UNIVERSIDAD DEL TOLIMA

FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA DE BIOLOGÍA

Bibiana Andrea Tovar Sánchez – 070150282017

PRE INFORME DE LABORATORIO: Observación de cromosomas Politénicos y

Cariotipo

1. Objetivos
 Identificar los cromosomas politénicos pertenecientes a Drosophila (larva) para
afianzar conocimientos sobre citogenética y reconocer la importancia de este
organismo.
 Entender el concepto de cariotipo y su importancia.

2. Introducción
Drosophila melanogaster es considerada una de las especies existentes más importantes para
el estudio de la biología, esto se debe principalmente a su facilidad de cultivo, corto tiempo
de generación, grandes cantidades de descendencia, tamaño pequeño, bajo costo en su
manejo y mantenimiento (Mora et al., 2000).
Una de las características más relevantes y estudiadas son sus cromosomas y en especial sus
cromosomas politénicos ya que son de fácil acceso, dichos cromosomas se encuentran en los
núcleos de las glándulas salivales de estos insectos, estas células se encuentran en una
interfase constante. Los cromosomas sufren un proceso conocido como endomitosis que
consiste en la duplicación sin separación del ADN, lo que indica que estas cadenas crecen en
miles de hebras. La primera descripción de los cromosomas de una especie de Drosophila
fue la de Drosophila melanogaster en el año 1907. El cariotipo de esta especie está formado
por dos autosomas metacéntricos grandes (cromosomas 2 y 3), un autosoma acrocéntrico
pequeño (cromosoma 4), un cromosoma X acrocéntrico y un cromosoma Y submetacéntrico.
Posteriormente se fueron describiendo los cariotipos de otras especies del género y se observó
que los diferentes cariotipos podían derivarse unos de otros mediante fusiones o fisiones
céntricas (Clayton y Guest 1986).
En este laboratorio se espera observar claramente dicho tipo de cromosomas complejos en la
larva de Drosophila y conocer la larga cadena de ADN y el complejo cromosómico que
representan estos cromosomas.
3. Marco Teórico
Características del Cariotipo
El cariotipo es el complemento cromosómico particular de un individuo y viene definido por
el número y morfología de los cromosomas en la metafase mitótica. (Mendiola M, 2007) Los
cromosomas de la mosca de la fruta o del vinagre, Drosophila melanogaster, se prestan a la
experimentación genética. Son sólo 4 pares (frente a los 23 pares de la dotación genética
humana), uno de ellos, marcado con las letras X e Y, determina el sexo de la mosca; además,
son muy grandes. Thomas Hunt Morgan y sus colaboradores basaron su teoría de la herencia
en estudios realizados con Drosophila observaron que los cromosomas pasaban de los
progenitores a los descendientes según el mecanismo atribuido por Gregor Mendel a los
caracteres heredados. Propusieron que los genes ocupan lugares específicos dentro de los
cromosomas. (Fernández D, 2019) Utilizando técnicas de tinción estándar los cromosomas
aparecen uniformemente teñidos en metafase y se clasifican.

Fig.1 Cariotipo de D. melanogaster. Distribución en los cromosomas mitóticos de la

eucromatina (blanco) y heterocromatina (negro).

