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SEMINÁRIO SOBRE A TÉCNICA DE FLUORESCÊNCIA

Doutorando: Rafael Mascarenhas de Almeida 1

Orientador: Wendel Andrade Alves 10/10/2017


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Joseph R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3ª ed., 2006, p. 2
Espectrofotômetro de fluorescência

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(Lindsay, S. M., Introduction to Nanoscience, 2010, p. 320)
Fotofísica de Fluorencência
• Espectro de absorção no UV-vis
(Espectrofotometro)

• Espectro de emissão
(Espectrofotometro de fluorencência ou espectrofluorímetro)

DESLOCAMENTO DE STOKES

Distância entre

- pico de máx. absorção (λabs)


- pico máx. de emissão (λem)

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(Joseph R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3ª ed., 2006, p. 4)
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(Joseph R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3ª ed., 2006, p. 4)
Efeitos após absorção de um fóton de energia hν que desestabiliza o estado excitado singleto
de moléculas em solução.

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(ADAPTAÇÃO - Joseph R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3ª ed., 2006, p. 207)
FIGURA: diagrama de Jablonski simplificado de fluorecência [Rafael Mascarenhas 10/2017]
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Efeitos da solvatação sobre o estado excitado
singleto de molécula

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(ADAPTAÇÃO - Joseph R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3ª ed., 2006, p. 206)
quantidade de fótons emitidos
F = (1)
quantidade total de fótons absorvidos

kr
F = (2)
kr + knr

(3)

1
𝜏(s) = (4)
kr + knr

F (rendimento quântico de fluorescência) 𝜏 (tempo de vida de emissão)


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SUPRESSÃO – relaxação não radiativa dos estados emissivos causada pela
colisão intermolecular entre o complexo e um supressor (Quencher)

o 𝐼o 𝜏o
equação de Stern-Volmer: = = = 1 + Ksv[Q] = 1 + kqτo [Q]
 𝐼 𝜏
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(Lacowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3 ed., 2006, p. 283)
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( Joseph R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3ª ed., 2006, p. 13)
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(Lacowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3 ed., 2006, p. 28)
Figure: (A) UV-Vis absorption spectrum of AuNPs synthesized at pH 7.0, considering CFF solutions of 3.8 x 10-4 mol L-1,
7.5 x 10-4 mol L-1 and 1.1 x 10-3 mol L-1 in the presence of NaBH4. (B) Fluorescence spectra for solutions containing
different CFF concentrations, considering: λexcitation = 258 nm, λstart = 265 nm, λstop = 500 nm and slits 3/5. Standardization
and linear extrapolation of the fluorescence data to obtain the CFF cac. [Mestrado Juliane]
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(Karina P. Morelli Frin; Rafael Mascarenhas de Almeida, Photochem. Photobiol. Sci., 2017, 1230-1237)
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(Karina P. Morelli Frin; Rafael Mascarenhas de Almeida, Photochem. Photobiol. Sci., 2017)
Oxidation Potential - 2,65 eV

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(Karina P. Morelli Frin; Rafael Mascarenhas de Almeida, Photochem. Photobiol. Sci., 2017, 1234)
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(Karina P. Morelli Frin; Rafael Mascarenhas de Almeida, Photochem. Photobiol. Sci., 2017, 1234)
GRAFICAL ABSTRACT

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(Karina P. Morelli Frin; Rafael Mascarenhas de Almeida, Photochem. Photobiol. Sci., 2017, 1230-1237)
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( Rafael Mascarenhas de Almeida, DISSERTAÇÃO - UFABC, 2016)
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( Rafael Mascarenhas de Almeida, DISSERTAÇÃO - UFABC, 2016)
FIGURA: resultado da imagem celular de complexos polipiridínicos de Re(I) em função da
estrutura molecular dos compostos e da estereoespecificidade do meio de cultura.
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(Leonidova, A.; Pierroz, V.; Adams, L. A.; Barlow, N.; Ferrari, S.; Graham, B e Gasser, G. - 2014)
FIGURA: possíveis mecanismos de supressão do complexo (D) com H2Q em MeCN a 298 K. Sendo o termo
EPT = transferência protônica acoplada a transferência de elétron
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( Rafael Mascarenhas de Almeida, DISSERTAÇÃO - UFABC, 2016)
OBRIGADO

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