LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA
PAMPLONA (NORTE DE SANTANDER)
10 DE OCTUBRE DE 2019
 Integrantes:
Any Yulieth Aguas Zuñiga -1004153701
Dani José Bayona Castilla -1004862843
Dana Alejandra Lázaro Garzón -1004945503
Presentado A:
Lizeth Bolívar
Laboratorio De Biología General
Facultad De Ciencias Básicas
Departamento De Biología
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA
Pamplona (Norte De Santander)
Octubre 2019

RESUMEN:
Las enzimas componen la clase más numerosa y especializada de proteínas y catalizan toda
la interminable serie de reacciones químicas que conforman el metabolismo celular, en
resumen, estos son los catalizadores biológicos. Como todas las proteínas, son elaboradas
por las células y tienen una única misión dentro del mecanismo celular. Las enzimas actúan
como cualquier otro catalizador químico, excepto en dos diferencias: 1. Son muy específicas
y 2. Todas son de constitución proteica.

1. Cada enzima cataliza un tipo particular de reacción mientras que un catalizador no

biológico cataliza gran variedad de reacciones. Este mecanismo de acción enzimática tan
especifico, lo realizan interactuando junto con las moléculas con que reaccionan,
formando un complejo transitorio llamado Enzima-Sustrato el cual es libremente
reversible. Esta reversión es rápida, de tal manera que la enzima queda libre sin alterarse
y puede una vez recuperada, combinarse con otra molécula de sustrato.

2. Lo cual determina una estructura espacial dada, permitiendo su especificidad como

catalizadores. Esta especificidad varía de una enzima a otra. Por esta segunda cualidad
son extremadamente sensibles al calor debido a la desnaturalización de sus componentes.
También son afectadas por el pH, mostrando mayor actividad a un pH determinado.

Existen enzimas cuya actividad depende exclusivamente de su estructura como proteínas.

Tras enzimas, sin embargo, están formadas por dos componentes: uno proteico llamado
apoenzima y otro orgánico no proteico llamado Coenzima, que son ambos fundamentales
para la acción enzimática: Las enzimas están clasificadas en seis grupos de acuerdo con el
tipo de reacción que catalizan.
 ENZIMA REACCION QUE CATALIZAN
Oxido Reductoras Reacciones de óxido-reducción
Transferasas Transferencias de grupos funcionales
Hidrolasas Reacciones de hidrólisis
Liasas Adición a los dobles enlaces
Isomerasas Reacciones de isomerización
Ligasas Formación de enlaces con ruptura del ATP
Table 1. Resume
PALABRAS CLAVES: Enzimas, Catalizador, Proteínas, Reacciones, Hidrólisis, Enlaces.

ABSTRACT: Enzymes make up the most numerous and specialized class of proteins and
catalyze the endless series of chemical reactions that make up cellular metabolism, in short,
these are the biological catalysts. Like all proteins, they are made by cells and have a single
mission within the cellular mechanism.
Enzymes act like any other chemical catalyst, except in two differences: 1. They are very
specific and 2. All are of protein constitution.

1. 1. Each enzyme catalyzes a particular type of reaction while a non-biological catalyst

catalyzes a variety of reactions. This mechanism of enzymatic action so specific, they
perform interacting with the molecules with which they react, forming a transitory
complex called Enzyme-Substrate which is freely reversible. This reversal is rapid, so
that the enzyme is free without being altered and can, once recovered, be combined with
another substrate molecule.

2. Which determines a given spatial structure, allowing its specificity as catalysts. This
specificity varies from one enzyme to another. By this second quality they are extremely
sensitive to heat due to the denaturation of their components. They are also affected by
the pH, showing greater activity at a given pH.
There are enzymes whose activity depends exclusively on their structure as proteins. After
enzymes, however, they are formed by two components: one protein called apoenzyme and
another non-protein organic called Coenzyme, which are both essential for enzymatic action.
Enzymes are classified into six groups according to the type of reaction they catalyze.

