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MACROMOLECULAS: Carbohidratos y Lípidos

Objetivo general: Determinar en forma cualitativa la presencia de carbohidratos y


lípidos a través de reacciones químicas.

MARTINEZ H., Luis Enrique; MURILLO M., Yulieth; HINESTROZA S., Isabela,
Universidad del Valle Sede Pacifico. Programa de Licenciatura en Ciencias
Naturales y Educación Ambiental. Primer semestre.

Julio 10 de 2019
Palabras claves: Carbohidratos, Lípidos, Glúcidos.

RESUMEN
En la realización de este laboratorio se efectuaron procedimientos para la
determinación de presencia de carbohidratos y lípidos, lo cual nos permitió observar
niveles de complejidad estructural de algunas muestras como la solución de
glucosa, almidón, suspensión de yema de huevo etc., y a través de mezclas que
sirven como patrones previamente preparadas en tubos de ensayo donde hay
,glucosa más un reactivo, sacarosa más un reactivo, almidón más un reactivo que
nos permite observar sus características y propiedades físico-químicas que de
acuerdo a la muestra y al color que presenta el resultado, permitiendo poder llegar
a un análisis de las diferentes reacciones.

INTRODUCCION
Las macromoléculas son moléculas de gran tamaño formadas comúnmente a través
de polimerización de subunidades conformada por miles de átomos los cuales
pueden ser tanto orgánicos como inorgánicos. Se puede decir que las
macromoléculas que se encontró presente en este laboratorio fueron: los
carbohidrato y lípidos.
Los carbohidratos son las moléculas de obtención de energía rápida, se conocen
con el nombre de glúcidos o azucares y generalmente son de origen vegetal, su
forma de reserva en los organismos es la glucosa presente en las células vegetales
y el glucógeno en las células animales.
De los carbohidratos se tienen tres grupos: los monosacáridos, oligosacáridos y
polisacáridos.
Monosacáridos: estos compuestos contienen de tres a ocho carbonos, de este
grupo el de más abundancia en los seres vivos es la glucosa.
Oligosacáridos: los de este grupo generan regularmente un mínimo de dos
moléculas de oligosacáridos y máximo 10, podemos encontrar que tienen un sabor
dulce y por esta razón se les conoce con el termino de azucares, los de mayo
importancia en términos biológicos son: la maltosa, sacarosa, lactosa y la celobiosa,
su fórmula estructural es C6H12O6.
Polisacáridos: son macromoléculas que al hidrolizarse dan lugar a más de 10
moléculas de monosacáridos, por ejemplo: almidón y celulosa.
Los lípidos son biomoléculas formadas principalmente por cadenas lineales de
Carbono e Hidrogeno y tienen como característica principal el ser insolubles en
agua, su clasificación general se basa en la consistencia a temperatura ambiente,
de esta manera están las grasas que son sólidas y los aceites que son líquidos. De
la misma manera que la glucosa es la unidad fundamental de los carbohidratos, en
algunos lípidos la unidad fundamental son ácidos grasos unidos a un glicerol.
Los lípidos se clasifican en tres grupos como: los lípidos simples, lípidos
compuestos y los lípidos derivados.
Lípidos simples: son esteres de glicerina y ácidos de cadena carbonada larga que
reciben por nombre ácidos grasos, conocidos como acigliceroles. Existe otra clase
de lípidos simples conformados por un alcohol de cadena larga de átomos de
carbono, que son diferentes a los ácidos grasos de cadena larga llamados ceras.
Los acigliceroles son moléculas lipídicas que utiliza la célula y el organismo para
almacenar energía.
Lípidos compuestos: son esteres de naturaleza diversa que están formados
generalmente por alcohol, ácidos grasos y ácidos fosfóricos, estos están formados
por una unidad de 1,2 diaciglicerol en enlace éster con ácido fosfórico, en, la
posición tres forman el ácido fosfático con el cual se van a construir los fosfolípidos
que forman las membranas biológicas.
Lípidos derivados: estos compuestos pueden considerarse esteres cuya molécula
es un sistema de anillos llamados como ciclopentanoperhidrofenantreno, que
constituye la molécula del colesterol, algunas vitaminas liposolubles y las hormonas
esteroideas.
MATERIALES REACTIVOS
● Tubos de ensayo Solución de glucosa
● Gradilla Solución de sacarosa
● Pinzas para tubos de Suspensión de almidón
ensayo Leche entera
● Beaker Leche deslactosada
● Pipeta de 5 y 10 ml Homogenizado de células hepáticas
Reactivo de Benedict
● Pro pipetas
Reactivo de Biuret
● Gotero Lugol
● Espátula Cristales de sudan IV
● Soporte universal Aceite de mesa
● Cinta de enmascarar Aceite de coco
● Vidrio reloj Suspensión de yema de huevo
● Pesa electrónica Solución de ácido acético glacial
● Erlenmeyer Solución de ácido glacial
● Tijeras Agua

