Dra.

María Rodriguez

SEPARACION DE METABOLITOS
SECUNDARIOS
 Dra. María Rodriguez

TIPOS DE CROMATOGRAFÍA DE
ADSORCIÓN
• CROMATOGRAFÍA RN CAPA FINA (CCF
Ó TLC)
• CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA (CC)
– Dependiendo de la presión aplicada:
• LPLC
• MPLC
• HPLC
 Dra. María Rodriguez

PARAMETROS QUE GOBIERNAN LA

SEPARACIÓN EN LA CROMATOGRAFÍA DE
ADSORCIÓN
• Adsorbente o fase estacionaria
• Fase móvil
– Dependiendo de la fuerza de la interacción del analito
con el soporte.
• Analito o muestra
– Depende del adsorbente y fase móvil utilizada.
• Rf
– Determina el grado de interacción con el adsorbente.
 Dra. María Rodriguez

adsorbentes
• Silica gel(SiOH): útil en la separación de la mayoría de
las sustancias dependiendo de la fase móvil utilizada.
• Alúmina( óxido de aluminio): para compuestos de
polaridad baja, mayor poder de adsorción.
• Florisil (silicato de magnesio): adsorbancia intermedia,
separación de lípidos y azucares.
• Poliamida: compuestos que pueden formar puente de
hidrógeno
• RP-18, RP-8: sílica modificada los enlaces SiOH han
sido transformados a SiOR donde R es una cadena
carbonada C18 ó C8.
Dra. María Rodriguez

Polaridad de solventes comunes

 Dra. María Rodriguez

Analito o muestra
• Tipo:
– Polar: alcaloides como sales o altamente hidroxilados
– polaridad intermedia: flavonoides, antraquinonas,
terpenos funcionalizados
– no polar: acetogeninas, terpenos no funcionalizados.
• Purificación:
– Taninos: columnas de poliamida
– Clorofilas: columnas de RP-18.
– Grasas: lavados con éter de petróleo o hexano.
• Sembrado:
– Húmedo
– Seco.
Dra. María Rodriguez

Factor de retención (RF)

• Frente del solvente

b • RF= a/b
a

• Sembrado de la muestra
 Dra. María Rodriguez

SEPARACIÓN POR CROMATOGRAFÍA DE

CAPA FINA (analítica y preparativa)

• Diferencias de RF> 0,3 entre los compuestos aseguran una buena separación.
• Espesor de la placa : 0,25 mm para analítica, 1 mm para preparativa.
Dra. María Rodriguez

Cromatografía en columna por

gravedad
Dra. María Rodriguez

Cromatografía de Adsorción
Centrífuga
Dra. María Rodriguez

Condiciones Para La Separación

Por Cromatografía Centrífuga
Dra. María Rodriguez

CROMATOGRAFÍA DE ALTA
PRESIÓN
Dra. María Rodriguez

CROMATOGRAFIA DE ALTA
PRESIÓN
Dra. María Rodriguez

CROMATOGRAFÍA POR
EXCLUSIÓN MOLECULAR
Dra. María Rodriguez

CROMATOGRAFÍA DE GAS