ENZYME REACTION CATALYZED

Oxide Reducers Oxide Reduction Reactions
Transferases Functional group transfers
Hidrolases Hydrolysis reactions
Liases Addition to double links
Isomerases Isomerization reactions
Ligases Formation of links with ATP rupture
Table 1. Abstract
INTRODUCCIÓN: PROCEDIMIENTO 1.
El siguiente informe tiene como finalidad Reconocimiento De La Catalasa En
conocer a fondo cada una de las diferentes Tejido Animal:
enzimas junto con las propiedades,  Coloque en un tubo de ensayo unos
características y componentes que estas trozos pequeños de hígado.
poseen. Para mayor veracidad se  Añada dos mililitros de agua
agregarán muestras, análisis de las oxigenada
muestras y conclusiones. Una vez  Observe
finalizada la lectura se pretende que el PROCEDIMIENTO 2.
lector discierna entre las diferentes Reconocimiento De La Catalasa En
enzimas que se utilizaron en los anteriores Tejido Vegetal:
procedimientos identificando así la  Coloque en un tubo de ensayo unos
finalidad que estas poseen en su respectivo trozos pequeños de hígado.
proceso biológico.  Añada dos mililitros de agua
oxigenada
METODOLOGIA.  Observe
El método que utilizamos en el laboratorio PROCEDIMIENTO 3.
de Enzimas fue experimental. Al inicio del Desnaturalización De La Catalasa:
laboratorio nos hicieron entrega de 15 Para la desnaturalización de la catalasa
tubos de ensayo exactamente y de 2 iniciamos colocando en un tubo de ensayo
gradillas para introducir los tubos de un trozo pequeño de hígado, agregamos
ensayo para poder trabajar de manera agua e introducimos los tubos en el fuego
correcta. Hicimos uso de trozos de hígado, en baño maría durante unos minutos, lo
saliva y tomate. retiramos y añadimos agua oxigenada
MATERIALES REACTIVOS hasta cubrir totalmente el trozo de hígado
 2 gradillas  Agua introducido.
 15 tubos de oxigenada. PROCEDIMIENTO 4:
ensayo  Lugol al 1% Hidrólisis Del Almidón:
 1 pinza de  Buffers Para el proceso de la hidrólisis del almidón
madera Fosfato 0.1 M utilizamos 6 tubos de ensayo y le
 1 beaker de 50 ml a Ph 3,7,11 adicionamos a cada uno las cantidades
 2 pipetas de 10  2 ml de siguientes:
ml reactive de  Tubo 1: 2mL de solución de almidón
 1 mechero Benedict  Tubo 2: 2mL de solución de almidón
 1 churrusco para  Tubo 3: 2mL de solución de almidón +
tubos. Soluciones: 1mL de saliva sin diluir
 Trozos de  Tubo 4: 2mL de solución de almidón +
Tomate.  Solución de 1mL de saliva sin diluir
 Trozos de almidón al 1%  Tubo 5: 2mL de solución de almidón +
Hígado 1mL de saliva diluida hervida
 Cinta de  Tubo 6: 2mL de solución de almidón +
Enmascarar. 1mL de saliva diluida hervida
 Bolsas negras.
Luego, colocamos los tubos en baño maría
a 37°C durante 10 minutos, procedimos a
añadir 1 gota de Lugol en los tubos 1, 3 y
Tabla 2 Materiales Y Reactivos 5, en cambio en los tubos 2, 4 y 6 añadimos
1 mL de reactivo de benedit y dejamos
calentar a 70°C en baño maría.
PROCEDIMIENTO 5:
Influencia Del Ph En La Actividad
Enzimática:
la prueba de la influencia del pH en la
actividad enzimática, empezamos
recogiendo una cantidad de 6mL de saliva
en un beaker de 50mL, enumeramos 3
tubos de ensayo y le adicionamos a cada
uno las siguientes cantidades:
 Tubo 1: 2mL de saliva + 2 mL de
Buffer fosfato 0.1 a pH 3
 Tubo 2: 2mL de saliva + 2 mL de
Buffer fosfato 0.1 a pH 7
 Tubo 3: 2mL de saliva + 2 mL de
Buffer fosfato 0.1 a pH 11
Agitamos los tubos, después añadimos
1mL de almidón a cada uno de los tubos
agitamos nuevamente y por último
añadimos una gota de Lugol.

