Validación de un método: es un procedimiento analítico

comprobado estadísticamente que demuestra que un método

genera resultados confiables y que cumple con una documentación
establecida.

Linealidad: Capacidad del método para producir resultados

directamente proporcionales a los rangos de concentración de los
analitos y se establece por medio de regresiones donde se
relaciona la concentración con la señal.

Exactitud: es la proximidad entre el resultado obtenido y el valor

real. La exactitud debe establecerse en todo el intervalo
especificado para el método analítico, La exactitud debe evaluarse
empleando un mínimo de nueve determinaciones sobre un mínimo
de tres niveles de concentración que cubran el intervalo
especificado (como por ej., tres concentraciones/ tres repeticiones
completas del método)

Recuperación: es la capacidad que tiene un procedimiento analítico

para determinar cuantitativamente una especie que ha sido
adicionada a la muestra

Precisión: indica el grado de concordancia entre los resultados

obtenidos para varias réplicas de una misma muestra, usualmente
se expresa en términos de la desviación estándar relativa o con el
coeficiente variación, se evalúa bajo tres consideraciones, la
repetibilidad, la reproducibilidad, y la precisión intermedia que
implica variaciones en los días de análisis, en el laboratorio, en los
equipos etc.

Repetibilidad: es una medida de la precisión de los datos obtenidos

por el equipo por un analista trabajando bajo las mismas
condiciones.

Reproducibilidad: es una medida de la precisión obtenida en los

datos variando los analistas, pero empleando el mismo método y las
mismas condiciones de trabajo.

Límite de detección : es la concentración mínima que detecta el

instrumento por encima del ruido, con una precisión y una exactitud
aceptable, según los lineamientos de calidad TP0100 del IDEAM,
presentando así errores de falsos positivos I y falsos negativos
bajos.
Límite de detección instrumental: concentración de un analito que
resulta 5 veces mayor a la relación señal/ruido, y Resulta muy útil
para valorar la concentración de analito o la cantidad de un extracto
necesaria para producir una señal que permita calcular un LDM
estimado.

Límite de detección del método: es la concentración del analito que

produce una señal del 99% de probabilidad diferente al blanco, para
determinarlo se añade el analito al agua grado reactivo o a la matriz
de interés para obtener una concentración próxima al LDM
estimado.

Límite de cuantificación: El límite de cuantificación es la menor

concentración de analito que puede determinarse con precisión y
exactitud en una muestra, bajo las condiciones experimentales
establecidas.

Especificidad o selectividad : se refiere a la propiedad del método

de producir una señal medible debida sólo a la presencia del
analito, libre de interferencia de otros componentes en la matriz de
la muestra, matriz, impurezas, productos de degradación etc.

Robustez: es una medida de su capacidad de no verse afectado por

variaciones pequeñas, pero deliberadas, en los parámetros del
método y proporciona una indicación de su confiabilidad, entre ellos,
el cambio de reactivos, de instrumentos etc.

Polarimetría: es la técnica que permite la determinación del ángulo de

rotación del plano de polarización cuando la luz linealmente polarizada
interactúa con una sustancia ópticamente activa. Es una técnica no
destructiva que presenta variantes a macro, semi micro y micro escala

El ángulo de rotación de la dextrosa específicamente varia con el

tiempo, con la temperatura hasta que logra un equilibrio de +52.7º

Procedimiento: se pesan de 2 a 5 gramos de glucosa en matraces de

50.00 ± 0.05mL y se disuelven con agua destilada hasta enrasar y
obtener concentraciones de 2-25 p/v, se mide la rotación óptica a
589 nm y aprox. 25 C º en las celdas de aprox. 1- 2 dm de cada
estándar registrando la temperatura.

Para las muestras, se toman alícuotas del suero de glucosa en

matraces de 100± 0.25mL añadiendo a cada muestra 0.2 mL de
solución de NH4OH al 10% enrasar con agua, dejar reposar 30
minutos y medir la rotación óptica.

Rango de linealidad: se pre4paraqn soluciones de 2-25 p/v de

glucosa a 589 nm, 25 ºC y se mide la rotación óptica.

Se prepara una serie de concentraciones de intervalos altas,

medias y bajas.

Para el rango de concentraciones bajas, de 2.0-7.0 p/v

Medias: 8.0-15 p/v

Altas: 19- 25 p/v

Y se leen las correspondientes rotaciones ópticas con las

respectivas muestras, se realizan lecturas por triplicado y se hace la
regresión de la concentración- ángulo de rotación.

Precisión: se preparan 3 muestras de concentraciones de 3.0-25 p/v

y se analiza por tres factores.

Mismo instrumento, mismo día, mismo analista: se hacen 10

réplicas de la muestra del suero de glucosa y se leen sus
respectivos ángulos de rotación, calcular el coeficiente de variación.

Para precisión intermedia: hacer 10 réplicas de las muestras en 3

días diferentes y leer el ángulo de rotación.

Reproducibilidad: realizar las mismas 10 réplicas de la muestra con

analistas diferentes, bajo las mismas condiciones de trabajo.

Exactitud:

Equipo:

1 Polarímetro JASCO 2000

1 Celda de cuarzo de 1 a 2 dm
1 Balanza analítica

10 Matraces de 50 mL

1 Frasco lavador

1 Espátula

2 Vidrios reloj

1 macro pipeta

Pipetas volumétricas de 0.5,1.0,2.0,3.0,5.0 …20 mL

http://www1.paho.org/hq/dmdocuments/2008/13_Modulo_VALIDACIoN_de_Metodos_Fisico
qcos.pdf

http://www.loa.org.ar/leg/DE-202-2003-PEN_archivos/1130.htm

http://www.ideam.gov.co/documents/14691/38152/Estandarizacion_metodos_analaticos.pdf
/934bd941-dd47-4501-8507-d2721ef4f316

https://books.google.com.co/books?id=HRhFUkEUlyAC&pg=PA301&lpg=PA301&dq=cuantifica
cion+de+soluciones+de+glucosa+polarimetria&source=bl&ots=rSMtWyWoz6&sig=ACfU3U1HK
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