
collected near abandoned mercury mines in southwestern Alaska, USA,‖ Sci. Total
Environ., vol. 260, pp. 21–33, 2000.
[81] K. Leopold, M. Foulkes, and P. Worsfold, ―Methods for the determination and
speciation of mercury in natural waters—A review,‖ Anal. Chim. Acta, vol. 663, no.
2, pp. 127–138, 2010.
[82] A. Bernaus, X. Gaona, D. van Ree, and M. Valiente, ―Determination of mercury in

polluted soils surrounding a chlor-alkali plant,‖ Anal. Chim. Acta, vol. 565, no. 1, pp.
73–80, 2006.
[83] M. Hojdova, J. Rohovec, V. Chrastný, V. Penízek, and T. Navrátil, ―The influence of

sample drying procedures on mercury concentrations analyzed in soils,‖ Bull.
Environ. Contam. Toxicol., vol. 94, no. 5, pp. 570–576, 2015.
[84] A. I. Cabañero Ortiz, Y. Madrid Albarrán, and C. Cámara Rica, ―Evaluation of

different sample pre-treatment and extraction procedures for mercury speciation in
fish samples,‖ J. Anal. At. Spectrom., vol. 17, no. 12, pp. 1595–1601, 2002.
[85] M. Sadiq, T. H. Zaidi, and H. Al-Mohana, ―Sample weight and digestion

temperature as critical factors in mercury determination in fish,‖ Bull. Environ.
Contam. Toxicol., vol. 47, no. 3, pp. 335–341, 1991.
[86] P. L. López Julian and J. M. Mondado Collado, ―Extracciones quimicas

secuenciales de metales pesados. Aplicacion en ciencias geologicas,‖ Ciencias
Geológicos, vol. 144, pp. 133–144, 2002.
[87] A. T. Reis, J. P. Coelho, I. Rucandio, C. M. Davidson, A. C. Duarte, and E. Pereira,

―Thermo-desorption: A valid tool for mercury speciation in soils and sediments?,‖

Geoderma, vol. 237, no. January, pp. 98–104, 2015.
[88] J. Chen et al., ―Simultaneous determination of mercury and organic carbon in

sediment and soils using a direct mercury analyzer based on thermal
decomposition–atomic absorption spectrophotometry,‖ Anal. Chim. Acta, vol. 871,
pp. 9–17, 2015.
[89] C.-M. Neculita, G. J. Zagury, and L. Deschênes, ―Mercury speciation in highly

contaminated soils from chlor-alkali plants using chemical extractions.,‖ J. Environ.
Qual., vol. 34, no. 1, pp. 255–262, 2005.
[90] I. A. Tazisong, Z. N. Senwo, and M. I. Williams, ―Mercury speciation and effects on

soil microbial activities,‖ J. Environ. Sci. Heal. Part A, vol. 47, no. 6, pp. 854–862,
2012.
[91] R. Fernández-Martínez, M. P. Galán, M. Petit-Domínguez, A. Ordóñez, J. Loredo,

and M. I. Rucandio, A rapid and robust method for the organic mercury
determination in Hg mine waters. 2005.
[92] Y. A. Vil´pan, I. L. Grinshtein, A. A. Akatov, and S. Gucer, ―Direct Atomic

Absorption Determination of Mercury in Drinking Water and Urine Using a Two-
Step Electrothermal Atomizer,‖ J. Anal. Chem., vol. 60, no. 1, pp. 38–44, 2005.
[93] Y. Zhao et al., ―Speciation analysis of mercury in natural water and fish samples by
using capillary electrophoresis-inductively coupled plasma mass spectrometry,‖
Talanta, vol. 89, pp. 280–285, 2012.
[94] Y. Wang et al., ―Highly sensitive and specific determination of mercury(II) ion in
water, food and cosmetic samples with an ELISA based on a novel monoclonal
antibody,‖ Anal. Bioanal. Chem., vol. 403, no. 9, pp. 2519–2528, 2012.
[95] T. Rijavec et al., ―Development of highly sensitive, automatized and portable

whole-cell Hg biosensor based on environmentally relevant microorganisms,‖
Geomicrobiol. J., no. manuscrito aceptado, pp. 1–38, 2017.
[96] D. Yu, L. Bai, J. Zhai, Y. Wang, and S. Dong, ―Toxicity detection in water
Bibliografía 77
containing heavy metal ions with a self-powered microbial fuel cell-based

biosensor,‖ Talanta, vol. 168, pp. 210–216, 2017.
[97] Y. Zhang et al., ―An ultra-sensitive Au nanoparticles functionalized DNA biosensor

for electrochemical sensing of mercury ions,‖ Mater. Sci. Eng. C, vol. 75, pp. 175–
181, 2017.
[98] US-EPA, ―Method 245.1 Determination of mercury in water by Cold Vapor Atomic
Absorption Spectrometry,‖ vol. 2, no. 1991, pp. 1–18, 1994.
[99] US-EPA, ―Method 1631: Mercury in water by oxidation, purge and trap, and cold
vapor atomic fluorescence spectrometry,‖ EPA 821-R-96-012. US EPA, Off. Water,
Washington, DC, no. August, 2002.
[100] US-EPA, ―Method 1630 Methyl Mercury in Water by Distillation , Aqueous

