Universidad Nacional Mayor de San Marcos

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

Facultad de Farmacia y Bioquímica
Proyecto de Tesis de Pregrado

I. Información General de la Tesis

1.1 Título

Estudio comparativo del efecto hipoglucemiante del extracto acuoso del fruto
Momordica charantia L. “melón amargo” y extracto acuoso de las hojas de
Gentianella gilgiana “yangamarsha” en ratas diabéticas inducidas por aloxano

II. Participantes de la Tesis

A. TESISTA (S)

Nombres Apellidos N° de Matrícula EP

Kellet Shaked Cadillo Barrueto 16040044 FFYB
Dennis Castillo Yachapa 15040006 FFYB
Bin Chen Málaga 16040013 FFYB
Ulises Herrera Yurivilca 15040027 FFYB
Rigoberto Huamaní Tinco 12040109 FFYB
Cristian Hurtado Peña 16040068 FFYB
Gina Inga Levizaca 16040032 FFYB

B. Director de la Tesis.

Nombres Apellidos Categoría Clase

Francisco Javier Ramírez Cruz
Código Docente Título profesional Grados Académicos
0A0347 Químico Farmacéutico Magíster en Farmacología
Especialidad Departamento Académico Firma

pág. 1
III. Descripción del Estudio

A. Antecedentes y fundamentación científica, técnica o humanística.

Thaira S., y Hussain F. en el año 2014, realizaron una investigación con el
objetivo de evaluar la actividad antidiabética de extractos de fruta de Momordia
charantia L., en la cual administraron dosis repetida con la misma cantidad de
extracto de fruto Momordica charantia (MC) durante un período de 14 días
generó una mejoría en la hiperglucemia e hiperlipidemia. La diabetes mellitus
se indujo en este estudio mediante la administración de monohidrato de
aloxano (80 mg / kg de peso corporal, disuelto en una solución salina al 5%
normal) a través de la vena marginal de la oreja por vía intravenosa. Aquellos
con 200 mg /dL de glucosa en sangre fueron considerados diabéticos. Los
conejos se dividieron en cinco grupos (siete animales por grupo) como: no
diabéticos sanos, controles negativos (NC), conejos diabéticos que no
recibieron extracto de planta o medicamento, tratados con solución salina,
control positivo (DC). Los conejos diabéticos suplementados con 100 mg / kg
de peso corporal / día dosis orales de extracto de etanol de fruta MC (DE),
conejos diabéticos suplementados con 100 mg / kg de peso corporal / día
dosis orales de extracto de metanol de fruta MC (DM) y conejos diabéticos
suplementados con 2,5 mg / kg de peso corporal / día de dosis oral de
glibenclamida, un fármaco antidiabético estándar (DG).Los resultados
evidenciaron que la administración repetida de dosis con la misma cantidad de
extracto (100 mg/ Kg de peso corporal/ día) durante un periodo de 14 días
generó una mejoría en la hiperglucemia e hiperlipidemia, esto sugiere la
posibilidad de una dosis efectiva de administración de Momordica charantia L.,
por encima y por debajo de la cual los efectos fisiológicos beneficiosos podrían
ser menos probables. Además se puede concluir que Momordica charantia L.
muestra un potencial antidiabético debido a la presencia de polifenoles,
flavonoides, terpenoides, cumarinas y otros fitoconstituyentes que exhiben un
efecto de disminución en los niveles de glucosa. 1
Mahmouda M., Zahraa F., et al en el año 2017, realizaron un estudio con el
objetivo de investigar la actividad antidiabética del jugo de fruta Momordica
charantia L. en la diabetes mellitus tipo 2 inducidas por estreptozocina en
ratas. En el cual a un grupo de ratas después del ayuno durante la noche se
les indujo la hiperglucemia y la diabetes manifiesta mediante una inyección
intraperitoneal de una dosis única de estreptozotocina (STZ) recién preparada
(45 mg / kg) en tampón de citrato (0,09 M, pH 4,8). Los animales fueron
asignados aleatoriamente a cuatro grupos (n = 6-8). Grupo I, ratas normales de
control; Grupo II, ratas diabéticas STZ; Grupo III, ratas tratadas previamente
con Momordica charantia (10 ml / kg) durante 14 días antes de la inducción de
la diabetes y luego 21 días de tratamiento. Grupo IV. Las ratas diabéticas
recibieron Momordica charantia (10 ml / kg) diariamente durante 21 días. Al
final del período de estudio, se recogieron muestras de sangre del plexo
venoso retroorbital de ratas anestesiadas con éter, para determinar el nivel de

