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Introducción.
Los escarabajos de la familia Meloidae son conocidos por sus habitos de parasitarios,
desarrollo hipermetabolico en el estado larval y la producción de cantaridina (Bologna y Pinto
2001). La posición de las diferentes subfamilias de meloidos reconocidas han variado a lo largo
del ultimo siglo comenzando con los acercamientos de Selander (1964) y finalizando con una
clasificación más incluyente como la de Bologna (1991); aun así existe poco consenso sobre
estas. En el siguiente trabajo se examinan las relaciones filogenéticas de algunas de las tribus
pertenecientes a la Subfamilia Meloinae utilizando secuencias mitocondriales (16S) y nucleares
(ITS2) mas datos morfológicos.
Metodología.
El análisis filogenético se realizo a partir de 31 taxa y 126 caracteres (Fig. 1), utilizando como
outgroup un representante de la familia Anthicidae (Anthicus antherinus Linnaeus, 1761), y
representantes de las 3 subfamilias que conforman la familia Meloidae (Electinae (2),
Tetraonycinae (1), Nemognathinae (4)); de los 126 caracteres solo se utilizaron 95, los 31
restantes fueron excluidos siguiendo los parámetros de Bologna y Pinto (2001). Las secuencias
fueron obtenidas en el EMBL (Tabla 1). Usando el criterio de parsimonia se realizo una primera
búsqueda a los datos; los datos morfológicos se evaluaron usando Winclada (Nixon 1999) para
encontrar el árbol más corto, el soporte de Bremer relativo para la morfología se obtuvo
utilizando NONA (Goloboff 1993). Se realizo el análisis de ILD (Farris et al. 1994) evaluando
diferentes matrices de sankoff (Tabla 2) para obtener el mejor costo usando el programa POY
4.0 Beta 2911 numero (Varon et al. 2008), usando los mejores costos, las secuencias fueron
alineadas usando POY y utilizando la salida para encontrar el bootstrap de los genes y la
evidencia total de los datos bajo el soporte de Bremer. Para el analisis de ML las secuencias
moleculares fueron alineadas usando Muslce 3.6 (Robert C 2004), el modelo de evolución se
obtuvo mediante el programa estadistico R (Ross y Robert 1996) usando APE (Paradis et al
2004); el bootstrap (1000 reps) en ML se obtuvo mediante el programa PhML (Guindon y
Gascuel 2003). Por ultimo se realizo el análisis Bayesiano (500000 reps, 4 cad) para los datos
moleculares y para la evidencia total.
Resultados y Discusión.
En la busqueda bajo el criterio de parsimonia apartir de los datos morfológicos se obtuvo 5
arboles con una longitud de 184, bajo el soporte de bremer se encontro que todos los nodos
estaban altamente soportados (Fig 2) diferenciando las cuatro subfamilias entre si,
evidenciando la monofilia de la subfamilia Meloinae; las relaciones de las tribus de esta
subfamilia estan resueltas excepto en las tribus Lyttini y Milabrini, esto se puede deber a la
exclusión de algunos caracteres. En el analisis de ILD, la matriz con los mejores costos fue la
que tuvo valores de gaps y proporción transversión/transición igual (ts1tv1g1). El Bootstrap
para los genes combinados (Fig. 3), muestra como grupo basal de las subfamilias a la subf
Electinae, además de no soportar la monofília de la subfamilia Meloinae, agrupando
internamente como grupos hermanos a las subfamilias Tetraonycinae y Nemognathinae. En los
Meloinae soporta la monofília de varias tribus como Epicautini, Cerocomini y Eupomphini, las
otras no soporta tal hipótesis, agregándolas entre si, esto también se ve evidenciado en el
análisis de los dos genes más morfología (Morf+16S+ITS2) (Fig. 4); esta baja resolución tiene
un fuerte trasfondo, ya que para este análisis as secuencias fueron implícitamente alineadas, lo
cual pudo generar inconsistencias en las relaciones transición/transversión/gaps.
Para el análisis de ML se obtuvo el mejor modelo para cada gen fue JC69, los arboles de ML
de los diferentes genes por separado soportan diferentes clados; el gen 16S (Fig. 5) aunque no
soporta la monofília de la subf Meloinae, si soporta la de algunas tribus como Mylabrini y Lyttini,
esta ultima no se había encontrado tan bien soportada antes; de igual forma el gen ITS2 (Fig.
6) no resuelve las subfamilias, pero si resuelve tribus como Epicautini y Cerocomini. En
contraposición a lo anterior el análisis de ML para los genes combiandos (16S+ITS2), (Fig. 7) si
soporta la monofilia de 3 subfamilias (excepto Tetraonycinae la cual la incluye dentro de
Meloinae), además de resolver todas las tribus (incluyendo a Lyttini).
