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BACTERIOLOGIA

DR. PABLO CHANG


Clase 1

22 DE OCTUBRE DEL 2019

1. Historia de la microbiologìa

a. Biología (bio = vida, logia = ciencia, tratado)

b. Microbiología (micro = pequeño, bios = vida, logìa = tratado, ciencia):

a. tratado de la vida de los seres pequeños

b. estudio de seres microscópicos que incluye varias ciencias como parasitología,

micología, bacteriología y virología. Las subciencias son inmunología y

epidemiología.

c. Relacionando con la bacteriología se refiere al estudio de seres microscópicos

de bacterias, su patología, su diagnóstico y prevención

2. Taxonomía (del griego taxón= organización): es la clasificación de los microorganismos

en un sistema ordenado que indica una relación natural.

a. Reino, división, clase, orden, familia, género, especie subtipo. El mayor es el

dominio. Antes se creía que había solo dos reinos el vegetal y el animal, y que las

bacterias eran del reino vegetal, lo cual es incorrecto.

3. Autores que aportaron a la evolución de la microbiología

a. Atanasio Kircher: sacerdote jesuita que observó seres microscópicos, lo cual se

consideraba dudoso porque pudieron haber sido seres en putrefacción.

b. Roger Bacon: poco probable que haya observables microorganismos

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c. Antòn Leuwenhoeck: era un holandés que tenía como hobby pulir lentes, por lo que

se cree que pudo haber observado los seres microscópicos. Reportò a la Real

Sociedad de Londres la forma de estos seres; redondas, coco; alargadas, bacilos; y

helicoidales, espirilos. Lo que él logró hacer es ampliar la visión 270 veces más en

un microscopio. Cuando apareció la electricidad se desarrolló el microscopio

óptico, se podía amplificar 1200 veces del tamaño normal.

d. En el año 1930 se visualizò nanopartìculas (virus) más pequeñas que las bacterias

e hizo una aclaración que los virus se medían en nanómetros (milésima parte de la

micra) y las bacterias en micras, milésima parte del milímetro; se puede visualizar

solo con microscopio electrónico y se lo perfeccionó con la elaboración del

condensador, cuya función es condensar un haz de luz sobre la placa, creado por

__________.

Se considera que el primer organismo en observarse fue botrytis bassiana,

productor de muscarina en el gusano de seda.

4. Another stuff´

Históricamente tiene a cargo la teoría de la negación de la generación espontánea a cargo

de Lazzaro Spallanzani.

En la antigüedad se pensaba que las moscas aparecían de manera espontánea en las orejasde

los bueyes, y los ratones en los basurales. Asimismo, microorganismos eran identificados

en la biblia como lepra, bacilo de Hansen; sarna o sarcoptes scabiei, peste o yersinia pestis.

a. Dentro de la negación de la teoría de la generación espontánea està Lazaro Spallanzani

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a. Francisco Reddi, realizò estudios màs avanzados de Spallanzani, fue quien se le

atribuye la observación de microorganismos en proceso de putrefacción en la carne,

puso un pedazo de gaza o algodòn sobre la carne para evitar la formación de los gusanos

de los moscas para fundamentar la teoría de la biogénesis.

b. Luis Pasteur atribuye que la vida es la única puede originar la vida. Èl mejorò el

experimento realizado por Lazaro que consistìa en hervir jugos vegetales taparlos.

Pasteur utilizò un matraz especial con forma de un cuello de cisne con un tapòn para

que las partículas se quedaràn en el cuello del instrumento. Ademàs estudiò la

fermentación, clasificación de los organismos en anaeróbicos (que se desarrolla sin la

presencia de oxìgeno) y aeróbicos, pasteurización (explica que elimina agentes o

bacterias patógenos en los alimentos, no es esterilización porque no elimina todos los

microorganismos ; calentamiento lento y enfriamento rápido, no altera características

alimentos): leche, se evita bacilos tuberculosos, hepatitis, poliomielitis, no elimina

bacillus lactis ), primeros criterios de la inmunología: inmunización de la rabia,

postulados de la vacunación y sospecho de la existencia de la rabia; y el carbunco

(ántrax): afecta al ganado, hombre y a veces a otros animales.

a. El carbunco o ántrax es una zoonosis que puede producirse por el

staphylococcus aureus o bacillus anthracis

c. Koch: estudio tres bacterias: bacilo de Koch o tuberculoso, estafilococo, bacilo cholera

(es virus); estafilococo; estudio los primeros medios de cultivo (utilizò rodajas de papas

para sembrar las bacterias)

a. Medio de cultivo: sustancia que tiene los nutrientes adecuados para permitir el

desarrollo de microorganismos. Posee medios físicos y químicos nutritivos para

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un determinado agente; tiene características adecuadas para que se desarrolle,

estos pueden ser artificiales o naturales, por ejemplo: tubos de ensayo (lìquido),

placa de Petri (sòlidos). La gelatina es un mal medio de cultivo.

i. AGAR: es la base de un medio de cultivo, es un polímero obtenido a

partir de algas descubierto de Koch, tiene un punto de ebullición alto

(màs de 40C)

1. AGAR sangre (con glóbulos rojos de bovino), si se calienta los

eritrocitos se degradan (some shit de la bilirrubina) y se hace

café debo a la hemoglobina degradada, pasa a denominarse

AGAR chocolate

2. AGAR bismuto: verde

3. AGAR amber: amarillo, urea

b. También se le atribuye el uso de los primeros agentes colorantes.

Para ver la bacteria primero se debe realizar un frotis: realizar la muestra y

sembrarlo en forma de estría para que se desarrollen las colonias, se tiñe el frotis

(un extendido) en la lámina portaobjetos en una suspensión como solución

saliva y se seca al aire o con calor.

d. Christian GRAM: violeta de giemsina, licor de Gram (fijador), alcohol potable

(decolorante), safranina (rosada)

a. GRAM + rosado

b. GRAM – azul

Métodos de tinción: simple, sirve para observar la morfología; y compuesto

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Clasificaciòn según a la forma: cocos, redondos; bacilo; y helicoidales, cuando son

varias espiras son espiroquetas y si es una sola espira es vibrio

e. Zoonosis: cualquier enfermedad propia de los animales que incidentalmente puede

transmitirse a seres humanos.

f. Prueba de Elisa: es una técnica que se utiliza como prueba (inespecífica) para detectar

el VIH en los años 80. La primera prueba especìfica fue ________

g. Prueba de papanicolau: se puede utilizar para detectar cáncer incipiente de ùtero

BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 2
La bacteriología es el estudio del organismo bacterianos

B. medica: es el estudio de los agentes infecciosos causantes de enfermedades, el diagnóstico,

tratamiento y control del mismo

Microbiologia es el estudio de los seres microscópicos, se divide en: bacteriologìa, virologìa,

parasitologìa, micología, y las subciencias son: epidemiologìa e inmunología

VARRO: año 2 AC Estableció el principio de contagio por particulas y las denomino MIASMAS

(sospecho desde el inicio que las enfermedades eran transmitidas por particulas en la piel)

Se les atribuyen probablemente haber visto los microorganismos:

Principalmente a; ANTON VAN LEWENGHOECK: Se le atribuye científicamente el

descubrimiento de microscopio por el uso de lentes de vidrio al microscopio óptico la cual se

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amplificaba por 270x. Fue el primero es ver y describir un microorganismo el BOTRITIS

BASSICAL

Luego apareció microscopio óptico amplificaba 1200x y finalmente el m. electronico que

amplifica 30.000 x utiliza radiacion permitiendo estudiar virus (nanometro) y bacterias

(nanomicra)

También a Bacon

GIROLAMO Fracastoro: en Venecia (1476-1478) publicò LA TEROIA DEL CONTAGIO: las

enfermedades contagiosas son trasmitidas por gérmenes vivientes llamados “seminaria morbis”.

Robert hook: Desarrollo el microscopio compuesto y confirmo el descubrimiento de lewenhoeck.

Agente etiológico de la muscardina es epotritis vasijae -beauveria bassiana- primer

organismo observado.

TEORIA DE LA GENERACION ESPONTANEA

La vida se origina de la nada (abiogénesis) carne descompuesta aristoteles.

Contribuyen:

John Needham, Jan Baptiste Van Helmont, pouchet (teoría del aire elástico)

Negacion de la teoría

Por francesco redi; puso un trapo sobre la carne fundamentando la biogénesis

Lazzaro Spallazai: hirvió carne ´por una hora y vio que no se formaba vida

John Tyndall: comprobó que en el polvo se transportaban gérmenes (tindalización esterilización

fraccionanda por calentamiento discontinuo).

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Ferdinand Cohn: padre de la bacteriología, descubrió que el uso del calor destruia a los

microorganismos

Louis Pasteur: descubrió la fermentación; la vacuna contra la rabia, técnica PASTEURIZACION

para matar gérmenes patógenos de alimentos calentando y enfriando rápidamente. Clasifico las

bacterias en aerobia y anaerobias, estudios del BACILO DEL ANTRAX o carbunco (capsulado

de origen proteico).(zoonosis)

Robert Koch: fundador de la microbiología, estudios sobre los carbuncos, Descubrio al Vibrio

cholerae, técnicas de aislamiento de cultivo puro, , uso de cultivo solidos y agar, Descubrio el

bacilo de koch (TUBERCULOSIS) o basilo tuberculoso Micobacterium tuberculoso, y el bacilo

de hasen o de la lepra, o micobacterium leprae. Uso de colorantes, uso de medios de cultivo

POSTULADOS DE KOCH o comprobación de agentes infecciosos:

Permitian establecer cual era el agente causal de dicha enfermedad infecciosa

1. Encontrar el organismos en animales enfermos

2. Aislamiento del microorganismo en un cultivo puro fuera del animal

3. Al inicia reproduce la enfermedad y se la reinocula en un animal sano suceptible

4. Volver a encontrar y aislar el microrganismo del animal infectado.

En la actualidad los postulados de Koch no se cumplen en todas las patologias.

Ejemplo: sifilis humana (enfermedad infecciosa bacteriana) que tiene como agente etiológico

Treponema pallidum - espiroqueta pallidum no cumple los postulados de Koch porque es una

bacteria que no ha podido ser cultivada

Otras bacterias que no han podido ser cultivas: bacilo de la lepra (bacilo de Hansen)

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Bacterias alcohol-acido resistentes:

Mycobacterium tuberculosis:

Mycobacterium leprae:

Año 1928: descubrimiento de Fleming de la penicilina. Obtuvo la penicilina a partir de un hongo

Penicillum chrysogenum

Medios de cultivos:

Joseph lister: desarrollo primera técnica de cultivo

Es la técnica de generar un ambiente artificial optimo y con nutrientes necesario para el

crecimiento de un organismo a estudiar.

Medios de cultivo naturales: papa, leche, sangre

TAXONOMIA

La ciencia de clasificación de los seres vivos recibe el nombre de taxonomía

Se clasifica por un TAXÓN más alto que el resto que es el dominio

 Dominio

 Filum o division

 Clase

 Orden

 Familia

 Género

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 Especie

 Subespecie

La nueva clasificación de los seres vivos en tres dominios:

El dominio se los representa como un árbol que tiene tres ramas

Eucarya - Plantas, animales, hongos y protistas.

Archaea - Microbios que viven en ambientes extremos (extremofilas), son las más primitivas

(arqueobacterias) estas se distinguen de una bacteria verdadera no tienen una pared bien

estructurada y tienen un compuesto similar al de la pared de la bacteria que es el peptido glucano

en menor cantidad.

Ejemplo: Bacteria metanógena, obtienen energía mediante la producción de gas natural, el metano

Bacterias hipertermófilas, bacterias que habitan a altas temperaturas mayores de 100 C en las aguas

termales y otras que se van al otro extremo a temperaturas bajo 0 C en el fondo del oceáno

Bacteria - Todas las demás bacterias.

Criterios para clasificar: volumen, forma, característica de tinción, motilidad, necesidad

fisiológica, reacciones metabólicas, carácter etiológico, c. genético, composicion antigénica.

Que es una célula bacteriana

Va a ser análogo a una célula biológica (unidad estructural de vida). La célula bacteriana va a

diferenciarse de la célula biológica porque no posee orgánulos.

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La célula bacteriana se asemeja más a la célula vegetal que animal por su pared celular que es

rigida en lugar de blanda pero se diferencia de las dos celulas(animal y vegetal)no tiene núcleo, no

tiene organelos sólo los ribosomas.

Tamaño promedio de la bacteria: 0.3 a 1 hasta 10 micras

Se reproducen por fisión binaria

Macro bacterias: Thiomargarita namibiensis 750 micras; Epulopiscium fishelsoni: 200 a 700

micras.

Clasificación de los microorganismos

A medida que evolucionó los microorganismos se dieron cuenta que no todos eran iguales, algunos

eran más evolucionados que otros en cuestión de que tenían núcleo

Los estreptobacilos son los bacilos dispuestos en cadena. Los Bacilos son alargados. Bacilos en

latín es bacillun y castellano es bar en forma de barba. Si la bar se presentan en forma de cadena

es un estreptobacilo pero si se presenta de dos en dos es un diplobacilo.

Campylobacter es un bacilo gram negativo tienes formas de alas de gaviota es un diplobacilo.

Si la bacteria tiene forma helicoidal se denomina espirilo predecir que tiene a varias espiras cada

curva es una espira, si la bacteria tiene una sola espira como una coma se denominan vibrio y

cuando tiene varias espiras se denomina espiroquetas.

Entre ellas los treponemas por ejemplo estreponema palida o treponema pallidum es el agente

causal de la sífilis humana.

Método de tinción de las bacterias

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Las bacterias para poder ser observadas tienen que ser teñidas y hay diversos métodos de tinción:

Método de tinción simple que utiliza un solo colorante se encuentran el azul de metileno y el

Violetta de genciana para observar su morfología.

El método de tinción compuesto utilizando sólo un colorante sino dos o más colorante entre otras

sustancias. Entre esos métodos se tiene un método de tensión constante qué es el método de gram

, fue inventado por Christian gram.

Según el método de gram las bacterias se pueden presentar de color violeta o Rosado. No se

presenta de color Violetta la bacteria se denomina gram positivo por medio de la técnica de gram

y se fija la safranina de color rosado la bacteria se denomina gram negativo.

El método de Gran consiste :

En el primer colorante Qué es Violeta de genciana que tiñe de color morado cuando la bacteria es

gram positivo.

Cubre el frotis( es un barrido o extendido) con Violeta de genciana se lo deja por un minuto y

luego se lo lava si la bacteria es gram positivo se teñirá de color morado.

Vas a seguir se cubre con licor de gram que ayuda a fijar el colorante que se puso inicialmente se

vuelve a lavar nuevamente y se saque licor de gram.

Se coge el alcohol potable para decolorar la placa para sacarle el exceso de Violeta.

después de esto se aplica la safranina y se deja por 10 segundos si la bacteria no Captor Violeta

probablemente va a captar la safranina que es de color rosado. Se lava la safranina y se deja secar

para luego aplicar aceite de cedro lugol Ahora sí está listo para observar.

Si se presentan de color morado son gram positivo y si se presentan de color rosado son gram

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Cuando se toma la muestra de un forúnculo como la etiología gram positivo es estafilococo estos

se presentan de forma agrupada vamos a encontrar un poco de cocos de color morado dispuestos

al racimo.

