UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS

ESCUELA DE CIENCIAS QUIMICAS

SEDE OCOZOCOAUTLA

Farmacología II

Mtro. Pérez Villatoro José Iván

Practica VI

Demostración del efecto sinergista y antagonista en un sistema

simulado.

Alumno
Escobar Álvarez Diego Emiliano

Ocozocoautla de Espinosa, Chiapas. A 14 DE Marzo de 2019.

Contenido
Introducción .......................................................................................................................... 3
Material .................................................................................................................................. 4
Procedimiento ....................................................................................................................... 5
1. Inicio del programa y comienzo de un nuevo experimento. ................................... 5
2. Adición de agonistas a la cámara de órgano aislado. ............................................. 5
Adición de antagonistas a la cámara de órgano aislado. ............................................ 6
Medición de la respuesta del tejido. ............................................................................... 6
Experimentos a realizar en el software de simulación. ............................................... 7
Experimento 1. Curvas concentración respuesta de agonistas. ................................ 7
Experimento 2. Efecto de un antagonista en la curva concentración respuesta de
agonistas. .......................................................................................................................... 7
Experimento 3. Efecto relajante de antagonistas. ........................................................ 8
Resultados .......................................................................................................................... 10
Análisis de resultados ....................................................................................................... 14
Discusión............................................................................................................................. 30
Conclusión .......................................................................................................................... 30
Bibliografía .......................................................................................................................... 31
Introducción
Las lecciones prácticas son una parte importante de la enseñanza de la
farmacología en diversas áreas como la medicina, enfermería y farmacia. Los
experimentos in vivo e in vitro han sido ampliamente utilizados en las lecciones
prácticas para ayudar a los estudiantes a adquirir habilidades en los experimentos
farmacológicos, reforzando su conocimiento aprendido con las clases teóricas y
libros.
Aunque los experimentos tradicionales en animales vivos son invaluables, tienen
desventajas: alto consumo de tiempo, dinero y sacrificio de animales; sólo pueden
probarse un número limitado de fármacos en un periodo de tiempo y requieren
frecuentemente de un trabajo constante e intenso.

Una variedad de software ha sido desarrollado para la enseñanza de la

farmacología en pregrado y posgrado. Evidencia previa ha mostrado que esta
técnica innovadora de enseñanza junto con los métodos de enseñanza
tradicionales, facilita al estudiante el aprendizaje y mejora su desempeño en
farmacología. La tecnología computacional y el internet tienen un potencial para
propiciar el aprendizaje dela ingeniería en un entorno altamente interactivo. “las
funciones de los profesores y estudiantes están cambiando, y sin duda hay formas
de aprender aún no descubiertas” (Reyes Lazalde, 2016)

Para que se produzca un efecto farmacológico es necesario la interacción fármaco-

receptor, ésta a su vez depende de la afinidad; la cual se define como la capacidad
de unión del fármaco al receptor. La actividad intrínseca será entonces la capacidad
para producir la acción, tras a unión del receptor. En termino generales un agonista
es una molécula que se une a un receptor y lo estabiliza en una determinada
conformación (activa); mientras que un antagonista es una molécula que inhibe la
acción de un agonista pero que no tienen ningún efecto en ausencia de éste. Los
antagonistas tienen afinidad pero no eficacia para sus receptores, así mismo median
sus efectos uniéndose al sitio activo o a os sitios alostericos en los receptores
La potencia se refiere a la cantidad necesaria de fármaco para producir un efecto
definido. La potencia del agonista se define como el logaritmo negativo en la
concentración de antagonista que nos obliga a administrar el doble de la De50, para
alcanzar el máximo efecto farmacológico (De la Rosa, et al 2005)

Objetivo

 Demostrar el efecto concentración dependiente de la Histamina y Carbacol

en un sistema simulado.
 Determinar el tipo de interacción farmacológica de la Atropina, Mepiramina y
Tubocurarina sobre la actividad de la Histamina y Carbacol en un sistema
simulado.

Material

 Software

Se utilizará el software Organ Bath Simulation 2006

Procedimiento
A) Manejo del software Organ Bath Simulation

Para el uso adecuado del software se dividirá su manejo por procedimiento con
referencia al esquema siguiente:

1. Inicio del programa y comienzo de un nuevo experimento.

Para iniciar el programa se debe oprimir el siguiente icono:

Para comenzar un nuevo experimento:

a) Seleccione en Tissue type, el tejido Guinea Pig Ileum. Este tejido es el que será
colocado dentro de la cámara de órgano aislado.

b) Oprima el botón New Experiment.

c) Oprime el botón Record, para comenzar la lectura dentro del área de registro.

d) Seleccione y aplique fármacos de la lista de agonistas o antagonistas como se

indica a continuación.

