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HOSPITAL Fecha de

Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 1 de 66

MANUAL DE
PROCEDIMIENTOS SERVICIO
DE HEMATOLOGIA

2018
ELABORADO POR : REVISADO POR : APROBADO POR :

Dra. Haydee Iparraguirre López


Dra. Fiorella Echevarria Concha Dr. Sergio Alvizuri Pastor Dr. Octavio Cubas Paredes
Dr. Juan Carlos Caycho Morales Jefe Departamento de Patología Clínica Gerente de Apoyo al Diagnóstico y Tto
Dra. Gladys Hinostroza Dávila
Apoyo: Dra. Cecilia Lengua Hinojosa Eco. Ismenia Padilla Ríos
LIc. Elizabeth Hoyos Vásquez Jefe Of. Calidad y Control Interno Jefe Of. de Gestión y Desarrollo
Lic Flor Chumbes Ortiz
Lic. Estrella Galarza Lázaro
Lic. Margarita Aquiño Vega
Firma y sello Firma y sello Firma y sello

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INDICE

1 INTRODUCCION ......................................................................................................4

2 OBJETIVOS ...............................................................................................................4

3 FINALIDAD ...............................................................................................................5

4 BASE LEGAL..............................................................................................................5

5 AMBITO DE APLICACION.……………………………………………………..…….…..5

6 DEFINICIONES….......................................................................................................5

7 CONTENIDO..............................................................................................................6

7.1 AREAS DE TRABAJO – HEMATOLOGIA…………………………..………………6

7.2 AREA DE DIGITACION………………………..…………………..………………… 8

7.3 AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS…………………………..………………9

7.3.1 AREA DE COAGULACION……….………..…………..…..……………..…..9

7.3.2 AREA DE LECTURA DE PLAQUETAS……………………………….....…12

7.3.3 AREA DE PRUEBAS ESPECIALES………………………………………..13

PERFIL TROMBOTICO……………………….…………….…………………. 13
DOSAJE DE FACTORES DE COAGULACION……………………………... 17
PRUEBA DE SOLUBILIDAD DEL COAGULO (FACTOR XIII)……….……. 19
DOSAJE DE INHIBIDORES DEL FACTOR VIII y IX……………………...... 21
DETERMINACION DEL COFACTOR DE RISTOCETINA (FvW:RCO)….. 23
ANTICUERPOS ANTIPLAQUETARIOS…….….….……………….…….….. 25
AGREGACION PLAQUETARIA………………………………..………….….. 27
RESISITENCIA A LA ASPIRINA…………………………….………………... 29

7.4 AREA DE MORFOLOGICAS……..……..……………….……….…………….…..31

7.4.1 AREA DE PRUEBAS ESPECIALES ……………………………………..….34

PROCESAMIENTO DE HEMOGRAMAS DE HEMATOLOGIA CLINICA….34


COLORACION DE ASPIRADOS DE MEDULA OSEA……………………… 35
FRAGILIDAD OSMOTICA ERITROCITARIA INCUBADA……….…...…….. 36

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VISCOSIDAD SANGUINEA………………………..…………………...……… 38
VISCOSIDAD SERICA……………………………………………...……..…… 40
CELULAS LE…………………………………………………………………..… 42
TEST DE HAM……………………………………………………………..……. 44
TEST DE SUCROSA………..………………………..…………….…..………. 46
DECIFIT DE LA GLUCOSA 6 FOSFATO DESHIDROGENASA……..…..... 48
TEST DE CRIOGLOBULINAS Y CRIOFIBRINOGENO……..…..……..…... 50
PRUEBA DE CRIOAGLUTININAS…………...………..…..….…..………..…. 52
PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO EN SUERO…………….…….....54
PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO EN ORINA.……...…………….. 57
INMUNOFIJACION EN SUERO…………………………………..……………. 59
INMUNOFIJACION EN ORINA…………………………………………………. 62
ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA………………………..…………... 65

7.5 INVENTARIO DE PROCEDIMIENTOS DEL SERVICIO DE HEMATOLOGIA.......68

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1. INTRODUCCION

El Departamento de Patología Clínica representa un apoyo primordial para el área médica,


ya que a través de los análisis realizados en ellos se pueden diagnosticar diferentes
patologías y establecer el tipo de tratamiento que se debe administrar al paciente. Es por
eso, que conscientes de la gran importancia y con la finalidad de alcanzar un trabajo de
calidad, es indispensable contar con un manual que presente de manera formal y
sistemática los procedimientos de cada Laboratorio.

En este Manual se describirá el Manual de Procedimientos del Servicio de Hematología del


Departamento de Patología Clínica del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen-
ESSALUD donde se ha elaborado de forma sencilla y práctica para que su contenido sea
de fácil aplicación por el personal que desarrolla estas actividades diarias.

Su contenido esta dividido en cinco apartados: El primer apartado se nombra las áreas que
cuenta el Servicio de Hematología del Departamento de Patología Clínica, el segundo
apartado se describe al área de digitación, el tercer apartado se nombra el área de
hemostasia y trombosis con sus procesos generales y especiales, el cuarto apartado se
nombra el área de morfológicas con sus procesos generales y especiales y por último se
describe el inventario de procedimiento del Servicio de Hematología.

Se espera que este manual sea una guía efectiva y útil para lograr la estandarización de
los procedimientos y calidad de los resultados obtenidos en el Servicio de Hematología del
Departamento de Patología Clínica del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen-
ESSALUD.

2. OBJETIVO

Proporcionar al personal del Servicio de Hematología del Departamento de Patología


Clínica del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen-ESSALUD un instrumento que
facilite la estandarización de procesos de trabajo en sus diferentes fases: pre analítica,
analítica y post analítica en las diferentes áreas del Servicio.

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3. FINALIDAD

Asegurar que los procesos: pre analítica, analítica y post Analítica del Laboratorio del
Servicio de Hematología del Departamento de Patología Clínica del Hospital Nacional
Guillermo Almenara Irigoyen-ESSALUD se cumplan conforme este estipulado en este
Manual de Procedimientos para poder obtener unos resultados oportunos y de calidad
antes de ser emitidos por el laboratorio.

4. BASE LEGAL

 Ley N° 26842, Ley General de Salud, y sus modificaciones.


 Resolución de Gerencia General N° 300-GG-ESSALUD-2013, que aprueba el
Plan Operativo Institucional del 2013.
 Reglamento de Organización y Funcionamiento del Servicio de Hematología del
Departamento de Patología Clínica del Hospital Nacional Guillermo Almenara
Irigoyen aprobado el 06 de Octubre del 2014 según Resolución de Gerencia
N°979-GR-RRA-ESSALUD-2014.

5. AMBITO DE APLICACIÓN

Las disposiciones contenidas en el presente Manual de Procedimientos son de


aplicación en el Servicio de Hematología del Departamento de Patología Clínica del
Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen-ESSALUD.

6. DEFINICIONES

 FASE PRE ANALITICA: Área de recepción, orientación, identificación, registro de


solicitud de análisis clínicos, asesoria médica pre analítica, toma de muestra,
verificación de la misma y distribución al área analítica.

 FASE ANALITICA: Área donde se realizan los procedimientos de análisis,


debidamente estandarizados y validados para el uso clínico, según necesidades.

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 FASE POST ANALITICA: Área de transferencia de resultados, validación del


proceso analítico, correlato e interpretación clínica, asesoria médica post analítica y
entrega de resultados.

7.- CONTENIDO

7.1 AREAS DE TRABAJO – HEMATOLOGIA

 AREA DE DIGITACION

El área de digitación de muestras se considera un área limpia por lo que no debe estar
en contacto con muestras clínicas. Ésta área está separada del área pre analítica
(separación y distribución de muestras). Es el área donde las muestras deben ser
registradas al Sistema de Gestión Hospitalaria y luego transferidas al Enterprise
generándole un código de barra para que haya una buena trazabilidad.

 AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS

Esta área cuenta con 3 procesos: pre analítica, analítica y post analítica las cuales son
supervisadas por el Médico Patólogo Clínico. La pre analítica cuenta con un Tecnólogo
Médico encargado de la recepción y enumeración de muestras; la analítica cuenta con
dos Tecnólogos Médicos, uno encargado de la lectura manual de plaquetas y el otro
encargado del procesamiento de las muestras para el perfil de coagulación básico que
incluye: Tiempo de Protrombina, Tiempo Parcial de Tromboplastina activada, Tiempo
de Trombina y fibrinógeno; por último, la post analítica es donde se realiza la validación
de controles y de los resultados por el Médico Patólogo Clínico mediante un correlato
clínico patológico.

 AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIACIALES

Es un área donde se realizan las pruebas especiales de hemostasia y trombosis entre


ellas tenemos: perfil trombótico, dosaje de factores de coagulación, dosaje de
inhibidores, agregación plaquetaria, anticuerpos antiplaquetarios, entre otras. El
Médico Patólogo Clínico es responsable de realizar el correlato clínico dirigida a la

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prueba solicitada. Por ser un área especial solo el personal del Servicio de
Hematología del Departamento de Patología Clínica es responsable de la toma de
muestra ya que se encuentran altamente capacitados, es por ello, que el área de
hemostasia y trombosis – pruebas especiales cuenta con su propia toma de muestra.

 AREA DE MORFOLOGICAS

Esta área cuenta con 3 procesos: pre analítica, analítica y post analítica las cuales son
supervisadas por el Médico Patólogo Clínico. En esta área se realizan los
hemogramas, láminas periféricas y VSG. La pre analítica cuenta con un Tecnólogo
Médico encargado de la recepción y enumeración de muestras, también es
responsable del procesamiento de la VSG; la analítica cuenta con un Tecnólogo
Médico encargado del procesamiento de las muestras para hemograma completo,
leucocitos, hb/hto y reticulocitos, aquí también se realiza el recuento diferencial de
leucocitos analizadas por el Médico Patólogo Clínico; por último, la post analítica es
donde se realiza la validación de los resultados por el Médico Patólogo Clínico
mediante un correlato clínico patológico..

 AREA DE MORFOLOGICAS – PRUEBAS ESPECIALES

Es un área donde se realizan las pruebas especiales de morfológicas entre ellas


tenemos: fragilidad osmótica eritrocitaria, viscosidad sanguínea, viscosidad sérica, test
de ham, test de sucrosa, déficit de la G6PDH, células LE, crioglobulinas,
criofibrinógeno, crioaglutininas, electroforesis en suero-orina, inmunofijación en suero-
orina y electroforesis de hemoglobina. El Médico Patólogo Clínico es el responsable de
realizar el correlato clínico dirigida a la prueba solicitada. Por ser un área especial solo
el personal del Servicio de Hematología del Departamento de Patología Clínica es
responsable de la toma de muestra ya que se encuentran altamente capacitados. Es
por ello que el área de morfológicas – pruebas especiales cuenta con su propia toma
de muestra.

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7.2 AREA DE DIGITACION


OBJETIVO Asegurar que todas las órdenes médicas del Servicio de Hematología del
Departamento de Patología Clínica se encuentren registradas en el Sistema
de Gestión Hospitalaria.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de digitación del Servicio de


Hematología del Departamento de Patología Clínica.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

RESPONSABLE

1 Registrar y codificar las pruebas solicitadas (hemogramas, pruebas de


coagulación, VSG, lámina periférica, reticulocitos) en el Sistema de
Gestión Hospitalaria en el siguiente horario:

-Pacientes urgentes que se encuentran en áreas críticas (Unidad de


Cuidados Intensivos, Unidad de Trasplante, UCI-Neonatología, Unidad
de Terapia Intensiva, Unidad de Vigilancia Intensiva) en el horario de 6 Digitador
a 7 am.
Nota: Coordinar con el Servicio de Neonatología para el registro de
pacientes recién nacidos en el Sistema de Gestión Hospitalaria.

-Pacientes consultorio externo en el horario de 8 am a 10 am.

-Pacientes hospitalizados en el horario de 7 am a 12 am.


2 Registrar las pruebas especiales de Morfológicas, Hemostasia y
Trombosis en el Sistema de Gestión Hospitalaria de pacientes referidos,
hospitalizados y consultorio externo en el horario de 7 am a 9 am.
Digitador
Nota: Los pacientes referidos deben presentar su hoja de referencia
con el sello de aprobación emitido por la Unidad de Referencias del
Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen.
3 Colocar la orden médica junto con las muestras en una canastilla y
entregar a los Tecnólogos Médicos de las diferentes áreas de Pre Digitador
Analítica del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.
4 Archivar en los cajones de almacenamiento las órdenes médicas por
día, divididos en: P. Coagulación Consultorio y Hospitalización; Digitador
Hemogramas Consultorio y Hospitalización; VSG, Leucocitos, Hb/Hto.

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7.3 AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS


AREA DE COAGULACION
OBJETIVO Determinar el Tiempo de Protrombina, Tiempo de Tromboplastina parcial
activada, Tiempo de Trombina y Fibrinógeno en plasma citratado.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de coagulación del Servicio de


Hematología del Dpto. de Patología Clínica.

MUESTRA Plasma pobre en plaquetas.