Un paciente con infección de vías urinarias puede ser o gonococo o echerichacoli para infección

vías urinarias por bacterias.

Si fuese gonococo se encontraron diplococo gram negativo en forma de grano de café de color

rosado Por qué plantó la safranina., organelos entonces se hizo una division los que eran primitivos

(involucionados) son las bacterias y las arqueobacterias incluso las algas verdeazules o

cianobacteria creándose el REINO PROCARIOTA (CHATTON)

Los más evolucionados que eran las algas, hongos, protozoarios se los incluyo en el REINO

EUCARIOTA o PROTISTA (Haeckel)

REINO FUNGI (WHITACKER) saco de los eucariontes a los hongos

REINO ANIMAL

REINO VEGETAL

Estructura

Caracteristicas similares a células vegetales y animal: alimentación por pinocitosis, pared rigida,

sin cloroplasto pero si con cromatóforos

Pueden ser:

redondos (dimensiones iguales) u ovalados = cocos; cadenas de cocos= estreptococo, racimo de

cocos= estafilococo, 8 cocos, es en sarcimos, diplococos, tetracocos.

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 Cocobacilo: no es completamente redondo a lo que denominamos pleomorfismo

 Estreptococos ligeramente alargados en el sentido del eje

 Gonococo de neisser (diplococo) causa la gonorrea similar a un grano de café tienen un

lado plano por donde se encuentran unidos

Bastones = bacilos ; estreptobacilo= cadenas de bacilos; diplobacilos;

 Dipolococos: Neumococo o estreptoco pneumoniae (neumonia) va a ser un diploco

ligeramente lanceolado va a tener un aspecto de punta de lanza

 Bacilos Gran negativo; Campylobacter tiene un aspecto de ala de gaviota

Vibrio = espirilo de una vuelta, espiroqueta son varias vueltas del espirilo

 Espiroqueta pallidum (sifilis)

 Vibrio cholerae

Las bacterias para poder ser observadas deben ser teñidas para lo cual tenemos los metodos de

tinción

TINCION SIMPLE: un solo colarante

 Azul de metileno la bacteria se presenta de color azul

 Violeta de gensiana se presenta color morado

TINCION COMPUESTA: dos o más colorantes u otras sustancias

Metodo de Grahm

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 Violeta de gensiana (Grahm positiva) color morado

 Safranina (Grahm negativa) color rosado

Poseen una envoltura o pared de péptidoglucano formada por acetil glucosamina y ac. Mureina.

Clasificadas por las tinciones de gram; las bacterias GRAM+ poseen pared gruesa con pocos

lípidos y se tillen con violeta de gensiana, posee una toxina interna llamada Ac. Teicocico

Las bacterias Gram- posee una pared peptidoglucano mas delgada y mas lípidos, posee un

amembrana externa formado por lipopolisacarido LPS que vendría a ser su antígeno y se tiñe con

safranina (rosa).

Su capsula en forma de moco se la conoce como glucocaliz que le da adherencia que se considera

capa S que es su forma virulenta.

El bacilo del antra y la de licheniformes posee una capsul a polipeptídica que la compone de Ac.

Poli-d-glutamico.

La capsula de proporciona forma, aherencia y protección, forma y virulencia (factor de virulencia.

La bacterias capsuladas forman colonias S lisa, pero si tienen aspecto rigoso R son bacterias si

capsula por ende avirulentas.

LA PARED:

Es una estructura rigida de peptidoglucanos que le confiere forma y protección, permite la

coloración y para componentes antígenos

GRAM+

Posee una pared mas gruesa (40 capas) de peptidoglucano, absorbe la violeta de gensiana, el Ac

teicocio se adhiere a la membrana y citoplasma y es un antígeno, rica en proteínas.


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GRAM-

De pared delgada (2 capas), posee una membrana externa que la separa de la membrana formada

de lipopolisacarido, posee mas grasa y absorbe mas safranina dándole color rosa.

Las anquibacterias caracterizado por vivir en condiciones extremas posee seudopeptidoglucano

por lo que no posee pared.

Existen bacterias que no poseen pared naturalmente y se las conoce como micoplasmas . una

bacterias puede perder su pared o destrucción de la pared celular por acción de lisozimas que

destruyen el peptidoglucano, la penicilina es una fármaco que actua en la pared evitando la

producción de peptidoglucano.

Los estreptobacilos son los bacilos dispuestos en cadena. Los Bacilos son alargados. Bacilos en

latín es bacillun y castellano es bar en forma de barba. Si la bar se presentan en forma de cadena

es un estreptobacilo pero si se presenta de dos en dos es un diplobacilo.

Campylobacter es un bacilo gram negativo tienes formas de alas de gaviota es un diplobacilo.

Si la bacteria tiene forma helicoidal se denomina espirilo predecir que tiene a varias espiras cada

curva es una espira, si la bacteria tiene una sola espira como una coma se denominan vibrio y

cuando tiene varias espiras se denomina espiroquetas.

Entre ellas los treponemas por ejemplo estreponema palida o treponema pallidum es el agente

causal de la sífilis humana.

Método de tinción de las bacterias

Las bacterias para poder ser observadas tienen que ser teñidas y hay diversos métodos de tinción:

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Método de tinción simple que utiliza un solo colorante se encuentran el azul de metileno y el

Violetta de genciana para observar su morfología.

El método de tinción compuesto utilizando sólo un colorante sino dos o más colorante entre otras

sustancias. Entre esos métodos se tiene un método de tensión constante qué es el método de gram

, fue inventado por Christian gram.

Según el método de gram las bacterias se pueden presentar de color violeta o Rosado. No se

presenta de color Violetta la bacteria se denomina gram positivo por medio de la técnica de gram

y se fija la safranina de color rosado la bacteria se denomina gram negativo.

El método de Gran consiste :

En el primer colorante Qué es Violeta de genciana que tiñe de color morado cuando la bacteria es

gram positivo.

Cubre el frotis( es un barrido o extendido) con Violeta de genciana se lo deja por un minuto y

luego se lo lava si la bacteria es gram positivo se teñirá de color morado.

Vas a seguir se cubre con licor de gram que ayuda a fijar el colorante que se puso inicialmente se

vuelve a lavar nuevamente y se saque licor de gram.

Se coge el alcohol potable para decolorar la placa para sacarle el exceso de Violeta.

después de esto se aplica la safranina y se deja por 10 segundos si la bacteria no Captor Violeta

probablemente va a captar la safranina que es de color rosado. Se lava la safranina y se deja secar

para luego aplicar aceite de cedro lugol Ahora sí está listo para observar.

Si se presentan de color morado son gram positivo y si se presentan de color rosado son gram

negativo.

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: Cuando se toma la muestra de un forúnculo como la etiología gram positivo es estafilococo

estos se presentan de forma agrupada vamos a encontrar un poco de cocos de color morado

dispuestos al racimo.

Un paciente con infección de vías urinarias puede ser o gonococo o echerichacoli para infección

vías urinarias por bacterias.

: Si fuese gonococo se encontraron diplococo gram negativo en forma de grano de café de color

rosado Por qué plantó la safranina.

BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 3

 Los métodos de tinción simple sirven para identificar la morfología de la bacteria, en

cambio, los métodos de tinción compuesto, como el método de Gran o el método de Ziehl

Neelsen, nos permite identificar si la bacteria es Gram + o Gram – cuando se tiñe con el

método de Gram.

 Cuando se tiñe con el método de Ziehl Neelsen permite identificar a la bacteria alcohol

ácido resistente, porque en el método de Ziehl Neelsen se utiliza el alcohol ácido, que a

diferencia del método de Gram se utiliza el alcohol potable.

¿Cuál es el método o técnica de Gram?

El método de Gram consta de 4 pasos:

1. Violeta de genciana

2. Licor de Gram

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3. Alcohol potable

4. Safranina

Pasos del método de Ziehl Neelsen

Consta de 3 pasos:

1. sustancia implicada

2. alcohol ácido

3. azul de metileno

¿Cuáles son los pasos para realizar un frotis?

El frotis se lo puede hacer tomando la muestra de lo que uno quiere investigar o tomando la muestra

de un medio de cultivo donde ya se desarrolló la muestra en colonias.

1. Coger la lámina portaobjetos.

2. Tomar la muestra ya sea de un medio de cultivo donde está la colonia o tomar la muestra

del sitio donde uno va a investigar (absceso, boca)

3. Poner la muestra en la lámina portaobjeto

4. Colocarle una gota de solución salina y hacerle una suspensión

5. De ahí, hacer un extendido, no un barrido

6. Secarlo al ambiente o al calor

7. Una vez que ya está seco, uno puede observar con lente de inmersión usando una gota de

aceite de cedro

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¿Qué es un medio de cultivo?

Es una sustancia que tiene las características físico-químicas, tiene nutrientes, tiene todos los

elementos adecuados para que la bacteria se pueda desarrollar.

¿Cómo está constituido el Agar sangre?

Agar mezclado con sangre. Mezcla el agar con la sangre, la pone en la caja de Petri, la deja que

se solidifique. Una vez que se solidifica ya está hecho el medio de cultivo. Ese medio de cultivo

es de color rojo, por eso se llama Agar sangre porque está hecho a base de sangre…y es en ese

medio de cultivo donde uno siembra la muestra para que se desarrolle ahí una bacteria… de esa

bacteria se constituye una colonia y eso ocurre porque la bacteria tiene las condiciones adecuadas

para desarrollarse en el medio de cultivo.

¿Qué es un medio de cultivo natural?

Es el medio de cultivo que está constituido por un material natural como lo es la sangre, la papa,

la leche, el pan

¿Qué es un medio de cultivo artificial?

El que es elaborado por síntesis, el que es sintético, el que es elaborado en un laboratorio.

¿Cuánto mide una bacteria?

De 0,3 hasta 1 o 10 micras…en la actualidad existen bacterias macroscópicas de más de 10 micras.

¿Cuál es la capacidad de resolución del microscopio óptico o sea, que tamaño debe tenr usted

como mínimo para poder observar al microscopio óptico una bacteria?

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Capacidad de resolución ocular es de 0,2 micras. Que quiere decir eso, que el microscopio óptico

me permite ver hasta una bacteria que mida 0,2 micras.

¿Cuáles son las bacterias más grandes?

Thiomargarita namibiensis y Epulopiscium fishelsoni

¿Cuáles son las bacterias más pequeñas?

Las clamidias, las isquepsias y los micoplasmas porque miden tamaños menores a 1 micra.

¿En qué se diferencia los micoplasmas de las demás bacterias?

Los micoplasmas de las demás bacterias se diferencian en que no tienen pared, es decir, son

bacterias sin pared.

¿Qué es lo que dice los postulados de Koch?

Los postulados de Koch Sirven para encontrar la etiología de 1 enfermedad. Quiere decir que los

postulados De Koch sirven para identificar la causa infecciosa de una enfermedad que yo no

conozco

1. La bacteria se debe encontrar, estar aislada en todos los animales enfermos que presentan

una misma enfermedad.

2. Aislarlo en un medio de cultivo en forma pura, ¿Por qué?, porque en un medio de cultivo

puede desarrollarse cualquier cantidad de bacterias…la idea del postulado de Koch es

aislarlo en forma pura el organismo que obtuve de todos los animales que tienen una misma

enfermedad, es decir, mismos síntomas y signos.

3. Tiene que inocularse el organismo que fue aislado de forma pura en un medio de

cultivo…inocularse a animales sanos y tiene que reproducirse la misma enfermedad

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¿Cuáles enfermedades no cumplen el agente etiológico de los postulados de Koch?

Spirotheca pallidum o Treponema pallidum. No cumplen porque no han podido ser cultivados.

Estructura bacteriana

Pared

Le sirve de protección, sirve para darle la forma, también sirve para la tinción de la bacteria, le

sirve para contener algunos antígenos

¿Qué tipo de pared tiene la bacteria?

¿Cuál es el componente más importante de la pared de la bacteria?

¿Qué es el glucocáliz?

Es una forma de presentación de la capsula de la bacteria, es la capsula de la bacteria. NO ES LA

PARED. Se denomina glucocáliz cuando presenta un aspecto de tipo enmarañado

¿Cómo está constituido la pared?

Por un polímero que es el péptidoglicano, que es un compuesto que solamente la presenta la célula

bacteriana. El esqueleto de la pared prácticamente lo constituye el peptidoglicano.

 La pared de la bacteria puede ser de tipo Gram + o Gram -.

 La pared de la bacteria Gram + tiene mayor grosor que la Gram -, y tiene mayor cantidad

de peptidoglucano.

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¿Qué cantidad de peptidoglucano tiene los micoplasmas?

Como no tiene pared, esa bacteria no tiene peptidoglucano

 La bacteria Gram + en su pared tiene el ácido teicoico y lipoteicoico que no se encuentra

en la pared de las Gram -.

 La pared de las Gram – tiene composición especialmente a base de lípidos o grasas… o

sea, a base de glucolipidos, o lipopolisacaridos

¿Por qué la bacteria se la llama Gram + o –¿

Por la tinción…porque la pared de las Gram + tienden a teñirse con el violeta de genciana.

¿Cuál es la explicación por la cual las Gram + se tiñen con violeta de genciana y no con

safranina?

Una de la explicaciones es que la composición de la pared de las Gram + es rica en proteínas…este

entra (el colorante) a través de los poros y cuando se echa el alcohol se deshidrata la pared, por lo

tanto, se cierran los poros y queda retenido el violeta de genciana…

Por el contrario, en las Gram negativas, su pared es rica en grasas…al echarle el alcohol, permite

que se disuelvan las grasas, se abran los poros y se pierda el violeta de genciana…como el último

de los pasos es de la safranina…entraría la safranina…por eso la bacteria queda de color rosado.

El Por qué depende de la composición de la pared aparentemente.

 La pared de la bacteria es sensible a la acción de algunas enzimas, por ejemplo, hay una

enzima que es la lisozima o muramidasa…la lisozima se encuentra normalemente en todos

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los líquidos corporales del organismo…por ejemplo, se encuentra en las secreciones

bronquiales, en las lágrimas, saliva, sudor

¿Qué características tiene la lisozima?

Esta enzima es capaz de disolver la pared de las bacterias…si esa enzima disuelve la pared de la

bacteria Gram positiva, la bacteria pierde toda su pared, y en ese caso toma el nombre de

protoplasto, es decir, solamente queda el protoplasma, porque pierde la pared.

En el caso que las bacterias afectadas sean las Gram -, por acción de la lisozima, la bacteria no

pierde toda la pared, pierde fragmentos de la pared, en ese caso la bacteria se denomina

esferoplasto.

BACTERIOLOGIA
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Clase 4
La fagocitosis de la bacteria, los fagocitos permiten permanecer viables como bacterias, por lo

tanto las hace virulenta.

La composición de la capsula varía de acuerdo a la bacteria, la mayor parte de la bacteria tienen

capsula de naturaleza polisacárido (un tipo de azúcar), aunque el bacilo de ántrax es una de las

bacteria que tiene capsula de naturaleza peptídica (proteínas). La capsula está bien estructurada en

la periferia, alrededor de la bacteria bien condensada, se denomina capsula propiamente dicha.