pág. 2
glucosa en sangre. Los resultados indican que los grupos diabéticos tratados
con Momordica charantia mostraron una disminución significativa en la glucosa
sérica, además que mejoraron los cambios histopatológicos del páncreas. En
conclusión Momordia charantia L. presenta excelentes actividades
antidiabéticas y antioxidantes, por lo tanto, tiene un gran potencial como nueva
fuente para el tratamiento de la diabetes, ya sea para profilaxis o tratamiento. 2
Srivastava, Y; Venkatakrishna‐Bhatt, H y col. 1993. Investigaron las
propiedades hipoglucemiantes del extracto acuoso del fruto de Mormodica
charantia (melón amargo) en ratas diabéticas inducidas con aloxano. Los
resultados mostraron ser significativos (p <0.01) en la caída de azúcar en la
sangre después de 3 semanas de tratamiento con el extracto acuoso de los
frutos. El extracto acuoso de la fruta fue más efectivo en la diabetes (caída del
azúcar en la sangre 54% después de 3 semanas de tratamiento) que el polvo
de la fruta seca (caída del 25% no significativa). Los efectos hipoglucemiantes
en pacientes diabéticos fueron altamente significativos (p<0.01) al final del
ensayo, pero fueron acumulativas y graduales, a diferencia de lo que produce
la insulina.3
Miura, T; Itoh, C; Iwamoto, N y Col. 2001. Usaron para su investigación el
extracto acuoso del fruto de Momordica charantia L. liofilizado que fue disuelto
en agua para administrarlos por vía oral en ratones KK-Ay (modelo animal con
diabetes tipo 2 de ratones que adquieren obesidad gradual cuando se hacen
adultos, además de resistencia a la insulina, hiperinsulinemia compensadora e
hiperplasia de células insulares, apareciendo finalmente una discreta
hiperglicemia). El extracto acuoso redujo la glucosa en sangre de los ratones
KK-Ay 3 semanas después de la administración oral (p <0,01) y también redujo
significativamente la insulina sérica de los ratones KK-Ay en condiciones
similares ( p<0.01). Sin embargo, el extracto no afectó la glucosa en sangre en
ratones normales. La glucemia en ratones KK-Ay tratados con el extracto
disminuyó significativamente en una prueba de tolerancia a la insulina.
Además, el contenido muscular de la proteína facilitadora del transportador de
glucosa isoforma 4 (GLUT4) en la fracción de membrana plasmática del
músculo aumentó significativamente en los ratones tratados con el extracto en
comparación con el de los controles (p <0.01). Los resultados de los
investigadores sugirieron que el efecto antidiabético de la Momordica charantia
L. se deriva, al menos en parte, de una disminución de la resistencia a la
insulina debido al aumento del contenido de proteína GLUT4 en la membrana
plasmática del músculo.4
Jia Tan, en el año 2008. Realizó un estudio cuyo objetivo era demostrar la
actividad antidiabética de los triterpenoides aislados de melón amargo. Nos
indica que las moléculas químicas activas en Momordica charantia L.
(Cucurbitaceae) o melón amargo reportados por Okabe Hikaru son
responsables de la actividad antidiabéticas, son los oligoglucosidos de
cucurbitano denominados momordicosides A y B. Donde Huang y Czech
estudiaron estas moléculas legando a la conclusión que estos estimulan la