PRUEBA Perfiles de coagulación (tiempo de protrombina, tiempo parcial de


tromboplastina activada, fibrinógeno, tiempo de trombina)

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y transportar las muestras en tubo con citrato de sodio 3.2% y Tecnólogo
la orden médica con su correspondiente código de barra de Perfil de Médico-Área Pre
Coagulación de pacientes urgentes, hospitalizados y consultorio externo Analítica
2 Anotar en la tabla de registro la hora y el número de muestras Tecnólogo
recepcionadas. Médico-Área Pre
Analítica
3 Enumeración de la orden médica con la respectiva muestra de los Tecnólogo
pacientes. Médico-Área Pre
Analítica
4 Verificar si las muestras de Perfil de Coagulación cumplen con la
relación sangre: anticoagulante (9:1). Las muestras que tengan
hematocrito elevado (> 50%) se les realizará su corrección con citrato Tecnólogo
de sodio 3.2%. Médico-Área Pre
Analítica
Nota: El Servicio NO recibe muestras remitidas, salvo de sala de
operaciones donde se colocará y reportará como muestra remitida
(indicando la fecha y hora de recepción).
5 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos (en centrifuga Tecnólogo
refrigerada) y separar el plasma inmediatamente. Médico-Área Pre
Analítica
6 Anotar en el cuaderno de ocurrencias las nuevas muestras (coaguladas,
insuficientes, hemolizadas, lipémicas) para su tabulación estadística y Tecnólogo
las correcciones respectivas (mejora continua). Médico-Área Pre
Analítica
Nota: La toma de nuevas muestras será realizada por el Técnico del
Servicio a la brevedad posible.

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7 Distribución de las muestras:

1. Las órdenes y muestras de Perfil de Coagulación se entregan al


Tecnólogo Médico del Área Analítica - Coagulación. Tecnólogo
2. Las órdenes, muestras de Hemogramas y láminas se entregan Médico-Área Pre
al Tecnólogo Médico del Área Analítica - Morfológicas. Analítica
3. Las láminas para plaquetas se entregan al Tecnólogo Médico del
Área de Lectura de Plaquetas.
8 Realizar la estadística en el folder correspondiente (Estadística Diaria- Tecnólogo
Hemostasia y Trombosis). Médico-Área Pre
Analítica

ANALITICA RESPONSABLE
1 Antes de iniciar los procesos sacar los reactivos de la refrigeradora y Tecnólogo
dejarlos a temperatura ambiente (18°-25°C) por 30 minutos. Médico-Área
Analítica
2 Reconstituir controles de calidad para Perfil de Coagulación: tiempo de Tecnólogo
protrombina, tiempo tromboplastina parcial activada, tiempo de trombina Médico-Área
y fibrinógeno. Analítica
3 Mantenimiento, acondicionamiento y suministro de reactivos de los Tecnólogo
Coagulómetros Nº 1 y 2 (Equipo BCS XP). Médico-Área
Analítica
4 Encendido del Interfase (computadoras). Tecnólogo
Médico-Área
Analítica
5 Pasar controles de calidad interno: control normal, control patológico y Tecnólogo
pool de muestra de cada una de las pruebas. Médico-Área
Analítica
Nota: Pasar control de calidad externo trimestralmente (Colegio
Americano de Patólogos -CAP y la Internacional Society on Thrombosis
and Haemostasis -ISTH)
6 Registro de controles en el folder correspondiente (Control de Calidad – Tecnólogo
Hemostasia y Trombosis). Médico-Área
Analítica
7 Cargar los racks, trackear y colocar las muestras al Coagulómetro Tecnólogo
(Equipo BCS XP) Nº 1 (consultorio externo) y 2 (hospitalización y Médico-Área
pruebas especiales). Analítica
8 Procesamiento de los resultados por equipo automatizado y
debidamente supervisado por el personal responsable.
Tecnólogo
Nota: Los tiempos de tromboplastina parcial activada prolongados (≥ 41 Médico-Área
seg) se les realizarán la corrección con plasma normal. Analítica

9 Resultados de Perfil de Coagulación son trasmitidos automáticamente al Tecnólogo


Sistema Enterprise (los resultados también son registrados en la orden Médico-Área
médica solicitada). Analítica

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10 Entregar la orden médica con los resultados de Perfil de Coagulación al Tecnólogo


Área Post Analítica-Coagulación. Médico-Área
Analítica

POST ANALITICA RESPONSABLE


1  Validación de control de calidad interno de Pruebas de M. Patólogo
Coagulación: control normal, control patológico, pool de muestra. Clínico
 Validación de control de calidad externo trimestralmente.
2 Realizar correlato clínico patológico y verificar los resultados en el M. Patólogo
Sistema Enterprise. Clínico

3 Validación de los resultados mediante un correlato clínico patológico y M. Patólogo


observando el Deltacheck (Histórico del paciente en el Sistema Clínico
Enterprise).
4 Al término del turno, verificar que los resultados hayan trasmitidos M. Patólogo
adecuadamente al Sistema de Gestión Hospitalaria (SGH). Clínico

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AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS


AREA DE LECTURA DE PLAQUETAS
OBJETIVO Determinar el número y morfología de las plaquetas.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de lectura de plaquetas del Servicio
de Hematología del Departamento de Patología Clínica.
MUESTRA Sangre anti coagulada con EDTA.

PRUEBA Lectura de plaquetas

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Recepción de órdenes y láminas de pacientes hospitalizados y Tecnólogo
consultorio externo. Médico

2 Coloración de láminas de pacientes hospitalizados y láminas Tecnólogo


patológicas de consultorio externo. Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Recepción de hemogramas que fueron ingresados al contador Tecnólogo
hematológico (Equipo ADVIA 2120i). Médico
2 Registro de resultados de la lectura automatizada al formato de Tecnólogo
recuento de plaquetas. Médico
3 Recuento manual y observación morfológica de plaquetas en láminas
coloreadas para su verificación con el recuento del equipo automatizado Tecnólogo
y su registro en el formato correspondiente. Médico
4 Registro de resultados verificados (promedio del recuento manual y Tecnólogo
recuento automatizado). Médico
5 Entrega de láminas coloreadas de pacientes hospitalizados al área post Tecnólogo
analítica-morfológicas para su recuento diferencial. Médico
6 Registro de lectura de plaquetas en la orden médica y entrega al Área Tecnólogo
Post Analítica-Coagulación. Médico
7 Estadística final de recuento de plaquetas diaria en el folder Tecnólogo
correspondiente (Estadística de plaquetas – Hemostasia y Trombosis). Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificación y validación de los resultados mediante un correlato clínico
patológico y observando el Deltacheck (Histórico del paciente en el M. Patólogo
Sistema Enterprise). Clínico
2 Ingresar y verificar los resultados de recuento de plaquetas al Sistema M. Patólogo
Enterprise o al Sistema de Gestión Hospitalaria según corresponda. Clínico

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AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


PERFIL TROMBOTICO
OBJETIVO Detectar los marcadores de trombogénesis en pacientes con factores de
riesgo.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.
MUESTRA Plasma pobre en plaquetas

PRUEBA Perfil Trombótico (ATIII, α2antiplasmina, Proteína C, Proteína S,


Anticoagulante Lúpico, Plasminógeno, Resistencia a la Proteína “C”, FVII,
FVIII, FXI, FXII, Dímero D, Anticardiolipina IgG, IgM – Antiβ2glicoproteína
IgG, IgM, Tpa, PAI-1)

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para el perfil trombótico. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato de sodio 3.2% (1:9) de pacientes Tecnólogo
hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal del área Médico
de pruebas especiales – hemostasia y trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos (en centrifuga Tecnólogo
refrigerada) y separar el plasma inmediatamente. Médico
6 En caso que las muestras no sean procesadas el mismo día como el t-
PA y el PAI-1 deberán ser almacenadas por congelamiento a – 20°C Tecnólogo
hasta su procesamiento (hasta 1 mes). Para el procesamiento de la Médico
muestra, se descongela por 20 minutos, hasta alcanzar la temperatura
ambiente.

ANALITICA
PRUEBAS: ATIII, α2antiplasmina, Proteína C, Proteína S, Anticoagulante RESPONSABLE
Lúpico, Plasminógeno, Resistencia a la Proteína “C”, FVII, FVIII, FXI, F
XII, Dímero D.
1 Antes de iniciar los procesos sacar los reactivos de la refrigeradora y Tecnólogo
dejarlos a temperatura ambiente (18°-25°C) por 30 minutos. Médico
2 Reconstituir los controles de calidad para perfil trombótico. Tecnólogo
Médico

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3 Mantenimiento, acondicionamiento y suministro de reactivos del Tecnólogo


coagulómetro Nº 2 (Equipo BCS XP). Médico
4 Encendido del Interfase (computadora). Tecnólogo
Médico
5 Pasar controles de calidad interno: control normal, control patológico de
cada una de las pruebas.
Tecnólogo
Nota: Pasar control de calidad externo trimestralmente (Colegio Médico
Americano de Patólogos -CAP y la Internacional Society on Thrombosis
and Haemostasis -ISTH)
6 Programar Perfil de Coagulación para cada una de las muestras. Tecnólogo
Médico
7 Cargar los racks y colocar las muestras al coagulómetro Nº 2 (Equipo Tecnólogo
BCS XP). Médico
8 Procesamiento de los resultados por equipo automatizado y
debidamente supervisado por el personal responsable.

Nota: Tecnólogo
 Los tiempos de tromboplastina parcial activada prolongados (≥ Médico
41 seg) se les realizará la corrección con plasma normal.
 Los tiempos de protrombina prolongados se les realizará FV,
FVII y FX para descartar si el paciente se encuentra
anticoagulado con warfarina.
 Si paciente se encuentra anticoagulado NO procede el perfil
trombótico.
9 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente (Pruebas especiales- Hemostasia Médico
y Trombosis).
10 Entregar la orden médica con los resultados de perfil trombótico al Área Tecnólogo
Post Analítica. Médico

PRUEBAS: Anticardiolipina IgG, IgM – Antiβ2glicoproteína IgG, IgM. RESPONSABLE


1 Antes de iniciar los procesos sacar los reactivos de la refrigeradora y Tecnólogo
dejarlos a temperatura ambiente (18°-25°C) por 30 minutos. Médico
2 Preparar el analizador ELISA automatizado (Equipo Alegría) con los Tecnólogo
lavados correspondientes. Médico
3 Colocar las tiras reactivas en las placas de corrida. Tecnólogo
Médico
4 Cargar las muestras en las cubetas de ensayo de cada tira reactiva. Tecnólogo
Médico
Nota: Colocar controles de calidad del sistema: control normal, control
patológico en el equipo Alegría una vez por semana.
5 Colocar las placas de corrida junto con las muestras al analizador ELISA Tecnólogo
automatizado (Equipo Alegría). Médico

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6 Trackear los códigos de barra y scanear las tiras reactivas. Tecnólogo


Médico

7 Impresión de los resultados. Tecnólogo


Médico
8 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente (Pruebas especiales-Hemostasia Médico
y Trombosis).
9 Entregar la orden médica con los resultados de perfil trombótico al Área Tecnólogo
Post Analítica. Médico

PRUEBAS: t-PA, PAI-1 RESPONSABLE


1 Antes de iniciar los procesos sacar los reactivos de la refrigeradora y Tecnólogo
dejarlos a temperatura ambiente (18°-25°C) por 30 minutos. Médico
2 Atemperar las muestras a 37°C el tiempo necesario y suficiente para Tecnólogo
que la descongelación sea completa. Médico
3 Reconstituir los reactivos 2, 6, 7 y diluir el reactivo 5 de acuerdo al Tecnólogo
inserto de trabajo. Médico
4 Calibración:
Se efectúa en tubos de plástico con el reactivo 6. Preparar la solución Tecnólogo
inicial t diluyendo el reactivo 6 a 1/10 en reactivo 4 (100ul de reactivo 6 Médico
+ 900ul de reactivo 4). A partir de esta solución inicial, realizar
diluciones t/2, t/4, t/8, t/16.
5 Los plasmas son diluidos en tubos de plástico a 1/10 en reactivo 4 Tecnólogo
(100ul de plasma + 900ul de reactivo 4) Médico
6 El control de calidad se realiza con el reactivo 7. Se analiza a 2 Tecnólogo
diluciones realizadas en tubos de plástico: una dilución a 1/10 en Médico
reactivo 4 y la dilución al 1/2 en reactivo 4 de esta dilución a 1/10.
7 Sacar las tiras de su embalaje, dispensar inmediatamente los Tecnólogo
calibradores así como los controles y muestras diluidas a analizar (en Médico
las 2 horas siguientes de su preparación). Además del reactivo 4
(blanco).
8 Fijación del antígeno:
Colocar 200ul de muestra en cada pozo. Tapar los pozos e incubar 1 Tecnólogo
hora y 2 horas (t-PA) a temperatura ambiente. Lavar los pozos 5 veces Médico
con el reactivo 5, seguir inmediatamente el proceso.
9 Fijación del inmunoconjugado:
Agregar 200ul del reactivo 2. Tapar los pozos e incubar 1 hora (PAI-1) y Tecnólogo
2 horas (t-PA) a temperatura ambiente. Lavar los pozos 5 veces con Médico
el reactivo 5, seguir inmediatamente el proceso.
10 Coloración:
Tecnólogo
Agregar 200ul del substrato (TMB) reactivo 3. Incubar exactamente 5 Médico
minutos a temperatura ambiente para cada muestra y luego añadir 50ul
de H2SO4 1M. Tras dispensar el acido en todos los pozos, agitar la
placa.