Pero si la capsula adopta la forma de un marañado, marañado de fibras se las conoce con el nombre

de Glucocaliz o puede tener un aspecto de limo cuando tiene una característica mucoide y es

delgada.

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El fenómeno S-R establece que las colonias de las bacterias capsuladas tienden hacer lisas, son las

llamadas colonias S en cambio que las colonias constituidas por bacterias no capsuladas dan origen

a colonias llamadas R o rugosas, ese se conoce con el nombre de fenómeno S-R, Que quiere decir

eso? Que las colonias cuando son cultivadas, y están bien estructurada, periferia bien delimitada

es una colonia bacteriana de tipo S ósea capsulada (las bacterias que constituyen esa colonia poseen

capsulas), cuando las colonias están constituida por bacterias que no poseen capsulas, es de aspecto

rugoso, irregular en la periferia no es bien delimitada la periferia, esas son las colonias R. Están

relacionadas con la presencia de bacterias virulentas o avirulentas.

Flagelos

La bacteria tiene estructura de características filiforme entre ellas los flagelos (Son apéndices

filiformes constituida por una proteína denominada Flagelina). En generalmente termina como en

un gancho a nivel de la membrana. No todas las bacterias tienen flagelos. Las bacterias que poseen

flagelos se denominan motiles y las que no se denominan no motiles. Eso quiere decir que la

motilidad está relacionada con resistencia de los flagelos.

Cuáles son los géneros que son no motiles?

Son el género Shigella, Yersinia y Klebsiella, característicamente no tienen motilidad.

Yersinia tiene 3 especies:

 Yersinia pestis (Agente etiológico de la peste).

 Yersinia enterocolitica.

 Yersinia pseudotuberculosis.

24
Las 2 últimas Yersinias tienden a ser motiles pero a temperaturas por debajo de 28 grado. Y

también produce cuadros diarreicos intestinales.

Según la disposición de los flagelos:

 Peritricas: flagelos alrededor.

 Monotricas: cuando tiene un solo flagelo en un extremo.

 Anfitricas: Un flagelos en cada polo.

 Lofotricas: Cuando tiene un mechón de flagelo en un polo.

 Atricas: Sin flagelos.

En los flagelos se constituye un antígeno:

 Antígeno H: Antígeno flagelar.

 Antígeno O: Antígeno somático o de soma bacteriano.

 Antígeno K o VI: de cubierta alrededor de toda la bacteria.

Otro aspecto filiforme con los denominado pilis o pelo:

Son apéndices filiformes constituidos por una proteína llamada pilina. Los pelos a diferencia de

los flagelos son de menor tamaño, alrededor de 3 a 8 milimicras.

Importancia: Sirve para adhesión, los pelos en realidad son unas adhesinas, estructuras que las

bacterias puedan fijarse en los tegumentos por ejemplo: gonococo de neisser, el agente etiológico

de la gonorrea, cuando se mete por la uretra la bacteria tiende a fijarse en el epitelio, mucosa o

membrana, y se agarra de ahí y dificulta la eliminación.

Los pelos están relacionado con la virulencia de la bacteria. 2 estructuras están relacionadas con

la virulencia de la bacteria:

25
 La capsula: Dificulta o impide la fagocitosis por medio de los fagocitos.

 Los pelos o pilis: Hacen que se adhiera y dificulte la eliminación.

Los pelos pueden ser:

 Los pelos comunes, que son los que se encuentran en mayor cantidad.

 Y los otros que son más largos, en menores números y son llamados los pelos sexuales o

pilis sexuales.

¿Por qué se llaman pilis sexuales?

Porque permiten la transferencia de material genético por medio de un sistema o mecanismo que

se denomina la conjugación. Es un mecanismo de recambio genético bacteriano.

¿Qué ocurre en la conjugación?

En la conjugación participan 2 células de las cuales una generalmente le transfiere material

genético a la otra. Y los pelos sexuales de cada una, forman un puente a través del cual se

transfieren el material genético. Esto se hace generalmente por medio del factor S que son los

llamados plásmidos, son ADN. Generalmente ocurre con las células que tiene pilis.

Se debe tener presente que hay bacterias que no tienen los pelos sexuales o pilis, sin embargo a

veces por contacto pueden hacer la trasferencia de una bacteria a otra. Eso puede ocurrir con los

estreptococos.

En el extremo de los pelos en ocasiones se constituye un azúcar que es la manosa. La manosa es

un azúcar que es una adhesina que permite ligarse en un receptor de los tegumentos que es la

llamada leptina. La leptina es un receptor que es una adhesina, ayuda a fijar a la bacteria por

intermedio de la manosa que tienen en el extremo del pelo.

26
Otra estructura que tienen la bacteria, especialmente las formas helicoidales o espiridales son el

llamado filamento axial. El filamento axial es propio de las bacterias espiridales o helicoidales las

que tienen varias espiras, y está constituido por unas series de flagelos que son endoflagelos (están

por dentro de la bacteria) nacen de un extremo de la bacteria y del otro extremo, es un mechón de

flagelos que nacen en los extremos que van para el centro y el otro mechón que van por el otro

lado, en la parte central, se envuelve o se recubre por una vaina, la vaina o endoflagelos se conoce

de filamento axial y es lo que da la motilidad a las bacterias espiridales por ejemplo: Espiroquetas,

Treponemas. ¿Cómo se mueve la bacteria con el filamento axial? Lo que hace el filamento axial

es contraer, se contrae y se estira (el mecanismo por el cual las bacterias espiridales tienen la

motilidad). Motilidad relacionada con los flagelos y el filamento axial.

Esporas

Otras estructuras que tienen las bacterias son las esporas. ¿Qué son las esporas? Son formas de

resistencia de la bacteria para sobrevivir. No para sobrevivir de los antibióticos sino del ambiente

en donde se encuentra. Cuando la bacteria se encuentra en un ambiente hostil, inadecuado, que no

le permite mantenerse viva o viable entonces la bacteria puede adoptar una forma irrectangulable.

Producirse unas capas y formar una estructura esférica que se conoce con el nombre de esporas

(forma de resistencia de la bacteria para sobrevivir en un ambiente inadecuado). Cuando la espora

encuentra el ambiente adecuado, se vuelve la viabilidad a la bacteria.

La espora está constituida por varias capas que tienen o cubiertas, que tienen una resistencia viable.

Una resistencia y dureza muy elevadas. La cubierta más importante por peptidoglucano pero la

dureza o resistencia de la pared de la capa está dada por un compuesto el ácido dipilcolinico+

calcio. La capa más externa es lo que se conoce con el nombre de corteza, está recubierta por un

contenido de aspecto quitinoso, semejante a la quitina. Las esporas se forman en el interior de la

27
bacteria y pueden localizarse ya sea en el extremo, puede ser terminal o que no llegue al extremo

subterminal o pueden ser en el centro, en este caso es central.

Las esporas por el sitio en donde se disponen pueden ser:

 Central.

 Subterminal.

 Terminal.

Ahí dos géneros bacterianos característicamente esporulados (Ósea tienen esporas) son:

 Bacilus.

 Clostridium.

El género Bacilus tienen el ejemplo más característico es el bacilo anthracis o bacilo del carbunco

produce la zoonosis. Los Bacilus son aerobios y tienen esporas que no deforman a la bacteria. En

cambio el otro género que también es esporulados es el género Clostridium tiende hacer anaerobio

con esporas deformantes. Ejemplo todo los Clostridium que existen:

 Clostridium tetani.

 Clostridium botulino.

 Clostridium prefingens o welchii entre otros.

Las bacterias tienen unas estructuras que son los mesosoma: Son invaginaciones de la membrana

que forman tabiques. Importancia: Participan en la síntesis de la pared de la bacteria y en la

división de la bacteria también, son de carácter estructural. Eso en relación a lo que es estructura

bacteriana.

Fisiología bacteriana

28
La bacteria fisiológicamente requiere la presencia de otros nutrientes necesarios para constituir la

estructura, producir energía y para realizar su metabolismo. Nutrientes que necesita la bacteria:

proteína, azucares, carbohidrato y lípidos que requiere algunos minerales como Mg, Fe. Y

bacterias que tienen proteínas específicas, son las que tiene los sideroforos, el hierro del individuo

para ellas poderla utilizar y distinguir y poder sobrevivir por ejemplo: gonococo de Neisser es el

agente etiológico de la gonorrea. El bacilo diftérico también requiere hierro. Y que lo acumulan o

lo tienen los sideroforos. Entonces la bacteria también necesita Ca, Mg, Cl, Na, los llamados

factores de crecimiento (Factor B).

Según los requerimientos nutritivos las bacterias se las conoces como bacterias autótrofas, y

bacterias heterótrofas.

Bacterias autótrofas: Tienen la capacidad de síntesis completa, ósea elaborar sus propios

nutrientes. Requiere solo de los elementos como el C, N y son capaces de sintetizar proteínas.

Esas bacterias son denominadas autótrofas: Capacidad de síntesis completa o también llamadas

litotrofas en especial cuando son capaces de la síntesis a partir de compuestos inorgánicos. Son

capaces de sintetizar nutrientes compuestos inorgánicos como el dióxido de carbono.

En cambio los heterótrofos no tienen capacidad de síntesis, que requieren que se le añadan los

nutrientes elaborados porque no lo pueden sintetizar, también se las denomina organotrofos.

Generalmente cuando de energía para la síntesis la obtienen de la luz se las denomina fotolitotrofas

en el caso de algunas autótrofas, las que hacen el fenómeno de fotosíntesis ejemplo: la bacteria del

agua, son bacterias fotosintéticas, aquellas como las plantas para obtener energía para la síntesis

de sus estructuras utilizan la energía solar para transformar en energía química al utilizar el C, N

29
de los compuestos inorgánicos. En cambio cuando la energía la utilizan a partir de compuestos

químicos como las heterótrofas o también llamadas organotrofas o quimioorganotrofas.

El mecanismo por el cual obtiene una energía si es compuesto químico u orgánico se denomina

quimioorganotrofas y las organotrofas son generalmente heterótrofas (capacidad de síntesis) pero

la mayoría acaba termocompuesto o pueden ser los azucares (glucosa) los deshidrata en cambio

las autótrofas generalmente la energía la toman de la luz por eso se llama fotolitotrofas y lo hacen

a partir de compuestos inorgánicos (tienen capacidad de síntesis solamente se les añade dióxido

de carbono, y puede sintetizar el carbono y utilizar para formar carbohidratos y utilizarlo en la

producción de su energía.

La mayor parte de las bacterias son heterótrofas (capacidad de síntesis). Eso en cuanto al

requerimiento de nutrientes.

Las bacterias tienen algunas características capciosas por ejemplo: Hay bacterias que se

desarrollan en presencia de oxígeno y mueren en presencia de vino, estas bacterias se denomina:

Aerobias obligadas o aerobias estrictas. Quiere decir que requieren la presencia de oxígeno para

sobrevivir Ejemplo: Bacilo tuberculoso, speudomonas. Por el contrario hay bacterias que no crecen

en presencia de oxígeno, porque el oxígeno las mata, estas son las anaerobias y ahí las llamadas

anaerobias estrictas (no pueden crecer en presencia de oxigeno) Ejemplo: Clostridium Tetani, C.

Welchii.

Hay bacterias que pueden crecer tanto en presencia o en ausencia de oxígeno y se las denomina

anaerobias facultativas y ahí otras que pueden crecer en presencia de mínimas cantidades de

oxígeno y se llaman microaerofilas o aerotolerante porque toleran pequeñísimas cantidades de

oxígeno.

30
En general las bacterias que son:

 Aerobias obligadas.

 Anaerobias obligadas.

 Anaerobias facultativas.

 Microaerofilas.

 Aerotolerante.

La mayor parte de las bacterias son anaerobias facultativa, que llegan a crecer tanto en presencia

como en ausencia de oxígeno.

Las bacterias requieren las existencias de temperaturas. La mayor parte de las bacterias a que

temperatura desarrolla? A 37-35 grados y son las llamadas mesófilas (La mayor parte de bacteria).

Y de ahí a los extremos, algunas crecen a temperaturas bajas y otros a temperaturas altas. Las que

crecen a temperatura baja (Psicrofilas) de 15 grados como promedio, pero tienen una temperatura

fluctual de 0 a 20 grados, con promedio de 15. Mesófilas están en la mitad de 35-37 grados, se

pueden incluir a las que están mayores de 20 y menos de 40 de rango. Las que son más de 40,

específicamente más de 60 grados se denominan termófilas. Y las están en una temperatura de más

de 80 grados se denominan Hipertermofila. Eso quiere decir que la mayor parte son mesófilas.

Las bacterias requieren también del pH (Concentración de hidrogeno) se establece en el neutro,

acido, básico. El pH puede ser acido como puede ser alcalino. El pH neutro es 7, por abajo es ácido

y por arriba básico. La mayor parte de las bacterias desarrollan a pH neutro sin embargo hay

bacterias que son muy pocas desarrollan a pH acido. En el estómago, acides (Ácido clorhídrico

pH: 1) entre las pocas bacterias que pueden sobrevivir en pH acido esta por ejemplo la sarcina

ventriculi, Lactobacilos, Helicobacter pylori (se esconde detrás de la mucosa donde es más alcalina

31
moco y epitelio y a su vez produce ureasa (aumenta la alcalinidad). Son de las pocas bacterias que

se encuentran a nivel del estómago, por eso estomago en si construye una barrera inicial para la

diseminación de una bacteria gastrointestinal.

Hay bacterias, en cambio crecen y se multiplica con pH alcalino por ejemplo: el Vibrio cholerae,

se desarrolla a pH de 8 en un rango que va de 6.9 a 9.6 en un promedio de 8.

La persistencia de enfermedades en una bacteria que produce esa patología a nivel de los intestinos

o pude ser el Cholera, depende muchas veces del volumen se llenó, si el alimento contaminado

Vibrio cholera es muy escaso, pocas bacterias. Es probable que las bacterias, se come el alimento,

pero el alimento no le producen enfermedades porque las bacterias no logran pasar la barrera que

es acidez del estómago que mata la bacteria. Cuando el inoculo, ósea la cantidad de bacteria en el

alimento es bastante es probable que algunas cantidades hacen es atravesar la barrera de acidez del

estómago, en cambio no te vas a morir en ese caso si se produce enfermedades.

Lisozima: Enzima que protege, se encuentra en las secreciones corporales: lagrimas. Capaz de

destruir la bacteria, parte de la inmunidad innata de los seres humanos. La piel y mucosa es parte

de la inmunidad (barreras).

Las bacterias fisiológicamente requieren de agua. Tienen una humedad alrededor del 80-90%. La

desecación las mata. Por eso muchas veces cuando se toma una muestra, y espera encontrar una

bacteria ahí, pero no se sabe que es muy sensible a la desecación. Tienen que trasladarla en medios

de cultivo, que mantienen la unidad adecuada para que sobreviva la bacteria especialmente si tiene

que desplazarla a tramos muy largos. Hay medios de cultivos, se llama medio de cultivos de

transporte (Rappaport-Vassiliadis).

32
Hay bacterias que requieren la presencia de cloruro de sodio ósea de sal, las bacterias que toleran

concentraciones de cloruro de sodio mayores al 7.5% se denominan bacterias halófilas por

ejemplo: Estafilococo aureus.

