PROTOCOLO DE FOSFATASA ALCALINA

REACTIVO A: REACTIVO B: REACTIVO C: Standard:

4-aminoantipirina 29 Fenilfosfato de Ferricianuro de Solución de fenol

mmol/l en solución de sodio, 1.4 potasio , equivalente a 200
aminometil propanol 3 mmoles 10mmol/l UI/l
mol/l

PREPARACIÓN DE REACTIVOS:

REACTIVO A
REACTIVO B
Transferir el contenido del frasco B en el
Disolver el contenido del envaso en 500mL
frasco del reactivo A y mezclarlo hasta
de agua destilada. Rotular la fecha de
disolución completa. Anotar la fecha de
preparación.
preparación

PROCEDIMIENTO:

Usar 3 tubos, los cuales serán marcados como: B (blanco), S (standard) y MP( Muestra problema)

Blanco Standard Muestra

Agregar 0.5mL de reactivo A reconstituido

Preincubar en baño de agua a 37°C por 3-5min.

Agregar 50 uL de standard Agregar 50 uL de suero

Mezclar e incubar exactamente por 10 min (cronómetro)

Agregar 2.5mL de reactivo C

Mezclar de inmediato cada tubo. Retirar los tubos del baño y leer en espectrofotómetro a
520 nm, llevando el equipo a cero de absorbancia con agua destilada.

La ESTABILIDAD DE LA REACCIÓN FINAL es de 30MIN, la absorbancia debe ser leída en ese

período.

CÁLCULO:
𝟐𝟎𝟎 𝑼𝑰/𝒍
𝑭𝒂𝒄𝒕𝒐𝒓 =
(𝑨𝒃𝒔 𝑺𝑻 − 𝑨𝒃𝒔 𝑩)
𝑼𝑰
𝑭𝒐𝒔𝒇𝒂𝒕𝒂𝒔𝒂 𝒂𝒍𝒄𝒂𝒍𝒊𝒏𝒂 ( ) = 𝑭𝒂𝒄𝒕𝒐𝒓 𝒙 (𝑨𝒃𝒔 𝑴𝑷 − 𝑨𝒃𝒔𝑩)
𝒍

Elaborado por: Gloria Huillcahuaman Delgado