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NACIONAL Elaboración:
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ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 16 de 66

11 Esperar 15 minutos a 1 hora tras detener la reacción, luego medir la Tecnólogo


absorbancia a 450nm (ajustar la lectura a 0 con el reactivo blanco). Médico
12 Colocar las tiras en la lectora de ELISA semiautomatizada (Equipo Tecnólogo
PR4100). Médico
13 Valores esperados: Tecnólogo
t-PA : 1-12 ng/ml. Médico
PAI-1 : 4-43 ng/ml.
14 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente (Pruebas especiales-Hemostasia Médico
y Trombosis)
15 Entregar la orden médica con los resultados de t-PA y PAI-1 al Área Tecnólogo
Post Analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1  Validación de control de calidad interno de cada una de las
pruebas: control normal y control patológico. M. Patólogo
 Validación de control de calidad externo trimestralmente. Clínico
2 Verificar y validar los resultados del perfil trombótico mediante un M. Patólogo
correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

16
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Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 17 de 66

AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


DOSAJE DE FACTORES DE COAGULACION
OBJETIVO Determinación cuantitativa de Factores de Coagulación en plasma citratado
para el descarte de trastornos hemorrágicos o coagulopatías.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.
MUESTRA Plasma pobre en plaquetas

PRUEBA Dosaje de factores de coagulación (FV, FVII, FVIII, FIX, FX Coagulante,


Factor Von Willebrand antigénico y funcional)

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato para el dosaje de factores de coagulación. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato 3.2% (1:9) de pacientes Tecnólogo
hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal del área Médico
de pruebas especiales – hemostasia y trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos (en centrifuga Tecnólogo
refrigerada) y separar el plasma inmediatamente. Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Antes de iniciar los procesos sacar los reactivos de la refrigeradora y Tecnólogo
dejarlos a temperatura ambiente (18°-25°C) por 30 minutos. Médico
2 Reconstituir controles de calidad para dosaje de factores. Tecnólogo
Médico
3 Mantenimiento, acondicionamiento y suministro de reactivos del Tecnólogo
Coagulómetro Nº 2 (Equipo BCS XP). Médico
4 Encendido del Interfase (computadora). Tecnólogo
Médico
5 Pasar controles de calidad interno: control normal, control patológico
de cada una de las pruebas.
Tecnólogo
Nota: Pasar control de calidad externo trimestralmente (Colegio Médico
Americano de Patólogos y la Internacional Society on Thrombosis and
Haemostasis -ISTH)
6 Programar perfil de coagulación para cada una de las muestras. Tecnólogo
Médico

17
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Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 18 de 66

7 Cargar los racks y colocar las muestras al coagulómetro Nº 2 (Equipo Tecnólogo


BCS XP). Médico

8 Procesamiento de los resultados por equipo automatizado y Tecnólogo


debidamente supervisado por el personal responsable. Médico

Nota:
 Los tiempos de tromboplastina parcial activada prolongados (≥
41 seg) se les realizará la corrección con plasma normal.
 Aquellos que no corrigen (TTPa > 5 segundos en relación al
pool del día) se les dosará inhibidores (inhibidores del VIII, IX,
X, XI, XII, anticoagulante lúpico).
9 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente (Pruebas especiales-Hemostasia Médico
y Trombosis).
10 Entregar la orden médica con los resultados de factores de Tecnólogo
coagulación al Área Post Analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1  Validación de control de calidad interno de cada una de las
pruebas: control normal y control patológico. M. Patólogo
 Validación de control de calidad externo trimestralmente. Clínico
2 Verificar y validar los resultados de factores de coagulación mediante M. Patólogo
un correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

18
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Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


PRUEBA DE SOLUBILIDAD DEL COAGULO (FACTOR XIII)
OBJETIVO Determinación cualitativa del Factor XIII en plasma citratado para el
descarte de trastornos hemorrágicos o coagulopatías.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-


pruebas especiales del Servicio de Hematología del Departamento de
Patología Clínica.
MUESTRA Plasma pobre en plaquetas

PRUEBA Prueba de solubilidad del coágulo (Factor XIII)

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de solubilidad del M. Patólogo
coágulo. Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato 3.2% (1:9) a pacientes Tecnólogo
hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal del área Médico
de pruebas especiales – hemostasia y trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos (en centrifuga Tecnólogo
refrigerada) y separar el plasma inmediatamente. Médico

AREA ANALITICA RESPONSABLE


1 Agregar la muestra y el cloruro de calcio en un tubo de vidrio para Tecnólogo
coagular el plasma. Médico
2 Tapar el tubo, mezclar por inversión e incubar por 30 minutos a 37°C Tecnólogo
(formación del coágulo). Médico
3 Retirar del baño maría y agregar 3ml de urea. Tecnólogo
Importante: despegar el coagulo de las paredes del tubo. Médico
4 Mantener a 37°C o a temperatura ambiente. Tecnólogo
Médico
5 Observar cada 15 minutos hasta 1 hora y registrar el tiempo de Tecnólogo
disolución del coagulo. Médico
6 REPORTE DE RESULTADOS:
Persistencia del coagulo: Presente Tecnólogo
No persistencia del coagulo: Ausente Médico

7 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo


cuaderno de registro correspondiente. Médico

19
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 20 de 66

8 Entregar la orden médica con los resultados de factores de coagulación Tecnólogo


al Área Post Analítica. Médico

AREA POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y validar los resultados de la prueba de solubilidad del coagulo M. Patólogo
(Factor XIII) mediante un correlato clínico patológico. Clínico
2 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

20
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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Departamento de Patología Clínica Página: 21 de 66

AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


DOSAJE DE INHIBIDORES DEL FACTOR VIII y IX
OBJETIVO Determinación cuantitativa de inhibidores del Factor VIII y IX en plasma
citratado para el descarte de coagulopatías.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Plasma pobre en plaquetas.

PRUEBA Dosaje de inhibidores del factor VIII y IX

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de inhibidores del factor M. Patólogo
VIII y IX. Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato 3.2% (1:9) a pacientes Tecnólogo
hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal del área Médico
de pruebas especiales – hemostasia y trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos (en centrifuga Tecnólogo
refrigerada) y separar el plasma inmediatamente. Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Obtener un pool de plasma normal pobre en plaquetas (N): Se prepara Tecnólogo
a partir de por lo menos 20 donantes normales centrifugando a 3500 Médico
RPM (en centrifuga refrigerada) por 10 minutos.
2 Mezclar el plasma del paciente + el pool de plasma normal (P+N) en Tecnólogo
proporción 1:1. Médico
3 Preparar diluciones progresivas (1/1, 1/2, 1/5) del plasma del paciente
con buffer imidazol y proceder luego a realizar las siguientes mezclas:
Tecnólogo
01 parte de plasma problema (1/1, 1/2, 1/5) + 01 parte del plasma Médico
normal (P+N).
01 parte de plasma normal + 01 parte de buffer imidazol (blanco).

4 Colocar volúmenes iguales de cada una de las mezclas en tubos de Tecnólogo


plástico limpios. Médico

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

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5 Tapar e incubar por 2 horas a 37°C para FVIII y 30 minutos a 37°C para Tecnólogo
FIX. Médico
6 Determinar la actividad coagulante del factor problema en cada una de Tecnólogo
las mezclas. Médico
7 REPORTE DE RESULTADOS:
Calcular el porcentaje (%) del factor problema residual. Considerando
como el 100% del factor problema residual (cuando no hay efecto Tecnólogo
inhibitorio) la concentración del factor problema en la mezcla de plasma Médico
normal y buffer.

100% del factor problema residual corresponde a 0UB/ml


50% del factor problema residual corresponde a 1UB/ml
8 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
9 Entregar la orden médica con los resultados de dosaje de inhibidores Tecnólogo
del factor VIII y IX al Área Post Analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y validar los resultados de dosaje de inhibidores del factor VIII y M. Patólogo
IX mediante un correlato clínico patológico. Clínico
2 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 23 de 66

AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


DETERMINACION DEL COFACTOR DE RISTOCETINA (FvW:RCO)
OBJETIVO Determinación cuantitativa del cofactor de ristocetina en plasma citratado
para el descarte de coagulopatías.
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.
MUESTRA Plasma pobre en plaquetas

PRUEBA Determinación del cofactor de Ristocetina (FvW:RCO)

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la determinación del cofactor de M. Patólogo
ristocetina. Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato 3.2% (1:9) a pacientes Tecnólogo
hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal del área Médico
de pruebas especiales – hemostasia y trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos (en centrifuga
refrigerada) y separar el plasma inmediatamente.
Estabilidad del plasma: 8 horas a 20°C y 6 meses a -80°C. Tecnólogo
Nota: Una vez descongelado el plasma a 37°C por un máximo de 10 Médico
minutos, ya no se debe volver a congelar.

ANALITICA RESPONSABLE
1 Preparar plaquetas lavadas y fijadas: Se utiliza un pool de plasma pobre
en plaquetas normales de por lo menos 20 pacientes normales que se
conserva fraccionado y congelado hasta el momento de su uso.
 Diluir a partes iguales una unidad de plaquetas con formol al 2%.
 Incubar a 37°C por una hora. Tecnólogo
 Conservar a 4°C por lo menos 18 horas. Médico
 Lavar 3 veces con buffer tris salino (solución de trabajo) ph 7.4.
 Resuspender cuidadosamente el tapón plaquetario en 5 ml de
buffer tris salino (solución de trabajo) ph 7.4.
 Ajustar a 300 000 plaquetas x mm3. Alicuotar (8ml) en tubos de
plástico y guardar a -20°C.

2 Prender el agregómetro por lo menos una hora antes de usarse para Tecnólogo
que caliente y llegue a 37°C. Médico

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Departamento de Patología Clínica Página: 24 de 66

3 Calibrar el agregómetro utilizando como blanco 200ul de plaquetas


lavadas mas 200ul de buffer tris salino (solución de trabajo), esto Tecnólogo
representa el 100% de tramitancia y como 0% de tramitancia se coloca Médico
200ul de plaquetas lavadas (300 000 plaquetas x mm3).
4 Curva de calibración:
Para la calibración se utiliza un pool de plasma pobre en plaquetas de
pacientes normales (por lo menos 20 pacientes), que se conserva
alicuotado a -20°C. Tecnólogo
Hacer diluciones del mismo 50%, 25%, 12.5% y 6.25% en buffer tris- Médico
salina (solución de trabajo).
Trabajar cada dilución como si fuera un plasma del paciente. Registrar
la amplitud de la onda y luego medirla en mm y extrapolarlos en un
papel doble logarítmico. De esta forma se obtiene una recta a la cual se
van a referir los resultados de los dosajes posteriores.
5 En los tubos de vidrio para agregación colocar: Tecnólogo
 Plaquetas lavadas y fijadas (300 000 x mm3) 400ul Médico
 Plasma pobre en plaquetas del paciente 50ul
 Ristocetina 50ul
6 Incubar por 3 minutos y agregar la barrita magnética. Tecnólogo
Médico
7 Registrar la amplitud de la onda producida por el paso de la luz. La Tecnólogo
amplitud de la onda es directamente proporcional al paso de la luz. Médico
8 Después de cada lectura lavar la barrita magnética con solución salina. Tecnólogo
Médico
9 REPORTE DE RESULTADOS: Tecnólogo
Valores normales: de 60 a 150%. Médico
10 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
11 Entregar la orden médica con los resultados de la determinación del Tecnólogo
cofactor de ristocetina al Área Post Analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y validar los resultados de la determinación del cofactor de M. Patólogo
ristocetina mediante un correlato clínico patológico. Clínico
2 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

24
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Departamento de Patología Clínica Página: 25 de 66

AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


ANTICUERPOS ANTIPLAQUETARIOS
OBJETIVO Determinar la presencia de anticuerpos antiplaquetarios circulantes
presentes en el suero.
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Suero

PRUEBA Anticuerpos antiplaquetarios

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de anticuerpos M. Patólogo
antiplaquetarios. Clínico
2 Extracción de sangre en tubo seco a pacientes hospitalizados, Tecnólogo
consultorio externo y referidos por el personal del área de pruebas Médico
especiales – hemostasia y trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Dejar coagular las muestras por 2 horas. Tecnólogo
Médico
6 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos. Conservar los Tecnólogo
sueros por 24 horas a -20°C. Médico
7 Al día siguiente descongelar los sueros para su procesamiento. Tecnólogo
Médico

AREA ANALITICA RESPONSABLE


1 Colocar en un tubo 0.2 ml de plasma rico en plaquetas de una persona Tecnólogo
normal. Médico

2 Añadir 0.2 ml de suero en estudio. Trabajar en paralelo con 05 sueros Tecnólogo


de personas normales. Médico
3 Incubar la mezcla a 37°C por 10 minutos. Tecnólogo
Médico
4 Tomar 0.1 ml de la mezcla y añadir a un tubo con 0.1ml de plasma Tecnólogo
pobre en plaquetas. Médico

5 Incubar por 30 segundos a 37°C. Tecnólogo


Médico

25
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 26 de 66

6 Añadir 0.2 ml de cloruro de calcio. Tecnólogo


Médico
7 Tomar el tiempo de coagulación. Tecnólogo
Médico
8 REPORTE DE RESULTADOS:
Se define como positivo una muestra si el tiempo de coagulación se Tecnólogo
acorta más de 2 desviaciones estándar de la media de 5 sueros control Médico
probados con la suspensión de plaquetas.
9 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
10 Entregar la orden médica con los resultados de anticuerpos Tecnólogo
antiplaquetarios al Área Post Analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y validar resultados de los anticuerpos antiplaquetarios M. Patólogo
mediante un correlato clínico patológico. Clínico
2 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

26
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 27 de 66

AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


AGREGACION PLAQUETARIA
OBJETIVO Evaluar la función plaquetaria (agregación) in vitro ante la presencia de
sustancias agonistas como ADP, adrenalina, fibrinógeno, colágeno, ac.
araquidónico y ristocetina.
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Plasma rico en plaquetas

PRUEBA Agregación plaquetaria.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de agregación M. Patólogo
plaquetaria. Clínico

2 Extracción de sangre en tubo con citrato de sodio 3.2% (1:9) un Tecnólogo


volumen de 15 ml a pacientes hospitalizados, referidos y consultorio Médico
externo por el personal del área de pruebas especiales – hemostasia y
trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 1000 RPM por 10 minutos (en centrifuga Tecnólogo
refrigerada) y separar el sobrenadante plasma rico en plaquetas en Médico
tubos de plástico.

