Universidad Juárez Autónoma de Tabasco

División Académica de Ciencias Biológicas

Licenciatura en Ing. Ambiental

Practica #2
TECNICA DE ILUMINACION DE KOHLER

Integrantes
Perla Pérez Álvarez
María Isabel López Torres
Ángel Mario Córdova López
Carlos Eduardo Bautista Ramírez
Luis Enrique Martínez Bocanegra

Materia
Microbiología Ambiental

Docente
M. en C. Dr. Rodolfo Gómez Cruz
OBJETIVO:
Observar en el microscopio las cepas mediante la técnica de iluminación Kohler
para aprender a usar diferentes tipos de graduaciones empezando por 40x y
terminando en 100x aprendiendo a diferenciar los microorganismos.

Materiales:
 Microscopio
 Aceite de inmersión
 Porta y cubre objetos
 Agua destilada
 Cepas
 Asa (para recoger una porción de cepas)
 Mechero y encendedor

Antes que nada, se esterilizaron todos los materiales que íbamos a utilizar con
jabón líquido y agua destilada. Utilizamos un papel especial para limpiar los
lentes de los objetivos.

Preparación:
1. Ocupamos el mechero y lo colocamos en la válvula de gas, una vez
conectado se procedió a abrir con cuidado el paso del gas, con el
encendedor se prendió el mechero.
2. Una vez encendido el mechero, pusimos a esterilizar el asa con el que se
iba a recoger las cepas para poder hacer la técnica de iluminación.
3. Cuando el asa se puso muy roja procedimos a destapar el recipiente
donde estaba la cepa y con cuidado metimos el asa para sacar una
porción de ella.
4. Se puso en el porta objeto la porción sacada de la cepa, se cubrió con el
porta objeto y el asa se volvió a esterilizar con el mechero.
5. Una vez utilizado el mechero, se cierra la válvula de gas.
Metodología:

1. Subimos el condensador hasta el tope introduciendo la lente abatible del

condensador para lograr la máxima concentración de luz sobre la
muestra a observar.
1. 2.Enfocamo el objeto con un objetivo de poca amplificación,
generalmente de 10x.
2. 3.Cerramos el diafragma del campo de lámpara colectora, con lo que se
vera proyectado este sobre la muestra.
3. 4.Bajamos el condensador para enfocar el diafragma de manera que su
imagen se proyecte bien definida sobre la muestra.
4. 5.Centramos la imagen del diafragma de campo con los tornillos para el
centrado del condensador.
5. Abrimos el diafragma de campo de manera que la imagen de sus bordes
se abra y se iluminen todo el campo visual.
6. 7.Ajustamos el diafragma de apertura del condensador para lograr mejor
contraste profundidad de campo y poder de resolución.
7. A cada cambio de lente objetivo en este caso 100x, volvimos a enfocar la
imagen con el tornillo micrométrico y ajustar el diafragma del
condensador para mejorar el contraste.

Después de ocupar y poder ver los organismos en el microscopio, se procedió a

limpiar los materiales ocupados y nuevamente los lentes de los objetivos para
un nuevo uso.
Evidencias.

Técnica de iluminación