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Aricapa- Trujillo Leidy Lorena, Ospina-López Leiza Danitza, Forero-Trujillo Luis Felipe
Estudiantes de la Universidad de la Amazonia, Facultad de Ciencias Básicas,
Programa de Biología
Florencia, Caquetá
PRE-LABORATORIO
Los métodos de esterilización pueden ser por medios físicos o químicos. Los
físicos incluyen las radiaciones (rayos solares y ultravioletas), el calor que
puede ser seco (flameo, estufa, horno y horno con ventilador) o húmedo
(ebullición y vapor de agua a presión) y por filtración. Los químicos lo
constituyen las soluciones químicas (glutaraldehído, formaldehído,
hipoclorito de sodio y otros) y el gas de óxido de etileno(Windows,
Corporation, Hori, & Sakajiri, n.d.)
1. Térmicos (físico)
Vapor bajo presión / calor húmedo
Aire caliente / calor seco
Microondas / radiación no ionizante
2. Químicos
Óxido de etileno gaseoso
Formaldehido gaseoso
Peróxido de hidrogeno plasmático / vapor
Ozono gaseoso
Solución activada de glutaraldehído
Solución de ácido paracético
Esterilización: Agentes físicos
Calor
Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del
calor. El calor provoca desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de
las membranas y/o procesos oxidativos irreversibles en los microorganismos.
La efectividad del calor como método de esterilización depende de:
Temperatura
Tiempo de exposición
Calor Húmedo
El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos
efectos se deben principalmente a dos razones:
El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras
biológicas (DNA, RNA, proteínas, etc) son producidas por reacciones que
eliminan agua. Por lo tanto, reacciones inversas podrían dañar a la célula a
causa de la producción de productos tóxicos. Además, las estructuras
secundarias y terciarias de las proteínas se estabilizan mediante uniones
puente de hidrógeno intramoleculares que pueden ser reemplazadas y rotos
por el agua a altas temperaturas.
El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más
elevado que el aire. Por lo que, los materiales húmedos conducen el calor
mucho más rápidamente que los materiales secos debido a la energía
liberada durante la condensación.
La autoclave es el aparato más comúnmente utilizado en los laboratorios para
esterilizar cultivos y soluciones que no formen emulsiones con el agua y que no se
desnaturalicen a temperaturas mayores a 100 °C. Una temperatura de 121 °C (una
atmósfera de sobrepresión) con un tiempo de exposición mayor a 15 minutos sirve
para destruir organismos formadores de esporas.(Ibarra, 2013)
Calor Seco
El calor seco produce desecación de la célula, efectos tóxicos por niveles elevados
de electrolitos, procesos oxidativos y fusión de membranas. Estos efectos se deben
a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en
contacto con éstos. El aire es mal conductor del calor, y el aire caliente penetra más
lentamente que el vapor de agua en materiales porosos. La acción destructiva del
calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está
seco o la actividad de agua del medio es baja. Esto se debe a que las proteínas se
estabilizan mediante uniones puente de hidrógeno intermoleculares que son más
difíciles de romper por el calor seco.
La estufa de esterilización es el artefacto utilizado en los laboratorios para
esterilizar por calor seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposición
que la autoclave. La temperatura varía entre 120° y 180°C, requiriéndose distintos
tiempos de exposición. A 140°C se necesitan por lo menos 5 horas de exposición,
mientras que a 160°C se requieren al menos 2 horas de exposición.
Sirve para esterilizar material de vidrio. El papel y el algodón no pueden ser
esterilizados a más de 160°C.
METODOLOGÍA
Procedimiento.
RESULTADOS
CONCLUSIONES
POS-LABORATORIO
1. Cuáles son los métodos para verificar la efectiva esterilización de la
autoclave
Existen métodos o controles pueden ser de tres tipos físicos, químicos y biológicos:
Controles químicos
Los controles químicos se realizan comúnmente mediante productos comerciales,
consistentes en sustancias químicas que cambian de color si se cumple uno o varios
elementos clave (temperatura, humedad, presión, concentración del agente
esterilizante) en el proceso de esterilización.
Para el caso de los controles químicos de funcionamiento para autoclaves como el
Bowie y Dick, que consiste en ubicar una lámina de control en el centro de un
paquete textil estándar, para detectar la penetración del vapor en el interior del
paquete. Se realiza siempre en las mismas condiciones: primer ciclo del día, cámara
vacía, el paquete es situado en la zona más fría (anteroinferior, sobre la llave de
purgado), en horizontal, a 134ºC durante 210 segundos. El indicador debe cambiar
de manera uniforme y en toda su longitud (7,18).
Controles biológicos
Los controles biológicos son los únicos universalmente aceptados y sirven para
verificar la eficacia de la esterilización. Consisten en preparaciones estandarizadas
de esporas de microorganismos muy resistentes, que son procesadas en el
esterilizador para comprobar si se han destruido o no y, por tanto, si se ha llevado
a cabo o no el proceso de esterilización.
Una espora de Bacillus stearotermophilus se utiliza para los procesos de
esterilización con vapor de agua o con vapores químico. Tras el proceso de
esterilización se incuban durante 24-48 horas y, posteriormente, en el caso de que
haya esporas vivas éstas volverán a su forma vegetativa, y se reproducirán
teniendo lugar un crecimiento bacteriano que será detectable por la aparición de
turbidez o por la modificación de color en el medio de cultivo, lo que pondrá de
manifiesto un fallo en la esterilización.
Controles físicos
Los controles físicos consisten en un registro del ciclo que documenta que se ha
alcanzado la presión, temperatura y tiempo adecuados, siendo elementos tales
como: termómetros, manómetros, sensores de carga, entre otros. Si se aprecia
alguna anomalía en estos parámetros la carga no puede ser considerada estéril, por
lo que a pesar de ser de utilidad no son un medio eficaz de comprobar la
esterilización. Deben realizarse todos los días y en todos los ciclos, al inicio, en su
transcurso y al finalizar el ciclo(Unidad & Los, n.d.)
BIBLIOGRAFÍA
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Unidad, D., & Los, C. De. (n.d.). Los contenidos de esta Unidad son. Retrieved
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Windows, M., Corporation, M., Hori, K., & Sakajiri, A. (n.d.). No Title阪大生のため
のアカデミック・ライティング入門.