6 Centrifugar lo restante a 3500 RPM por 10 minutos (en centrifuga Tecnólogo


refrigerada) y separar el sobrenadante plasma pobre en plaquetas en Médico
tubos de plásticos.

AREA ANALITICA RESPONSABLE


1 Preparación del plasma rico en plaquetas trabajo: Llevar el plasma rico
en plaquetas a valores de 300 000 plaquetas x mm3 diluyéndolo con su
propio plasma pobre en plaquetas y mediante una regla de tres simple. Tecnólogo
PRP 560 000 plaquetas x mm3 Médico

560 1ml
300 X

27
HOSPITAL Fecha de
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NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 28 de 66

X= 300 000 x 100 = 0.54 ml


560 000

Se debe tomar 0.54 de PRP y 0.46 PPP.

2 Prender el agregómetro por lo menos 1 hora antes de usarse para que Tecnólogo
caliente y llegue a 37°C. Médico
3 Calibrar el equipo colocando el plasma pobre en plaquetas en su Tecnólogo
respectiva celda a 100% de transmisión de luz y colocar el plasma rico Médico
en plaquetas en su respectiva celda a 10% de transmisión de luz.
4 Colocar en 7 viales de vidrio 450ul de plasma rico en plaquetas trabajo Tecnólogo
y colocarlos en el equipo para que se calienten. Médico
5 En cada uno de ellos agregar 50ul de cada uno de los diferentes
agonistas:
ADP 2.5umol/L, Adrenalina 3umol/L, Fibrinógeno bovino 0.3mg/ml,
Colágeno 2ug/ml, Acido araquidónico 500 mg/ml. Tecnólogo
La ristocetina se trabaja en 4 concentraciones diferentes: Médico
Concentración (mg/ml): 1.5 1.2 0.9 0.6
Ristocetina (uL): 50 40 30 20
PRP (uL): 450 450 450 450

6 Al momento de añadir el agonista se le coloca la barrita magnética y se Tecnólogo


coloca dentro del equipo. El cambio de transmisión de luz a través de la Médico
muestra es recogida en un registrador. La amplitud de la onda es
directamente proporcional al paso de la luz.
7 Después de cada lectura lavar la barrita magnética con solución salina. Tecnólogo
Médico
8 Verificar que el papel este bien colocado en el registrador. Tecnólogo
Médico
9 REPORTE DE RESULTADOS:
Si la curva es mayor del 50% NORMAL Tecnólogo
Si la curva es menor del 50 % DISMINUIDA Médico
Si no se registra la curva AUSENTE
10 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
11 Entregar la orden médica con los resultados de agregación plaquetaria Tecnólogo
al Área Post Analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y validar resultados de la agregación plaquetaria mediante un M. Patólogo
correlato clínico patológico. Clínico
2 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

28
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Departamento de Patología Clínica Página: 29 de 66

AREA DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS – PRUEBAS ESPECIALES


RESISTENCIA A LA ASPIRINA
OBJETIVO Determinar la incapacidad de la aspirina para inhibir la agregación
plaquetaria.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de hemostasia y trombosis-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Plasma rico en plaquetas

PRUEBA Resistencia a la aspirina

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de resistencia a la M. Patólogo
aspirina. Clínico

2 Extracción de sangre en tubo con citrato de sodio 3.2% (1:9) un Tecnólogo


volumen de 15 ml a pacientes hospitalizados, referidos y consultorio Médico
externo por el personal del área de pruebas especiales – hemostasia y
trombosis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 1000 RPM por 10 minutos y separar el Tecnólogo
sobrenadante plasma rico en plaquetas en tubos de plástico. Médico

6 Centrifugar lo restante a 3000 RPM por 10 minutos y separar el Tecnólogo


sobrenadante plasma pobre en plaquetas en tubos de plásticos. Médico

AREA ANALITICA RESPONSABLE


1 Preparación del plasma rico en plaquetas trabajo: Llevar el plasma rico
en plaquetas a valores de 300 000 plaquetas x mm3 diluyéndolo con su
propio plasma pobre en plaquetas y mediante una regla de tres simple.
PRP 560 000 plaquetas x mm3
Tecnólogo
560 1ml Médico
300 X
X= 300 000 x 100 = 0.54 ml
560 000

29
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IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 30 de 66

Se debe tomar 0.54 de PRP y 0.46 PPP.


2 Prender el agregómetro por lo menos 1 hora antes de usarse para que Tecnólogo
caliente y llegue a 37°C. Médico
3 Calibrar el equipo colocando el plasma pobre en plaquetas en su Tecnólogo
respectiva celda a 100% de transmisión de luz y colocar el plasma rico Médico
en plaquetas en su respectiva celda a 10% de transmisión de luz.
4 Colocar en 7 viales de vidrio 450ul de plasma rico en plaquetas trabajo Tecnólogo
y colocarlos en el equipo para que se calienten. Médico
5 En cada uno de ellos agregar 50ul de cada uno de los diferentes Tecnólogo
agonistas: Médico
ADP 10umol/L, Adrenalina 3umol/L, Colágeno 2ug/ml, Acido
araquidónico 500 mg/ml.
6 Al momento de añadir el agonista se le coloca la barrita magnética y se Tecnólogo
coloca dentro del equipo. El cambio de transmisión de luz a través de la Médico
muestra es recogida en un registrador. La amplitud de la onda es
directamente proporcional al paso de la luz.
7 Después de cada lectura lavar la barrita magnética con solución salina. Tecnólogo
Médico
8 Verificar que el papel este bien colocado en el registrador. Tecnólogo
Médico
9 REPORTE DE RESULTADOS: Tecnólogo
Definimos como resistencia a la aspirina la presencia de: Médico
Agregación plaquetaria mayor de 20% con Acido araquidónico.
Agregación plaquetaria mayor de 70% con ADP, colágeno y adrenalina.
10 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
11 Entregar la orden médica con los resultados de la resistencia a la Tecnólogo
aspirina al Área Post Analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y validar resultados de la resistencia a la aspirina mediante un M. Patólogo
correlato clínico patológico. Clínico
2 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

30
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Departamento de Patología Clínica Página: 31 de 66

7.4 AREA DE MORFOLOGICAS


OBJETIVO *Determinar el recuento de los distintos tipos de leucocitos con respecto a
su representación total por mm3 de sangre.
*Determinar la precipitación de los eritrocitos en un tiempo determinado (1-2
horas)
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas del Servicio de
Hematología del Departamento de Patología Clínica.

MUESTRA Sangre anti coagulada con EDTA para Hemogramas


Sangre anti coagulada con citrato 3.2% (1:4) para Velocidad de
Sedimentación Globular
PRUEBA Hemogramas
VSG

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Verificar y transportar las muestras en tubo con EDTA (Hemograma) o Tecnólogo
en tubo con citrato 3.2% (1:4) (VSG), la orden médica y las láminas Médico-Área Pre
con su correspondiente código de barra de pacientes urgentes Analítica
(leucocitos, Hb/HTCO, hematología clínica, oncología), hospitalizados
y consultorio externo.
2 Anotar en la tabla de registro la hora y el número de muestras Tecnólogo
recepcionadas. Médico-Área Pre
Analítica

3 Registro de ocurrencias de nuevas muestras (coaguladas,


insuficientes, hemolizadas, lipémicas) para su tabulación estadística y Tecnólogo
las correcciones respectivas (mejora continua). Médico-Área Pre
Nota: La toma de nuevas muestras será realizada por el Técnico del Analítica
Servicio a la brevedad posible.
4 Enumeración de la orden médica con la respectiva muestra de los Tecnólogo
pacientes. Médico-Área Pre
Analítica
5 Las órdenes y muestras de Hemogramas se entregan al Tecnólogo
Médico del Área Analítica - Morfológicas. Tecnólogo
Nota: El Servicio NO recibe muestras remitidas, salvo de sala de Médico-Área Pre
operaciones donde se colocará y reportará como muestra remitida Analítica
(indicando la fecha y hora de recepción).
6 Coloración de láminas de todos los pacientes hospitalizados y sólo las Tecnólogo
láminas de consultorio externo solicitadas por el Médico Patólogo Médico-Área Pre
Clínico para su posterior revisión, ya que los hemogramas presentan Analítica
alarmas y/o resultados patológicos en valor crítico.

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Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

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7 Realizar la estadística en el folder correspondiente (Estadística Diaria- Tecnólogo


Morfológicas). Médico-Área Pre
Analítica

ANALITICA RESPONSABLE
1 Antes de iniciar los procesos sacar los reactivos de la refrigeradora y Tecnólogo
dejarlos a temperatura ambiente (18°-25°C) por 30 minutos. Médico-Área
Analítica
2 Mantenimiento, acondicionamiento y suministro de reactivos de los Tecnólogo
contadores hematológicos N° 1 y 2 (Equipo ADVIA 2120i). Médico-Área
Analítica
3 Encendido del Interfase (computadoras, impresoras). Tecnólogo
Médico-Área
Analítica
4 Pasar los controles de calidad interno: control normal, control patológico Tecnólogo
alto, control patológico bajo de cada una de las pruebas. Médico-Área
Analítica
5 Entregar el reporte del control de calidad a los Médicos Asistentes Tecnólogo
Patólogos Clínicos para su respectiva validación. Médico-Área
Analítica
6 Cargar los racks, trackear y colocar las muestras en los contadores Tecnólogo
hematológicos N° 1 y 2 (Equipo ADVIA 2120i). Médico-Área
Analítica
7 Procesamiento de los resultados por equipo automatizado y Tecnólogo
debidamente supervisado por el personal responsable. Médico-Área
Analítica
8 Impresión de los resultados y engramparlos con su correspondiente Tecnólogo
orden. Médico-Área
Analítica
9 Procesamiento de las muestras para VSG en el analizador automático Tecnólogo
(Equipo Matic Original) previo ingreso de controles de calidad interno: Médico-Área
normal y patológico. Analítica
10 Resultados de Hemogramas son transmitidos automáticamente al Tecnólogo
Sistema Enterprise y resultados de VSG son registrados a la orden Médico-Área
médica solicitada. Analítica
11 Entregar la orden médica con los resultados de Hemogramas y VSG al Tecnólogo
Área Post Analítica. Médico-Área
Analítica

POST ANALITICA RESPONSABLE


1  Validación de controles de calidad interno de Hemogramas:
control normal, control patológico alto, control patológico bajo.
M. Patólogo
 Validación de controles de calidad interno de VSG: control Clínico
normal, control patológico.

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 33 de 66

2 Recepcionar las órdenes con los resultados de Hemogramas de M. Patólogo


pacientes de consultorio externo, hospitalización (junto con láminas) y Clínico
hematología clínica.

3
CONSULTORIO EXTERNO:
 Verificación y validación de resultados de Hemogramas en el
Sistema Enterprise si estos se encuentran dentro del rango
normal dando prioridad a los leucocitos de pacientes oncológicos
y hematología clínica. Aquellos que presenten alarmas y/o
resultados patológicos en valor crítico se solicita revisión de la
lámina para la verificación y su posterior validación.

HOSPITALIZACION:
 Lectura de láminas de paciente hospitalizados.
 Validación de los resultados de Hemogramas mediante un
correlato clínico patológico, observando el Deltacheck (histórico
del paciente en el Sistema Enterprise) y validación de las M. Patólogo
pruebas de VSG en el Sistema de Gestión Hospitalaria Clínico
mediante un correlato clínico patológico.