METODOLOGIA
Para el desarrollo de esta práctica se utilizaron diferentes sustancias y soluciones
para poder determinar la presencia de carbohidratos y lípidos que se encuentran
presentes en las diferentes reacciones.
Para determinar la presencia o no de carbohidratos y lípidos se utilizaron los
siguientes reactivos a continuación:

PROCEDIMIENTO
Determinación de Glucosa
1. Se tomaron 3 tubos de ensayo, rotulados con los números 1,2 y 3.
2. Agregamos a cada uno de ellos 2ml de solución de glucosa.
3. Al tubo 1 le agregamos 5 gotas de lugol, al instante en que entro en contacto
con la glucosa se dio una mezcla totalmente homogénea que se tornó de un
color vino tinto (rubí).
4. Al tubo número 2 le añadimos 1ml de reactivo de benedict, tornándose de
color azul turquesa.
5. Al tubo 3 le adicionamos 1ml de reactivo de biuret el cual se tornó de color
azul lavanda.
6. Tomamos los tubos 2 y 3, y los calentamos en baño maría durante 5 minutos
y pudimos observar que: el color de la sustancia del tubo numero 2 no era
más de color azul, sino que cambio a un color verde, después a un color café
claro y finalizando en un color anaranjado. El tubo número 3 se tornó primero
de un color amarillo, después a un color naranja y quedando en un color rojo
ladrillo o anaranjado.

Determinación de Sacarosa y Lactosa


1. Tomamos 6 tubos de ensayo con sus respectivos rótulos.
2. A los tubos 1 y 4 le agregamos 2ml de solución de sacarosa.
3. A los tubos 2 y 5 les adicionamos 2ml de leche (normal).
4. Al tubo 3 y 6 les añadimos 2ml de leche deslactosada.
5. A los tubos 1,2 y 3 les aumentamos 1ml de reactivo de benedict, el tubo 1 se
tornó de color turquesa, las sustancias de los tubos 2 y 3 se tornaron de color
violeta claro.
6. Agregamos a los tubos 4,5 y 6 1ml de reactivo de biuret, el tubo número 4 se
tornó de color azul lavanda, en el tubo número 5 se formaron 3 anillos de
color violeta, azul zafiro claro y el otro color es el blanco proporcionado por
la leche, la mezcla del tubo número 6 se logran distinguir dos colores como
el violeta claro y el blanco.
7. Primero tomamos los tubos 1,2 y 3 y los colocamos en baño maría y
observamos que el tubo 1 se tornó de un color verde azulado y en el fondo
del tubo se lograba distinguir el color turqués, el tubo 2 se tornó de color
amarillo mostaza y además la leche se había coagulado, el tubo numero 3
fue cambiando progresivamente de color, comenzando con anillos de color
amarillo, verde claro y terminando en un color naranja amarillo y la leche ya
se había coagulado.
8. Luego, pusimos los tres tubos (4,5 y 6) restantes en baño maría y
observamos que: el tubo 4 comenzó a tener un color verde musgo, luego se
tornó de un color mostaza, los tubos 5 y 6 primero se tornaron de color violeta
claro, luego se tornaron de color blanco y finalmente quedaron de color
anaranjado, en esta parte la leche se coagulo solo en los tubos 5 y 6.

Determinación de almidón y glucógeno


1. Tomamos 6 tubos de ensayo con sus respectivos rótulos, a los tubos 1,2 y 3,
se le agrego suspensión de almidón al 1%.
2. A los tubos 4,5 y 6 les agregamos homogenizado de células hepáticas.
3. En los tubos 1 y 4 adicionamos 5 gotas de lugol, observamos que el tubo 1
se tornó de color negro ámbar, el otro tubo se tornó de color marrón.
4. Añadimos 1ml de reactivo de benedict a los tubos 2 y 5, observamos que en
el tubo 2 se obtuvo una sustancia de color azul celeste, mientras que en el
otro pudimos observar que los trocitos de hígado o células hepáticas subían
a la superficie del líquido, el cual era de color marrón.
5. En los tubos 3 y 6 depositamos 1ml de reactivo de biuret y observamos que
en el tubo 3 se presentaba un color azul (lavanda) y en el tubo 6 observamos
que presentaba características muy similares a las del tubo número 5, ya que
los trozos de hígado subían a la superficie, con la única diferencia que el
color del líquido en la cual estaba era más oscuro que el anterior.
6. Con las pinzas tomamos los tubos 2,3,5 y 6 y los llevamos al beaker en baño
maría, pudimos observar que: en él tubo 2 no se presentaron cambios de
color, en el tubo 3 el color que se presento fue marrón, en los tubos 5 y 6 se
mantuvo la coloración y las células (o trocito de hígado) se mantuvieron en
la superficie.