Las que toleran concentraciones mayores del 10% se denominan haloduricas, algunas bacterias

toleran presiones osmóticas elevadas como son altas concentraciones de azucares en el medio, esas

bacterias se denominan osmofilas.

Hay bacterias que requieren dióxido de carbono para crecer y se las denomina capnofilicas

Ejemplo: muchos de los estrepcocos son capnofilicas, igual al gonococo requiere dióxido de

carbono.

¿Qué es la quimiotaxis?

Está relacionada con los movimientos, las bacterias se dirigen por quimiotaxis, por atracción aun

componente químico. Si el nutriente tiene un químico determinado, la bacteria tiende a ir.

Las bacterias crece y se multiplica y se constituye en una colonia cuando es sembrada en un medio

de cultivo adecuado, para crecer y multiplicarse se divide (se divide por fisión binaria: se origina

un estrangulamiento en la parte central de la membrana, se estrecha y se produce una duplicación

del cromosoma, se estrecha la parte media de la membrana y se origina 2 células hijas a partir de

una célula madre.

La división de una célula bacteriana, constituye con lo que se conoce con el tiempo de generación:

la bacteria 1 se divide en 2, 2 se divide en 4, y 4 se divide en 8 es una división de la bacteria.

Esto da origen a la formación de las colonias, ¿Cuánto es el tiempo de generación? Alrededor de

15 a 20 minutos. (Miles y millones de bacterias)

33
¿Cuándo se pide un cultivo de una bacteria, yo debo el resultado del cultivo en que tiempo?

48 a 72 horas, 2 o 3 días, en la mayor parte de bacterias como son los estafilocos, estreptocos. Eso

porque el tiempo de generación es de 15 a 20 minutos. Pero ahí bacterias que tienen un tiempo de

prolongación más elevado, de 18 a 20 horas por ejemplo: Mycobacterium tuberculosis, el bacilo

de koch.

¿Si yo pido un cultivo de bacilo tuberculoso, en que tiempo tengo el resultado de ese cultivo?

Se espera de 4 a 8 semanas, a veces hasta mes y medio o dos meses en el caso del cultivo.

El resultado del cultivo es de 6 a 8 semanas porque el tiempo de generación es de 18 a 20 horas.

Gráfica: Curva de crecimiento bacteriano.

Es una curva virtual de que es lo que ocurre en una colonia bacteriana. Cuando uno ve una colonia

no quiere decir que todas las bacterias en esas colonias estén vivas, pueden estar muertas o vivas,

o muriendo.

Si yo hago una siembra, yo puedo mantener un medio de cultivo de bacteria viable por ejemplo yo

tengo una colonia bacteriana, un cultivo bacteriano en una caja Petri tengo una colonia bacteriana

y en esa colonia, el cultivo está bien quiere decir que está en fase de muerte. Yo puedo reiniciar

un crecimiento de esa colonia y la presiembro en un medio de cultivo nuevo ósea un medio de

cultivo que tenga los nutrientes nuevos.

¿Qué pasa cuando paso una colonia de un cultivo viejo aun cultivo nuevo?

La bacteria tiene que adaptarse al medio de cultivo nuevo, después de unas horas recién comienza

a crecer.

34
En la primera fase la curva de crecimiento, una curva plana, sube y ahí una elevación máxima y

vuelve a disminuir y cae.

Primera fase: Adaptación o rezago, en esa fase no hay crecimiento, solo existe una adaptación de

la bacteria al cultivo nuevo, después de una hora empieza a crecer.

Segunda Fase: Aceleración, sube la curva.

Tercera fase: Fase logarítmica. (Importante, activo). Empieza a disminuir el crecimiento, hace otra

curva y hace la fase A, B, C, D. y luego una fase plana E (no hay crecimiento bacteriano, se

acumulan los productos tóxicos del catabolismo de la bacteria, se comienzan agotar los nutrientes

y acumularse gases. Llamada fase Estacionaria, equilibrio entre el número de bacterias vivas o

muertas. Esa fase es plana y cae.

¿Cómo se define la muerte bacteriana?

Como la incapacidad de reproducirse de la bacteria. Un medio de cultivo por más viejo que este

siempre da la posibilidad de realizar un crecimiento si este un 99% de muerte.

En cada fase hay una velocidad de crecimiento:

Fase A: Latencia o de rezago, velocidad 0.

Fase B: Aceleración, creciente.

Fase C: Fase más activa, constante.

Fase D: Decreciente.

Fase E: 0

Fase F: Muerte.

35
BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 5
Se llama muerte bacteriana a la perdida irreversible de la capacidad de vivir. Las bacterias como

todo ser complejo requieren de un sistema de energía para elaborar sus estructuras, esa energía la

obtienen de un intermediario que se conoce como ATP. Los mecanismos por los cuales la bacteria

hace su metabolismo son:

 por medio de un proceso de respiración aerobia, en el cual el oxígeno es el captador del

nitrógeno por liberación de agua y oxigeno libre.

 y por medio de la fermentación que corresponde a una respiración anaerobia, aquí se

producen la degradación de azucares o carbohidratos y los captadores de ……… pueden

ser compuestos

 por medio de la fotosíntesis, que no es más que la transformación de la energía lumínica

en energía química. Aquí intervienen los cromatóforos que son los que tienen la clorofila

como pigmento.

El metabolismo no es más que un proceso que implica: el anabolismo y el catabolismo. El

anabolismo consiste en asimilación de los nutrientes, que posteriormente con lleva a la

degradación de estos y a la eliminación de los desechos ya esto se denomina catabolismo.

MECANISMOS DE RECAMBIO GENETICO

Las bacterias tienen la capacidad de transferir características hereditarias de una célula bacteriana

a otra, en la cual la célula donadora le da una característica genética nueva a la célula receptora.

Esto se conoce con el nombre de mecanismo de recambio genético bacteriano: es decir, se

36
intercambian características genéticas entre dos células bacterianas. Los mecanismos de recambio

genético son:

 La conjugación

 La transducción

 La transformación

Hay otro mecanismo que puede cambiar genéticamente la bacteria sin que este sea un mecanismo

de recambio y es que la propia bacteria y su parte genética y cromosómica cambia, esto se conoce

con el nombre de mutación. La mutación se define como la alteración abrupta de un gen. En los

seres vivos complejos las mutaciones se dan en un espacio de tiempo prolongado, es decir se dan

pasando muchas generaciones, como en el caso del ser humano que debe pasar 50 o 100 años para

que haya un cambio genético. En cambio, en la célula bacteriana, las colonias tienen un millón de

bacterias y en ellas los cambios genéticos se dan en menos espacio de tiempo.

La mutación equivale a la alteración de la producción de los nucleótidos, o sea, puede ser que un

par de bases purinicas se sustituya una con otra y puede ser que un par de bases pirimidínicas

también sean sustituidas. En algunos casos la mutación se da de manera desconocida y eso es lo

que se conoce como idiopático o también se puede dar por causas conocidas como son: agentes

físicos y químicos que pueden afectar la estructura del gen.

La conjugación es donde participa un ADN extra cromosómico, es decir los plásmidos. Los

plásmidos son importantes porque son causa frecuente de resistencia. La bacteria que lo posee lo

transfiere a una bacteria que no lo posee y la hace resistente. El plásmido es un replicón, un replicón

es un ADN capaz de duplicarse. El plásmido se encuentra por fuera del cromosoma bacteriano.

Los plásmidos generalmente transfieren resistencia entre las bacterias GRAM -. Los plásmidos

37
pueden suelen ser llamados facultativos porque la célula bacteriana GRAM- suele poseer un pelo

sexual. La conjugación se hace por medio de dos pelos sexuales que se unen durante una célula

donadora a una célula colectora se unen los dos pelos y hacen un puente, a través de eso la célula

donadora le transfiere plásmido a la célula receptora.

Los plásmidos conjugativos están en el factor F(Factor sexual), cuando la célula que es F+ se une

a la célula ~ se hace visible y le transfiere el factor F a la célula que no la posee la cual se convierte

en F+, eso quiere decir que una célula F+ puede transformar a una célula F- en F+ pero hay

bacterias que se denominan HFR (high frequency recombination) es decir que tienen una alta

frecuencia de recombinación.

La cepa HFR es capaz de transformar no solamente a una bacteria en un momento dado a F+ sino

que es capaz de transformar a muchas bacterias en F+ por su alta capacidad de recombinación.

El factor F realmente se desconoce su función, sin embargo, se cree que el Factor F permite

transferir un gen que es capaz de codificar la síntesis de una proteína F, esa proteína F se utiliza

en la constitución de los pilis sexuales que intervienen en la conjugación.

En las bacterias gram +, los plásmidos pueden transferirse en formas de estas o a través del

mecanismo de transducción. No todas las Gram+ tienen pelos, Los bacilos gram- son conjugativos

la resistencia la obtiene a través del proceso de la conjugación, hay cocos gram- como el gonococo

en donde los pelos comunes sirven de adherencia hacia la mucosa por lo cual se hace difícil la

eliminación de la bacteria por lo tanto eso quiere decir que los pelos aumentan la virulencia de la

bacteria. En todo caso cuando son Gram+ los plásmidos se transfieren mediante conjugación.

38
El Factor F es un plásmido conjugativo, hay plásmidos que se los conoce como plásmidos Coli y

son capaces de transferirle a la bacteria la información genética que le permite a la bacteria

producir una sustancia que se llama colisina.

La colisina no es un antibiótico, es una sustancia propia del metabolismo de la bacteria como por

ejemplo el escherichia coli, la Pseudomonas aeruginosa llamada también bacilo pirociano. Esta

sustancia puede matar o incluso actuar sobre las propias bacterias.

Otros plásmidos son los llamados Factores betalactámicos son capaces de transmitir un gen de

resistencia, lo que hace la betalactamasa es que hace resistente a la bacteria al antibiótico.

La betalactamasa lo que hace es romper el anillo betalactámico, lo antibióticos betalactámicos

como por ejemplo la penicilina, monobactamicos. La betalactamasa corta el anillo betalactámico

e inactiva al antibiótico eso quiere decir que si la bacteria le transfiere el gen productor de la

betalactamasa esa bacteria va a ser resistente a los antibióticos betalactámicos.

El otro mecanismo de recambio genético es el que se conoce como transducción, es un mecanismo

de recambio genético por el cual una célula donadora le transfiere a una célula receptora un gen o

una estructura genética como puede ser el mismo plásmido, un fragmento de cromosoma, un

transposón.

El bacteriófago es un virus bacteriano, eso quiere decir que si ese virus se mete a la bacteria e

invade se agarra del plásmido, y ese plásmido como es ADN incorporado en la estructura genética

del virus, el virus se multiplica y crece se divide y llena a la bacteria de virus hasta que se rompe,

cuando se rompe mata a la bacteria y van a invadir a otras células bacterianas pero van llevando

esa carga genética de una célula donde estuvo hospedada anteriormente, si ese plásmido es de

resistencia va a transferir resistencia a nuevas células pero por medio de un virus, si la bacteria se

39
agarra de un gen del cromosoma y es el gen vecino donde está el plásmido esa transducción se

denomina especializada por el contrario si agarra algún gen de forma aleatoria esa transducción se

llama generalizada.

Por ejemplo la difteria que es una enfermedad infecto contagiosa producida por una bacteria

llamada el Corynebacterium diphtheriae o bacilo diftérico para que un bacilo diftérico produzca la

enfermedad quiere decir que esa bacteria debe tener la capacidad de producir una endotoxina

porque si no la produce no es capaz de producir la enfermedad, y cuando la produce cuando tiene

un gen que le permite codificar la producción de la toxina, ese gen se llama gen tox y le transmite

al bacilo diftérico un bacteriófago que se conoce con el nombre de colidefago b.

El otro mecanismo de recambio genético es la transformación, que se define como la transferencia

de material genético de una célula bacteriana a otra en forma de x, lo cual se explica en el

experimento de Griffith. El experimento de Griffith prueba que el neumococo o streptococcus

pneumoniae es una bacteria productora de neumonía lobar (la neumonía es un proceso inflamatorio

en el pulmón y lobar porque afecta a un lóbulo del pulmón) es letal inoculado intraperitonialmente

en el abdomen lo mata en 24 h. Griffith cogió ratones y les inoculo neumococo virulento y al

mismo tiempo inoculó\o con neumococo avirulento, los ratones murieron a las 24h.l investigo la

sangre del animal y solo encontró neumococo virulento y de ahí llego a la conclusión de que había

una estructura genética que había sido transferida del neumococo virulento al neumococo

avirulento por eso todos los neumococo que el encontró eran virulentos. Esto ocurre porque se

piensa que se transfiere el ADN directamente de una célula bacteriana a otra sin que participen

bacteriófagos sino de forma directa.

CONTROL INHIBITORIO DE LOS MICROORGANISMOS

40
El control inhibitorio de los microorganismos son todos los procedimientos o pasos que se realizan

para evitar la diseminación de los microorganismos e impedir de esta forma que se produzca una

enfermedad.

Definición de términos

¿Qué es esterilización?

Es un concepto absoluto que implica la ausencia total de vida. Eso quiere decir que no existe algo

parcialmente estéril. No deja ningún tipo de organismo vivo ni siquiera las esporas.

Bactericida: Mata o destruye Bacterias

Fungicida: Mata o destruye hongos

Esporicidas: Destruye las esporas

Parásitos: Parasiticida

Un antibiótico no puede ser un bacteriostático.

Bacteriostático: No mata las bacterias. Inhibe su proliferación y crecimiento. Por ejemplo, la

tetraciclina, la vancomicina, eritromicina. Se usa para patologías específicas especialmente para

zoonosis. Cuya finalidad es debilitar la bacteria y que la inmunidad natural del individuo complete

la destrucción de la bacteria.

No se debería utilizar antibióticos y bacteriostáticos como bactericidas, se debería utilizar 2

antibióticos bactericidas y preferible utilizar un antibiótico bactericida que bacteriostático a menos

que sea lo correcto. Por ejemplo, la clamidia su medicación es un bacteriostático como la

eritromicina.

41
Si la bacteria es sensible al bacteriostático quiere decir que el bactericida no le va a hacer nada

porque el bacteriostático inhibe la proliferación de la bacteria y no se forma bien la pared, si se

administra un bactericida que actúa sobre la pared (tetraciclina + penicilina). Si la bacteria es más

sensible al bacteriostático entonces no tendría sobre que actuar el bactericida, y solo se estaría

creando resistencia a la penicilina.

Fungiestático, Esporostático, entre otros.

Desinfectante: es una sustancia capaz de destruir o matar los microorganismos tanto en su forma

vegetativa, menos segura en su forma esporulada y se utiliza sobre materia inerte. Existen varios

grados de desinfección:

Ninguna desinfección es igual a una esterilización. Puede haber desinfectantes que alcanzan el

99.9%, pero no igual que la esterilización, porque las esporas son resistentes a los químicos y la

desinfección solo se realiza con químicos y la esterilización se realiza por medios físicos y

químicos.

 De alto nivel: Desinfectar material que va a estar en contacto con el torrente sanguíneo,

porque este se considera que es estéril.