Cromosomas politénicos en Drosophila melanogaster

Estos cromosomas, llamados también cromosomas gigantes, aparecen como resultado de la
diferenciación terminal de tejidos con una alta actividad metabólica, como por ejemplo las
glándulas salivares (Fig. 2). Son cromosomas interfásicos en los que se han producido 10 o
más rondas de replicación del DNA sin que haya división celular. Durante el proceso de
replicación las cromátidas hermanas quedan alineadas longitudinalmente, es decir,
politenizan. Sólo la eucromatina y la -heterocromatina politenizan. La -heterocromatina
no se replica y queda formando una masa difusa llamada cromocentro a partir del cual se
proyectan los cromosomas. Los cromosomas politénicos muestran un patrón de bandas
transversales que resultan de la variación en la compactación de la cromatina. La
conservación del patrón de bandas permite construir mapas físicos de alta resolución de los
cromosomas. (Ruiz A, 2002)
La existencia de los cromosomas politénicos y la gran disponibilidad de clones genómicos
permiten una comparación directa de la organización del genoma en diferentes especies de
este género Esta comparación se ve facilitada por el hecho de disponer de la secuencia del
genoma de la especie mejor caracterizada genéticamente: Drosophila melanogaster (Adams
et al. 2000). A pesar de ello, se dispone de mapas físicos de muy pocas especies de este
género (Segarra et al. 1995; 1996; Vieira et al. 1997a; Laayouni et al. 2000; Ranz et al. 2001).
Se ha propuesto que las tasas de evolución cromosómica pueden variar entre cromosomas
dentro de una misma especie (Rice 1984; Charlesworth et al. 1987). Sin embargo, los estudios
realizados hasta el momento se basan únicamente en el análisis de especies del género
Drosophila próximas filogenéticamente (Tonzetich et al. 1988; Wasserman 1992; Vieira et
al. 1997a).

Fig. 2 Ubicación de las glándulas salivales en Drosophila, A. vista lateral, B. vista dorsal

Fig. 3 Cromosomas politènicos de Drosophila melanogaster

3. Metodología
Observación de los cromosomas politénicos
Se inicia la práctica extrayendo las larvas de Drosophila depositadas previamente en el
banano, luego es llevada al microscopio para realizar el proceso de disección y posterior
extracción de las glándulas salivales de la larva, luego se realiza el proceso de tinción con
orceína acético-láctica, luego se coloca el cubreobjetos y se lleva al microscopio para
observar los cromosomas politénicos presentes en estos insectos. (Dimas et al, 2017)

Obtención del cariotipo

Se disectan larvas de tercer estadio para extraer los ganglios cerebrales, en un portaobjeto
excavado se colectan de 10 a 12 ganglios cerebrales en solución de Ringer-Drosophila, se
transfieren a otro porta excavado conteniendo una solución de Ringer: colchicina 0,01M en
proporción 2:1 por 30 minutos; se extrae esta solución y se remplaza por KCl 0,075 M
durante 20 minutos, después del tratamiento hipotónico se fija el tejido de metanol: ácido
acético (3:1) por mínimo 30 minutos al cabo de los cuales se extrae el fijador y se dispersa el
tejido en ácido acético 6,0% se añade dos gotas de fijador y se gotea en portaobjetos los
cuales serán mantenidos en etanol y en refrigeración; las placas con la suspensión se dejarán
secar en una plancheta a 64° C (el shock térmico permite una mejor dispersión de los
cromosomas) las placas serán teñidas con Giemsa diluido en agua desionizada en proporción
1:20. Los cariotipos se montan recortando el perfil de los cromosomas en fotografías
convencionales, se miden los cromosomas y se organizan en orden ascendente.

4. Bibliografía

 DEMEREC M. Ed., Biology of Drosophila, Carnegie Institution of Washington, Washington,

D.C., Hafner Publishing Co., Nueva York, 1965, 633 pp.
 DIMAS J, SIERRA E. Observación de cromosomas politénicos. Universidad de córdoba, 2017.
 ECHEVERY M, ORDOÑEZ M, CRIOLLO A. GUÍAS TEÓRICO PRÁCTICAS DE GENÉTICA,
Universidad del Tolima, Universidad de los Andes, 2019.
 FERNANDEZ D, Drosophila melanogaster, 2019
 MENDIOLA M, Prácticas de genética humana, 2007
 MORA F, SANTOS F, CAMPOS H. Efecto del doble mutante e//e w//w y el medio del cultivo
en la productividad de Drosophila melanogaster. Acta biol Colomb. 2000; 1(5):39-46.
 RUIZ A, EVOLUCIÓN COMPARADA DE LOS ELEMENTOS CROMOSÓMICOS EN EL GÉNERO
DROSOPHILA, Universidad Autónoma de Barcelona, 2002.