HEMATOLOGIA CLINICA:
 Verificación y validación de resultados de Hemogramas en el
Sistema Enterprise si estos se encuentran dentro del rango
normal. Aquellos que presentan alarmas (blastos, LUC elevado,
etc.) solo se procederán a validar el recuento de leucocitos, las
plaquetas y hemoglobina/hematocrito; procediéndose a eliminar
la fórmula leucocitaria cuya lectura será responsabilidad de
Hematología Clínica quien realizará su validación (se le entrega
a Hematología Clínica la orden con resultados, lámina coloreada
del frotis y coloración de reticulocitos cuando lo solicitan).

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Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


PROCESAMIENTO DE HEMOGRAMAS
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anticoagulada con EDTA


Aspirado de médula ósea

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

RESPONSABLE

1 Registro de pacientes de Hematología Clínica en el cuaderno de Tecnólogo


Hematología Especial. Médico
2 Coloración de las láminas de sangre periférica. Tecnólogo
Médico
3 Verificar el recuento de plaquetas de sangre periférica y luego entregar los Tecnólogo
resultados al Médico Patólogo Clínico para su posterior validación. Médico
4 Aquellas muestras que tienen pedido de recuento de reticulocitos se Tecnólogo
procederá a realizar extendido de la lámina y la coloración supravital. Médico
5 Entregar a Hematología Clínica la orden con resultados, la lámina Tecnólogo
coloreada del frotis y la lámina coloreada de reticulocitos para su Médico
respectiva lectura.

34
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


COLORACION DE ASPIRADOS DE MEDULA OSEA
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anticoagulada con EDTA


Aspirado de médula ósea

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

RESPONSABLE

1 Registro de pacientes de Hematología Clínica en el cuaderno de Tecnólogo


Especiales. Médico

2 Coloración de las láminas de aspirado de médula ósea. Tecnólogo


Médico
3 Entregar a Hematología Clínica las láminas de aspirado de médula Tecnólogo
coloreadas para su respectiva lectura. Médico

35
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

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AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


FRAGILIDAD OSMOTICA ERITROCITARIA INCUBADA
OBJETIVO Evaluar la capacidad que tiene los glóbulos rojos de soportar un aumento de
su contenido acuoso (resistencia osmótica eritrocitaria o ROE)

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anti coagulada con EDTA.

PRUEBA Fragilidad osmótica eritrocitaria incubada.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico de pruebas especiales – morfológicas. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra en tubo con EDTA de pacientes hospitalizados, Tecnólogo
referidos y consultorio externo por el personal del área de pruebas Médico
especiales – morfológicas. Usar sangre de un control sano con EDTA.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Colocar en un soporte con 12 tubos. Enumerarlos del 1 al 12. Tecnólogo
Médico
2 Colocar 5ml de cada solución de trabajo en diferentes concentraciones Tecnólogo
(0.1 al 0.85%) de la solución salina de trabajo. Usar sangre de un control Médico
sano con EDTA.
3 Añadir 50ul de sangre bien mezclada del paciente a cada tubo. Tecnólogo
Médico
4 Tapar los tubos y mezclar por inversión. Tecnólogo
Médico
5 Dejar en reposo por 30 minutos a temperatura ambiente. Proceder igual Tecnólogo
con el control. Médico
6 Centrifugar los tubos a 2500 RPM por 3 minutos. Tecnólogo
Médico
7 Comparar la absorbancia de cada uno de los sobrenadantes en un Tecnólogo
espectrofotómetro a 540nm. Médico

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HOSPITAL Fecha de
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NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 37 de 66

8 Tomar el sobrenadante de la concentración 0.85% como blanco y el Tecnólogo


0.10% como 100% de hemólisis. Médico
9 CALCULO DE LOS RESULTADOS: Aplicando la siguiente fórmula.
%Hemólisis = DO tubo problema x 100
DO tubo 12: 100% hemólisis

EJEMPLO: 10% (tubo 12) Lectura 105.1


40% (tubo 08) Lectura 70.0 Tecnólogo
Médico
%Hemólisis = 70.0 x 100 = 66.6%
105.1

Valor Normal: Hemólisis inicial: 0.50 - 0.45 %


Hemólisis final: 0.30 - 0.25 %
10 Registro de los resultados del % de hemólisis de los 12 tubos a la curva Tecnólogo
de fragilidad osmótica eritrocitaria incubada. Médico
11 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
12 Entregar la orden médica con los resultados de fragilidad osmótica Tecnólogo
eritrocitaria incubada al área post analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados de la prueba de fragilidad osmótica M. Patólogo
eritrocitaria mediante un correlato clínico patológico. Clínico

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NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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Departamento de Patología Clínica Página: 38 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


VISCOSIDAD SANGUINEA
OBJETIVO Determinar la viscosidad sanguínea midiendo el tiempo que demora una
cantidad determinada de sangre en recorrer un segmento de tubo, a T° y
presión constante.
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anti coagulada con citrato 3.2% (1:4)

PRUEBA Viscosidad sanguínea.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de viscosidad sanguínea. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato 3.2% (1:4) de pacientes Tecnólogo
hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal del área de Médico
pruebas especiales – morfológicas. Usar sangre de un control sano con
citrato de sodio 3.2% (1:4).
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Cargar una pipeta de glóbulos rojos con la sangre del paciente Tecnólogo
previamente mezclado hasta la marca 101. Médico
2 Colocar la pipeta en un soporte de tal manera que mantenga una Tecnólogo
posición estrictamente vertical. Médico
3 Cronometrar el tiempo de caída de la sangre hasta que llegue la marca Tecnólogo
1. Anotar el tiempo. Médico
4 Hacer lo mismo con el control normal, utilizando la misma pipeta. Tecnólogo
Médico
5 REPORTE DE RESULTADOS: Tecnólogo
El control normal debe de dar un valor alrededor de 7 minutos. Médico
6 Registro de resultados en el cuaderno de Especiales. Tecnólogo
Médico
7 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
8 Entregar la orden médica con los resultados de viscosidad sanguínea al Tecnólogo
área post analítica. Médico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 39 de 66

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados de la prueba de viscosidad sanguínea M. Patólogo
mediante un correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

39
HOSPITAL Fecha de
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 40 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


VISCOSIDAD SERICA
OBJETIVO Determinar la viscosidad sérica midiendo el tiempo que demora una
cantidad determinada de suero en recorrer un segmento de tubo, a T° y
presión constante.
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Suero

PRUEBA Viscosidad sérica

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de viscosidad sérica. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra en tubo seco de pacientes hospitalizados, referidos y Tecnólogo
consultorio externo por el personal del área de pruebas especiales – Médico
morfológicas. Usar sangre de un control sano.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Dejar coagular las muestras por 2 horas. Tecnólogo
Médico
6 Llevar los tubos a centrifugar a 3500 RPM durante 10 minutos para Tecnólogo
obtener suero. Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Cargar una pipeta de glóbulos rojos hasta la marca 101 con el suero del Tecnólogo
paciente. Médico
2 Colocar la pipeta en un soporte de tal manera que mantenga una Tecnólogo
posición estrictamente vertical. Médico
3 Cronometrar el tiempo desde que empieza a caer el suero hasta la Tecnólogo
marca 1. Médico

4 Hacer lo mismo con el control y con agua destilada usando la misma Tecnólogo
pipeta para los tres casos. Anotar el tiempo. Médico
5 CALCULO DE LOS RESULTADOS:
Dividir el tiempo obtenido con el suero del paciente y el tiempo del agua Tecnólogo
destilada. Hacer lo mismo con el control. Médico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 41 de 66

EJEMPLO: Tiempo del suero del paciente 2min 30 seg.


Tiempo del agua 1min 37 seg.

2.30/1.37 = 1.67 Valor Normal = 1.4-1.8


6 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
7 Entregar la orden médica con los resultados de viscosidad sanguínea al Tecnólogo
área post analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados de la prueba de viscosidad sérica mediante M. Patólogo
un correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 42 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


CÉLULAS LE
OBJETIVO Identificar las células fagocíticas del sistema inmune que han fagocitado el
material nuclear desnaturalizado de otro tipo de célula.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Capa leucoplaquetaria (Buffy coat)

PRUEBA Células LE

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de células LE. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra de pacientes hospitalizados, referidos y consultorio Tecnólogo
externo por el personal del área de pruebas especiales – morfológicas. Médico
3 Tomar 5ml de sangre en tubo seco con 12 perlas de vidrio. Agitar Tecnólogo
continuamente por 15 minutos para desfibrinar. Después de la agitación Médico
colocar en baño maría a 37°C durante 30 minutos.
4 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
5 Centrifugar la muestra a 3500 RPM durante 10 minutos. Tecnólogo
Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Eliminar el plasma hemolizado con una pipeta pasteur hasta más o Tecnólogo
menos 2 mm antes del paquete de leucocitos y plaquetas (Buffy coat). Médico
2 Enjuagar la pipeta pasteur y tomar aproximadamente 1 ml de la capa de Tecnólogo
leucocitos, trasvasar a un tubo de wintrobe. Médico
3 Centrifugar a 3000 RPM durante 20 minutos. Tecnólogo
Médico
4 Eliminar el plasma hemolizado con la pipeta pasteur hasta Tecnólogo
aproximadamente 2 a 3 mm antes del paquete de leucocitos y trasvasar Médico
a un portaobjetos limpio, homogenizado.
5 Realizar el frotis. Tecnólogo
Médico
6 Colorear con Wright durante 2 minutos y luego durante 5 minutos con Tecnólogo
agua destilada y observar mediante objetivo de inmersión. Médico
7 Entregar las láminas coloreadas al área post analítica. Tecnólogo
Médico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 43 de 66

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Identificación de las Células LE: material nuclear alterado de aspecto M. Patólogo
hialino, recubierto de anticuerpos y complemento fagocitado por los Clínico
polimorfos nucleares activos.
2 Verificar y validar resultados de la prueba de células LE según mediante M. Patólogo
una correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

43
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 44 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


TEST DE HAM
OBJETIVO Determinar hematíes lisados por suero fresco normal especialmente cuando
el suero es acidificado.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anti coagulada con citrato 3.2% (1:9)

PRUEBA Test de HAM

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para el test de Ham. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato 3.2% (1:9) y tubo seco de Tecnólogo
pacientes hospitalizados, consultorio externo y referidos por el personal Médico
del área de pruebas especiales – morfológicas. Usar sangre de un
control sano isogrupo (ABO Rh compatible).
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Lavar los eritrocitos tres veces con solución fisiológica normal, luego Tecnólogo
separar una suspensión al 50% en solución fisiológica. Médico
6 Se acidifica 0.5ml de suero agregando 0.05ml HCl 0.2N. Al mismo Tecnólogo
tiempo se prepara un testigo con 0.5ml de suero no acidificado. Médico
7 Se agrega a cada suero una gota de suspensión de eritrocitos al 50% Tecnólogo
Médico
8 Trabajar con 7 tubos. En el tubo 3 poner 0.5ml de suero normal e incubar Tecnólogo
a 56°C por 30 minutos. Médico
9 TUBO SUERO (0.5ML) ERITROCITOS (0.05ML) HCL 0.2N
HEMOLISIS
1 paciente paciente -- NO Tecnólogo
2 paciente paciente 0.05ml SI Médico
3 normal (56°C) paciente 0.05ml NO
4 normal paciente -- NO
5 normal paciente 0.05ml SI
6 paciente normal -- NO
7 paciente normal 0.05ml NO

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 45 de 66

10 Incubar todos los tubos a 37°C (excepto tubo N°3) por una hora. Tecnólogo
Médico
11 Centrifugar a 2000 RPM por 2 minutos y verificar la hemólisis en los Tecnólogo
sobrenadantes. Médico
12 REPORTE DE RESULTADOS:
En un paciente normal no debe haber hemólisis en ningún tubo.
Una ligera hemólisis puede ser notada en los tubos 1,3 y 4 Tecnólogo
La presencia de hemólisis en los tubos 2 y 5 establece el Médico
diagnostico HPN.
En algunos casos puede observarse hemólisis en el suero acidificado
presente en los tubos 2, 3 y 5; sospechar esferocitosis.
13 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
14 Entregar la orden médica con los resultados de test de Ham al área post Tecnólogo
analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados del test de Ham mediante una correlación M. Patólogo
clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 46 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


TEST DE SUCROSA
OBJETIVO Observar el efecto que sufren los hematíes en un medio de baja fuerza
iónica.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anti coagulada con citrato 3.2 % (1:9)

PRUEBA Test de Sucrosa

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para el test de sucrosa. M. Patólogo
Clínico
2 Toma de muestra en tubo con citrato 3.2% (1:9) de pacientes Tecnólogo
hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal del área Médico
de pruebas especiales – morfológicas. Usar sangre de un control sano.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Marcar 2 tubos de 12x 75 mm como P paciente y C control. Tecnólogo
Médico
2 Colocar 0.9ml de solución de sucrosa a cada tubo. Tecnólogo
Médico
3 Adicionar 0.1ml de sangre citratada de paciente y control Tecnólogo
respectivamente. Médico

4 Dejar en reposo a temperatura ambiente por 30 min. Tecnólogo


Médico
5 Mezclar cuidadosamente y centrifugar a 2000 RPM por3 minutos. Tecnólogo
Médico
6 REPORTE DE RESULTADOS: Se examina el sobrenadante Tecnólogo
Presencia de hemólisis: prueba positiva especifica HNP Médico
Ausencia de hemólisis: prueba negativa.