2. Adición de agonistas a la cámara de órgano aislado.

a) En el apartado Agonist, seleccione el agonista que se utilizará.

b) Seleccione la concentración molar que se utilizará.

c) Introduzca en el volumen a utilizar: 0.10 mL

d) Oprima el botón Add to Organ Bath, para agregar el agonista a la cámara.

Registre por 12 segundos (un cuadro en la línea de tiempo) que equivale a 3 minutos
en la simulación.
e) Para curvas acumulativas, agregue la siguiente concentración de agonista. Para
curvas por lotes o no acumulativas, oprima el botón, Flush Reservoir to Bath, para
lavar el tejido con disolución Krebs.

Adición de antagonistas a la cámara de órgano aislado.

a) En el apartado Antagonist, seleccione el antagonista que se utilizará.

b) Seleccione la concentración molar que se utilizará.
c) Introduzca en el volumen a utilizar: 0.10 mL
d) En la lista desplegable que se encuentra a la derecha del botón Add to,
seleccione
Organ Bath, y oprima el botón Add to para agregar el antagonista a la cámara.

Medición de la respuesta del tejido.

Para medir la amplitud de los picos de las contracciones del tejido:

a) Oprima el botón Stop, para terminar el experimento.
b) Usando la barra de desplazamiento horizontal del área de registro, seleccione la
sección que contiene las contracciones del tejido que serán medidas.
c) Arrastre el cursor de medición al punto de la gráfica de registro que será medido.
La fuerza de contracción (en gramos) será mostrada debajo del cursor.
d) Se sugiere tomar al menos 5 lecturas cercanas dentro de la meseta o área de
medida y obtener el promedio de las lecturas para un mejor resultado.
Experimentos a realizar en el software de simulación.

Experimento 1. Curvas concentración respuesta de agonistas.

a) Seleccione como tejido al íleon de cobayo e inicie un nuevo experimento.

b) Seleccione a Histamina (Histamine) como el agonista a utilizar a una
concentración de1x10‐8 M y un volumen de 0.10 mL.
c) Oprima el botón Record para iniciar el experimento.
d) Se deja estabilizar la muestra por 3 minutos (12 segundos reales o un cuadro del
área de registro) y se oprime el botón Add to Organ Bath.
e) Cuando la contracción del músculo se estabilice (se registre una meseta) o hayan
transcurrido 3 minutos de la simulación (si es que no hay contracción), se agrega la
concentración de 1x10‐7 M y así sucesivamente hasta agregar la concentración de
1x100M.
f) Al terminar la curva, se oprime el botón Stop, se guarda el registro. Y se calcula
la fuerza de contracción por cada concentración agregada.
g) Se realiza el mismo experimento, ahora con Carbacol (Carbachol).

Experimento 2. Efecto de un antagonista en la curva concentración

respuesta de agonistas.

a) Seleccione como tejido al íleon de cobayo e inicie un nuevo experimento.

b) Seleccione a Histamina como el agonista a utilizar a una concentración de 1x10‐

8 M y un volumen de 0.10 mL.
c) Seleccione a Mepiramina (Mepyramine) como el antagonista a utilizar a una
concentración de 1x10‐6 M y un volumen de 0.10 mL.
d) Oprima el botón Record para iniciar el experimento.
e) Se deja estabilizar la muestra por 3 minutos (12 segundos reales o un cuadro del
área de registro) y se agrega el antagonista a Organ Bath oprimiendo el botón Add
to del apartado Antagonist. Se deja incubar por 3 minutos de simulación.
f) Después de terminada la incubación. Se construye la curva concentración
respuesta de la Histamina como se describe en el experimento 1.
g) Se realiza el mismo experimento, ahora con Carbacol como agonista y Atropina
(Atropine) como antagonista.
h) Adicionalmente realice el mismo experimento utilizando dos concentraciones más
del antagonista con el objeto de tener el efecto del antagonista a tres diferentes
concentraciones, en la acción del agonista.

Nota: Se puede experimentar con combinaciones de agonistas y antagonistas con

los que cuenta el software para demostrar la selectividad de estos últimos.

