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PRUEBAS GENERALES PARA CARBOHIDRATOS

Nombres E-mail
Chávez Barrera Anyi Sofia Anyisofia1698@unicauca.edu.co
Camayo Camayo Tania Liset tanial@unicauca.edu.co
Bioquímica General, Biología, Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y de la
Educación, Universidad del Cauca
Fecha de realización de la práctica: 16/02/2017
Fecha de entrega de informe: 28/02/2017

1. RESUMEN
Una solución amortiguadora, tampón o buffer es la mezcla de un ácido débil y su base
conjugada, donde su función o propiedad es mantener estable el pH de una disolución al
adicionar ácidos o bases en cantidades relativamente pequeñas; por lo cual se preparó
diferentes disoluciones con acetato de sodio (CH3COONa) y ácido acético (CH3COOH)
para determinar el pH utilizando el pHmetro, y poder realizar comparaciones con los
resultados teóricos analizando las incompatibilidades para cada caso, de igual manera
indicar que soluciones desempeñan la función de solución amortiguadora, donde se pudo
concluir que la capacidad de una solución amortiguadora se reduce a medida que
aumenta el pH o desciende, como consecuencia de un cambio entre la especie aceptora
y dadora de protones.

2. RESULTADOS

Para realizar la prueba de pH y soluciones amortiguadoras se realizaron algunos


procedimientos donde se obtuvo los siguientes resultados:

Tabla 1. pH teóricos calculados utilizando ecuación de Henderson hasselbach.

pH y soluciones amortiguadoras
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Solució mL pH pH +HCl +HCl +NaOH +NaOH


n Acetato/Áci calcula determin pH pH pH pH
do do ado calcula determina calcula determina
do do do do
1 10.0/0.0 9.02 7.86 3.81 5.87 6.82 11.94
2 8.0/2.0 5.35 5.24 4.3 5.02 6.41 5.40
3 6.0/4.0 4.52 4.86 4.87 4.74 4.97 4.98
4 5.0/5.0 4.75 4.66 4.75 4.61 4.79 4.76
5 4.0/6.0 4.56 4.52 5.88 4.44 4.61 4.57
6 2.0/8.0 4.14 4.08 4.05 3.87 3.19 4.36
7 0.0/10.0 2.72 4.08 3.14 2.18 3.47 3.36

Muestra +HCl pH +HCl pH Muestra +NaOH pH +NaOH pH


de agua calculado Determinado de agua calculado determinado
A 2.87 2.37 B 8.87 11.64

Cálculos
#1 solución 10.0/0.0 pH calculado:
1 1
Ecuación pH: 7 + pKa + log co
2 2
pKa: 4,75

1 1
pH: 7 + × 4,5 + log (0,2)
2 2
pH: 9,02
#2 solución 8/2

Ecuación Henderson [Ac]


pH: pKa + log
[HAc] pKa: 4,75
Haselbach

0.2 𝑀 × 0.008 𝐿
0,010 𝐿 0,008 𝐿
=
0,2 𝑀 × 0,002 𝐿 0,002 𝐿
0,010 𝐿

pH y soluciones amortiguadoras
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[0,008]
pH: 4,75 + log = 5,35
[0,002]

#7 solución 0.0/10.0
1 1
Ecuación pH:pKa − log co
2 2
1 1
pH: × 4,75 + log (0,2)
2 2
pH: 2,72
#2 solución 8.0/2.0 +HCl pH calculado:

Base 𝑛 = 0,2𝑀 × 0.002𝐿 = 1.6 × 10−3


Acido 𝑛 = 0,2𝑀 × 0,002𝐿 = 4 × 10−4
1,610−3 𝑚𝑜𝑙
𝑀 𝑏𝑎𝑠𝑒 = = 0,6 𝑀
0,010 𝐿
4 × 10−4
𝑀 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜 = = 0,4 𝑀
0.010 𝐿
𝑏𝑎𝑠𝑒: 0,16 𝑀 × 0,005 𝐿 = 8 × 10−4
á𝑐𝑖𝑑𝑜: 0,04 𝑀 × 0,005𝐿 = 5 × 10−4
0,1 𝑀 × 0,005𝐿 = 5 × 10−4 𝑚𝑜𝑙 𝐻𝐶𝑙
HCl H+ + Cl-
5 × 10−4 5 × 10−4 5 × 10−4
A- + H + HA
8 × 10−4 2 × 10−4
5 × 10−4 5 × 10−4

3 × 10−4 7 × 10−4
3 × 10−4
𝑀 𝑏𝑎𝑠𝑒 = = 0,3
0,001
7 × 10−4
𝑀 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜 = = 0,7
0.001
0,3
𝑝𝐻 = 4,75 + log = 4,3
0,7

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#2 solución 8.0/2.0 NaOH pH calculado:

Acetato 𝑛 = 0,2𝑀 × 0.008𝐿 = 0,01605 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠

Ácido 𝑛 = 0,2𝑀 × 0,002𝐿 = 4 × 10−4 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠


0,5
NaOH 𝑛 = 0,1 𝑀 × = 5 × 10−5 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
1000
HCa + NaOH AcNa + H2O