pág. 3
translocación del transportador de glucosa que responde a la insulina GLUT4 a
la membrana plasmática en líneas celulares de músculo y adipocito, estos
compuestos también activan la vía de la proteína quinasa activada por AMP
(AMPK), una vía reguladora importante para la translocación de GLUT4. En el
estudio que realizó Min-Jia Tan al aislar cuatro glucósidos de cucurbitano,
momordicosides Q, R, S y T, demostrando que tanto momordicoside tipo S
como T mejoró significativamente la tolerancia a la glucosa en ratones
normales, y la eficacia fue comparable a la producida por ribonucleótido 5-
aminoimidazol-4-carboxamida (AICAR) en una dosis de 5 a 50 veces mayor,
ofreciendo una serie de efectos biológicos beneficiosos para la diabetes y la
obesidad.5
Ahmed I. et al, en el año 2004. Realizó un estudio de efectos benéficos y
mecanismo de acción de Momordica charantia en el tratamiento de diabetes
mellitus, realizaron un estudio con ratas que presentaron diabetes experimental
inducidas con estreptozocina, indicaron que en un periodo de 10 semanas de
tratamiento con Momordica charantia esta planta tiene un efecto
hipoglicemiante, también realizo un análisis fitoquímico el cual mostró
presencia de metabolitos tipo alcaloide y triterpeno. 6
Carretero A. María, en el año 2012, menciona que la actividad hipoglicemiante
de Momordica charantia parece ser debida a las saponinas esteroídicas
(charantinas, principalmente 3-glucosil-beta-sitosterol y 3-glucosil-5,25-
estigmastadienol), a los péptidos, semejantes a la insulina y a los alcaloides,
desconociéndose si la actividad se debe principalmente a uno de los grupos o
al conjunto.7
Aunado a esto, en nuestro país existe la familia Gentianacea con diferentes
especies, Gentianella thyrsoidea, G. umbellata, G. gramínea entre otras, las
cuales son comúnmente usadas como hipoglicemiantes; se le atribuye la
actividad a sus fitoconstituyentes como flavonoides, peptinas, saponinas y
triterpenos.
Bermúdez Díaz, en Perú, en el año 2015. Realizaron una investigación cuyo
objetivo fue comparar el efecto hipoglucemiante de extractos acuosos de
Gentianella bicolor, Gentianella nitida, Gentianella chamuchui y Smallanthus
sonchifolius en Rattus rattus. Se conformaron 07 grupos de experimentación de
07 animales cada uno; el grupo 01 estuvo conformado por animales sanos y el
resto de los grupos por animales con diabetes inducida por administración de
Estreptozotocina (60 mg/kg, i.p). Un grupo de ratas diabéticas fue tomado
como control positivo, otro grupo recibió 10 mg/Kg de peso de glibenclamida y
al resto de los grupos se le administró una dosis diaria de 500 mg/kg de peso
de extracto acuoso de Gentianella bicolor, Gentianella nítida, Gentianella
chamuchui, Smallanthus sonchifolius respectivamente, durante 21 días. Los
primeros 13 días no se observó disminución estadísticamente significativa de
las glucemias de los animales de experimentación después de la

pág. 4
administración de los extractos de las plantas en ninguno de los grupos de
experimentación. A partir del día 14, se observó una disminución de la glucemia
estadísticamente significativa en los grupos a los que se le administró extractos
de plantas de la especie Gentianella, obteniéndose una disminución alrededor
del 40% con la administración del extracto acuoso de Gentianella bicolor. No se
observó una disminución significativa de la glucemia con la administración del
extracto acuoso de Smallanthus sonchifolius. En este trabajo se corroboró el
efecto hipoglucemiante de las especies de Gentianella, observándose un efecto
hipoglucemiante a largo plazo que pudiera deberse a la regeneración de las
células beta del páncreas.8
Nuñez Bernilla, en Perú, en el año 2018. Realizaron una investigación el cual
tuvo como objetivo determinar el efecto hipoglucemiante del extracto acuoso de
Gentianella nitida sobre la glucemia en Rattus rattus var. albinus con
hiperglicemia inducida. La muestra estuvo constituido por 18 especímenes, con
un peso promedio de 250 g y fueron distribuidas en 3 grupos (n=6): control
negativo, al que se le administro alimento y liquido Ad libitum, control positivo,
al que se le administró solución de aloxano (100mg/kg), y Grupo experimental,
al que se les administró el extracto acuoso de Gentianella nitida a
concentraciones de 700mg/kg, por vía oral después de 48 horas de la
inducción de hiperglucemia con aloxano. La medición de la glucemia se realizó
después de los 7 días de la administración del extracto acuoso de Gentianella
nitida. Como resultado se obtuvo que en el grupo experimental, la glucemia
post inducción con aloxano tuvo un promedio y una desviación estándar de
198.33mg/dl ± 3.55, luego la glucemia final después de la administración del
extracto acuoso de Gentianella nitida tuvo un promedio y desviación estándar
de 182.33mg/dl ± 4.32. Se concluye que el extracto de Gentianella nitida
presento un efecto hipoglucemiante estadísticamente significativo. 9
Guevara Vásquez, en Perú, en el año 2011, Realizó un estudio cuyo objetivo
fue comprobar el mecanismo de acción del infuso de Gentianella gilgiana para
disminuir la hiperglicemia en rattus Norvegicus var. Albinus diabéticos, Se
estudió el efecto del infuso de Gentianella gilgiana en la absorcion intestinal de
glucosa in vivo y en la funcion pancreatica de Rattus norvegicus var. albinus,
para determinar el mecanismo por el cual esta planta ejerce su efecto
hipoglicemiante. Se utilizaron 32 especímenes machos, con peso corporal
promedio de 200g, en ayuno de 12 horas y suministro de agua ad libitum, los
cuales fueron distribuidos al azar en grupos, de 16 ratas cada uno,
normoglicemico e hiperglicemico (se usó Aloxano al 3% como agente
diabetogeno ,150 mg/kg p.c v.i.p). Cada grupo tuvo subgrupos control y
experimential (recibió infuso del vegetal). Se canulo la vena porta para medir la
concentración de glucosa proveniente de la absorción intestinal. Para los
grupos control se tomaron muestras de sangre portal y de sangre periférica (de
la cola) en ayunas y luego 30 minutos post-alimentos; para el grupo problema
se tomaron los basales de glicemia, se administró el infuso al 10% (200 mg/kg