Determinación de lípidos
1. Tomamos 2 tubos de ensayo y les agregamos 2ml de agua, luego le
agregamos cristales de sudan IV (0.2g), agitamos y dejamos reposar por 3
minutos.
2. Procedimos a agregarle al tubo 1, 1ml de aceite (de cocina), y después le
agregamos al tubo 2, 1ml de aceite de coco, luego agitamos y los dejamos
en reposo durante 3 minutos.
3. En esta práctica observamos que: al pasar los 3 minutos después de haber
agitado y dejar reposar el agua con los cristales de sudan IV, se observó que
los cristales se quedan en la superficie y el agua había cambiado de color
trasparente a un tono rosado, después de haber agregado a cada tubo el
aceite que le correspondía agitamos y dejamos reposar, luego pudimos
observar que en el tubo 1, el color es rojo intenso (carmesí),no se efectúo
una mezcla homogénea, en el tubo 2 se observó que la tonalidad del color
era rojo pero mucho más oscuro que en la sustancia del tubo 1, en este caso
y al igual que el anterior no se presentan mezclas homogéneas, las mezclas
son totalmente heterogéneas.

Reconocimiento de colesterol
1. En un tubo de ensayo agregamos 2ml de suspensión de yema de huevo al
10%, luego le agregamos 5 gotas de ácido acético glacial, después le
agregamos 5 gotas de ácido sulfúrico, agitamos suavemente y la dejamos en
reposo por 5 minutos.
2. Pudimos observar que antes tenía un color amarillo más intenso y después
su color era más claro, su composición era un poco acuosa.
RESULTADOS
En la siguiente tabla se anotarán los resultados correspondientes a la práctica,
siendo positivo si hay presencia de carbohidratos y lípidos o negativo si no se
encuentran presentes en cada una de las diferentes soluciones.

SOLUCIÓN Lugol Benedict Biuret Sudan Ácido Acético


IV Glacial

Glucosa Positivo Positivo Positivo


Sacarosa Negativo Positivo
Leche (normal) Positivo Positivo
Leche Positivo Positivo
deslactosada
Almidón Positivo Negativo Positivo
Células Positivo Positivo Positivo
Hepáticas
Aceite (de Positivo
mesa)
Aceite de coco Positivo
Yema de huevo Positivo
al 10%

En la siguiente tabla se plantearán los resultados para la determinación de


monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.

SOLUCION COLOR RESULTADO


Glucosa Paso de color trasparente Positivo
a café con el lugol y con
los reactivos de Benedict
y Biuret fue de color
naranja.
Sacarosa Con el reactivo de Negativo para Benedict y
Benedict hubo un cambio positivo para Biuret.
de color (azul a verde)
pero no se determinó la
presencia de
carbohidratos, pero si con
el de Biuret.
Leche (normal) Cambió de color violeta a Positivo con ambos reactivos
anaranjado.
Leche deslactosada Cambió de color violeta a Positivo con ambos reactivos
anaranjado.
Almidón Cambió de color Positivo para Lugol y Biuret.
blancuzco a negro ámbar
El resultado fue negativo en la
con lugol y con el reactivo
prueba de Benedict.
de Benedict fue negativo y
con Biuret positivo.
Células hepáticas Cambió de color café Se determinó la presencia de
oscuro a un café más glucógeno con los reactivos
claro. correspondientes.

En esta prueba se llevarán a cabo la determinación de glucosa, sacarosa y lactosa,


utilizando las reacciones de Benedict, Biuret y la prueba de Lugo, las cuales
arrojaron los siguientes resultados.

Glucosa + Glucosa +
Biuret Benedict Glucosa +
lugol
Sacarosa Leche (normal)+ Leche deslactosada Sacarosa Leche (normal) Leche
+ Benedict Benedict + Benedict + Biuret + Biuret deslactosada
+ Biuret
En la siguiente prueba se llevaron a cabo la determinación de almidón y glucógeno,
aplicando las reacciones de Benedict, Biuret y Lugol.