RESULTADOS.
PROCEDIMIENTO 1.
Reconocimiento De La Catalasa En Tejido Animal:
ANALISIS DE
MUESTRA REACTIVO
RESULTADOS.
Hígado. Agua Oxigenada En las muestras se observan
burbujas, además de una tonalidad
CANTIDAD Trozos pequeños. 2 ml más clara del hígado y parece
desintegrarse, las burbujas del
agua oxigenada, matan las
bacterias anaerobias por el
desprendimiento de oxigeno que
produce la acción de la catalasa.
La catalasa es una oxido reductasa
de los sistemas enzimáticos
respiratorios y se encuentra, en la
mayoría de los tejidos vegetales y
animales, al igual que en muchas
especies bacterianas, la función de
esta enzima, en los tejidos es
necesaria, porque durante el
metabolismo, celular se forma una
molécula toxica, que es el
peróxido de hidrogeno a oxigeno
con la simultanea reducción de una
segunda molécula de peróxido a
agua
Catalasa
2H2O2------------------O2 + 2H2O
La existencia de catalasa en los
tejidos animales, se aprovecha
para utilizar el agua oxigenada
como desinfectante cuando se
Img 1 y2: tubo de ensayo con hígado + agua oxigenada vierte sobre la herida.
Tabla 3. Resultados/Análisis de resultados/Procedimiento 1: hígado + agua oxigenada
PROCEDIMIENTO 2.
Reconocimiento De La Catalasa En Tejido Vegetal:
ANALISIS DE
MUESTRA REACTIVO
RESULTADOS.
Tomate Agua oxigenada Se observan burbujas y
CANTIDAD Trozos pequeños 2ml desprendimiento de las capas
del tomate, principalmente la
piel (Epicarpio), las burbujas
se dan debdo al
desprendimiento de oxigeno el
agua, evidenciando la acción
de la catalasa en el tejido
vegetal; durante el metabolismo,
celular se forma una molécula
toxica, que es el peróxido de
hidrogeno a oxigeno con la
simultanea reducción de una
segunda molécula de peróxido a
agua
Catalasa
Img 3y4: Reconocimiento de la catalasa/tomate+ agua oxigenada 2H2O2------------------O2 + 2H2O
Tabla 4. Resultados/Análisis de resultados/Procedimiento 2: Tomate + agua oxigenada
PROCEDIMIENTO 3.
Desnaturalización De La Catalasa
ANALISIS DE
MUESTRA REACTIVO
RESULTADOS.
Agua Agua
Hígado Oxigenada + Oxigenada Cuando se puso al
Fuego limpia fuego la muestra, en
CANTIDAD Trozos pequeños 2ml 2ml 20 segundos, ya había
hervido, el hígado
parcialmente cocido,
al retirar agua
oxigenada hervida se
le agregan 2 ml de
agua oxigenada
limpia, esta vez no se
observaron burbujas ni
desintegración, pero si
una notable aclaración
del hígado, parece ser
que el calor inhibe la
reacción de la catalasa.
Img 5y6: Desnaturalización de la catalasa/hígado + agua + agua oxigenada
Tabla 5. Resultados/Análisis de resultados/Procedimiento 3: hígado + agua oxigenada+Calor
PROCEDIMIENTO 4
Hidrolisis Del Almidón:

ANALISIS DE
MUESTRA REACTIVO
RESULTADOS.
Tubo 1. Solución de Almidón
CANTIDAD 2 ml
MUESTRA REACTIVO