 Mediano nivel- Examen ginecológico- espéculo, debido a la flora bacteriana de la cavidad

vaginal. Primera bacteria en la boca, después de 12 horas aproximadamente del contacto

con el ambiente es el streptococcus viridans, que incluyen un grupo de streptococcus

(sanguis, mitis, salivarus)- flora bacteriana

 De bajo nivel- uso del termómetro- generalmente se lo coloca en un vaso con alcohol

yodado de 15 a 20 minutos, pero antes haber bajado el volumen de mercurio.

42
Esterilización química no tiene igualdad con esterilización física. Sustancias que se emplean

Glutaraldehído al 2% y formolaldehído al 2%, se puede realizar desinfección o esterilización

química de alto nivel. Se toma la pinza y se lo deja en glutaraldehído 12 por horas.

Todos los procedimientos de desinfección y esterilización deben ir precedidos de un proceso de

descontaminación, que consiste en lavar con agua y jabón para eliminar los restos de material

orgánico.

BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 6
Términos
1. Control Esterilización: estadio de ausencia total de vida en un ambiente.

2. Desinfectante: sustancia capaz de destruir la forma vegetativa de La bacteria menos las

esporuladas. Se lo usa sobre tejido inerte. Puede ser de alta, medio y bajo nivel.

3. Antisepsia: sustancia capaz de eliminar los microorganismo, impedir su proliferación y

multiplacion . se utiliza sobre tejido vivo.

4. Bactericida: mata a las bacterias.

5. Bacteriostático: detiene la reproducción de las bacterias para que el sistema inmune pueda

atacarlas.

6. Biosida similar a gerbicida o desinfectante.

Control inhibitorio de los microorganismos: impide la diseminación y la producción de

enfermedad por los diversos gérmenes

Puede ser físico o químico

43
Físico: uso de calor puede ser seco o húmedo

Seco (horno de Pasteur 160° durante dos horas y 170° durante una hora): actúa aglutinando las

proteínas

Horno de pasteur: es un recipiente de forma rectangular. Usa resistencias eléctricas. Adentro tendrá

unas rejillas para colocar el material a esterilizar. Cada material tiene una temperatura diferente.

Antes de realizar una esterilización hay que alcanzar la temperatura adecuada adentro del aparato

y a partir de ahí comenzar a tomar el tiempo desde ese punto. en la puerta podemos encontrar: un

termómetro y Un reloj.

Calor seco domésticamente: mediante la incineración o cremación que consiste en el flameo que

es pasar la boca del tubo de ensayo por encima de la llama del mechero cuando se destapa o se

cierra.

Pasteurización: procedimiento de calentamiento rápido (elimina las bacterias criofilas) y

enfriamiento rápido (elimina las bacterias termófilas) se trata de acortar el tiempo entre el

enfriamiento y el calentamiento para que no haya oportunidad que se desarrollen las bacterias

mesófilas. Busca eliminar los gérmenes patógenos y evitar las características organolépticas (color,

sabor, etc.) de los alimentos. No es una esterilización ya que solo elimina las bacterias patógenas

y no destruye las bacterias saprofitas

Pasteurización rápida: 74.1° durante 2 a 3 segundos

Pasteurización lenta: 68° durante 10 a 15 segundos

Húmedo a presión (autoclave 121° durante 30 minutos a 15 libras de presión): actúa

desnaturalizando las proteínas y precipitándolas

44
Autoclave: es un recipiente cilíndrico con una tapa en la parte superior con un cierre hermético

con unos tornillos cabeza de mariposa. Se obtiene el calor por medio de agua que se coloca en el

fondo y se calienta por resistencias eléctrica. Dentro del autoclave hay una sesta donde se ponen

los elementos que se quiere esterilizar. Hay que realizar un proceso previo conocido como purga

que es la eliminación del aire frio dentro del autoclave para que no se condense alrededor del

material a esterilizar, la presión que tiene que generar el vapor será aun mayor si no existiera. El

autoclave en la tapa tiene una válvula que permite realizar la purga, tiene un reloj, un manómetro

y termómetro.

Calor húmedo domésticamente: olla de presión domestica

El calor húmedo es mas efectivo ya que usa el calor a presión

Esterilización fraccionaria o foto reactivación o quintanizacion: es el uso de calor vapor a presión

atmosférica. Se le llamaba fraccionada por que se lo hace generalmente en 3 días a una hora cada

día. Se lo utiliza en materiales que pueden alterarse por la presión del calor. El primer día se elimina

la mayor parte de formas vegetativas presentes y una que otra esporulada. El segundo día se

eliminan las formas vegetativas que hayan sobrevivido y la mayoría de formas esporuladas y el

tercer día se completa la eliminación de las formas esporuladas que hayan sobrevivido.

Técnica UHT: tratamiento a temperatura ultra-altas se los utiliza para los productos con bajo nivel

de acidez (pH superior a 4,6)

45
Filtración: separa los gérmenes y las bacterias del solvente donde se encuentran que pueden ser

cualquier líquido. un filtro para que tenga la capacidad de retener bacterias debe de poder filtrar a

0.2 micras. Las mas pequeñas bacterias y virus pueden pasar a través de los poros.

Filtro de vidrio molido comprimido de pyrex: fueron los primeros en utilizarse. Dejaba espacio

entre el vidrio molido. La forma de retención de las bacterias era por adherencia eso quiere decir

que en los bordes de los filtros se aglutinaban las bacterias

Filtro de arcilla: (arena puede ser un filtro).

Filtro de celulosa (filtros microporosos): Más usados en la actualidad.

Filtros de Chamberland: Graduados desde L1 a L3, son inversamente proporcionales al número de

filtros, lo cual quiere decir que, el del poro más pequeño es L1 y tiene mayor número de poros.

Filtros de Berkefeld: Graduados por las letras:

La potabilización del agua.

El agua potable es el agua apta para el consumo humano. La potabilización implica la filtración y

la cloración. Una vez realizado eso el agua puede ser ingerida.

Otra forma de control inhibitorio por medios físicos es el uso de ondas sonoras.

46
Ondas sonoras.

Las ondas sonoras en la actualidad, especialmente las ondas ultrasónicas (aquellas ondas que

tienen una vibración mayor a 20000 kciclos/seg, es decir, no audibles), se utilizan generalmente

para romper la célula bacteriana con la finalidad de investigación, de estudio de los componentes

internos de la bacteria. Se considera que la vibración rompe la bacteria.

*Las ondas sónicas, audibles, tienen una vibración menor a 4000 kciclos/seg.

*Las ondas ultrasónicas, no audibles, tienen una vibración mayor a 20000 kciclos/seg.

Agitación: Se usan unos aparatos conocidos como los agitadores rotatorios de viento cuya

agitación es capaz de romper mecánicamente la célula bacteriana.

Trituración: Por medio de moteros.

Electrocución: También se pueden inhibir las bacterias por electrocución. Se produce una

ionización de sus componentes.

Resumen control inhibitorio por medios físicos.

Calor seco

Calor húmedo.

La foto reactivación o esterilización fraccionada o quintanización.

47
Pasteurización.

Filtración.

Uso de ondas sónicas.

Agitación

Trituración.

Electrocución.

Control inhibitorio por medios químicos

Se usa el fenol y sus derivados.

Fenol o ácido félico: derivado del alquitrán de hulla, que es el producto de la actividad anaerobia

de una madera antigua.

*El fenol a concentraciones altas, al 5%, puede ser cáustico, lo cual significa que quema o corroe.

*Al 1% destruye la mayor parte de las formas vegetativas o esporuladas.

Derivados del fenol:

Los alquifenoles

Los cresoles

La creolina: Es un desinfectante utilizada para desinfectar los suelos, por ejemplo. Tiene como

característica un olor fuerte, irritante.

48
Hexaclorofenoles

Hexaclorofeno (Phisohex, nombre comercial): Fue utilizado en los años 70 pero ha sido retirado

del mercado. Se lo utilizó mucho antiguamente como componente añadido a los jabones, ya que

el hexaclorofeno tenía una actividad alta sobre los cocos Gram-positivos como los estafilococos,

y por tanto proponían a los jabones con hexaclorofeno para lavar al recién nacido y así evitar la

colonización del cordón umbilical con bacterias, pero se presentaron casos por intoxicación con

fenol, ya que el fenol se absorbía a la piel del recién nacido y por eso en EE. UU la FDA lo sacó

del mercado.

El fenol se lo utilizó también como preservante de algunos productos.

Su uso, como fenol, ha sido relegado en la actualidad debido a la aparición de productos más

efectivos y menos tóxicos.

El fenol ha quedado relegado a ser un compuesto patrón, lo cual quiere decir que es un modelo de

actividad para sacar al mercado otros desinfectantes para comprobar su eficacia usando un índice

o coeficiente fenólico.

Índice o coeficiente fenólico: la relación que se da entre la actividad que tiene un desinfectante en

relación a la actividad del fenol. Si el coeficiente fenólico es mayor a 1, es malo. Sirve como

modelo patrón para comparar la eficacia que tiene un desinfectante para sacarlo al mercado.

Alcoholes

49
Existen 3 tipos de alcoholes que se usan en la práctica:

Alcohol industrial: alcohol metílico o metanol

Alcohol potable; etanol o alcohol etílico

Alcohol isopropílico

Hubo una época en la cual se usaba el alcohol para bajar la temperatura a los recién nacidos. Lo

ponían en un trapo y lo pasaban sobre el bebé. Esto debido a que el alcohol baja la temperatura

porque es tumefaciente, es decir, que aumenta la circulación ya que es un estimulador de las

terminaciones nerviosas y provoca la sensación de frio. El alcohol produce hiperemia, es decir,

aumenta el flujo de la sangre, entonces se produce una vasodilatación aumentando la circulación

en el área y se pierde calor por difusión. Pero se dieron cuenta de que en los niños se absorbía el

alcohol también y debido a su toxicidad, no se podía usar.

ALCOHOL.

Ahora, en los alcoholes, el alcohol metílico es el industrial, es toxico. El industrial en dos

presentaciones: el isopropilico es el más efectivo de los alcoholes, el hecho de que también es

toxico.

El alcohol que se utiliza es el etanol, el alcohol etílico.

Generalmente el alcohol se utiliza al 70 a 90 por ciento, el alcohol es un séptico débil se inactiva

fácilmente con la catalasa de los tejidos y de las bacterias , se usa mucho especialmente para la

50
limpieza del ambiente pero se usa mucho especialmente para la limpieza del ambiente previo a la

administración por vía parenteral.

Por vía: todas las vías que penetran la piel, la muscular, La dérmica, intradérmica, intercutánea,

subcutánea.

La subcutánea, todas esas vías son parenterales

Porque otras vías son orales, rectal bucal sublingual, para eso se utiliza generalmente…

Control inhibitorio por medios químicos también están los derivados los agentes antioxidantes.

Entre ellos por ejemplo se tiene el cloro, en cuanto al alcohol tiene acción bactericida y virucida,

se tiene entre los agentes halógenos al cloro, el cloro es un excelente bactericida, en materia inerte

para descontaminar un material, antes, el VIH se tenía un circunvalo con cloro ahora hay espéculos

parietales descartables,

Se los dejada sumergidos en cloro lavaba 15- 20 minutos, luego se los lavaba con agua y jabón,

los espéculos de metal.

El cloro esta comúnmente en forma de hipo cloruro, clorato de sodio, se usa para la potabilización

del agua

Generalmente habrá... al 5%

La actividad del cloro se da generalmente, porque en contacto con el agua se transforma en acido

hipocloroso. La trasformación del ácido hipocloroso, se usa para desinfección de las piscinas,

El yodo, que es uno de los antisépticos más eficaces que existe, aunque ahora algunos dicen que

el cloro.

51
El yodo es comprobado que antiguamente, se dice que es un buen antiséptico porque tiene acción

bactericida, viricida, fungicida, puede destruir bacterias, virus y hongos, pero el yodo puede ser

irritante cuando esta en solución alcohólica.

Por ejemplo en el caso de la tintura de yodo, compras yodo con alcohol.

La tintura de yodo tiene yodo metálico, cloruro de sodio, y alcohol, se usa en la actualidad lo que

se denomina yodoforo, por ejemplo la povidona yodo, o yodopovidona . que es? Povidin, que

hay en … y solución.

¿Cuál es la diferencia entre yodóforo y la tintura de yodo?

El yodoforo no es irritante, se supone que el yodoforo es yodo mezclado con una sustancia

tensioactiva, permite que el yodo se disemine , es mas efectivo porque permite que el yodo se

mantenga mas tiempo en el medio y no irrita.

Compuesto a base de yodo que se conoce como povidin.

Se tiene el peróxido de hidrogeno, o agua oxigenada, también es un buen antiséptico que inactiva

rápidamente igual que en el alcohol, en presencia de materia orgánica, la catalasa producida por

las bacterias o la catalasa de los tejidos de las personas por las personas desdobla el peróxido de

hidrogeno producida.

Es buen antiséptico, beneficia a su vez de que libera oxígeno, y el oxígeno es letal especialmente

para las bacterias anaeróbicas, Si es una herida que está contaminada por tierra, donde

frecuentemente se encuentran las esporas.

52
Infringe, algo que ayudaría porque va a limpiar la herida y va a oxigenar la herida con agua

oxigenada, fuera de que el peróxido de hidrogeno tiene actividad desodorante, es decir que quita

el mal olor, tiene la capacidad de eliminar restos orgánicos.

El peróxido de hidrogeno y el agua o tiene elimina los restos orgánicos elimina el mal olor, en

realidad desodorante.

Las costras, es resecado. Se utiliza generalmente peróxido de hidrogeno al 3%, otro componente

es el de manganato potasio que ya no hay en el mercado.

Tenía una característica que era ser antiséptico, astringente, quiere decir que es cualquiera de las

sustancias que con su aplicación externa local (tópica) retraen los tejidos y pueden producir una

acción cicatrizante, antiinflamatoria y antihemorrágica.

BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 7
Biguanidas
Por importancia se entiende la:
Clorhexidina.- Se dice actualmente que es el mejor antiséptico. Se utiliza para asepsia
quirúrgica, tanto de las manos como de pacientes, y del área quirúrgica, si no utiliza povidona
yodo (que es un yodóforo). Algunas presentaciones de la clorhexidina no se pueden utilizar en el
tejido vivo, sin una herida abierta porque tienden a ser irritantes.
Dentro del control inhibitorio por medios químicos también se incluyen los antibióticos,
porque con ellos también matamos las bacterias.
¿Qué es un antibiótico?
Es el producto del metabolismo de un organismo vivo. En el caso de la penicilina, del Penicillum
chrysogenum que es un hongo que es capaz de matar a una bacteria.
¿Qué es un quimioterápico?
Es un producto de origen sintético, es decir, elaborado en un laboratorio. Ej: Las sulfas,
descubiertas por Domack en 1935 a partir de un colorante que fue el Prontosil, él se dio cuenta que

53
administrando prontosil a una persona, se degradaba el prontosil en el organismo y se transformaba
en sulfanidamida, que es un principio de las sulfas que tiene actividad antibacteriana pero en sí es
una sustancia química.
A veces se suele confundir antibiótico con quimioterápico pero conceptualmente no son lo mismo.
Características (que debería tener un antibiótico) para que sea ideal
 Que sea más bactericida que bacterióstatico (que mate más que inhibir)
 Que sea económico
 Que sea de un espectro de acción amplio, osea que abarque gran cantidad de
microorganismos y no pocos. Porque los antibióticos pueden ser de amplio espectro, o de
espectro reducido.
 Que no produzca efectos colaterales. Por ejemplo: Reacciones alérgicas o anafilácticas.

