Bioquímica I – Taller – Guía de Problemas N° 2 - 2019

Ingeniería en Biotecnología
UNRN

Taller - Guía de problemas N° 2

Enzimas – Cinética enzimática

1. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reacción catalizada por una
enzima hipotética son:

[S] (moles/l) V (µmoles/min)

5x10-2 0.25
5x10-3 0.25
5x10-4 0.25
5x10-5 0.20
5x10-6 0.071
5x10-7 0.0096

a) ¿Cuál es la velocidad máxima para esta reacción?

b) ¿Por qué la velocidad inicial permanece constante a una [S] mayor de 5x10-4 M
c) ¿Cuál es la concentración de enzima libre para una [S] de 5x10-4 M?
d) ¿Cuál es la Km de la enzima?
e) Calcular la velocidad inicial para [S]=1x10-6 y [S]=1x10-1
f) Calcular la concentración de producto formado en los cinco primeros minutos de reacción utilizando 10
ml de una disolución de sustrato 2x10-3 M.

2. Se estudió la actividad de una enzima a dos pH diferentes 7,6 y 9,0. Los resultados obtenidos son los
siguientes:

S (moles/L x10-4) velocidad

pH 7.6 pH 9.0
1,7 0,074 0,034
2,7 0,084 0,047
5,2 0,133 0,08
17,0 0,168 0,128
40,0 ---- 0,170

Determinar a qué pH la enzima tiene mayor afinidad por el sustrato.

3. Se estudió la actividad de la enzima ureasa, que cataliza la siguiente reacción:

CO(NH2)2+H2O CO2+2NH2

en función de la concentración de urea, con los resultados siguientes:

Concentración de urea
30 60 100 150 250 500
(mmoles dm-3)
V inicial (mmoles urea 3,37 5,53 7,42 8,94 10,70 12,04
 Bioquímica I – Taller – Guía de Problemas N° 2 - 2019
Ingeniería en Biotecnología
UNRN

consumidos min-1 mg
enzima-1)

¿Cuáles son los valores de Km y Vmáx para esta reacción?

4. Se investigó el efecto de un inhibidor I sobre la velocidad de una reacción catalizada enzimáticamente

sobre un solo sustrato, obteniéndose los siguientes resultados

Concentración del inhibidor

(mmol L -1)
Concentración de sustrato 0 0.5 1.0
(mmol L -1)
Velocidad de reacción ( mol L -1 min-1)

0.05 0.33 0.20 0.14

0.10 0.50 0.33 0.25
0.20 0.67 0.50 0.40
0.40 0.80 0.67 0.57
0.50 0.83 0.71 0.63

a) ¿De qué manera actúa el inhibidor?

b) Obténgase los valores para Vmáx, y Km.

5. A partir de los siguientes datos de una reacción enzimática, determinar de que manera está actuando el
inhibidor. Determinar la Km y la velocidad máxima.

[S] mM µg producto/h (sin inhibidor) µg producto/h (6 mM inhibidor)

2 139 88
3 179 121
4 213 149
10 313 257
15 370 313

6. Habiéndose conseguido aislar de Salmonella typhimurium una enzima (E) que cataliza la reacción A→P,
se decidió hacer un estudio estructural y cinético de dicha enzima:

[A] mM 1,00 0,55 0,25 0,20

V(mmol P/ min) 1,00 0,71 0,50 0,41
V (nmol P/min) con J 0,66 0,41 0,25 0,20

donde J es un inhibidor de E cuya influencia como tal se quiere estudiar. [J] = 0,25mM.
a) Calcular la Km de la enzima estudiada para A, y Vmax para la transformación A--P en presencia de E.
b) Que tipo de inhibidor es J?
c) Cuál sería el efecto sobre la Vmax de la enzima, un aumento de la concentración de J?
 Bioquímica I – Taller – Guía de Problemas N° 2 - 2019
Ingeniería en Biotecnología
UNRN

7. La fosforilación de la glucosa puede ser catalizada por dos enzimas: glucoquinasa y hexoquinasa. Al
incubarse el extracto enzimático en un volumen final de 1 ml con diferentes concentraciones de sustrato
se obtuvieron los siguientes valores

Glucosa 2 mM
µmoles G-6-P/5 minl
2 ml
Glucoquinasa x102 Hexoquinasa x102
0,2 380 320
0,4 665 515
0,6 920 650

a) determinar Km y Vmáx para cada enzima.

b) ¿Cuál de las dos enzimas tiene mayor afinidad por la glucosa.? Justifcar la respuesta.
c) ¿Cuál enzima fosforilará más glucosa en 1 minuto?