Experimento 3. Efecto relajante de antagonistas.

a) Seleccione como tejido al íleon de cobayo e inicie un nuevo experimento.

b) Seleccione a Histamina como el agonista a utilizar a una concentración de 1x10‐
1 M y un volumen de 0.10 mL.
c) Oprima el botón Record para iniciar el experimento.
d) Se deja estabilizar la muestra por 3 minutos (12 segundos reales o un cuadro del
área de registro) y se oprime el botón Add to Organ Bath.
e) Cuando la contracción del músculo se estabilice (se registre una meseta) o hayan
transcurrido 3 minutos de la simulación (si es que no hay contracción), se construye
una curva concentración respuesta con concentraciones crecientes de Mepiramina
(de 1x10‐8 M a 1x100 M). Tome en cuenta que ahora la fuerza de contracción
disminuirá en lugar de aumentar.
f) Al terminar la curva, se oprime el botón Stop, se guarda el registro. Y se calcula
la fuerza de contracción por cada concentración agregada.
g) Se realiza el mismo experimento, ahora con Carbacol a una concentración de
1x10‐3 M y como antagonista Atropina.
Nota importante: Al igual que en los experimentos in vitro, la concentración real en
la cámara de órgano aislado es 100 menor debido a la dilución 1:100 que se realiza
al agregar 0.01 mL de muestra en 10 mL de disolución que contiene la cámara.
Resultados

Curva de respuesta de Histamina en íleon de cobayo, experimento 1.

Curva de respuesta de Carbacol en íleon de cobayo, experimento 1.

Curva de respuesta de Histamina utilizando Mepiramina como antagonista con
una concentración de -6 M

Curva de respuesta de Histamina utilizando Mepiramina como antagonista con

una concentración de -4 M
Curva de respuesta de Histamina utilizando Mepiramina como antagonista con
una concentración de -2 M

Curva de respuesta de Carbacol utilizando Atropina como antagonista con una

concentración de -6 M
Curva de respuesta de Carbacol utilizando Atropina como antagonista con una
concentración de -4 M

Curva de respuesta de Carbacol utilizando Atropina como antagonista con una

concentración de -2 M
Análisis de resultados
Experimento 1, curvas concentración respuesta de Histamina
Concentracion Respuesta
M en % g/F
-8 0.637254902 0.078
-7 0.47875817 0.0586
-6 12.45098039 1.524
-5 54.11764706 6.624
-4 80.38398693 9.839
-3 84.39542484 10.33
-2 84.96732026 10.4
-1 95.58823529 11.7
0 100 12.24

Respuesta en %
120
y = 14.301x + 114.21
R² = 0.8904
100

80

60

40

20

0
-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

Lineal
CE50 -4.48989581 M
 Concentracion
M Log Conc. Respuesta
0.00000001 -8 0.637254902
0.0000001 -7 0.47875817
0.000001 -6 12.45098039
0.00001 -5 54.11764706
0.0001 -4 80.38398693
0.001 -3 84.39542484
0.01 -2 84.96732026
0.1 -1 95.58823529
0 100

Respuesta
120
y = 15.824x + 122.83
R² = 0.8987 100

80

60

40

20

0
-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

Lineal Log
CE50 2.49745E-05 M

Debido a que R² del modelo lineal-logarítmico se acerca más al 1, es el

modelo que más se ajustan los datos obtenidos
Experimento 1, curvas concentración respuesta de Carbacol
Concentracion Respuesta
M en % g/F
-8 0.813347237 0.078
-7 6.517205422 0.625
-6 39.83315954 3.82
-5 85.88112617 8.236
-4 96.97601668 9.3
-3 97.91449426 9.39
-2 98.54014599 9.45
-1 99.47862357 9.54
0 100 9.59

Respuesta en %
140
y = 13.418x + 123.22
R² = 0.7679
120

100

80

60

40

20

0
-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Lineal
CE50 -5.55538695 M
 Concentracion Respuesta
M LOG conc. en %
0.00000001 -8 0.81334724
0.0000001 -7 6.51720542
0.000001 -6 39.8331595
0.00001 -5 85.8811262
0.0001 -4 96.9760167
0.001 -3 97.9144943
0.01 -2 98.540146
0.1 -1 99.4786236
0 100

Respuesta en %
140

y = 15.906x + 137.32 120

R² = 0.8158
100

80

60

40

20

0
-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

LOG
CE50 3.23778E-06 M

Debido a que R² del modelo lineal-logaritmico se acerca mas al 1, es el

modelo que mas se ajustan los datos obtenidos
Experimento 2, curva de concentración respuesta de Histamina utilizando
mepiramina como antagonista con una concentración de -6 M