Las bacterias pueden adquirir resistencia a los antibióticos


¿Cómo lo hacen? Por medio de los mecanismos de intercambio genético: Transformación,
transducción y conjugación a través de los plásmidos, transposones o de cualquier replicón o
segmento de ADN que sea transferible de una bacteria a otra. O por la mutación también se da el
intercambio genético pero hay una alteración del gen.
Existen otras sustancias que se conocen con el nombre de anti (beta) lactamasa que no son
antibióticos. Que inhiben la acción de la (beta) lactamasa, que es una enzima producida por las
bacterias para inactivar el antibiótico porque el antibiótico está con un compuesto químico que
tiene un anillo (beta) lactámico y la bacteria es capaz de producir esa enzima que corta el anillo
beta lactamico y lo inhibe, por lo tanto inactiva el antibiótico, por lo tanto el antibiótico no le hace
nada a ella y quiere decir que ella es resistente a ese antibiótico.
La capacidad de producir la beta lactamasa se transfiere genéticamente a través de la transmisión
del factor G (factores de resistencia) que son en realidad plásmidos.
Anti beta lactamasa
Las anti beta lactamasa son:
 Ácido clavulánico
 Sulbactam
 Tazobactam
Como son anti beta lactamasa, usualmente se los une al antibiótico. Por ejemplo: (Unasyn)
Ampicilina (penicilina de amplio espectro) + Sulbactam. De tal forma que si yo le mando eso a
una paciente que tiene una enfermedad infecciosa bacteriana, yo le mando el antibiótico
(ampicilina) que está asociada a la anti beta lactamasa (sulbactam). Si la bacteria es productora de
beta lactamasa, el sulbactam va a inactivar esa capacidad de la bacteria, por lo tanto va a permitir
que el antibiótico mate a la bacteria.
La amoxicilina puede estar asociada al ácido clavulánico (Nombre comercial: Augmentine) es
decir, que si yo le pongo tratamiento a una persona con infección bacteriana y yo sospecho que

54
esa bacteria es productora de beta lactamasa, yo le mando un antibiótico que no se inactive con la
beta lactamasa de la bacteria, un antibiótico asociado a una anti beta lactamasa, que puede ser
el sulbactam. (Augmentine = Amoxicilina + Ácido clavulánico).
El tazobactam se asocia a una penicilina antipseudomona, que apareció específicamente para
actuar contra la pseudomona, tiene importancia porque también se la llama bacteria de hospital o
bacteria de infección nosocomial.
¿Qué es el nosocomio? Hospital.
¿Qué quiere decir infección nosocomial? Infección de hospital. El hospital es el lugar donde se
cogen las infecciones más graves porque los enfermos tras que son inmunodeprimidos, son los que
padecen las infecciones que más los perjudican a ellos mismos, porque si un paciente tiene una
bacteria que normalmente no le causa enfermedad a un paciente inmunocompetente, a un paciente
de hospital lo agarra enseguida.
Las bacterias de hospital, son bacterias que generalmente son difíciles de manejar. Por ejemplo, el
bacilo piociánico que molesta tanto a los pacientes quemados. Por eso aparecieron los derivados
de la plata, la zurfaraccina diargéntico, por ejemplo, que ayuda bastante contra la implantación
de las pseudomonas.
La piperacilina es una penicilina que se descubrió para actuar contra las pseudomonas. Es la más
moderna.
Pero la primera penicilina que se descubrió para actuar contra las pseudomonas fue la
carbenicilina.
La flora bacteriana intestinal dentro de la materia fecal predominan los bacilos gram (-), en
cambio en la piel predominan los cocos gram +.

BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 8

Los antibióticos tienen diferentes sitios donde actúan y se comienza por la pared celular entre ellos
los betalactamicos.

Entre los betalactámicos vamos a ver especialmente a la penicilina que los demás antibióticos en
cuanto tienen que ver farmacología.

Hay sustancias llamadas anti betalactamicos que lo que hacen es inactivar la betalactamasa
bacteriana entre esos están sulbactam, tazobactam y ácido clavulánico.

¿Cómo se quiere la resistencia a los antibióticos?

55
Se da Generalmente las bacterias gram negativas, te dan por intermedio de los factores que son los
plasmidos (plásmido L: plasmidos de resistencia que le otorga a la bacteria la capacidad de
codificar la producción de una enzima que es la betalactamasa) generalmente se hace una
transmisión de un plásmido de resistencia por fenómeno de conjugación (es la transferencia
genética de una bacteria la otra por intermedio de los plasmidos).

Los plásmidos pueden ser resistencia, f, sexuales, plásmidos coli. También se puede hacer la
transferencia de resistencia por intermedio de otros mecanismos de intercambio genético como
puede ser la transcripción qué tiene el bacteriogeno (virus bacteriano) que generalmente toma el
plásmido de una bacteria que está parasitando se multiplica el bacteriogeno que es un virus una
vez que se ha multiplicado van a invadir otras células a las cuales llevan el carácter genético de los
plasmidos se agarraron de las células que estaba hospedada.

La bacteria que le invade se haga resistencia transfiriéndole la resistencia a la bacteria nueva.

Otro mecanismo es la transformación ¿cómo actúa la resistencia y la bacteria?

Puede que la bacteria se hace resistente porque es capaz de producir la betalactamasa y está lo que
hace es dañar el anillo químico betalactamico del antibiótico entonces lo inactiva al antibiótico.

(la penicilina es uno de los antibióticos qué va a tener este anillo betalactamico)

La betalactamasa es transmitida por uno de los plasmas de resistencia loor los mecanismos de
conjugación en las gran - Y en las positivo todo el resto y muy raro por plasmidos.

Puede ser que el antibiótico no encuentra las llamadas proteínas ligadoras de la penicilina (PLP)
proteínas actúan en la pared si no encuentran antibiótico la PLP esas proteínas de la pared no puede
fijarse y esos mecanismos de resistencia que tiene una bacteria puede ser que altera la
permeabilidad de la membrana (si el antígeno pudo haber penetración del antibiótico), Este es otro
mecanismo de resistencia bacteriana. Por ejemplo, en las Pseudomona aeruginosa o bacilo
piociánico una bacteria de tipo nosocomial propio nivel de hospital pacientes inmunodeprimidos
No necesariamente a 100%.

¿Cómo actúan los antibióticos? Estos actúan a los diversos niveles: pared celular, membrana
celular para destruirlo a través de la síntesis de proteína en los ribosomas también puede ser captura
nivel de los ácidos nucleicos.

56
Antibiótico se obtuvo a través de la pared celular

Penicilina primera penicilina que se descubrieron fue la penicilina G sodica-potasica(penicilinas


naturales) estás penicilina se inactivan con la Beta lactamasa bacteriana inyectan por vía parenteral
que quiere decir que es por medio de una inyección puesto que atraviesan los tejidos. Están
dosificadas Generalmente en unidades internacionales u/i Ej. 1 200 000 de unidad internacionales.
No se puede administrar por vía oral puesto que se inactivan o degradan por los jugos digestivos
siempre por vía parenteral por razón de esto se descubrió fenoximetil penicilina b (si resiste los
jugos gástricos) si se puede administrar por vía oral sin embargo si también a resistir a la
betalactamasa así fácilmente se inactiva.

Desaparecieron las penicilinas de depósito estas son y se denominan así por se libera lentamente
del sitio donde se les deposita que generalmente es en el músculo en una zona de un músculo de
la grande que el muslo hay tres tipos de penicilina de depósito:

• P. benzatínica: 21 a 30 días

• P. procaínica: 12 a 48 horas

•P. penisol: 12 a 48 horas

Estas se diferencian en su vida media en el organismo.

Penicilina semisintetica resistentes a la betalactamasa estas intrínsicamente resisten a la


betalactamasa y no tienen una necesidad de estar asociada a una anti-betalactamasa. Ej:
dicloxacilina, cloxacilina, oxacilina

Estas son de espectro reducido (el número de bacterias que abarca ya sea gram positivos o gram
negativo sólo está limitado a un grupo pequeño) está penicilina actúa sobre grupos pequeños como
coco gram +.

Penicilina de amplio espectro gracias a sus alteraciones químicas (quiere decir sobre gram
positivos y gram negativos) Ej: amoxilinas

Penicilina antipseudomona que fue la carboxipenicilina y luego salió piperacilina (vienen en


asociación con el tazobactan: antibetalactamasa), mezlocilina .

57
Efectos colaterales de la penicilina es la alergia o anafilaxia. Para evitar el efecto de la anafilaxia
se puede realizar la prueba de sensibilidad o hipersensibilidad esta consiste en demostrar que el
paciente es alérgico por tiene anticuerpos hacia esa sustancia.

¿Cómo se puede demostrar que un paciente es alérgico?

Se puede demostrar debido a la presencia de anticuerpos, que son sustancias que se producen por
un antígeno, con excepción de que la reacción sea parte de una alergia hereditaria. El anticuerpo
de la hipersensibilidad es la inmunoglobulina E. Se puede determinar que un paciente es alérgico
titulando las inmunoglobulinas, y la cantidad de estas, específicamente la inmunoglobulina E.

Una reacción serológica es aquella que se produce entre el antígeno y el anticuerpo y se puede
estudiar en el suero de la sangre, que se obtiene durante la centrifugación al eliminar las proteínas
involucradas en la coagulación del plasma sanguíneo; por ejemplo, si un paciente tiene tifoidea
en su sangre se va a encontrar el anticuerpo antifoidea que se produjo a expensas de la salmonella
typhi que lo enfermó, donde la bacteria cumple el papel de antígeno. Se puede demostrar la
presencia de la enfermedad a través del suero y el contacto con la salmonella typhi.

Para la búsqueda de una enfermedad que se desconoce el antígeno, se debe tener un anticuerpo
conocido, y en base a este generar pruebas con todos los antígenos probables para determinarlo.

Las pruebas de hipersensibilidad o anafilaxia local

Los procesos alérgenos se suelen desarrollar de manera sistémica pero para las pruebas de
hipersensibilidad se busca provocar una reacción local que se realiza mediante la introducción de
un líquido de manera intradérmica, el signo semiológico llamado cáscara de naranja permite
comprobar la vía donde se introdujo, la zona va a adquirir una coloración pálida, se va a formar
una pápula, por lo que la piel se va a extender y los poros se van abrir provocando esta textura.
Esta prueba permite determinar la sensibilidad a la penicilina

En un paro anifiláctico el paciente puede desmayarse, tener sentimientos de ahogo, estar cianótico
o incluso la muerte

Prueba de tuberculina: se obtienen los resultados para lectura a las 72 horas, se deja señalado el
lugar para evitar el contacto con el agua, es una prueba de hipersensibilidad retardada

58
Prueba de sensibilidad anifilaxica: La lectura se realiza en 15-20 minutos, no necesariamente
se tiene que señalar, ejemplo: prueba de penicilina

Prueba de penicilina: se introduce 1/10 de penicilina natural intradérmica, es recomendable usar


una jeringuilla de insulina o una de 2cm. La penicilina que se utiliza es la natural G sódica o
potásica y la mezcla debe estar bien diluida, la penicilina G benzatina puede ocasionar reacciones
adversas

Esta mezcla tiene mínimo hay que agregar a la disolución 5-4 cm e inyectarla de forma
intradérmica, si se la pone intravenosa se forma necrosis. Se aplican 10 u

Se diluye una ampolla de penicilina que está en polvo de 1´000.000 de unidades en 10 mililitros
de agua destilada, 2 cm . Esta mezcla tiene una concentración de 100.000 unidades de penicilina
por cada 1 mililitro.

Se descarta 9 ml de la mezcla anterior y se lleva nuevamente a 10 mililitros adicionando agua


destilada, quedando una solución de 1000 unidades de penicilina en 1 mililitro. Esta mezcla tiene
una concentración de 100 unidades de penicilina por cada 0.1 Mililitro.

Se descarta 9 ml de la mezcla anterior y se lleva nuevamente a 10 mililitros adicionando agua


destilada, quedando una solución de 1000 unidades de penicilina en 1 mililitro. Esta mezcla tiene
una concentración de 100 unidades de penicilina por cada 0.1 Mililitro.

Se descarta 9 ml de esta mezcla y se lleva a 10 mililitros adicionando otra vez agua destilada,
quedando una solución de 100 unidades de penicilina en 1 mililitro. Esta mezcla tiene una
concentración de 10 unidades de penicilina por 0.1 mililitro.

La cefalosporina de primera y segunda generacion se utilizan para Gram +, se utilizan por via
parenteral y mayormente por via oral en cambio a partir de la tercera generacion (3era, 4ta) son
parenterales(inyectables).

La actividad de accion es similar sobre bacterias pueden ser afectadas por la penicilina por eso la
cefalosporina puede ser una droga alternativa en caso de que no actue la penicilina pero hay el
problema tambien de que una cefalosporina pueda producir una reaccion alergica , en el caso de

59
que un paciente sea alergico a la penicilina hay que tener cuidado al inyectar una cefalosporina ya
que esta tambien produce reacciones alergicas, siendo similar a la penicilina,

Efectos colaterales producidos por la cefalosporina

§ Reaccion alergica

§ Superinfeccion bacteriana (proliferacion de mas bacterias de las que puede actuar el antibiotico)
ejemplo: el niño esta con diarrea va donde el medico y este piensa es una diarrea infecciosa
bacteriana y le receta antibioticos pasan 3 a 4 dias y sigue con diarrea cambia de doctor le manda
otro antibiotico pasan dos o 3 dias mas y sigue con diarrea hasta con mayor intensidad y el tercer
doctor ya piensa en una superinfeccion bacteriana ya que al recetar antibioticos sin un control o
sin saber antes la causa de la diarrea del niño que puede ser producto de una infeccion por cambio
de dieta alimenticia y resulta que no es tolerante a esa leche de ahi la causa de la diarrea siendo
innecesario los antibioticos lo que esto va a causar es borrarle la flora bacteriana normal que
protégé al niño y al borrarle la flora saprofita intestinal lo que va a provocar es que las dos o tres
bacterias patogenas que se encuentran inhibidas por las saprofitas proliferen y produzcan una
enfermedad, entonces en vez de mejorarlo lo emperan y le causan una superinfeccion y el
tratamiento seria el de restablecerle la flora bacteriana y se le quita la diarrea. Por eso cuando el
medico no tiene un diagnostico claro simplemente pide que se mantenga hidratado al niño y espere
unos dias que puede que al cabo de estos se cure por si solo en vez de recetarle y crear resistencia
a ese antibiotico.

Una mala dosis y un tiempo inadecuado pueden crear resistencia se aconseja el uso de estos
antibioticos de 10 a 14 dias siempre y cuando el antibiotico usado sea el correcto.

VANCOMICINA.