7 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo


cuaderno de registro correspondiente. Médico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 47 de 66

8 Entregar la orden médica con los resultados de test de Sucrosa al área Tecnólogo
post analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados del test de sucrosa mediante un correlato M. Patólogo
clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 48 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


DEFICIT DE LA GLUCOSA 6 FOSFATO DESHIDROGENASA
OBJETIVO Evaluar la deficiencia de enzima glucosa 6 fosfato deshidrogenasa.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anti coagulada con EDTA

PRUEBA Déficit de la glucosa 6 fosfato deshidrogenasa.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de Déficit de la M. Patólogo
glucosa 6 fosfato deshidrogenasa. Clínico
2 Toma de muestra en tubo con EDTA de pacientes hospitalizados, Tecnólogo
referidos y consultorio externo por el personal del área de pruebas Médico
especiales – morfológicas. Usar sangre de un control sano.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Determinar el hematocrito del paciente; si el hematocrito es menor Tecnólogo
del 30% centrifugar a baja velocidad y descartar el plasma hasta Médico
conseguir un hematocrito aproximado de 40 ± 5 %.
2 Marcar los 3 tubos de 12 x 75 mm:

REF. REF. PACIENTE


NORMAL POSITIVO Tecnólogo
Sangre normal 1.0ml 1.0ml - Médico
Sangre paciente - - 1.0ml
Sol. Nitrito - 50ul 50ul
dextrosa
Sol. Azul de - - 50ul
Metileno

3 Luego de una adecuada mezcla por inversión, colocar los tubos en Tecnólogo
baño maría a 37°C por 3 horas. Médico

48
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 49 de 66

4 Rotular 3 tubos de 16 x 150mm con 10 ml de agua destilada, a los Tecnólogo


que se les agregará 0.1ml del contenido de los tubos incubados y Médico
mezclar.
5 REPORTE DE RESULTADOS:
Observar si hay variación en el color después de un tiempo no menor
de 2 ni mayor de 10 minutos después de la dilución.
Tecnólogo
-Personas deficientes: tubo con muestra del paciente tendrá un Médico
color gris oscuro o café similar al tubo de referencia positivo.
-Personas no deficientes (normal): tubo desconocido.
6 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico

7 Entregar la orden médica con los resultados de la reducción de la


metahemoglobina al Médico Asistente Patólogo Clínico para su Tecnólogo
validación, dando prioridad a los pacientes referidos, hospitalizados y Médico
por último, consultorio externo.

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados de la prueba de la reducción de la M. Patólogo
metahemoglobina mediante un correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

49
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 50 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


CRIOGLOBULINAS Y CRIOFIBRINOGENO
OBJETIVO Observar la presencia o ausencia de precipitados de crioglobulinas o
criofibroinógeno, en el suero de una muestra de sangre

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Suero
Sangre anticoagulada con citrato 3.2 % (1:9)

PRUEBA Test de crioglobulinas y criofibrinógeno

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para las pruebas de crioglobulinas y M. Patólogo
criofibrinógeno. Clínico
2 Precalentar 2 tubos: tubo sin anticoagulante y tubo con citrato 3.2% Tecnólogo
(1:9) a 37°C por 15 minutos. Médico
3 Conservando esta temperatura se procede a la toma de muestra de
pacientes hospitalizados, referidos y consultorio externo por el personal Tecnólogo
del área de pruebas especiales – morfológicas. Médico
Hacer lo mismo con la muestra control de un paciente sano.
4 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
5 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Colocar los tubos sin anticoagulante tanto del paciente como del control Tecnólogo
en baño maría a 37°C durante una hora. Médico
2 Centrifugar los tubos con y sin anticoagulante, tanto del paciente como Tecnólogo
del control a 3000 RPM por 10 minutos. Médico
3 Colocar los sobrenadantes en tubos de Wintrobe hasta la marca 10 Tecnólogo
correctamente rotulados como suero y plasma. Médico
4 Guardar en refrigeración a 4°C por 24 horas. Tecnólogo
Médico
5 El tubo testigo se mantiene a 37°C. Tecnólogo
Médico
6 Observar precipitación de las crioglobulinas y criofibrinógeno a las 24 Tecnólogo
hrs. Los resultados negativos deben ser observados hasta por 7 días. Médico

50
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 51 de 66

7 Si es positivo, centrifugar los tubos de Wintrobe a 3500 RPM por 10 Tecnólogo


minutos. Médico

8 REPORTE DE RESULTADOS:
El criofibrinógeno se reporta como Negativo o Positivo.
Las crioglobulinas se reportan haciendo uso de la siguiente tabla:

Tubo de Wintrobe Crioglobulinas


0,01 120mg%
0,02 180mg%
0,03 240mg% Tecnólogo
0,04 300mg% Médico
0,05 370mg%
0,06 430mg%
0,07 500mg%
0,08 560mg%
0,09 625mg%

Confirmación del test Positivo:


Incubar ambos tubos a 37°C por 30 minutos. Si desaparece el
precipitado el test es verdaderamente positivo.
9 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
10 Entregar la orden médica con los resultados del test de crioglobulinas y Tecnólogo
criofibrinógeno al área post analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados del test de crioglobulinas y M. Patólogo
criofibrinógeno mediante un correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

51
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 52 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


CRIOAGLUTININAS
OBJETIVO Determinar la presencia de autoanticuerpos reactivos en frío.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Suero
Sangre anticoagulada con citrato 3.2% (1:9)

PRUEBA Prueba de crioaglutininas

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de crioaglutininas. M. Patólogo
Clínico
2 Precalentar en una estufa 2 tubos: tubo sin anticoagulante y tubo Tecnólogo
con citrato 3.2% (1:9) a 37°C por 15 minutos. Médico
3 Conservando esta temperatura se procede a la toma de muestra
de pacientes hospitalizados, referidos y consultorio externo por Tecnólogo
el personal del área de pruebas especiales – morfológicas. Médico
Hacer lo mismo con la muestra control. Colocar los tubos en
baño maría a 37°C por 1 hora.
4 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
5 Centrifugar los tubos sin anticoagulante del paciente y control a Tecnólogo
3500 RPM por 10 minutos. Obtener el suero. Médico
6 Centrifugar la sangre anticoagulada con citrato del paciente y del Tecnólogo
control a 3500 RPM por 10 minutos. Eliminar el plasma. Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Realizar 4 lavados de glóbulos rojos con solución salina obtenidos en
el tubo anticoagulante. Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 3 Tecnólogo
- 5% en solución salina. Médico
Nota: si las células muestran aún aglutinación serán necesariamente
más lavadas.
2 En cada tubo añadir 100ul de solución salina y una gota de suspensión Tecnólogo
de glóbulos rojos hasta el tubo N° 10. Proceder de la misma forma con Médico
el control.
3 Al primer tubo añadir 100ul de suero del paciente y mezclar bien con la Tecnólogo
pipeta, y de este tubo tomar 100ul y añadir al tubo N° 2, repetir esta Médico
operación hasta el tubo N° 10.

52
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 53 de 66

4 Mantener los tubos a 4°C por 1 hora. Tecnólogo


Médico
5 Centrifugar a 1000 RPM por 1 minuto y leer sobre lámpara, Tecnólogo
desprendiendo suavemente el botón hemático. Luego observar Médico
presencia de hemólisis y aglutinación.
6 Si hay aglutinación colocar los tubos a 37°C para observar una Tecnólogo
disminución o desaparición de la misma. Médico
7 Puede mantener la muestra a 4°C por 24 horas y luego centrifugar a Tecnólogo
1000 RPM por 1 minuto y leer. Médico
8 REPORTE DE RESULTADOS: Tecnólogo
Informe el resultado del último tubo donde aparezca una aglutinación Médico
visible; por ejemplo 1/128. Considere negativo el resultado si es menor
que 1/32.
9 Los resultados son registrados en la orden médica solicitada y al Tecnólogo
cuaderno de registro correspondiente. Médico
10 Entregar la orden médica con los resultados de la prueba de Tecnólogo
crioaglutininas al área post analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación del control normal. M. Patólogo
Clínico
2 Verificar y validar resultados de la prueba de crioaglutininas mediante un M. Patólogo
correlato clínico patológico. Clínico
3 Ingreso de resultados al Sistema de Gestión Hospitalaria. M. Patólogo
Clínico

53
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 54 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


PROTEINOGRAMA ELECTROFORETICO EN SUERO
OBJETIVO Detectar modificaciones del perfil proteico en suero.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Suero

PRUEBA Proteinograma electroforético en suero

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización del correlato clínico para la prueba de proteinograma M. Patólogo
electroforético en suero. Clínico
2 Toma de muestra en tubo seco de pacientes hospitalizados, referidos Tecnólogo
y consultorio externo por el personal del área de pruebas especiales Médico
– electroforesis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Dejar coagular las muestras por 2 horas. Tecnólogo
Médico
6 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos. Tecnólogo
Médico
7 Las muestras hemolizadas, lipémicas ó ictéricas serán desechadas Tecnólogo
ya que alteran los resultados. Médico
8 Se emitirá una orden para Bioquímica donde figure su sello y el M. Patólogo
nombre del Médico solicitante (dosaje de proteínas totales y Clínico
fraccionadas).
9 Alicuotar las muestras y separar un volumen de muestra para la
determinación de proteínas totales y fraccionadas (Servicio de Tecnólogo
Bioquímica), con su respectivo código de barra. Médico
En caso que las muestras no sean procesadas el mismo día deberán
ser almacenadas por congelamiento a – 20°C hasta su
procesamiento (hasta 1 mes).
10 Para el procesamiento de las muestras, se descongela durante 20 Tecnólogo
minutos, hasta alcanzar la temperatura ambiente. Médico

54
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 55 de 66

ANALITICA RESPONSABLE
1 Acondicionamiento del equipo (solución de lavado, solución decolorante, Tecnólogo
limpieza de placas y electrodos). Médico
2 En el programa Hydrasys seleccionar HYDRAGEL PROTEIN (E). Tecnólogo
Médico
3 Ingreso de la lista de trabajo las muestras a procesar, incluyendo la Tecnólogo
muestra control normal y patológico. Médico

4 La corrida se realiza con el kit HYDRAGEL 7 PROTEIN (E) para 7 Tecnólogo


muestras ó HYDRAGEL 15 PROTEIN (E) para 15 muestras. Médico
5 En el aplicador que viene en el kit se cargan las muestras; 10ul de suero Tecnólogo
sin diluir por cada muestra en los respectivos pocillos de aplicación. Médico
6 Dejar de difundir las muestras durante 5 minutos, después de la Tecnólogo
aplicación de la última muestra. Médico
7 En el equipo Hydrasys seleccionar el programa de trabajo 7 PROTEIN Tecnólogo
(E) Médico

8 Abrir la puerta del Módulo de migración y elevar los soportes de los Tecnólogo
electrodos y del aplicador. Médico
9 Colocar las esponjas tamponadas asirlas por los extremos de plástico y Tecnólogo
enganchar en los soportes de los electrodos. Médico
10 Abrir el gel, colocar un papel de filtro fino de manera rápida y uniforme Tecnólogo
sobre la superficie del gel para absorber el exceso de líquido. Médico
11 Dispensar 120ul de agua destilada en el tercio inferior del marco Tecnólogo
serigrafiado. Médico

12 Aplicar el gel en la superficie serigrafiada haciéndolo contactar con el Tecnólogo


agua. Asegurarse que no queden burbujas y que este alineado con el Médico
marco.
13 Devolver ambos soportes a su posición original. En esta posición las Tecnólogo
esponjan tamponadas no deben tocar el gel. Médico
14 Coger el aplicador, romper el plástico protector y colocarlo en la posición Tecnólogo
N° 6. Médico

15 Cerrar la puerta del módulo de migración e iniciar la corrida presionando Tecnólogo


la tecla start. Médico
16 Terminada la migración, retirar el aplicador, los tampones y desechar; Tecnólogo
retirar el gel y colocarlo en el soporte respectivo para la coloración. Médico
17 Seleccionar el programa de coloración N°1 PROTEIN E/B1-B2 (Negro Tecnólogo
Amido) colocar el gel en la cámara de coloración. Médico

18 Terminada la coloración retirar el gel de la cámara de coloración. Tecnólogo


Médico
19 Scanear el gel seco seleccionando el programa de lectura apropiado Tecnólogo
desde el programa Phoresis. Médico
20 Impresión de los resultados. Tecnólogo
Médico

55
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 56 de 66

21 Entregar los resultados de proteinograma electroforético al área post Tecnólogo


analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación de la muestra control. M. Patólogo
Clínico
2 Lectura e interpretación de la corrida electroforética de las muestras. M. Patólogo
Clínico
3 Validación de los resultados mediante un correlato clínico patológico. M. Patólogo
Clínico

56
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 57 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


PROTEINOGRAMA ELECTROFORETICO EN ORINA
OBJETIVO Detectar modificaciones del perfil proteico en orina.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Orina simple u orina de 24 horas.