Concentracion Respuesta
M en % g/F
-8 0.25398614 0.02931
-7 0.84662045 0.0977
-6 2.55719237 0.2951
-5 4.31802426 0.4983
-4 16.0051993 1.847
-3 62.4870017 7.211
-2 85.5112652 9.868
-1 96.187175 11.1
0 100 11.54

Respuesta en %
90
y = 29.006x + 143.6 80
R² = 0.9542
70
60
50
40
30
20
10
0
-6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-10

Lineal
CE50 -3.22691857 M
 Concentracion Respuesta
M LOG conc. en %
0.00000001 -8 0.25398614
0.0000001 -7 0.84662045
0.000001 -6 2.55719237
0.00001 -5 4.31802426
0.0001 -4 16.0051993
0.001 -3 62.4870017
0.01 -2 85.5112652
0.1 -1 96.187175

Respuesta en %
90
y = 29.006x + 143.6
80
R² = 0.9542
70
60
50
40
30
20
10
0
-6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-10

LOG
CE50 0.0003768 M

Debido a que R² del modelo lineal se asemeja a la R² del modelo lineal-

logaritmico, los dos modelos se ajustan a los datos.
Experimento 2, curva de concentración respuesta de Histamina utilizando
mepiramina como antagonista con una concentración de -4 M
Concentracion
Respuesta
M en % g/F

-8 1.06902357 0.127

-7 1.31313131 0.156

-6 0.15622896 0.01856

-5 1.65824916 0.197

-4 1.72727273 0.2052

-3 5.07407407 0.6028

-2 33.476431 3.977

-1 85.3535354 10.14

0 100 11.88

y = 22.028x + 92.952 Respuesta en %

R² = 0.8641 120

100

80

60

40

20

0
-6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

-40

Lineal
CE50 -1.94988197 M
 Concentracion Respuesta
M LOG conc. en %
0.00000001 -8 1.06902357
0.0000001 -7 1.31313131
0.000001 -6 0.15622896
0.00001 -5 1.65824916
0.0001 -4 1.72727273
0.001 -3 5.07407407
0.01 -2 33.476431
0.1 -1 85.3535354

y = 27.928x + 101.23 Respuesta en %

R² = 0.8688 100

80

60

40

20

0
-4.5 -4 -3.5 -3 -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0
-20

LOG
CE50 0.01464334 M

Debido a que R² del modelo lineal-logaritmico se acerca mas al 1, es el

modelo que mas se ajustan los datos obtenidos
Experimento 2, curva de concentración respuesta de Histamina utilizando
mepiramina como antagonista con una concentración de -2 M
Concentracion Respuesta
M en % g/F
-8 1.12453959 0.0977
-7 1.57458564 0.1368
-6 1.68047882 0.146
-5 1.95672192 0.17
-4 1.97974217 0.172
-3 1.49631676 0.13
-2 5.06445672 0.44
-1 37.4539595 3.254
0 100 8.688

Respuesta en %
120
y = 32.79x + 85.189
R² = 0.8608
100

80

60

40

20

0
-3.5 -3 -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0
-20

Lineal
CE50 -1.07316255 M
 Concentracion Respuesta
M LOG conc. en %
0.00000001 -8 1.12453959
0.0000001 -7 1.57458564
0.000001 -6 1.68047882
0.00001 -5 1.95672192
0.0001 -4 1.97974217
0.001 -3 1.49631676
0.01 -2 5.06445672
0.1 -1 37.4539595

Respuesta en %
y = 17.979x + 50.629
R² = 0.8236 40
35
30
25
20
15
10
5
0
-3.5 -3 -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0
-5
-10

LOG
CE50 0.93449457 M

Debido a que R² del modelo lineal se acerca mas al 1, es el modelo que mas
se ajustan los datos obtenidos
Experimento 2, curva de concentración de respuesta de Carbacol usando atropina
como antagonista a una concentración -6 M

Concentracion Respuesta
M en % g/F
-8 0.592441267 0.058
-7 2.694586313 0.2638
-6 7.660878447 0.75
-5 42.80898876 4.191
-4 88.32482125 8.647
-3 98.26353422 9.62
-2 98.56996936 9.65
-1 99.28498468 9.72
0 100 9.79

Respuesta en %
140

y = 15.411x + 121.44 120

R² = 0.851
100

80

60

40

20

0
-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

Lineal
CE50 -4.63564986 M
 Concentracion Respuesta
M LOG conc. en %
0.00000001 -8 0.59244127
0.0000001 -7 2.69458631
0.000001 -6 7.66087845
0.00001 -5 42.8089888
0.0001 -4 88.3248212
0.001 -3 98.2635342
0.01 -2 98.5699694
0.1 -1 99.2849847