Antibiotico betalactámicos que tiene actividad especialmente sobre el estafilococo

Efectos colaterales

· Superinfeccion

60
· Debe ser administrado con cuidado en los pacientes con insuficiencia renal

En los pacientes sin patologias y los que tienen insufiencia renal su administracion no va a ser la
misma,

Hay una formula llamada Cockcroft Gault en donde se puede sacar la dosis de acuerdo al peso

IFG = (140-edad) x peso (Kg)

---------------------------------

72 x creatinina sérica (mg/dl)

CICLOSERINA

Antibiotico betalactámicos, actualmente se lo usa como antituberculoso como droga de segunda


linea

Bectalactámicos: tambien son

· Penicila

· Cicloserina

· Vancomicina

· Cefalosporina

· Monobactam (aztreonam)

· Carbapenémicos (imipenem, el meropenem, ertapenem, doripenem)

RESISTENCIA BACTERIANA

En la actualidad, hay que tener presente lo que es la cepa BLEE y la cepa KPC.

61
Cepa BLEE. Cuando quieres hacer un cultivo y quieres ver la sensibilidad, cuando quieras hacer
el tratamiento de un paciente y no sabe que bacteria tiene por ejemplo tiene pus la garganta y debe
hacer un cultivo de la garganta para ver que bacteria tiene y hacer a su vez la prueba de sensibilidad
hacer el antibiograma para saber que bacteria tiene y para ver cual es la droga de eleccion a usar.
Pruebas de laboratorio dan resultado de estafilococo o estreptococo y le pone cepa BLEE (ß-
lactamasas de espectro extendido) QUIERE DECIR que esta cepa que han aislado tiene resistencia
a muchas ß-lactamasas bacterianas que es una cepa que hay que evitar que se disemine porque sino
va a crear resistencia.

Cepa KPC (Klebsiella Pneumonie Carbapenemasa resistencia) las carbapenemasa son una forma
de ß-lactamasas y esta cepa se origino a partir de la Klebsiella Pneumoniae. La Klebsiella
Pneumoniae es una enterobacteria. La Klebsiella Pneumoniae produce pneumoniesis sin imbargo
es una bacteria propia del intestino

La primera cepa resistente se llama KPC, de ahi su nombre.

La primera cepa resistente carbapenemasa fue la Klebsiella Pneumoniae carbapenemasa resistente


y esas hay que aislarlas debido a su resistencia. Eso quiere decir KPC que es resistente a la
carbapenemasa y las carbapenemasa son ß-lactamasas que afectan o activan a los carbopenémicos.

¿Qué es una enterobacteria? Una bacteria propia de la flora intestinal tambien llamadas bacterias
coliformes.

BACITRACINA

Antibiotico derivado de metabolismo de una bacteria que es Bacillus subtilis, bacilo subtilis

Tiene una actividad muy buena sobre las bacterias cocos Gram +. No se puede usar por via
sistemica sino por via topica (localmente) junto con la neomicina y bacitracina que tienen buena
actividad sobre cocos Gram + .

62
BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 9
El anticuerpo son el resultado como respuesta a la presencia de un antígeno, el cual toman como
modelo para formarse y para reaccionar con el específicamente, puede darse las llamadas
reacciones cruzadas cuando el antígeno es similar al que dio origen eso da lugar a los llamados
falsos positivos.

Es decir que da positiva la prueba serológica sin que sea real, porque el antígeno no es el que en
realidad se está buscando, dan origen a los FALSOS POSITIVOS- se llama ESPECIFICIDAD.

Lo que hace el anticuerpo es equivocarse, por la similitud de las características del antígeno.

Los falsos negativos: se relaciona con la SENSIBILIDAD, por ejm puedo tener muchos antígenos
similares y en medio de esos antígenos, suponiendo que sean 10 antígenos, uno es el que estoy
buscando. Puedo tener el anticuerpo que conozco para buscar ese antígeno del cual solamente hay
1. Se pone en contacto el suero del anticuerpo con el suero que tiene un antígeno, ese anticuerpo
no lo detecta al antígeno que se encuentra escondido, porque la prueba es poco sensible.

Para evitar las pruebas cruzadas en las pruebas serológicas, se utilizan los llamados
ANTICUERPOS MONOCLONALES; o sea que son anticuerpos que son muy específicos y muy
sensibles, debido a que se originan de un solo clon, o sea de una sola célula productora de ese
anticuerpo.

El uso de los anticuerpos monocronales, evita que se den las reacciones cruzadas, ya que se
caracteriza por reaccionar con un antígeno especifico.

El descubrimiento de los agentes monoclonales se dio a partir deun experimento, que fue un
hibridoma , en el cual se clonó célula, productora de anticuerpos; un linfocito B, que se transforman
en plasmocitos y luego en plasmocitomas, que dan origen a la producción de anticuerpos . Se une
un linfocito con un tumor a la medula plasmática, esto debido a que el tumor es capaz de producir
una cantidad de células , con ese hibridoma que se mezclaba una celula tumoral con un linfocito
B, el mismo que puede producir muchas células del mismo tipo.

Las células monoclonales surgen en base a una sola célula madre.

63
Un antígeno son las toxinas, un toxico producidos por los seres vivos, las toxinas pueden ser:

ENDOTOXINAS Y EXOTOXINAS; hay pruebas que producen tanto exo como endotoxinas

Ej.: Bacterias productoras de exotoxinas, porque son exotoxinas, es porque las toxinas son
elaboradas por el microorganismo y secretada hacia afuera, en cambio la endotoxina es producida
generalmente por bacilos Gram -: Salmonella, Shigella, Escherichia coli Acinetobacter, todas
estas forman partede endotoxina. Son endotoxinas porque ellas producen la toxina, pero para que
la toxina se libere, la bacteria debe romperse, lisarse, en ese momento la toxina se libera, se absorbe
y produce la toxicidad.

En la exotoxina el tiempo de incubación es muy corto, por ejm, el Estafilococo aureus a la 1h o


30 min actúa y leda fiebre, porque el alimento esta la toxina , en cambio couando se hierven un
alimento y el tiempo de incubación es mas prolongado de 6h a 12h.

Las toxinas suelen ser muy ANTIGENICAS, porque son capaces de regular el sistema inmune con
la produccion de anticuerpos unas son mas antigénicas y otras menos. Siendo la exotoxina la mas
antigénica en relación a la endotoxina (ya que estas tienen menor respuesta inmunológica)

Shigella; bacteria que produce tanto endo como exotoxinas.

Con base en las toxinas se elaboran toxoide; que es una toxina que se desactiva la capacidad de
producir daño y asi perder la capacidad antigénica, manteniendo la capacidad inmunológica.

Ejm: vacuna del tétano

Si el antígeno se llama toxina, el anticuerpo se llama antitoxina, sirva para la protección del
tratamiento curativo, no profiláctico, porque generalmente tengo esta toxina de una misma especie
o diferente.

Especie diferente en un caballo cuando tengo la antitoxina antitetánica y luego extraer de el o


extraer las inmunoglobulinas especificas contra el tétano que se desarrolló en un individuo que se
vacuno, esta gammaglobulina tetánica especifica qué se extrae que es antitetánica se inyecta al
individuo; se denomina inmunidad adquirida.

64
El uso de suero heterólogo con en la gammaglobulina específica, como el suero homologo, suero
heterólogo; suero del caballo. Inmunidad adquirida pasiva, porque son defensas adquiridas, y las
defensas duran un tiempo, porque se van a catabolizar y degradar,

Por lo general en las vacunas siempre hay que poner un refuerzo, en los niños cad 2-4-6 meses,
otra vacuna se pone al año y medio, por la capacidad de respuesta que pueden ser, si son bien
inmunologicas se pone una sola vez, luego al año y medio o a los 6 años.

BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 10

Los anticuerpos: resultado de la respuesta de un antígeno al cual toman como modelo para
formarse y reaccionar con el específicamente. Pueden darse Reacciones cruzadas cuando hay
antígenos similares al que le dio origen y ocasionar los denominados Falsos Positivos. (Prueba
serológica positiva, aunque no es el resultado real)- Relacionado con la Especificidad (Antígeno-
anticuerpo)- El anticuerpo se equivoca debido a la similitud de las características del antígeno.

Falsos Negativo está relacionado con la Sensibilidad. Entre varios antígenos similares si se busca
un antígeno determinado con un anticuerpo conocido y se pone en contacto el antisuero del
anticuerpo con el antisuero de los antígenos el anticuerpo no detecta al anticuerpo que está
escondido (en escasa cantidad), porque la prueba es poco sensible.

Para evitar las reacciones cruzadas (Falsos positivos) en las pruebas serologías se utilizan los
anticuerpos monoclonales (muy específicos y sensibles porque se originan de un solo clon o
célula productora de ese anticuerpo). El estudio de los anticuerpos monoclonales se dio a partir de
un experimento que fue un hibridoma, en el cuál se clonó una célula productora de anticuerpos
Linfocito B (Plasmocitos se transorman en plasmocitomas y da origen a la producción de
anticuerpos) se unió el linfocito B con un plasmocitoma (Tumor en células plamáticas), por lo
tanto, el linfocito B adquirió información genética del plasmocitoma para producir gran cantidad
de anticuerpos, los monoclonales.

65
Antígeno: Una proteína, de elevado peso molecular, de estructura compleja y que es extraño en el
organismo. Los mejores antígenos son las proteínas y los polisacáridos. Un antígeno son las
Toxinas, las toxinas son proteínas producidas por los diversos microorganismos y pueden ser de
2 tipos Endotoxinas (producen la toxina bacteria tiene que lisarse para liberarse y producir
toxicidad. Tiempo de incubación largo de 6-12 horas. Producida por bacilos gram negativos Ej:
Salmonella, eschercia, klebsiella, enterobacter, ciclobacter) y Exotoxinas (el microrganismo las
produce y secreta hacia afuera. Tiempo de incubación corto. Ej: clostridium, de la familia
baciliaceae, Corynebacterium diphtheriae). Hay bacterias que producen una y otras ambas. (Ej:
Shigellas, bacilo gran negativo)

Ejemplo: Staphylococcus aureus que es productor de exotoxinas, si está contaminando un alimento


es probable que después de ingerir el alimento a la media hora o una hora ya presenta
sintomatología, ya que en el alimento ya se encuentra la toxina.

Las toxinas son muy antigénicas porque son capaces de estimular el sistema inmune o la
producción de anticuerpos. Pueden ser: Muy antigénicas (exotoxina) o poco antigénicas
(endotoxina).

Si la toxina es muy antigénica con esa toxina se pueden elaborar los toxoides que es una toxina
que se inactiva o se le hace perder la capacidad patogénica, pero se mantiene la capacidad
inmunogena. Ej: Vacuna del tétano, si se inactiva la bacteria del tétano con formol aldehído se
obtiene el toxoide, que es una proteína y una toxina inactivada puede servir de antígeno para actuar
como vacuna y crear anticuerpos (Antitoxina). Que serviría para hacer tratamiento curativo,
porque se obtiene la antitoxina cuando se obtiene de una especie diferente la globulanica o cuando
se obtiene la tetánica. O se puede extraer las gammaglobulinas tetánica específicas o suero
enterólogo es inmunidad adquirida pasiva. Solo durarán un tiempo la inmunidad porque se
catabolizan rápidamente.

Hay vacunas bien inmunogenas y una vez que se ha sensibilizado la célula puede estar siempre
produciendo el anticuerpo, especialmente cuando el organismo lo requiere. Hay otras que
requieren varis dosis, pero por lo general requieren de un refuerzo todas las vacunas.

En los niños se colocan las vacunas cada 2, 4 y 6 meses y otras al año y medio o 6 años pero
depende de la cantidad de respuesta. Para hacer la curva de respuesta al antígeno, la respuesta

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primaria (el organismo tiene que sensibilizarse al antígeno, periodo de incubación de 20-30 días,
pero después se eleva la producción de anticuerpos hasta que lleve un momento en que comience
a disminuir la curva, es ahí cuando debe colocarse la otra dosis para volver a elevar la curva) y la
secundaria, (dosis siguiente) no tiene que sensibilizarse y por ello no requiere de periodo de
incubación. En la 3era dosis se considera que el paciente queda protegido durante un tiempo
determinado.

Vacunas usadas en el programa del ministerio de salud y de inmunizaciones (programa


ampliado de inmunización)

¿Cuál es la primera vacuna que nos ponen?

La BCG (bacilo de Calmette-Guérin)…se pone al mes de nacido

Bacilo bovino que se lo ha re cultivado varias veces y ha perdido su virulencia. No previene todos
los cuadros clínicos, pero si los más graves. Previene tuberculosis meníngea y biliar.

¿Qué otras vacunas nos ponen?

2 meses

4 meses la pentavalente

6 meses

Llama la atención en la pentavalente que ponen 5 vacunas que son:

1,2,3. La triple bacteriana o DPT…esta tiene 3 vacunas contra las enfermedades bacterianas

 Difteria
 Tétanos
 Tos ferina

67
4. A los 2 meses se pone la primera dosis…a eso se le añade la vacuna contra la meningitis que es
la vacuna Hib (contra Haemophilus influenzae tipo B)

¿Qué entienden por PCR? Prueba de ingeniería genética o proteína C reactiva

¿Qué es la proteína C reactiva? Proteína que es producida por ejemplo por el neumococo que se
eleva en casos de procesos infecciosos

Hay 7 serotipos de la influenza…serotipo A, B, C, D, E, F, G…pero de los serotipos, el que tiene


que ver con la meningitis en los niños es la tipo B…es decir que la vacuna Hib protege contra
ese serotipo, pero no contra los otros serotipos

La causa epidemiológica de la meningitis en niños 1-3 años generalmente tiende a ser el


Haemophilus influenzae tipo B

5. Vacuna contra la polio

Polio salk…es la inyectable

Polio sabin…las gotas, vía oral

6. otra que es contra la hepatitis B

 En la actualidad ponen otra vacuna más que es…

7. La del neumococo…así como produce neumonía, causa frecuente de sinusitis, otitis,


meningitis…esa vacuna contra el neumococo puede ser de 7 serotipos (es decir, hasta 7 serotipos
de neumococo) o pueden ser contra 13 serotipos de neumococo. Realmente se usa la de 13

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serotipos que es la que tiene ACTIVIDAD INMUNOLOGICA MEJOR…SE PONE A LOS 2
MESES

8. ¿Para qué sirve la vacuna contra el Rotavirus?

El rotavirus es para los cuadros diarreicos…las diarreas más frecuentes son producidas por
rotavirus

A los 9-12 meses ponen la triple viral…protege contra 3 enfermedades producidas por virus

1. Sarampión
2. Rubéola
3. Parotiditis o paperas

…después le ponen refuerzo a los 15 meses o año y medio

 El neumococo es el Streptococcus pneumoniae…bacteria que produce la neumonía


global… ¿Cuál es la neumonía global? La que afecta a 1 lóbulo del pulmón y es
la más frecuente. La neumonía que al parecer afecta al borracho, se queda dormido
en medio y se despierta con fiebre, escalofrío, tos

¿En qué paciente es más notorio la inmunización contra el neumococo?

Cuando se extirpa el bazo. Cuando a un paciente se le hace una esplenectomía, queda


inmunodeprimido…estadísticamente está comprobado que lo agarra el Streptococcus pneumoniae
por cualquier lado

¿Cómo se llama la excelsi del bazo? Excelsi siginica sacar

69
Esplenectomía

¿Qué función tiene el bazo? Tejido linfoide productor de anticuerpos

Otra estructura que participa en nuestro sistema humoral …de tipo humoral lo constituye el
complemento

¿Qué es el complemento?