4×10-4 - 5×10-5 1,6 ×10-3 + 5 ×10-5


3,5 ×10-4 moles 0,01605moles
0,01605
𝑝𝐻 = 4,75 + log = 6,41
3,5 × 10−4

3. ANALISIS DE RESULTADOS
La medida de pH es uno de los procedimientos analíticos más importantes y más
utilizados en bioquímica, ya que determinan muchas características notables de la
estructura y la actividad de las macromoléculas biológicas, 1 por lo cual es importante
mantener un pH estable, que generalmente se logra a partir de soluciones
amortiguadoras, buffer o tampón, el cual es un medio que tiende a impedir cambios en el
pH, por lo cual se realizó diferentes disoluciones para poder comprobar dicha teoría
combinando acetato de sodio (CH3COONa) y ácido acético (CH3COOH) en diferentes
cantidades se pudo observar que el pH no muestra grandes variaciones, la comparación
de los resultados obtenidos en el pHmetro y los de pH calculado, donde fue necesario
utilizar la fórmula de Henderson-Hasselbach, que es una transformación logarítmica de
la expresión para la constante de disociación, esta ecuación permite el cálculo del valor
de pKa de cualquier acido conociendo la relación molar de las especies dadoras y
aceptoras de protones, y a un pH determinado, permite también el cálculo del pH de un
par conjugado acido-básico,1 por lo cual se comprueba que estas variaciones son
mínimas, tanto al tener una solución de ácido acético y acetato de sodio en diferentes
cantidades, al igual que al adicionarles 0.5 mL de ácido clorhídrico (HCl) 0.1M y 0.5 mL
de hidróxido de sodio (NaOH) 0,1M; sin embargo se pudo observar que algunos

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resultados presentan una diferencia de pH que pudo deberse a algunas falencias en


cuanto a la preparación y manipulación de la solución buffer y del pHmetro.

Posteriormente se realizó una prueba con el objetivo de comprobar cómo actúa el agua
cuando se le agrega ácido clorhídrico (HCl) e hidróxido de sodio (NaOH), donde se pudo
detectar por medio del pHmetro y el pH calculado que al adicionarle ácido clorhídrico
disminuye el pH y al agregarle hidróxido de sodio aumenta su pH significativamente,
debido a que la capacidad reguladora de la solución no contiene concentraciones
equimolares de un ácido débil y su base conjugada por lo tanto la variación de pH no será
mínima2, y debido a estos resultados el agua no se podría considerar como una buena
solución amortiguadora.

Para finalizar es importante mencionar que desde el punto de vista biológico las
soluciones amortiguadoras son de gran importancia debido a que mantienen y regulan el
pH para que la fisiología funcioné correctamente, existiendo para ello diferentes
tampones biológicos como: tampón de proteínas, tampón hemoglobina, tampón
carbónico/bicarbonato y tampón fosfato 3; de igual manera existen soluciones
amortiguadoras para otros sistemas fundamentales como los suelos y el agua.

4. CONCLUSIONES
 Las soluciones amortiguadoras se caracterizan por resistir cambios bruscos de
pH, por lo cual en algunas de las pruebas donde se añadió 5ml de HCl y 5 ml de
NaOH, la alteración del pH no fue tan significativa.
 El agua tiene poca eficacia amortiguadora, por lo tanto su pH varía mucho al
agregarle un ácido o una base fuerte respectivamente.
 Se puede concluir que los valores obtenidos por medio del pHmetro pueden
presentan una margen de error, como consecuencia de esto, los resultados
pueden demostrar algunas variaciones debido a errores en los cálculos o en las
mediciones.

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 5. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
5.1 comparar los resultados teóricos con los obtenidos usando el pHmetro. ¿A qué
pueden deberse las posibles discrepancias para cada caso?
Los márgenes de error que se presentan en los resultados, en algunos casos se debe a
que los instrumentos del laboratorio no siempre son exactos, por lo que pueden presentar
un margen de error al adicionar o medir sustancias, en este caso al utilizar el pHmetro, el
cual presento falencias a la hora de utilizarlo, de igual manera también se contempla la
posibilidad de la preparación y manipulación de la solución amortiguadora.

5.2 indicar cuál de las soluciones es la que cumple mejores funciones como buffer. ¿Está
de acuerdo con este resultado? Explique la respuesta.
Como sabemos las soluciones buffer son aquellas que resisten cambios bruscos de pH,
por lo cual partiendo del valor calculado y determinado por el pHmetro se puede observar
que la solución numero 4 no presenta cambios significativos en su pH, por lo tanto se
concluye que esta cumple mejores funciones como buffer.

5.3. ¿Cuál es el objetivo de adicionar HCl y NaOH a los vasos con agua? expresar una
conclusión del resultado en este caso.
El objetivo de adicionar HCl y NaOH es comprobar si el agua cumple con las funciones
de una solución amortiguadora debido a que al agregarle HCl y NaOH su pH disminuye
y aumenta respectivamente; por lo cual se infiere que el agua no es una buena solución
buffer.

6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
(1). Lehninger, A.L. En BIOQUÍMICA las bases moleculares de la estructura y funcion
celular. Ed Omega S.A, Segunda edición, Barcelon, 1982. p. 49-52-53

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(2).soluciones reguladoras de pH. Disponible en:


http://materias.fi.uba.ar/6305/download/SOLUCIONES%20REGULADORAS%20DE%2
0pH.pdf, fecha de visita: 25/02/2017
(3).amortiguadores de pH y su importancia biologia. Disponible en:
http://carolinabcdc.blogspot.com.co/2010/09/amortiguadores-de-ph-y-su-
importancia.html, fechade visita: 27/02/2017

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