Ethylation , Purge and Trap , and CVAFS,‖ Science And Technology, no. January.
pp. 1–46, 2001.
[101] US-EPA, ―method 245.7 Mercury in Water by Cold Vapor Atomic Fluorescence
Spectrometry,‖ United States Environ. Prot. Agency, vol. Revision 2, no. February,
pp. 1–30, 2005.
[102] US EPA, ―Method 7473. Mercury in solids and solution by thermal descomposition,
amalgation, and atomic absorption spectrophotometry,‖ Methods, vol. Revision 0,
no. February, pp. 1–17, 2007.
[103] S. Standard Methods, ―Method 3112. Metals by Cold-Vapor Atomic Absorption

Spectrometry.‖ .
[104] A. M. Haji Shabani, S. Dadfarnia, and N. Nasirizadeh, ―Speciation analysis of

mercury in water samples by cold vapor atomic absorption spectrometry after
preconcentration with dithizone immobilized on microcrystalline naphthalene,‖ Anal.
Bioanal. Chem., vol. 378, no. 5, pp. 1388–1391, 2004.
[105] Z. Gao and X. Ma, ―Speciation analysis of mercury in water samples using
dispersive liquid–liquid microextraction combined with high-performance liquid
chromatography,‖ Anal. Chim. Acta, vol. 702, no. 1, pp. 50–55, 2011.
[106] G. Xiang, L. Li, X. Jiang, L. He, and L. Fan, ―Thiol-Modified Magnetic Silica Sorbent
for the Determination of Trace Mercury in Environmental Water Samples Coupled
with Cold Vapor Atomic Absorption Spectrometry.,‖ Anal. Lett., vol. 46, no. 4, pp.
706–716, 2013.
[107] Z. Es’haghi, G. R. Bardajee, and S. Azimi, ―Magnetic dispersive micro solid-phase

extraction for trace mercury pre-concentration and determination in water,
hemodialysis solution and fish samples,‖ Microchem. J., vol. 127, pp. 170–177, Jul.
2016.
[108] US-EPA, ―Appendix to Method 1631 Total Mercury in Tissue , Sludge , Sediment ,
and Soil by Acid Digestion and BrCl Oxidation,‖ United States Environ. Prot.
Agency, no. January, pp. 1–13, 2001.
[109] A. Q. Shah et al., ―Optimization of ultrasonic-assisted acid extraction of mercury in

muscle tissues of fishes using multivariate strategy,‖ J. AOAC Int., vol. 92, no. 5,
pp. 1580–1586, 2009.
[110] A. Q. Shah et al., ―Determination of Total Mercury in Muscle Tissues of Marine Fish
Species by Ultrasonic Assisted Extraction Followed by Cold Vapor Atomic
Absorption Spectrometry,‖ Pakistan J. Anal. Environ. Chem., vol. 11, no. 2, pp. 12–
17, 2010.
[111] J. Qian, Mercury Species in Environmental Samples Studied by Spectroscopic

Methods. 2001.
[112] I. C. F. Damin, M. a E. Santo, R. Hennigen, and D. M. Vargas, ―Validation of a

hydride generation atomic absorption spectrometry methodology for determination
of mercury in fish designed for application in the Brazilian national residue control
plan,‖ J. Environ. Sci. Health. B., vol. 48, no. 12, pp. 1103–11, 2013.
[113] L. H. Reyes, J. L. G. Mar, A. Hernández-Ramírez, J. M. Peralta-Hernández, J. M.

A. Barbosa, and H. M. S. Kingston, ―Microwave assisted extraction for mercury
speciation analysis,‖ Microchim. Acta, vol. 172, no. 1–2, pp. 3–14, 2011.
[114] F. Cordeiro et al., ―IMEP-115: Determination of methylmercury in seafood by

elemental mercury analysis: Collaborative study,‖ J. AOAC Int., vol. 97, no. 2, pp.
Bibliografía 79
593–597, 2014.
[115] J. Cheng and S. C. Hight, ―Elemental Analysis Manual for Food and Related
Products. 4.5 Cold Vapor Atomic Absorption Spectrometric Determination of Total
Mercury in Seafood Using Microwave Assisted Digestion,‖ U.S. Food Drug Adm.,
vol. 0, no. June, 2008.
[116] AOAC, ―AOAC Official Method 2015.01 Heavy Metals in Food Inductively Coupled
Plasma–Mass Spectrometry First Action 2015,‖ 2015.
[117] S. L. C. Ferreira, L. O. B. Silva, F. A. de Santana, M. M. S. Junior, G. D. Matos,

and W. N. L. dos Santos, ―A review of reflux systems using cold finger for sample
preparation in the determination of volatile elements,‖ Microchem. J., vol. 106, pp.
307–310, 2013.
[118] 3M, ―Guía para Selección de Respiradores,‖ p. 102.
[119] US-EPA, ―Method 245.6 Determination of mercury in tissues by cold vapor atomic
absorption spectrometry.‖ pp. 281–293, 1991.
[120] UNAL, ―Protocolo para el manejo integral de residuos quimicos,‖ B-PC-15.003.052,

p. 12, 2014.