PRUEBA Proteinograma electroforético en orina

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de preoteinograma M. Patólogo
electroforético en orina. Clínico
2 Recepción de muestras de pacientes hospitalizados, referidos y Tecnólogo
consultorio externo por el personal del área de electroforesis. Médico

3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador


4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Centrifugar las muestras a 3500 RPM durante 5 minutos. Tecnólogo
Médico
6 Se emitirá una orden para Bioquímica donde figure su sello y el M. Patólogo
nombre del Médico solicitante (dosaje de proteínas totales y albumina). Clínico
7 Alicuotar las muestras y separar un volumen de muestra para la
determinación de proteínas totales y fraccionadas (Servicio de Tecnólogo
Bioquímica), con su respectivo código de barra. Médico
En caso que las muestras no sean procesadas el mismo día deberán
ser almacenadas por congelamiento a – 20°C hasta su procesamiento
(hasta 1 mes).
8 Para el procesamiento de las muestras, se descongela durante 20 Tecnólogo
minutos, hasta alcanzar la temperatura ambiente. Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Acondicionamiento del equipo (solución de lavado, solución decolorante, Tecnólogo
limpieza de placas y electrodos). Médico
2 En el programa Hydrasys seleccionar HYDRAGEL PROTEIN HR 3. Tecnólogo
Médico
3 Ingreso de la lista de trabajo las muestras a procesar, incluyendo la Tecnólogo
muestra control normal. (Muestra control suero diluida 1/40) Médico

57
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 58 de 66

4 La corrida se realiza con el kit HYDRAGEL 7HR para 7 muestras. Tecnólogo


Médico
5 En el aplicador que viene en el kit se cargan las muestras; 10ul de orina Tecnólogo
sin diluir por cada muestra en los respectivos pocillos de aplicación. Médico
6 Dejar de difundir las muestras durante 5 minutos, después de la Tecnólogo
aplicación de la última muestra. Médico
7 En el equipo Hydrasys seleccionar el programa de trabajo 7/15 HR. Tecnólogo
Médico
8 Abrir la puerta del Módulo de migración y elevar los soportes de los Tecnólogo
electrodos y del aplicador. Médico
9 Colocar las esponjas tamponadas asirlas por los extremos de plástico y Tecnólogo
enganchar en los soportes de los electrodos. Médico
10 Abrir el gel, colocar un papel de filtro fino de manera rápida y uniforme Tecnólogo
sobre la superficie del gel para absorber el exceso de líquido. Médico
11 Dispensar 120ul de agua destilada en el tercio inferior del marco Tecnólogo
serigrafiado. Médico
12 Aplicar el gel en la superficie serigrafiada haciéndolo contactar con el Tecnólogo
agua. Asegurarse que no queden burbujas y que este alineado con el Médico
marco.
13 Devolver ambos soportes a su posición original. En esta posición las Tecnólogo
esponjan tamponadas no deben tocar el gel. Médico
14 Coger el aplicador, romper el plástico protector y colocarlo en la posición Tecnólogo
N° 5. Médico

15 Cerrar la puerta del módulo de migración e iniciar la corrida presionando Tecnólogo


la tecla start. Médico
16 Terminada la migración, retirar el aplicador, los tampones y desechar; Tecnólogo
retirar el gel y colocarlo en el soporte respectivo para la coloración. Médico
17 Seleccionar el programa de coloración N°4 HR ACID VIOLET, colocar el Tecnólogo
gel en la cámara de coloración. Médico
18 Terminada la coloración retirar el gel de la cámara de coloración. Tecnólogo
Médico
19 Scanear el gel seco seleccionando el programa de lectura apropiado Tecnólogo
desde el programa Phoresis. Médico
20 Impresión de los resultados. Tecnólogo
Médico
21 Entregar los resultados de proteinograma electroforético al área post Tecnólogo
analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación de la muestra control. M. Patólogo
Clínico
2 Lectura e interpretación de la corrida electroforética de las muestras. M. Patólogo
Clínico
3 Validación de los resultados mediante un correlato clínico patológico. M. Patólogo
Clínico

58
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 59 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


INMUNOFIJACION EN SUERO
OBJETIVO Identificación de cadenas pesadas y ligeras de la gammapatía monoclonal
en suero.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Suero

PRUEBA Inmunofijación en suero

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de inmunofijacion en M. Patólogo
suero. Clínico
2 Toma de muestra en tubo seco de pacientes hospitalizados, referidos y Tecnólogo
consultorio externo por el personal del área de electroforesis. Médico
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Dejar coagular las muestras por 2 horas. Tecnólogo
Médico
6 Centrifugar las muestras a 3500 RPM por 10 minutos. Tecnólogo
Médico
7 Las muestras hemolizadas, lipémicas ó ictéricas serán desechadas ya Tecnólogo
que alteran los resultados. Médico

8 Se emitirá una orden para Bioquímica donde figure su sello y el M. Patólogo


nombre del Médico solicitante (dosaje de proteínas totales y Clínico
fraccionadas).
9 Alicuotar las muestras y separar un volumen de muestra para la
determinación de proteínas totales y fraccionadas (Servicio de Tecnólogo
Bioquímica), con su respectivo código de barra. Médico
En caso que las muestras no sean procesadas el mismo día deberán
ser almacenadas por congelamiento a – 20°C hasta su procesamiento
(hasta 1 mes).
10 Para el procesamiento de las muestras, se descongela durante 20 Tecnólogo
minutos, hasta alcanzar la temperatura ambiente. Médico

59
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 60 de 66

ANALITICA RESPONSABLE
1 Acondicionamiento del equipo (solución de lavado, solución decolorante, Tecnólogo
limpieza de placas y electrodos). Médico
2 En el programa Hydrasys seleccionar HYDRAGEL IF. Tecnólogo
Médico
3 Ingreso de la lista de trabajo las muestras a procesar. Tecnólogo
Médico
4 La corrida se realiza con el kit HYDRAGEL 2/4 IF para 2 ó 4 muestras. Tecnólogo
Médico
5 Diluir los sueros antes de su aplicación para prevenir el efecto prozona,
consecuencia de elevados niveles de antígeno, mezclando de forma
homogénea. Tecnólogo
PISTA SUERO (uL) DILUYENTE Médico
(uL)
Pista IgG 20 100
ELP 30 60
6 Marcar con plumón en el aplicador las posiciones 1, 8 y 15 que no se Tecnólogo
usan en esta corrida. Médico
7 Aplicar 10uL de suero diluido adecuadamente en los respectivos pocillos
de aplicación.
EPL G A M K L
HYDRAGEL 2 3 4 5 6 7 Tecnólogo
2F (M1y Médico
M3)
(M2 y M4) 9 10 11 12 13 14

8 Dejar de difundir las muestras durante 5 minutos, después de la Tecnólogo


aplicación de la última muestra. Médico
9 En el equipo Hydrasys seleccionar el programa de trabajo 2 /4 IF ME/MD. Tecnólogo
Médico
10 Abrir la puerta del Módulo de migración y elevar los soportes de los Tecnólogo
electrodos y del aplicador. Médico
11 Colocar las esponjas tamponadas asirlas por los extremos de plástico y Tecnólogo
enganchar en los soportes de los electrodos. Médico
12 Abrir el gel, colocar un papel de filtro fino de manera rápida y uniforme Tecnólogo
sobre la superficie del gel para absorber el exceso de líquido. Médico
13 Dispensar 200ul de agua destilada en el tercio inferior del marco Tecnólogo
serigrafiado. Médico

14 Aplicar el gel en la superficie serigrafiada haciéndolo contactar con el Tecnólogo


agua. Asegurarse que no queden burbujas y que este alineado con el Médico
marco.
15 Devolver ambos soportes a su posición original. En esta posición las Tecnólogo
esponjan tamponadas no deben tocar el gel. Médico
16 Coger el aplicador, romper el plástico protector y colocarlo en la posición Tecnólogo
N° 6 cuando usa un aplicador; N° 3 y 9 cuando se usa dos aplicadores. Médico

60
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 61 de 66

17 Cerrar la puerta del módulo de migración e iniciar la corrida presionando Tecnólogo


la tecla start. Médico
18 Terminada la migración, retirar el aplicador, los tampones y desechar; Tecnólogo
proceder a la inmunofijación. Médico
19 Colocar la plantilla de aplicación de los antisueros. Hacer coincidir con la Tecnólogo
hendidura en la guía metálica. Médico
20 Aplicar los antisueros.
PISTA Plantilla 1,2 REACTIVO COLOR
y4
ELP 40 uL Solución fijadora Amarillo Tecnólogo
G 25 uL Antisuero anti Rosa Médico
gamma
A 25 uL Antisuero anti Azul oscuro
alfa
M 25 uL Antisuero anti mu Verde oscuro
K 25 uL Antisuero anti Verde claro
Kappa
L 25 uL Antisuero anti Azul claro
Lambda
21 Cerrar el módulo de migración y dar start. Tecnólogo
Médico
22 Al escuchar la señal audible abrir la puerta del módulo de migración y Tecnólogo
eliminar el exceso de reactivos usando los peines de papel de filtro. Dar Médico
start. (tiempo 15 segundos)
23 A la segunda señal audible se procede a retirar la guía de aplicación de Tecnólogo
los antisueros y se coloca un papel de filtro grueso sobre el gel. Médico
24 Cerrar la puerta del módulo de migración y dar start (se inicia el proceso Tecnólogo
de secado del gel). Médico
25 Una vez secado el gel, retirar el gel y colocarlo en el soporte respectivo Tecnólogo
para la coloración. Médico
26 Seleccionar el programa de coloración N°2 IF ACID VIOLET y colocar el Tecnólogo
gel en la cámara de coloración. Médico
27 Terminada la coloración retirar el gel de la cámara de coloración. Tecnólogo
Médico
28 Scanear el gel seco seleccionando el programa de lectura apropiado Tecnólogo
desde el programa Phoresis. Médico
29 Impresión de los resultados. Tecnólogo
Médico
30 Entregar los resultados de inmunofijación en suero al area post analítica. Tecnólogo
Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Lectura e interpretación de la corrida electroforética de las muestras. M. Patólogo
Clínico
2 Validación de los resultados mediante un correlato clínico patológico. M. Patólogo
Clínico

61
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 62 de 66

AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


INMUNOFIJACION EN ORINA
OBJETIVO Identificación de cadenas pesadas y ligeras de la gammapatía monoclonal
en orina.

ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas


especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Orina simple u orina de 24 horas.

PRUEBA Inmunofijación en orina.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de inmunofijacion en M. Patólogo
orina. Clínico
2 Recepción de muestras de pacientes hospitalizados, referidos y Tecnólogo
consultorio externo por el personal del área electroforesis. Médico

3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador


5 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
6 Centrifugar las muestras a 3500 RPM durante 5 minutos. Tecnólogo
Médico
7 Se emitirá una orden para Bioquímica donde figure su sello y el M. Patólogo
nombre del Médico solicitante (dosaje de proteínas totales y albumina). Clínico
8 Alicuotar las muestras y separar un volumen de muestra para la
determinación de proteínas totales y fraccionadas (Servicio de
Bioquímica), con su respectivo código de barra. Tecnólogo
En caso que las muestras no sean procesadas el mismo día deberán Médico
ser almacenadas por congelamiento a – 20°C hasta su procesamiento
(hasta 1 mes).
9 Para el procesamiento de las muestras, se descongela durante 20 Tecnólogo
minutos, hasta alcanzar la temperatura ambiente. Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Acondicionamiento del equipo (solución de lavado, solución decolorante, Tecnólogo
limpieza de placas y electrodos). Médico
2 En el programa Hydrasys seleccionar HYDRAGEL BENCE JONES. Tecnólogo
Médico

62
HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 63 de 66

3 Ingreso de la lista de trabajo las muestras a procesar. Tecnólogo


Médico
4 La corrida se realiza con el kit HYDRAGEL 2 BENCE JONES para 2 ó 4 Tecnólogo
muestras. Médico

5 Diluir los sueros antes de su aplicación para prevenir el efecto prozona,


consecuencia de elevados niveles de antígeno, mezclando de forma
homogénea. Tecnólogo
PISTA SUERO (uL) DILUYENTE Médico
(uL)
Pista IgG 20 100
ELP 30 60
6 Marcar con plumón en el aplicador las posiciones 1, 8 y 15 que no se Tecnólogo
usan en esta corrida. Médico
7 Aplicar 10uL de suero diluido adecuadamente en los respectivos pocillos
de aplicación.
EPL G A M K L
HYDRAGEL 2 3 4 5 6 7 Tecnólogo
2F (M1y M3) Médico
(M2 y M4) 9 10 11 12 13 14