Almidón + Almidón + Almidón Células hepáticas Células hepáticas +


Lugol Benedict + Biuret + Lugol Benedict

Células
hepáticas +
Biuret
En la siguiente tabla se plantearán los resultados para la determinación de lípidos y
colesterol.
SOLUCION COLOR RESULTADO
Aceite de mesa Cambio de un color
amarillo a rojo intenso.
Aceite de coco Cambio de un color Positivo
amarillo a rojo con
tonalidad más oscura.
Yema de huevo Paso de un amarillo Positivo
intenso a uno más claro.
En la siguiente practica se va a llevar acabo la determinación usamos la reacción
de Sudan IV para determinar lípidos.

H2O + Sudan IV H2O + Sudan IV + Aceite de mesa/ Aceite de coco

En esta práctica se dará el reconocimiento del colesterol usando la solución de


yema de huevo al 10%.
Yema de huevo +
ácido acético glacial +
H2SO4
PREGUNTAS

1. ¿Qué reacción explica los cambios apreciados en cada caso?


R//= En el caso de la determinación de glucosa, sacarosa, lactosa,
almidón, glucógeno, y lípidos, se utilizaron las reacciones de Biuret,
Benedict, Lugol y Sudan IV.

Reactivo de Biuret: s un método que detecta la presencia de compuestos


con dos o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las
proteínas y péptidos cortos. El reactivo del Biuret (sulfato de cobre en una
base fuerte) reacciona con los enlaces del péptido y cambia el color
cuando entra en contacto con otra sustancia. El reactivo de Biuret
consiste en una solución acuosa de sulfato cúprico (CuSO4) en medio
alcalino (NaOH). Esta reacción la utilizamos para determinar azucares
reductores o no reductores en: la glucosa, sacarosa, lactosa, almidón y
glucógeno.

Reacción de Benedict: identifica azúcares reductores (aquellos que tienen


su OH anomérico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y
celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color
azul aCu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-
naranja. Empleamos esta reacción para la determinación de azucares
reductores o no reductoras de la glucosa, sacarosa, lactosa, almidón y
glucógeno en células hepáticas.

Reacción de Lugol: es una sustancia (compuesta principalmente por


yodo) que se utiliza para detectar la presencia de almidón en alguna
solución, alimento o donde sea. Su nombre proviene del apellido Lugol,
un científico francés que fue el primero en prepararla. También se utiliza
como colorante para preparar muestras y verlas en el microscopio
(básicamente las tiñe por así decirlo). Este reactivo fue utilizado en los
casos de determinación de glucosa, almidón y glucógeno.

Reacción de Sudan IV: es un colorante que se utiliza para detectar


específicamente las grasas, porque es insoluble en agua y en cambio es
soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve tiñe las
grasas de color rojo anaranjado. Aplicamos esta reacción para la
detección de lípidos.
2. ¿Son reacciones específicas para cada tipo de biomolécula? Justifícalo.
R//= Si, por que cada uno de los reactivos que utilizamos detecta
moléculas en particular.

3. ¿Por qué algunos reactivos no generan cambios apreciables con algunas


sustancias?
R//= en algunas de las reacciones que se presentaron como fue el caso
de Benedict y sacarosa, nos arrojó resultados negativos porque el
reactivo solo detecta la presencia de azucares reductores, en el caso del
almidón y benedict dio un resultado negativo ya que el almidón no
reacciona con el Benedict debido a que el número de grupos aldehído
libres (presentes sólo en el extremo de cada cadena) es pequeño en
proporción con el resto de la molécula.
CONCLUSIÓN

Con la realización de esta práctica de laboratorio pudimos aprender a identificar la


composición y estructura físico-química, para la determinación de presencia de
carbohidratos y lípidos a través de reacciones químicas, haciendo uso de soluciones
que habitualmente empleamos en nuestra vida cotidiana, como son los casos de:
aceite de mesa, glucosa, almidón, leche, yema de huevo, entre otras, también
queremos aludir la importancia que tuvo la observación al momento de describir los
cambios físicos presentados en cada reacción.

 Se pudo determinar la presencia de carbohidratos y lípidos utilizando las


reacciones de Benedict, Biuret, Lugol y Sudan IV.
 Esta práctica es muy importante ya que por medio de estos métodos se
aprende como identificar los distintos tipos de azucares que existen.
 Los carbohidratos son biomoléculas que contienen glucosa, mejor conocida
como azucares, y se clasifican en simples y complejos.
 Los azucares simples son de rápida absorción y tienen sabor más dulce, los
complejos presentan absorción más lenta y son reserva de energía como por
ejemplo el almidón.
REFERENCIAS
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