Tubo 2. Solución de Almidón

CANTIDAD 2ml
MUESTRA REACTIVO

Tubo 3. Solución de Almidón Saliva sin diluir

CANTIDAD 2ml 1 ml
MUESTRA REACTIVO

Tubo 4. Solución de Almidón Saliva sin diluir

CANTIDAD 2ml 1ml
MUESTRA REACTIVO

Tubo 5. Solución de Almidón Saliva Hervida

CANTIDAD 2 ml 1 ml
MUESTRA REACTIVO

Tubo 6. Solución de Almidón Saliva Hervida

CANTIDAD 2 ml 1 ml

Img 7: seis tubos de ensayo que contienen solución de almidón + saliva. Fría y caliente
Img 8 y 9: seis tubos de ensayo con solución de almidón + saliva+ colorantes+calor
Tabla 6. Resultados/Análisis de resultados/Procedimiento 4: Hidrolisis del almidon
PROCEDIMIENTO 5
ANALISIS DE
MUESTRA REACTIVO
RESULTADOS.
Tubo 1. saliva Buffer de Fosfato 3 La mayoría de los
CANTIDAD 2 ml 2 ml enzimas son muy
MUESTRA REACTIVO sensibles a los
cambios de pH.
Tubo 2. saliva Buffer de Fosfato7
Desviaciones de
CANTIDAD 2 ml 2 ml pocas décimas por
MUESTRA REACTIVO encima o por debajo
Tubo 3. saliva Buffer de Fosfato11 del pH óptimo
pueden afectar
CANTIDAD 2 ml 2 ml drásticamente su
actividad. Como
ligeros cambios del
pH pueden provocar
la desnaturalización
de la proteína, los
seres vivos han
desarrollado sistemas
más o menos
complejos para
mantener estable el
pH intracelular,
Nuestra muestra no
tuvo reacción al
Reactivo de buffer,
creemos que no
Img 10 : tres tubos de ensayo que contienen saliva poseía suficientes
Img 10 : tres tubos de ensayo que contienen saliva + buffer fosfato a diferentes PH. enzimas para una
reacción visible.
Tabla 7. Resultados/Análisis de resultados/Procedimiento 5:Influencia Del Ph En La Actividad Enzimática