8 Dejar de difundir las muestras durante 5 minutos, después de la Tecnólogo


aplicación de la última muestra. Médico
9 En el equipo Hydrasys seleccionar el programa de trabajo 2 BENCE Tecnólogo
JONES ME/MD. Médico
10 Abrir la puerta del Módulo de migración y elevar los soportes de los Tecnólogo
electrodos y del aplicador. Médico
11 Colocar las esponjas tamponadas asirlas por los extremos de plástico y Tecnólogo
enganchar en los soportes de los electrodos. Médico

12 Abrir el gel, colocar un papel de filtro fino de manera rápida y uniforme Tecnólogo
sobre la superficie del gel para absorber el exceso de líquido. Médico
13 Dispensar 200ul de agua destilada en el tercio inferior del marco Tecnólogo
serigrafiado. Médico

14 Aplicar el gel en la superficie serigrafiada haciéndolo contactar con el Tecnólogo


agua. Asegurarse que no queden burbujas y que este alineado con el Médico
marco.
15 Devolver ambos soportes a su posición original. En esta posición las Tecnólogo
esponjan tamponadas no deben tocar el gel. Médico
16 Coger el aplicador, romper el plástico protector y colocarlo en la posición Tecnólogo
N° 6 cuando usa un aplicador; N° 3 y 9 cuando se usa dos aplicadores. Médico

17 Cerrar la puerta del módulo de migración e iniciar la corrida presionando Tecnólogo


la tecla start. Médico

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HOSPITAL Fecha de
Marzo 2018
NACIONAL Elaboración:
GUILLERMO
ALMENARA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
IRIGOYEN Aprobación:

Servicio de Hematología Versión: 02

Departamento de Patología Clínica Página: 64 de 66

18 Terminada la migración, retirar el aplicador, los tampones y desechar; Tecnólogo


proceder a la inmunofijación. Médico

19 Colocar la plantilla de aplicación de antisueros y aplicar los antisueros. Tecnólogo


Médico
20 Aplicar los antisueros.
PISTA Plantilla 1,2 REACTIVO COLOR
y4
ELP 40 uL Solución fijadora Amarillo Tecnólogo
G 25 uL Antisuero anti Rosa Médico
gamma
A 25 uL Antisuero anti Azul oscuro
alfa
M 25 uL Antisuero anti mu Verde oscuro
K 25 uL Antisuero anti Verde claro
Kappa
L 25 uL Antisuero anti Azul claro
Lambda
21 Cerrar el módulo de migración y dar start. Tecnólogo
Médico
22 Al escuchar la señal audible abrir la puerta del módulo de migración y Tecnólogo
eliminar el exceso de reactivos usando los peines de papel de filtro. Dar Médico
start (tiempo 15 segundos)
23 A la segunda señal audible se procede a retirar la guía de aplicación de Tecnólogo
los antisueros y se coloca un papel de filtro grueso sobre el gel. Médico
24 Cerrar la puerta del módulo de migración y dar start (se inicia el proceso Tecnólogo
de secado del gel). Médico
25 Una vez secado el gel, retirar el gel y colocarlo en el soporte respectivo Tecnólogo
para la coloración. Médico
26 Seleccionar el programa de coloración N°2 IF ACID VIOLET y colocar el Tecnólogo
gel en la cámara de coloración. Médico
27 Terminada la coloración retirar el gel de la cámara de coloración. Tecnólogo
Médico
28 Scanear el gel seco seleccionando el programa de lectura apropiado Tecnólogo
desde el programa Phoresis. Médico
29 Impresión de los resultados. Tecnólogo
Médico
30 Entregar los resultados de inmunofijación en orina al área post analítica. Tecnólogo
Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Lectura e interpretación de la corrida electroforética de las muestras. M. Patólogo
Clínico
2 Validación de los resultados mediante un correlato clínico patológico. M. Patólogo
Clínico

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Marzo 2018
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AREA DE MORFOLOGICAS - PRUEBAS ESPECIALES


ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA
OBJETIVO Detectar las anomalías cualitativas (hemoglobinas anormales S,C,D,E, etc)
y cuantitativas (aumento de Hb F o Hb A). Separa las moléculas en función
de su carga eléctrica.
ALCANCE A todo el personal que labora en el área de morfológicas-pruebas
especiales del Servicio de Hematología del Departamento de Patología
Clínica.

MUESTRA Sangre anticoagulada con EDTA

PRUEBA Electroforesis de hemoglobina

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

PRE ANALITICA RESPONSABLE


1 Realización de correlato clínico para la prueba de electroforesis de M. Patólogo
hemoglobina. Clínico
2 Toma de muestra en tubo con EDTA de pacientes hospitalizados, Tecnólogo
referidos y consultorio externo por el personal del área de Médico
electroforesis.
3 Registro de las muestras al Sistema de Gestión Hospitalaria. Digitador
4 Enumeración de las muestras y orden médica del paciente. Tecnólogo
Médico
5 Si es necesario, almacenar las muestras entre 2 y 8 °C hasta 5 días. Tecnólogo
Médico

ANALITICA RESPONSABLE
1 Determinar el valor de hemoglobina del paciente. Tecnólogo
Médico
2 Agitar el tubo primario antes de tomar el volumen de sangre total que se Tecnólogo
va a tratar. Médico
3 Preparación del hemolizado: Centrifugar la sangre no coagulada a 5 000 Tecnólogo
RPM durante 5 minutos y descartar el plasma. Lavar los glóbulos rojos 2 Médico
veces con 10 volúmenes de solución salina.
4 Eliminar el exceso de solución salina que hay en la superficie del botón Tecnólogo
de glóbulos rojos lavados y luego agitar en el vórtex. Médico

5 En un criovial dispensar 260ul del Reactivo solución hemolizante Tecnólogo


HYDRAGEL HEMOGLOBIN (E) y añadir 20ul de los glóbulos rojos Médico
empaquetados.
6 Agitar en el vórtex durante 10 segundos e incubar 5 minutos a Tecnólogo
temperatura ambiente. Médico

65
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GUILLERMO
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha de
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Departamento de Patología Clínica Página: 66 de 66

7 Centrifugar el hemolizado a 10 000 RPM durante 5 minutos. Tecnólogo


Médico
8 El análisis se realiza con el sobrenadante del hemolizado. Tecnólogo
Médico
9 Acondicionamiento del equipo (solución de lavado, solución decolorante, Tecnólogo
limpieza de placas y electrodos). Médico
10 En el programa Hydrasys seleccionar HYDRAGEL HEMOGLOBIN (E). Tecnólogo
Médico
11 Ingreso de la lista de trabajo las muestras a procesar, incluyendo la Tecnólogo
muestra control patológica. Médico
12 La corrida se realiza con el kit HYDRAGEL 7 HEMOGLOBIN (E) para 7 Tecnólogo
muestras. Médico
13 En el aplicador que viene en el kit se cargan las muestras; 10ul del Tecnólogo
hemolizado por cada muestra en los respectivos pocillos de aplicación. Médico
14 Dejar de difundir las muestras durante 5 minutos, después de la Tecnólogo
aplicación de la última muestra. Médico
15 En el equipo Hydrasys seleccionar el programa de trabajo 7/15 Hb. Tecnólogo
Médico
16 Abrir la puerta del Módulo de migración y elevar los soportes de los Tecnólogo
electrodos y del aplicador. Médico
17 Colocar las esponjas tamponadas asirlas por los extremos de plástico y Tecnólogo
enganchar en los soportes de los electrodos. Médico
18 Abrir el gel, colocar un papel de filtro fino de manera rápida y uniforme Tecnólogo
sobre la superficie del gel para absorber el exceso de líquido. Médico
19 Dispensar 150ul de la solución Ethylene glicol en el tercio inferior del Tecnólogo
marco serigrafiado. Médico
20 Aplicar el gel en la superficie serigrafiada haciéndolo contactar con el Tecnólogo
agua. Asegurarse que no queden burbujas y que este alineado con el Médico
marco.
21 Devolver ambos soportes a su posición original. En esta posición las Tecnólogo
esponjan tamponadas no deben tocar el gel. Médico
22 Coger el aplicador, romper el plástico protector y colocarlo en la posición Tecnólogo
N° 4. Médico
23 Cerrar la puerta del módulo de migración e iniciar la corrida presionando Tecnólogo
la tecla start. Médico
24 Terminada la migración, retirar el aplicador, los tampones y desechar; Tecnólogo
retirar el gel y colocarlo en el soporte respectivo para la coloración. Médico
25 Seleccionar el programa de coloración Hb, colocar el gel en la cámara de Tecnólogo
coloración. Médico
26 Terminada la coloración extraer el gel de la cámara de coloración. Tecnólogo
Médico
27 Scanear el gel seco seleccionando el programa de lectura apropiado Tecnólogo
desde el programa Phoresis. Médico

28 Impresión de los resultados. Tecnólogo


Médico

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29 Entregar los resultados de electroforesis de hemoglobina al área post Tecnólogo


analítica. Médico

POST ANALITICA RESPONSABLE


1 Validación de la muestra control. M. Patólogo
Clínico
2 Lectura e interpretación de la corrida electroforética de las muestras. M. Patólogo
Clínico
3 Validación de los resultados mediante un correlato clínico patológico. M. Patólogo
Clínico

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7.5 INVENTARIO DE PROCEDIMIENTOS DEL SERVICIO DE HEMATOLOGIA

DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA CLINICA –HNGAI

N° ANALISIS SECCION

1 Perfil completo de coagulación Hemostasia-Trombosis

2 Tiempo de sangría Hemostasia-Trombosis

3 Tiempo de protrombina Hemostasia-Trombosis

4 Tiempo de tromboplastina parcial activada Hemostasia-Trombosis

5 Tiempo de trombina Hemostasia-Trombosis

6 Fibrinógeno Hemostasia-Trombosis

7 Recuento de plaquetas Hemostasia-Trombosis

8 Retracción del coagulo Hemostasia-Trombosis

9 Determinaron de dímero D Hemostasia-Trombosis-E

10 Dosaje de factores extrínsecos de la coagulación: V, VII y X Hemostasia-Trombosis-E

11 Dosaje de factores intrínsecos de la coagulación: VIII, IX, XI, XII Hemostasia-Trombosis-E

12 Dosaje de inhibidores del factor VII y factor IX Hemostasia-Trombosis-E

13 Agregación plaquetaria Hemostasia-Trombosis-E

14 Síndrome de plaqueta pegajosa Hemostasia-Trombosis-E

15 Determinación del cofactor de ristocetina Hemostasia-Trombosis-E

16 Dosaje del factor Von Willebrand antigénico Hemostasia-Trombosis-E

17 Detección de anticuerpos antiplaquetarios Hemostasia-Trombosis-E

68
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18 Determinación de anticoagulante lúdico Hemostasia-Trombosis-E

19 Determinación de proteína S Hemostasia-Trombosis-E

20 Dosaje del activador del plasminógeno tisular Hemostasia-Trombosis-E

21 Dosaje del inhibidor del activador del plasminógeno tisular Hemostasia-Trombosis-E

22 Dosaje de antitrombina III Hemostasia-Trombosis-E

23 Determinación de plasminógeno Hemostasia-Trombosis-E

24 Determinación de la resistencia a la proteína C activada Hemostasia-Trombosis-E

25 Dosaje de alfa-2 antiplasmina Hemostasia-Trombosis-E

26 Resistencia a la aspirina Hemostasia-Trombosis-E

27 Determinación de homocisteina Hemostasia-Trombosis-E

28 Dosaje de proteína C Hemostasia-Trombosis-E

29 Dosaje de anticardiolipinas de IgG Hemostasia-Trombosis-E

30 Dosaje de anticardiolipinas de IgM Hemostasia-Trombosis-E

31 Dosaje de ß2 glicoproteína de IgG Hemostasia-Trombosis-E

32 Dosaje de ß2 glicoproteína de IgM Hemostasia-Trombosis-E

33 Hemograma completo por equipo automatizado Morfológicas

34 Dosaje de hemoglobina y hematocrito por equipo automatizado Morfológicas

35 Determinación de las constantes corpusculares Morfológicas

36 Estudio de frotis de sangre periférica Morfológicas

37 Determinación de velocidad de sedimentación globular Morfológicas

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38 Recuento de leucocitos – Índice de Reticulocitos Morfológicas

39 Examen de células LE Morfológicas- E

40 Test de crioglobulinas Morfológicas-E

41 Test de crioaglutininas cualitativo y semicuantitativo Morfológicas-E

42 Test de Ham Morfológicas-E

43 Test de Sucrosa Morfológicas-E

44 Fragilidad osmótica Morfológicas-E

45 Viscosidad sanguínea Morfológicas-E

46 Viscosidad sérica Morfológicas-E

47 Déficit de la Glucosa 6 Fosfato Deshidrogenasa Morfológicas-E

48 Inmunofijación en orina Morfológicas-E

49 Inmunofijación en suero Morfológicas-E

50 Electroforesis de hemoglobina Morfológicas-E

51 Determinación de proteinogramas en orina Morfológicas-E

52 Determinación de proteinogramas en suero Morfológicas-E

70

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