Determinacion de Mercurio

Enviado por

Dados do documento

Título original

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Determinacion de Mercurio

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Determinación de mercurio orgánico

Caroll Edith Cortés Castillo

Universidad Nacional de Colombia

Caroll Edith Cortés Castillo

Universidad Nacional de Colombia

Por su amor y apoyo incondicional

Porque siempre serán combustible y motor que guía

A la Universidad Nacional de Colombia Sede Bogotá y al grupo de investigación ―Grupo

A mi directora la profesora Elianna Castillo Serna del departamento de Química por su

Palabras clave: Mercurio, Especiación, Mercurio espectrometría de absorción atómica

Keywords: Environmental mercury, Speciation, Mercury, Cold Vapor Atomic Absorption

Lista de figuras ................................................................................................................ XIII

Lista de tablas .................................................................................................................. XIV

Lista de Símbolos y abreviaturas ................................................................................... XV

1. Mercurio: características y prevalencia en el ambiente .......................................... 5

2. Métodos de análisis de mercurio en muestras ambientales................................. 27

3. Propuesta metodológica para la determinación y especiación de mercurio en

4. Conclusiones y recomendaciones ........................................................................... 55

4.2 Recomendaciones ............................................................................................. 56

A. Anexo A: Normatividad Colombiana. Niveles de mercurio permitidos en

Anexo B: Protocolo de muestreo para pescado ............................................................ 63

Anexo C: Diseño dedales fríos......................................................................................... 65

Figura 1. Reacción cobalamina con mercurio. Dibujada por el autor .................................. 8

Tabla 1. Especies de mercurio [13] ...................................................................................... 6

Lista de Símbolos y abreviaturas

En el contexto mundial, la evaluación de las emisiones de mercurio producto de su ciclo

Debido a la preocupación internacional sobre el mercurio, el Consejo de Administración

Según el informe quinquenal epidemiológico (2005-2012) del Instituto Nacional de Salud

Amazonas [6], en aguas de la Quebrada la pedrera en Bogotá [7], y en procesos

Si bien, en el país existen diversos institutos, universidades y laboratorios privados que

Este documento corresponde a un trabajo de revisión bibliográfica; para su desarrollo fue

El énfasis primordial de este documento es en las metodologías de análisis para

metodológica en la que se emplea la CV-AAS como técnica de detección y cuantificación

1.1 Especies químicas del mercurio

El mercurio existe en tres estados de oxidación: mercurio metálico (Hg0), mercurio

En compartimentos de la naturaleza, como el suelo, la forma predominante del mercurio

Los compuestos organomercúricos se caracterizan por la formación de enlaces

Tabla 1. Especies de mercurio [13]

Dimetilmercurio (Me2Hg) (CH3)2Hg

Etilmercurio (EtHg+) CH3CH2Hg+

1.2 Liberación de mercurio en el ambiente.

Por acción microbiológica y abiótica se producen transformaciones de las especies de

Se ha establecido que la principal fuente de emisión de mercurio atmosférico (cerca del

1.2.1 Mercurio en la atmosfera

El mercurio elemental se encuentra fundamentalmente en la atmósfera en forma de

1.2.2 Mercurio en Suelo

En suelo la forma más común de encontrar el mercurio es en estado divalente Hg(II), su

Figura 1. Reacción cobalamina con mercurio. Dibujada por el autor

La formación de metilmercurio se ve favorecida en condiciones ácidas y concentraciones

metilmercurio incrementa proporcionalmente con la concentración de iones sulfuro libres

Tanto el mercurio inorgánico Hg(II), como el metilmercurio, forman complejos estables

La coexitencia de especies de mercurio en el suelo, depende de numerosos factores,

Además, un tercer S reducido (probablemente un sulfuro orgánico) contribuye en la

Figura 2.Propuesta de estructuras promedio de Hg complejado por suelo orgánico.

1.2.3 Mercurio en agua

pocos minutos a muchos años, dependiendo del tipo de especie de mercurio

En Colombia los estudios desarrollados por Marrugo en la zona de la Mojana han

Hg (0) Hg (II) MMHg Hg (refractario)

Fitoplancton Zooplancton Peces Peces

HgS Hg (II) MMHg Hg (refractario)

Figura 3. Transformaciones del mercurio en ambientes acuáticos. Copiado de: [34]

Todas las transformaciones que sufre el mercurio dependen de diversos factores

de la metilación de mercurio, viéndose favorecida su actividad en condiciones