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Con el micro pipeta, poner un punto Procedemos a extender la sangre
de sangre, sobre la lámina. sobre la lámina.
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Agregar sobre la muestra, la tinta Luego enjuagar con abundante agua.
Wright, hasta cubrir por completo, la
muestra.
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Estas de alta velocidad con las de baja
velocidad son empleadas básicamente en
CENTRIFUGACION. fraccionamiento subceluar. (2)
o ULTRACENTRIFUGAS.
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Procedimiento centrifugación: imprescindible calcular de nuevo esta
relación para cada centrífuga. (3)
A continuación, vamos a conocer el modo
de empleo de la centrifuga y el objetivo que Luego de estar equilibrada y conocer
debemos tener en cuenta, el objetivo que la graduación de la maquina en el
deseamos lograr que es la separación de la tiempo que deseemos, programarla
muestra de sangre periférica. para obtener el resultado que
necesitamos o que buscamos.
Para este procedimiento debemos tener en A continuación muestro la evidencia
cuenta algunos aspectos, fundamental para el del proceso del experimento llevado
correcto uso de esta máquina: cabo en la práctica.
primero que todo, esta máquina la
fuerza de gravedad que ejerce el Acomodar, de tal manera que quede
horizontal. balanceado.
Posee unos almacenamientos
llamados bogues en donde se procede
a colocar el tubo con la muestra de
sangre.
Siempre tiene que quedar de manera
balanceada, en caso de que no quede
balanceada la maquina comenzara a
saltar, provocando que se rompan los
tubos de muestra esto podría dañar la
máquina, por eso en este caso
debemos proceder a pagarla muy
rápidamente.
COMO PUEDO YO CALCULAR O
CONVERTIR, REVOLUCIONES A
GRAVEDADES?
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revoluciones por minuto (rpm) Debido a procedemos a emplear un gradiente
densidad, con el que facilitaremos el objetivo
durante 5min. deseado, aquí podremos demostrar como el
¿Cómo lo sabemos? gradiente, es el elemento indicado para este
tipo de procedimientos debido a que facilita
Muy simple en la imagen podemos ver que la sedimentación de los componentes, según
aparece el número (40), pero en realidad este su densidad.
se multiplica por 100, a lo que equivale
realmente la conversión. GRADIENTE DE
Nuevamente, centrifugar durante DENSIDAD.
15min.
FICOLL-PAQUE.
Este método se basa en la aplicación de
centrifugación de gradiente de densidad
Ficoll-Paque en tubos cónicos de 15/50 mL o
tubos de muestras de sangre,
respectivamente. (5)
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¿Qué es un gradiente de
densidad? o GRADIENTE CONTINUO:
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Alistar el tubo de muestra, para Posteriormente colocar, la
poner en el ficoll hypaque. muestra de sangre periférica.
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Luego se procede a colocar este tubo Estos resultados han sido obtenidos por
tal cual, en la centrifuga, medio del procedimiento de tinción, es un
equilibrándola con otro tubo que método empleado de hace más de 100 años
contiene la muestra de suero, con la por medio del cual se busca, poder diferenciar
misma cantidad para lograr un en este caso los tipos de células en la sangre
equilibrio. las más visibles que son los glóbulos rojos y
los glóbulos blancos.
A continuación podremos evidenciar, el
procedimiento llevado a cabo en la práctica
de los estudiantes en la universidad
cooperativa, pudiendo cumplir esta
competencia.
Se programa la centrifuga a
4000(rpm) durante 15mi.
3. RESULTADOS.
Proceso de tinción.
Palabra clave: tinta Wright, glóbulos Es muy fácil notar la diferencia entre estos dos tipos de
células. A simple vista podemos visualizarlos y diferenciarlos.
rojos, glóbulos blancos.
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Glóbulos blancos,
Glóbulos
podemos ver su
rojos.
El lente empleado en estas imágenes que
forma larga y su
estamos plasmando es de 10.10 que hendidura.
equivale, a 100 veces aumentado.
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PLASMA
WBCs y plaquetas.
RBSc
PLASMA
RBSc
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debido a que se vinieron también los glóbulos En este segundo resultado, podemos observar
rojos, con esta proceso podemos concluir que cómo, la sangre se ha podio separar mucho
la sangre no pudo ser separada, con una sola más, se ve muy simplemente, como cada tipo
centrifugación. de células están de forma de gradientes
continuo, ósea que van en segmentos
descendentes.