CONCLUSION: En conclusión, unos de La enzima catalasa y la amilasa para

los factores como son el pH, que puede
llegar a desnaturalizar una enzima o
inhibirla, su manera de actuar es afectando
directamente su estado de ionización, en
sus cadenas laterales de este modo puede
modificar las estructuras terciarias
proteicas que componen la enzima, por eso
la utilización del fosfato en sus diferentes
pH nos da a entender que la enzima tiene
puntos óptimos en los cuales la enzima
puede actuar
producir la reacción catalítica y exacerbar
a un producto tienen puntos de reacción
que son depresiones reactivas en las cuales
llevan estos procesos, al implicar factores
de desnaturalización como son la
temperatura, pH o radiación ionizante;
estos puntos tienden a modificarse.
La clasificación de las enzimas usadas
como la catalasa y la amilasa están
clasificadas como oxidorreductasas e
hidrolasas respectivamente
También pudimos ver lo que ocurría
cuando se le añadía diferentes sustancias,
en algunos no pasó nada. Pudimos
observarlo en el tubo de ensayo que
contenía almidón y saliva, al revolverse
esas dos sustancias no se observaba nada
solo que se volvía un poco más espesa el
líquido.
ANEXOS:
1. Describa el efecto de la
temperatura en la acción enzimática
Respuesta: En general, los aumentos de
temperatura aceleran las reacciones
químicas: por cada 10ºC de incremento, la
velocidad de reacción se duplica. Las
reacciones catalizadas por enzimas siguen
esta ley general. Sin embargo, al ser
proteínas, a partir de cierta temperatura, se
empiezan a desnaturalizar por el calor. La
temperatura a la cual la actividad catalítica
es máxima se llama temperatura óptima.
Por encima de esta temperatura, el
aumento de velocidad de la reacción
debido a la temperatura es contrarrestado
por la pérdida de actividad catalítica
debida a la desnaturalización térmica, y la
actividad enzimática decrece rápidamente
hasta anularse.
2. ¿A que valores de pH y
temperatura es estable la actividad
enzimática de la catalasa?
Respuesta: Los valores de pH y
temperatura para mantener estable la
actividad enzimática de la catalasa fue
máxima a un pH entre 6,8 y 7,5 y
temperatura entre 30°C hasta 50 °C
efectivamente.
3. ¿A qué pH es más activa la
amilasa?
Respuesta: El pH de la amilasa es de 6,9
aproximadamente 7.0 y se vuelve inactiva
en un pH de 3,3. Lo que quiere decir que
puede estar activa desde un pH de 4,0 hasta
11 siendo esto que entre mayor sea el pH
mas activa se convierte
4. ¿Qué diferencia hay entre una
coenzima y una apoenzima?
COENZIMA APOENZIMA
 Las coenzimas unidas a una apoenzima
constituyen una holoenzima
 son cofactores orgánicos no proteicos
 son termoestables
 tienen en general baja masa molecular
 Las apoenzimas son enzimas que no
tienen cofactor.
 es la parte proteica de una enzima
 es catalíticamente inactiva
 permite la unión a los sustratos,
moléculas sobre las que actúan las
enzimas en las reacciones químicas.
5. La pepsina es una enzima secretada
por el estómago. ¿Discuta el rango de
pH en el cual la enzima se encuentra
activa y sugiera lo que probablemente le
sucede estructuralmente a la enzima
cuando pasa del estómago al intestino?
Respuesta: como anteriormente se dijo el
estómago secreta pepsina, cuando es
secretada por el estómago es la forma
inactiva de la pepsina, para activarse
necesita precisamente de un pH acido, al
pasar al intestino se desactiva ya que el pH
alcalino no permite su actividad. Los
valores de La pepsina cuando es más
activa son con un pH de entre 2 y 3. Se
desactiva con un pH superior a 5
6. ¿Qué otros factores, además de la
temperatura y el pH influyen en la
actividad de una enzima?
Respuesta: otros son
 la presencia de cofactores, ya que a
veces una enzima requiere para su
función la presencia de sustancias no
proteicas que colaboran en la catálisis
 las concentraciones del sustrato y de
los productos finales la presencia de
los productos finales puede hacer que
la reacción sea más lenta, o incluso
invertir su sentido,
 la presencia de inhibidores,
 modulación alostérica: este se divide
en dos: Activador alostérico que
favorece la unión del sustrato e
Inhibidor alostérico que impide la
unión del sustrato
 modificación covalente: Unas enzimas
pasan de una forma menos activa a otra
más activa uniéndose covalentemente
a un grupo químico de pequeño
tamaño como el Pi o el AMP
7. Isoenzimas:
Algunos enzimas tienen distinta estructura
molecular, aunque su función biológica es
similar. Se llaman isozimas o isoenzimas.
Estas diferencias de estructura se traducen
en ligeros cambios en sus propiedades, de
forma que cada isozima se adapta
perfectamente a la función que debe
realizar
8. Cite cinco enzimas y los sustratos
respectivos sobre los cuales actúan
 Amilasa salival: Que actúa sobre el
almidón Pepsina.
 Lactasa: Que actúa sobre la lactosa.
 Sacarasa: Que actúa sobre la sacarosa
 Tripsina: Que actúa sobre los
polipéptidos.
 Renina: Que actúa sobre la caseína.
AGRADECIMIENTOS:
Agradecemos a la maestra y a las
asistentes de laboratorio que siempre velan
por nuestro conocimiento.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.