pág. 5
p.c), 15 minutos después se suministró alimentos y se midió la glucosa
postprandial a los 30 minutos. Se utilizó el glucómetro Accu-Chek Active para
cuantificar glucosa. La glicemia postprandial aumento significativamente en el
grupo control (p<0.05) y mínimamente en el grupo problema; el estudio
histopatológico del páncreas de ratas diabéticas mostro daño extenso en los
islotes y el infuso retraso el aumento de glicemia en la curva de tolerancia a la
glucosa oral (p<0.05). Los resultados sugieren que la disminución de la
glicemia que produce el infuso de Gentianella gilgiana se debería a que
disminuye la absorción intestinal de glucosa y esto a su vez podría ser debido a
la inhibición del transportador SGLT-1 presente en la membrana de borde en
cepillo de los enterocitos, este efecto se puede atribuir a los flavonoides,
xantonas, leucoantocianinas y otros compuestos presentes en el infuso, a los
cuáles se les atribuye el efecto antihipergliceminate. Se concluye que el infuso
de Gentianella gilgiana disminuye la absorción intestinal de glucosa in vivo en
Rattus norvegicus var albinus.10

B. Justificación.
Perú es un país en desarrollo con una prevalencia creciente de enfermedades
crónicas no comunicables entre las que destacan la diabetes mellitus, el
síndrome metabólico y la obesidad. En este sentido, la diabetes mellitus es un
problema creciente de salud pública en el Perú que conlleva retos para el
sistema de salud; la prevalencia de diabetes en nuestro país es de 1 a 8 % de
la población general, encontrándose Piura y Lima como los departamentos más
afectados con esta enfermedad. Se describe que la frecuencia de diabetes es
de 3 a 4 veces mayor en población con antecedentes familiares (primer o
segundo grado) de dicha enfermedad, de la cual la detección temprana antes
de los 45 años de edad, es materia a considerar en la prevención secundaria
de nuestra población.11
Los medicamentos ampliamente prescritos para la diabetes mellitus tipo 2
incluyen un agente biguanida (metformina) y una sulfonilurea (glimepirida,
glipurida, glipizida). Las biguanidas evitan que el hígado produzca glucosa,
mientras que las sulfonilureas trabajan para prevalecer en el páncreas y
secretar más insulina. Sin embargo, pueden causar efectos adversos como
acidosis láctica, vómitos, anorexia y malestar abdominal. Por lo tanto, sería una
alternativa deseable reducir la glucosa en sangre a través del consumo de
alimentos que contienen compuestos bioactivos con efectos hipoglicémicos.
Recientemente, se han reportado propiedades hipoglucemiantes con la ingesta
de Momordica charantia L., que inhibe el transporte de glucosa en la
membrana del borde en cepillo de las células intestinales, esta actividad se
debe a las saponinas esteroídicas, péptidos semejantes a la insulina y
alcaloides presentes en su extracto.12
Aunado a esto, Gentianella gilgiana (Reimers) “yangamarsha”, originaria del
Perú, es utilizada por pueblos cercanos a Huamachuco, como medicina