Resultados de la Ahora vamos a abstraer los glóbulos blancos
centrifugación, con el para proceder a hacer una nueva
gradiente de densidad, ficoll- centrifugación, para completar la separación
hypaque. y poder obtener el mejor resultado, separando
por completo los glóbulos rojos de los
blancos.
Ficoll-hypaque.
Glóbulos blancos.
Para el siguiente procedimiento,
entonces vamos a extraer los glóbulos
blancos y en nuevo tubo se mezclaran
con un poco de suero, para de nuevo
centrifugarla y completar el proceso
Glóbulos rojos.
de separación, y poder analizar más
detenidamente los glóbulos blancos.
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MEZCLA
. TOTAL, SEPARACION DE LAS CELULAS
DE LA SANGRE; LOS GLOBULOS
RESULTADO FINAL. BLANCOS.
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OBSERVACIÓN:
Glóbulos blancos.
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4. DISCUSIÓN. evidencia de que si es posible la separación
de las células, en este caso en la sangre.
Para evaluar el laboratorio, terminado este
proceso, tan largo a mi parecer, cada método Todo esto fue facilitado gracias al elemento
que pudimos emplear, fue de gran ayuda, clave empleado llamado, ficoll-hypaque, que
cada etapa culminada arrojo diferentes en comparación a la primera centrifugación,
resultados, permitiéndonos diferentes sin el uso de este, no fue posible la separación
conocimientos, como poder observar que completa de las células de la sangre, a
sucedía con cada método. diferencia que con su empleo permitió la
completa separación, de las células
La tinción para empezar es método que nos permitiéndonos llegar al resultado final
ayuda en primer lugar poder distinguir las deseado, para poder observar, ser testigos, y
células de la sangre, en este caso las más constatar la veracidad de estos métodos.
notorias como lo son los glóbulos rojos, de los
blancos; gracias a este método que pudimos
observar, pudimos concluir que en la sangre
los glóbulos rojos son mayoría, los glóbulos
5. CONCLUSIÓN.
blancos son minoría.
El proceso de centrifugación, es un método Para métodos de centrifugación,
que se emplea por medio de la centrifuga, en recomendamos el uso de ficoll-hypaque, para
donde por medio de fuerza de gravedad en obtener mejores y más acertados resultados
este caso horizontal, permite la separación de de lo que buscamos. Hoy pudimos comprobar
un elemento. En la primera centrifugación que con este método obtener resultados de
ejercida, pudimos observar que no fue alta calidad.
suficiente, aunque la sangre aparentemente
estaba separada, al momento de tomarla fue Sin el gradiente de sedimentación, hubiese
imposible, por eso se prosiguió a continuar sido imposible obtener la completa
con una nueva centrifugación tomando de separación de células y componentes de la
esta muestra anterior sangre nuevamente, que sangre y gracias a todo este proceso pudimos
posteriormente, fue centrifugada añadiendo el aprender estos métodos científicos empleados
gradiente de densidad, gracias a este pudimos para la separación de componentes, desde su
tener un mejor resultado, pudimos ver como realización, y poder saber que es más
obtuvimos el resultado de una separación de eficiente.
gradiente de forma continua, esto significa
que el resultado estaba en el tubo de forma
descendente.
Luego posteriormente al tomar nuevamente 6. BIBLIOGRAFIA.
una muestra de este resultado y mezclarlo con
suero, procedimos a centrifugar de nuevo,
dándonos por resultado final, la total 1. https://www.quia.com/files/quia/users/
separación e donde pudimos obtener la cmontelara/1101/Informes/Presentaciy
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yn_Rosa_Hiraldo_La_sangre_y_sus_co
mponentes.pdf
2. https://www.eppendorf.com/product-
media/doc/es/169514/Eppendorf_Cent
rifugation_Application-
Note_372_Centrifuge-5920-
R_Centrifuge-5910-R_Faster-Isolation-
PBMC-Ficoll-Paque-Plus-Eppendorf-
Multipurpose-Benchtop-Centrifuges-
5920-R-5910-R.pdf
3. http://www.noticiascientificas.info/201
1/02/velocidad-de-centrifugacion-
conversion.html
4. https://www.cun.es/diccionario-
medico/terminos/gradiente-densidad
5. https://www.eppendorf.com/product-
media/doc/es/169514/Eppendorf_Cent
rifugation_Application-
Note_372_Centrifuge-5920-
R_Centrifuge-5910-R_Faster-Isolation-
PBMC-Ficoll-Paque-Plus-Eppendorf-
Multipurpose-Benchtop-Centrifuges-
5920-R-5910-R.pdf
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