En el análisis bayesiano se evidencio la monofília de 2 de las 4 subfamilias, excepto
Tetraonycini, quien en todos los análisis se ha encontrado dentro de los Meloinae
principalmente con la tribu Melonini; y Electicinae quien se encuentra más relacionada con la
familia Anthicidae. Al igual que la resolución de las subfamilias, en el análisis bayesiano para
los genes combinados (Fig. 8), encontramos que las tribus de los Meloinae están soportadas
por probabilidades posteriores altas, indicando la monofília de las diferentes tribus, esto
también es evidente en el análisis de evidencia total (Fig. 9), donde se resuelven las mismas
subfamilias, con excepción de la subf Tetraonycini, la cual se encuentra como grupo hermano
de los Meloinae.
Muchas de las relaciones encontradas en las diferentes particiones soportan diferentes teorías,
como lo son los resultados de Parsimonia, los cuales para los genes, soporta más la hipótesis
de Selander (1991) de 2 subtribus: Cercomini (Reuniendo como subtribus a: Epicautina,
Eupomphina, Lyttina and Mylabrina) y Melonini; sin embargo el análisis Bayesiano y de ML soporta
mejor la Hipótesis de Bologna (1991) acerca de las 7 subtribus diferenciadas para la Subfamilia
Meloinae. Aunque los resultados son comparables con los obtenidos por Bologna et al. (2008),
algunas relaciones se hacen menos evidentes en esta revisión, como lo son la soportadas por
los análisis particionados de ML, ya que los autores prefirieron eliminar los gaps para así dar
mayor resolución a los datos, aunque da mayor resolución a nivel de subfamilia, le resta al nivel
de tribu lo cual es evidente en las relaciones del análisis bayesiano.
Bibliografía.
Bologna, M.A., 1991. Coleoptera Meloidae. Fauna d’Italia. XXVIII. Calderini, Bologna.
Edgar, Robert C. (2004), MUSCLE: multiple sequence alignment with high accuracy and high
throughput, Nucleic Acids Research 32(5), 1792-97.
Farris,J.S. Kallersjo M., Kluge. A., and Bult. C. (1994) Testing the Significance ofIncongruence.
Cladistics,10,315–319.
Goloboff, P.A. (1993) NONA, Version 1.6. Published by the Author, Instituto Miguel Lillo, Miguel
Lillo 205, 400 Sierra Madre de Tucuman, Argentina
Guindon S, Gascuel O. (2003) "A simple, fast, and accurate algorithm to estimate large
phylogenies by maximum likelihood." Systematic Biology. 52(5):696-704.
Nixon,1 K.C. (1999) WINCLADA (BETA), Version 0.9.9. Published by the author, Cornell
University, Ithaca, New York. Nixon, K.C. & Carpenter, J.M. (1993) On Outgroups. Cladistics, 9,
413–426.
Paradis E., Claude J., and Strimmer K. (2004) APE: Analyses of Phylogenetics and Evolution
in R language. Bioinformatics 20 (2). 289-290.
Ross I., and Robert G. (1996). : A Language for Data Analysis and Graphics. Journal of
Computational and Graphical Statistics 3 (5) 299-314
Selander, R.B., 1964. Sexual behavior in blister beetles (Coleoptera: Meloidae). I. The genus
Pyrota.. Can. Entomol. 96, 1037–1082.
Selander, R.B., 1991. On the nomenclature and classification of the Meloidae (Coleoptera).
Insecta Mundi 5, 65–94.
Varón, A., L. S. Vinh, I. Bomash, W. C.Wheeler. 2008. POY 4.1. American Museum of Natural
History. http://research.amnh.org/scicomp/projects/poy.php
Anexos.
Tabla 3. Test de incongruencia de Farris para los diferentes costos asignados a los gaps,
transversiones y transiciones.
Fig
Fig 2. Filogenia obtenida a partir del Análisis de Parsimonia (consenso estricto) de datos
morfológicos. Los números sobre las ramas corresponden al soporte de Bremer relativo.
Fig 2. Analisis de los dos genes combinados. Los valores corresponden a los valores de
Bootrap.
Fig 4. Filogenia obtenida a partir del Análisis de Parsimonia (consenso estricto) de datos
totales. Los números sobre los nodos corresponden al soporte de Bremer relativo.
Fig 5. Analisis del gen 16S en ML. Los valores corresponden a los valores de Bootrap
Fig 6. Analisis del gen ITS2 en ML. Los valores corresponden a los valores de Bootrap
Fig 7. Analisis de los dos genes combinados en ML. Los valores corresponden a los valores de
Bootrap.
Fig 8. Analisis de los dos genes combinados en analsis Bayesiano. Los valores corresponden a
los valores de Bootrap.
Fig 9. Filogenia obtenida a partir del Análisis Bayesiano para evidencia total. Los números
sobre los nodos corresponden a las probabilidades posteriores.