pág. 6
tradicional en el tratamiento de la diabetes, empleando la planta entera en
forma de infusión.13
Existe poca información científica sobre esta especie por lo que es de suma
importancia investigar y demostrar su efecto sobre la hiperglicemia. Es por ello
que el presente estudio tiene como finalidad evaluar la actividad
hipoglicemiante del extracto acuoso del fruto de Momordica charantia L. y de
las hojas de Gentianella gilgiana (Reimers), la veracidad de dichas propiedades
medicinales se corroborará en ratas diabéticas inducidas por aloxano, por lo
que los resultados obtenidos incrementará un mayor conocimiento para ser
considerado como una alternativa fitoterapéutica.

C. Hipótesis.
H: El extracto acuoso del fruto Momordica charantia L. “melón amargo” y el
extracto acuoso de las hojas de Gentianella gilgiana “yangamarsha” presenta
actividad hipoglicemiante en ratas diabéticas inducidas por aloxano.

D. Objetivos.
OBJETIVOS GENERALES:
 Comparar la actividad hipoglicemiante del extracto acuoso de
Momordica charantia L. y extracto acuoso de Gentianella gilgiana.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:
 Determinar la presencia de metabolitos secundarios mediante el
tamizaje fitoquímico del extracto acuoso del fruto Momordica charianta L.
y del extracto acuoso de hojas de Gentianella gilgiana
 Inducir hiperglicemia experminental con aloxano por vía intraperitoneal
en ratas albinas cepa Holtzmann
 Preparar los extractos acuoso de las Momordica charantia L. y
Gentianella gilgiana.
 Determinar la actividad hipoglicemiante del extracto acuoso Momordica
charantia L. y extracto acuoso de Gentianella gilgiana.

E. Metodología de trabajo.
1. Recolección y desecación del material botánico.
El fruto de Momordica charantia L. será recolectada el 30 de marzo del 2019,
en el Barrio chino, Calle Capón: y las hojas de Gentianella gilgiana será
recolectada en el Departamento de La Libertad (Huamachuco), el 3 de abril del
2019.

pág. 7
El fruto de Momordica charantia L se lavarán y se dejarán secar a T° ambiente,
para posteriormente cortarlo en trozos y reducir mayor su tamaño con ayuda
de una licuadora (extracto), este extracto se dejará secar en una estufa a una
temperatura de 37 – 40°C durante 72 horas.14
Las hojas de Gentianella gilgiana se llevará a una estufa a una temperatura de
37 – 40°C durante 72 horas. Posteriormente se realizará la molienda con un
molino de discos convencional.9
Los productos deberán ser almacenados en frascos ámbar para su posterior
uso.
2. Obtención del extracto de Momordica charantia L. y Gentianella
gilgiana
Se realizará la preparación del extracto acuoso de Momordica charantia L. a
partir de las frutas frescas verdes enteros, usando agua en una proporción de .
14

También se realizará la preparación del extracto acuoso de Gentianella

gilgiana a partir de las hojas desecadas anteriormente, se preparará
extrayendo 2 kg de Gentianella gilgiana utilizando agua en una proporción de
1:10. Se deberá mantener en maceración por 3 días para finalmente filtrarlo y
evaporarlo a sequedad.9
Los productos obtenidos serán almacenados en frascos ámbar a temperatura
ambiente y evitando su exposición a la luz.
El tamizaje fitoquímico se realizará mediante pruebas fisicoquímicas de
caracterización, para identificar metabolitos secundarios presentes en el
extracto acuoso de Momordica charantia L. y el extracto acuoso de Gentianella
gilgiana mediante reacciones de coloración y formación de precipitados. 15
3. Determinación de los componentes del extracto acuoso de frutos
de Momordica charantia L. y extracto acuoso de hojas de
Gentianella gilgiana
Se identificarán los metabolitos secundarios del extracto acuoso de frutos de
Momordica charantia L. y extracto acuoso de hojas de Gentianella gilgiana.
Cada reacción de identificación de metabolitos secundarios presentes en los
extractos se realizará con 5 mL de extracto problema diluido y 5 gotas de
reactivos de identificación para cada metabolito. Se realizará detección de
metabolitos específicos basándonos en la metodología de Olga Lock. 15
4. Preparación de los animales.

