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NACIONAL
AUTÓNOMA DE
MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS
SUPERIORES CUAUTITLÁN
LICENCIATURA EN QUÍMICA
Grupo: 2702
EQUIPO 4
Objetivo general
Estudiar cualitativa y cuantitativamente la actividad enzimática de la 𝛼- amilasa para
comprender algunas bases de los procesos metabólicos.
Objetivos particulares
I. Estudiar comparativamente la actividad amilasa en una muestra de saliva dializada y
no dializada.
II. Cuantificar amilasa salival por medio de la espectrofotometría como técnica.
INTRODUCCIÓN
Los seres vivos requieren de un continuo suministro de energía para subsistir el cual obtienen
de reacciones de oxidación de los alimentos. Para que ésto pueda ser absorbido por el
organismo se deben degradar los chos lip y prot a sus partículas que los conforman como lo
son los monosacáridos, los ác. grasos y los aas. A este proceso se le llama digestión.
En la saliva existe una enzima denominada alfa amilasa (α-amilasa), la que se encarga de
desdoblar o romper al almidón y a otros polisacáridos ingeridos en la dieta, hasta producir
moléculas más pequeñas como la glucosa, principal proveedor de energía en las reacciones
que se llevan a cabo en los organismos.
Para efectos de esta práctica se estudia la cuantificación, así como su actividad a condiciones
óptimas en el cuerpo humano (37°C). Su determinación se realiza principalmente para
diagnosticar o controlar enfermedades del páncreas como pancreatitis crónica o aguda.
METODOLOGÍA
La indicada en el manual de prácticas de bioquímica metabólica, correspondiente a la práctica
2 “Introducción al metabolismo”, págs. 26-37.
RESULTADOS
Tabla 1. Dilución seleccionada para el método colorimétrico
Dilución seleccionada 1/20
2/10 30
1/15 60
CÁLCULOS
𝐴𝑏𝑠. 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑖𝑔𝑜 − 𝐴𝑏𝑠. 𝑝𝑟𝑜𝑏𝑙𝑒𝑚𝑎
𝑈𝑛𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑎𝑚𝑖𝑙𝑎𝑠𝑎 𝑝𝑜𝑟 100 𝑚𝐿 = × 600
𝐴𝑏𝑠. 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑖𝑔𝑜
0.117 − 0.028
𝑈𝑛𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑎𝑚𝑖𝑙𝑎𝑠𝑎 𝑝𝑜𝑟 100 𝑚𝐿 = × 600 = 456.41
0.117
ANÁLISIS DE RES ULTADOS Commented [1]: Todavía faltan uno cuanto puntos de
La saliva es una secreción cuya principal función es la de mantener la integridad de los tejidos lo que dice el manual
orales y está constituida por proteínas salivales como lo son: esteaterina, amilasa, mucina,
peroxidasa, lactoferrina, gustina y lisozima, además de electrolitos como bicarbonato, sodio,
potasio, calcio, fosfatos y cloruro. (Echeverri, 1995). De los componentes mencionados, la
amilasa es la sustancia de interés en esta práctica debido a su actividad enzimática.
Las ɑ-amilasa, también llamada ptialina, es una enzima glucolítica que hidroliza los enlaces
éter (glucosídicos) de las cadenas de los polisacáridos de las sustancias amiláceas,
degradándolas a oligosacáridos, disacáridos y monosacáridos, que son más solubles en
medios acuosos. De esta manera conseguiremos eliminar el almidón de forma más sencilla.
La reacción que cataliza es la siguiente (Universidad del País Vasco, 2012):
Se empleó lugol para realizar pruebas colorimétricas en intervalos de 30 segundos, por 3
minutos, que permitieran observar la actividad de la amilasa salival sobre el almidón, ya que
el lugol permite la identificación de la presencia de almidón, observándose una coloración
violeta-azul (Figura 1). Se encontró que la dilución ideal de la saliva para esta prueba es de
1/20, ya que podemos observar detalladamente los cambios de color (que van del violeta al
amarillo) que sufrió el sistema a lo largo de esos 3 minutos y que son indicadores de que la
hidrólisis del almidón se llevó a cabo.
Los diferentes tipos de amilasas se distinguen entre sí en su estructura, ubicación, así como
en sus funciones. Presentan una actividad distinta porque necesitan un medio diferente para
realizar sus actividades óptimas, esto debido a que las mismas son diferentes en cuanto a en
dónde actúan; como por ejemplo la lipasa necesita de un medio moderadamente alcalino ya
que actúa sobre las grasas, y proporciona glicerina, todo esto en el páncreas.
La regulación de la actividad de las enzimas se realiza tanto dentro, como fuera de la célula.
Al adicionarse a la molécula de precursores no activo, son capaces de cambiar su
conformación dando lugar a la formación de un compuesto con actividad catalítica. La
actividad de la enzima amilasa es atacar los azar los enlaces alfa(1-4) del interior de la
cadena, dando unidades libres de maltosa y glucosa.
CONCLUSIONES
En un proceso metabólico, la influencia de diversos factores, como en este caso lo es la
diálisis, conlleva a la disminución de la actividad enzimática; pudiendolo comprobar cualitativa
y cuantitativamente. De manera que sabemos entonces que al remover experimentalmente
los electrolitos en la saliva, estamos también removiendo al cofactor que actúa como
intermediario para la alfa-amilasa en su actividad enzimática, aumentando considerablemente
el tiempo en el que ésta reacciona; cosa que se puede comprobar en las pruebas cualitativas
con ayuda del reactivo Lugol.
REFERENCIAS
● Cruz,K. (2012). “Modelado del proceso de hidrólisis enzimática de almidones
gelatinizados del fruto de la planta de banano”. Consultado el 01 de marzo de 2019
de http://bdigital.unal.edu.co/7435/1/73007073.2012.pdf