Respuesta en %
140

120
y = 17.709x + 134.47
R² = 0.8824
100

80

60

40

20

0
-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

LOG
CE50 1.69867E-05 M

Debido a que R² del modelo lineal-logaritmico se acerca mas al 1, es el

modelo que más se ajustan los datos obtenidos.
Experimento 2, curva de concentración de respuesta de Carbacol usando
atropina como antagonista a una concentración -2 M
Concentracion Respuesta
M en % g/F
-8 1.0290652 0.0917
-7 1.09639771 0.0977
-6 2.07608574 0.185
-5 3.26562675 0.291
-4 4.01750645 0.358
-3 10.7058692 0.954
-2 39.3670744 3.508
-1 88.4300303 7.88
0 100 8.911

Respuesta en %
120
y = 21.873x + 95.648
R² = 0.8867 100

80

60

40

20

0
-6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

Lineal
CE50 -2.19785923 M

Concentracion Respuesta
M LOG conc. en %
0.00000001 -8 1.0290652
0.0000001 -7 1.09639771
0.000001 -6 2.07608574
0.00001 -5 3.26562675
0.0001 -4 4.01750645
0.001 -3 10.7058692
0.01 -2 39.3670744
0.1 -1 88.4300303
 Respuesta en %
y = 20.568x + 90.861 100
R² = 0.8042
80

60

40

20

0
-6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

LOG
CE50 0.04608672 M

Debido a que R² del modelo lineal se acerca mas al 1, es el modelo que más
se ajustan los datos obtenidos.
Experimento 2, curva de concentración de respuesta de Carbacol usando
atropina como antagonista a una concentración -4 M
Concentracion Respuesta
M en % g/F
-8 1.096397711 0.0977
-7 1.096397711 0.0977
-6 2.076085737 0.185
-5 3.289193132 0.2931
-4 3.725732241 0.332
-3 5.153181461 0.4592
-2 39.3670744 3.508
-1 88.4300303 7.88
0 100 8.911

Respuesta en %
120
y = 22.054x + 95.129
R² = 0.8664 100

80

60

40

20

0
-6 -5 -4 -3 -2 -1 0
-20

-40

Lineal
CE50 -2.13135524 M
 Concentracion Respuesta
M LOG conc. en %
0.00000001 -8 1.09639771
0.0000001 -7 1.09639771
0.000001 -6 2.07608574
0.00001 -5 3.28919313
0.0001 -4 3.72573224
0.001 -3 5.15318146
0.01 -2 39.3670744
0.1 -1 88.4300303
y = 41.638x + 127.59
R² = 0.9895 Respuesta en %
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
-3.5 -3 -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0

LOG
CE50 0.013693178 M

Debido a que R² del modelo lineal-logaritmico se acerca mas al 1, es el

modelo que más se ajustan los datos obtenidos.
Discusión
En el caso de el papel del antagonista competitivo es la acción que hace sobre un
agonista para moverlo de su receptor, dependiendo de la concentración que se use,
y de la afinidad que tenga con su receptor cada agonista y antagonista. En el caso
de la Histamina y el Carbacol se realizó en el experimento 1 una curva de respuesta
en íleon de cobayo y en el experimento 2 una curva de respuesta frente a
Mepiramina y Atropina como antagonistas respectivamente de igual forma en el
íleon de cobayo.

Los antagonistas utilizados son agonistas inversos que bajan la efectividad del
receptor de histamina y carbacol.

Conclusión
La simulación de los experimentos de laboratorio permite a los alumnos situarse en
una actividad cinética real, llevada a la computadora. Un experimento real de este
tipo tiene una duración de cinco a siete horas, y obtener una curva dosis-respuesta
requiere múltiples experimentos. Con el simulador, los tiempos disminuyen
considerablemente; un experimento se efectúa en minutos. Los simuladores
permiten implementar experimentos que, por sus altos costos, son imposibles de
realizar en la licenciatura
Bibliografía
De la Rosa , R., Hernandez, J., Merino, L., Molina, L., & Torres, F. (2005). StuDocu.
Obtenido de https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-nacional-
autonoma-de-mexico/farmacologia-ii/practica/prectica-no7-demostracion-del-
efecto-antagonista-en-un-sistema-simulado/685518/view
Reyes Lazalde, A. (2016). Experimentación. Apertura. Obtenido de
http://www.academia.edu/28915888/Experimentaci%C3%B3n_virtual_con_el_simu
lador_dosis-respuesta_como_herramienta_docente_en_biolog%C3%ADa