Se utilizarán ratas albinas Cepa Holtzman con pesos entre 200 a 250 gr de
peso corporal procedentes del INS, se mantendrán en jaulas plásticas en
condiciones de temperatura y humedad relativa de 70 – 80%, expuestos a
ciclos de luz/oscuridad de 12 h/12 h. con libre acceso a agua y comida durante
el tiempo previo a su utilización. Luego se mantendrán en el bioterio del
laboratorio de Farmacología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional de San Marcos.16

pág. 8
Al inicio del experimento se deberá registrar el peso de cada rata e identificar a
las mismas, para luego dividirlas aleatoriamente grupos homogéneos, a los
cuales se les administrará por vía oral durante, los siguientes tratamientos:
a) Grupo I (n=9): Ratas con hiperglicemia experimental tratadas con suero
fisiólogico (control negativo)
b) Grupo II (n=9): Ratas con hiperglicemia experimental tratadas con
glibenclamida (daonil) a una dosis de 5 mg/kg (control positivo)
c) Grupo III (n=9): Problema administrado extracto acuoso de Gentianella
gilgiana al 10% (dosis 200 mg/kg de peso corporal)
d) Grupo IV (n=9): Problema administrado extracto acuoso de Momordica
charantia L. (dosis 20 mg/kg de peso corporal)

5. Inducción de hiperglicemia con Aloxano

Después de los 5 días de aclimatación, se procederá a medir la glucemia basal
con ayuno previo de 12 horas, luego se inducirá hiperglicemia en Rattus rattus
var. albinus mediante la administración de Aloxano monohidrato (100mg/kg ip),
disuelto en buffer citrato 0.3 M pH 4.5, vía intraperitoneal a una sola dosis,
transcurridas las 48 horas se determinará la glicemia con ayuno previo. 17
6. Evaluación de la actividad hipoglicemiante del extracto acuoso de
frutas de Momordica charantia L. y del extracto acuoso de hojas
de Gentainella gilgiana
Después de la inducción con aloxano, se procederá a la administración del
extracto acuoso de Momordica charantia L. a una dosis de 20 mg/kg de peso
corporal con una sonda orogástrica, de la misma forma se procederá con el
extracto acuoso de Gentianella gilgiana a una dosis de 200 mg/kg de peso
corporal por vía oral, se administrarán ambos extractos respectivamente al
grupo III y IV, una vez al día durante cuatro días consecutivos. El dosaje de
glicemia se realizará 2 horas después de administrar el extracto, y luego cada
24 horas. Las muestras sanguíneas serán recolectadas del ápice de la cola del
animal, desechando la primera gota y recibiendo el siguiente sobre la tira
reactiva, utilizando un glucómetro marca Accu-Check Active. 17

F. Fecha de realización de la Tesis.

a) Inicio: 3 de abril 2019 b) Término: 19 de junio 2019

pág. 9
 G. Calendario e actividades.

Mes

Actividad Abril Mayo Junio

S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S S S
10 11 12
Elección del tema de
1 investigación

2 Elección de la especie
investigación y búsqueda
de información
bibliográfica.

3 Recolección de la especie
vegetal.

4 Presentación del
anteproyecto de
investigación

5 Preparación de la muestra
vegetal y preparación del
extracto acuoso de
Momordica charantia L. y
extracto acuoso de
Gentianella gilgiana

6 Tamizaje fitoquímico del

extracto acuoso de
Momordica charantia L. y
extracto acuoso de
Gentianella gilgiana

7 Evaluación de la actividad
hipoglicemiante.

8 Análisis de los resultados

obtenidos.

9 Elaboración del informe

final del proyecto de
investigación.

10 Exposición del trabajo de

investigación.

pág. 10
H. Referencias Bibliográficas
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