Es una proteína que se encuentra en la sangre normalmente de todos los individuos normales
excepto los que tienen hipocomplementenia o acomplementenia.

 Cuando entra un antígeno… ¿una de las formas de respuesta ante un antígeno


cual puede ser?...1. generalmente tiene que acercarse la célula presentadora de
antígeno o CPA, lo agarra al antígeno y lo presenta al linfocito T…2. O puede ser
que en presencia del antígeno se activen los anticuerpos, ¿Cuáles anticuerpos?
Anticuerpos que se conocen con el nombre de opsonina

¿Qué es la opsonina? Son anticuerpos que rodean al antígeno, se fijan en él, lo


debilitan para que sea fácilmente fagocitado…¿Cómo es fagocitado? Porque el
anticuerpo tiene 2 extremos…¿Cómo está constituido el anticuerpo?...por 2
partes, una parte que es la llamada o el extremo Fab y la otra parte que se conoce
con el extremo Fc

¿Qué forma tiene el anticuerpo?

Forma de Y…o sea, tiene una bifurcación, es lo que se llama la porción bisagra.

70
 En el extremo Fab se encuentran 2 sitios de reacción del anticuerpo, por eso el
anticuerpo tiene que ser bivalente. Un anticuerpo reacciona generalmente con 2
antígenos…en el extremo del mismo anticuerpo se llama paratopo…ahí se mete
el epitopo…que es el determinante antigénico…quiere decir que el antígeno tiene
varios sitios reaccionantes, quiere decir que cada sitio reaccionante es un
determinante antigénico…y ese determinante antigénico se une en un
brazo y en el otro brazo
 El extremo Fc o factor cristalizable…en la cola del anticuerpo
existen receptores para los llamados linfocitos B o T, para los
macrófagos, también para el complemento

 El complemento se grafica con una C y con un apostrofe…C’1, C’2,


C’3…generalmente existen alrededor de 11, 20 o más complementos pero los más
importantes son los primeros, ej. 10, 9, etc

 Cuando se mete un antígeno y el anticuerpo reacciona, va y lo agarra al antígeno…


¿Cómo lo destruye a este antígeno? Este anticuerpo viene a ser una opsonina
porque se fija por ahí varios anticuerpos y lo debilitan.

¿Qué es lo que hace el complemento cuando se pega al extremo Fc? Hay una reacción antígeno-
anticuerpo-complemento

¿Qué es lo que hace el complemento para destruir a la bacteria?

El complemento atrae hacia el foco donde está la reacción antígeno-anticuerpo-


complemento…atrae hacia el foco la migración de leucocitos o de macrófagos…es migración es
para que vayan a atacar o afectar al antígeno, que vendría a ser la bacteria…para que eso ocurra
no es que viene el complemento, se pega ahí atrás y ya empiezan a venir los leucocitos y
macrófagos…el complemento tiene que activarse…la forma como se activa el complemento son
3…la activación por la vía clásica, alternativa y de las manosas

71
¿Cómo se activa el complemento?

Hay que activar el C’1, EL C’2, EL C’3, EL C’4 Y ASÍ…en secuencia…y eso da origen a la
formación de 2 sistemas enzimáticos que es la de convertasa de C’3 y convertasa de C’5

¿cuál es la secuencia?

1. Entra el antígeno y lo agarra el anticuerpo…se une la reacción antígeno anticuerpo


2. La cola del anticuerpo fija el complemento
3. El complemento tiende a ser el C’1
4. El C’1 está formado por 3 subfactores: C´1q, C´1r y C´1s
5. La cola se une con el C’1 con el extremo del C’1q, que se transforma en C’1r y de ahí en
C’1s
6. Activado los 3 subfactores…se dice que el C’1 ya está activado, C’1ª es activado
7. C´1 activado actúa sobre C’2 y C’4
8. Cada vez que actúa, fragmenta ese complemento, el C´2 y C´4
9. C’2 a y C´2 b. C’4 se divide en C’4ª y C’4b
10. Cuando ya está activado C´1, C´2 Y C´4…se forma en este caso la covertasa C’142
11. Esa C’142 es lo que se llama convertasa de C3…que va a actuar sobre C’3 y lo va a
activar y lo divide en C’3a y C’3b
12. El a es anafilotóxico, esto quiere decir que libera sustancias vasoactivas o
inmunomoduladoras…histamina, bradicinina
13. En cambio el b es quimiotáctico, quiere decir que atrae hacia el sitio donde está por la
presencia de la composición química a los leucocitos
14. C´3b actúa después sobre C´5 y lo divide en C´5ª y C’5b y se forma la convertasa de
C’5…que es…C’3b, C’2ª, C’4b
15. C5b actua a nivel de C6 C7 C8. Cuando se activa C6 se forma el complejo Cam (complejo
atacante de membrana). C8 es citolitico y ayuda a la lisis.

Las personas que tienen déficit de complemento son personas que padecen tuberculosis, por
eso es que las ven todo el tiempo con granos.

El complemento es otr parte de llo que es el sistema inmune

72
La via alternativa

 Normalmente no participa C1. Hay que tener en cuenta que siempre tenemos en
pequeñas cantidades C3b activo. La activación se hace directamente a partir a C3b
 Se une un factor B y forma C3bB
 Se una un factor D y va a formar C3bBa y C3bBb(convertasa de C3)
 A partir de C3bBb se forma mas C3b
 La convertasa de C3 se une con C3b y se forma la convertasa de C5 (C3bBb-C3b),
formándose C5 que se divide en C5a y C5b
 A partir de C5b se activa C6 C7 C8 (Cam)

Via de la manosa

No está bien claro. C3b actúa sobre un azúcar que es la manosa y activa el complejo Cam

Reacción antígeno anticuerpo

Entre las diversas pruebas serológicas tenemos:

Precipitación o floculación: cuando los componentes se encuentran en solución. Los


componentes forman grumos por eso se llama precipitación o floculación. Un ejemplo de esto
es BDLE que es una prueba inespecífica de la sífilis. Los componentes Tienen un tamaño
menor a 0.0001 micra. La prueba es inespecífica porque una mujer embarazada y una persona
con una enfermedad autoinme si le hacen una prueba de BDLE le va a salir reactividad. Como
estudio de campo es barata y se la puede hacer a todo el mundo y al que le sale reactivo hay
que hacerle estudios para saber si tiene aluna otra enfermedad de fondo. Las que se contestan
positivo son las pruebas específicas. Cuando sale reactivo o no reactivo se refiere a una
cualidad. Si se contesta positivo o negativo es cuando ha habido una reacción verdadera o no
al antígeno.

En la precipitación en los tubos de ensayo se va a presentar una zona donde no hay reacción
antígeno anticuerpo a esa zona se la conoce como fenómeno de zona. Para que haya una
reacción bien establecida debe haber un equilibrio entre el número de antígenos con el número
de anticuerpos. Cuando existe un exceso o un defecto de alguno de los dos no se produce la
reacción.

73
Pruebas de aglutinación: se da cuando lo componentes se dicen que son de tipo
corpusculares. Por ejemplo un eritrocito con una hemolisina se produce la lisis. La aglutinación
se puede acelerar con el movimiento. Un ejemplo también es reacciones transfusionales

Fijación de complemento FC: observar la reacción donde participa el complemento. Aquí


participa antígeno, anticuerpo y complemento

Pruebas de inmunofluorescencia: son pruebas que utilizan una sustancia fluorescente para
que la reacción antígeno anticuerpo se haga visible. Utilizan flourocromo. Puede ser directa o
indirecta.

IFD: al anticuerpo se le añade una sustancia fluorescente. Y si el antígeno es específico para


el anticuerpo se van a unir y la reacción se hará visible.

IFI: para buscar el antígeno voy a poner un anticuerpo pero sin la sustancia fluorescente y si
es especifico se van a unir y se añadirá un anticuerpo unido a la sustancia fluorescente y este
se unirá atrás en el otro anticuerpo y formara una reacción antígeno anticuerpo anticuerpo junto
a la sustancia fluorescente. Se considera que esta prueba es más sensible.

BACTERIOLOGIA
DR. PABLO CHANG
Clase 11
1.- ¿Dónde se produce el complemento?

Es parte del Sistema humoral

2.- ¿Cómo actúa el complemento? ¿Cómo actúa el complemento eliminando, facilitando la


defensa del organismo?

El agente infeccioso, es la bacteria y la bacteria es un antígeno porque tiene proteína, tiene


polisacárido es un conjunto químico, es un antígeno. El complemento al igual que los anticuerpos
son mecanismos que permiten la eliminación de los agentes patógenos, trabajan de la parte de la
inmunidad de la defensa del individuo.

Actúa a partir de la presencia de un anticuerpo, cuando un agente se une al anticuerpo él se activa,


una vez que se activa se produce factores quimiotaxis: Atraen hacia el foco del antígeno que viene

74
hacer la bacteria que esta agarrado por el anticuerpo, atrae los macrófago, Célula mononucleares
para que vayan a destruir a ese antígeno. Por eso actúa el complemento que tiene el organismo.

Las personas que no tienen complemento o que tienen varios complementos son personas
susceptibles a presentar ciertas enfermedades. Eje: pacientes con tuberculosis que tienen granos
son probablemente que no contienen complemento. Por ende el complemento es parte de la defensa
del organismo.

Existen pruebas donde interviene el complemento, son pruebas o reacciones de antígeno-


anticuerpo, para que un anticuerpo se una con un antígeno requiere del complemento, si no esta no
se va a unir. Estas pruebas serológicas porque se hacen del suero de la sangre, vienen hacer la
sangre la cual se la extraído los eritrocitos y proteínas. Hay se puede encontrar al antígeno, yo
puedo probar un anticuerpo siempre y cuando le añada un complemento que me permita si es que
son específicos el antígeno con el anticuerpo que yo pruebo le permita unirse y eso se conoce como
la “Fijación del complemento”

Existen pruebas serológicas que se llaman prueba de fijación del complemento, ¿Cómo se realiza?

Se hacía manteniendo dos sistemas que eran eritrocitos con la hemolisina. Eritrocito (Antígeno),
Hemolisina (Anticuerpo), un anticuerpo puede ser: Hemolisina, bacterioricina o una antitoxina,
existe una teoría que se llama: La teoría de la selección clonal, quiere decir que todos los
anticuerpos son los mismos, se los conoce de acuerdo a la reacción en la que participa. Si participa
produciendo hemolisis se llama (Hemolisina), si participa a partir de una toxina es la (antitoxina).

Si se tiene un eritrocito y la hemolisina se tiene el antígeno y el anticuerpo, el otro sistema es poner


el anticuerpo que conozco para buscar un antígeno que no conozco, estoy haciendo una prueba
con sangre que no sé qué tiene, al paciente se le saca la sangre, le preparo el suero y me espero
encontrar en el suero el agente patógeno (una bacteria). Identificar que agente me está produciendo
una enfermedad.

Sospecho que es una enfermedad bacteriana, se supone que tengo varios anticuerpos los cuales se
conocen que reaccionan con tales antígenos, conociendo yo el anticuerpo yo puedo probar en el
suero el antígeno que no conozco, pero para que se una ese antígeno con ese anticuerpo se requiere
que intervenga el complemento. Si yo tengo la hemolisina (Anticuerpo) y el eritrocito (Antígeno)
si yo tengo el antígeno que no conozco en el suero y le agregó el anticuerpo que conozco, y le

75
añado complemento previo a realizar la prueba serológica a 54 grados para inactivar el
complemento que normalmente tiene la sangre, porque uno le agrega el complemento al individuo.
Una vez que inactivo, yo hago la prueba, añado el complemento. Si el anticuerpo que yo conozco
no reacciona con el antígeno que estoy buscando. Quiere decir que ese anticuerpo no es específico
para ese antígeno por eso no lo trata de unir. Entonces como la prueba de fijación de complemento
para que se una el anticuerpo con el antígeno tendría que meterse el complemento en el medio para
que se unan los dos, como no es específico no se unen, el complemento queda libre y se mete en
la reacción hemolisina-eritrocito. Se hace hemolisina-complemento-eritrocito, como es
hemolisina, lisa al eritrocito donde se produce la prueba de hemolisis, si la prueba hay hemolisis
me ¿indica que la prueba es positiva o negativa?

El que tiene que reconocer al antígeno es el anticuerpo, si el anticuerpo lo reconoce al antígeno, la


unión se va a dar porque se va a meter el complemento. Si no son especifico el complemento no
se va a unir, y el complemento se va a meter en otra reacción porque ahí antígeno y anticuerpo, se
va a meter en a reacción del eritrocito-hemolisina y va a producir hemolisina, e indica que la prueba
es negativa.

Concepto Especificad: Un antígeno da origen a la presencia de un anticuerpo, y este anticuerpo


se forma a expensas de este antígeno porque lo toma como molde y este antígeno va a reaccionar
siempre con el anticuerpo que le dio origen eso se llama especificad. Si existe otro antígeno que
es parecido a este, es probable que este anticuerpo se forma a expensas del otro, puede reaccionar
a otro esto se llama reacciones cruzadas. Esto se da porque el anticuerpo que se forma cuando
hay un antígeno a veces es policlonado ósea que se origina se varias clones por eso da reacciones
cruzadas, si yo tengo un anticuerpo que se origine de un solo clon ósea de una célula, ese anticuerpo
va hacer siempre específico para ese antígeno, va a reaccionar solamente con el que le dio origen
y no se va a confundir.

Sensibilidad: Capacidad de detectar un anticuerpo aun antígeno, sino es capaz de detectar la


prueba es negativa ósea es poco sensible o puede ser que lo detecte en enseguida, se refiere a la
sensibilidad.

Si uno tiene un complejo y yo tengo un anticuerpo que conozco, acá tengo un antígeno que no
conozco yo parto del hecho de un paciente que está enfermo, tengo que detectar que enfermedad
tiene, yo hago un diagnostico diferencia, este paciente tiene una enfermedad infectocontagioso,

76
una infección que realmente es una bacteria que se ha metido y sospecho que la bacteria podría ser
por síntoma gripal o una tifoidea (salmonella typhosa). Como puedo probar que el paciente tiene
la bacteria?

Con la prueba de fijación de complemento, yo le saco el suero y probablemente tiene el antígeno


y si yo tengo el anticuerpo contra la salmonella, si yo pongo el suero del paciente, se supone que
tiene un antígeno que no conozco en este caso la salmonella. El antígeno que no conozco, yo tengo
un anticuerpo que es antisalmonella-tifosa, tengo otro complejo de eritrocito-hemolisina, si yo le
añado un complemento, la prueba es de fijación de complemento y requiere que el complemento
intervenga para que se unan los dos. Si este anticuerpo que estoy usando para probar este antígeno
que es anticuerpo monoclonal, si esto fuera en realidad el antígeno salmonella typhosa, va a unirse
porque este anticuerpo es antisalmonella typhosa y se va a unir pero para que se una este
complemento tiene que unirse a los dos y se si se une no va a ver reacción eritrocito-hemolisina,
no porque todo el complemento se va a consumir en la otra reacción y no va a ver complemento
para que una el eritrocito-hemolisina entonces no va a ver hemolisis la prueba es positiva o
negativa?

Es positiva, pero si no se da así quiere decir que el complemento quedo libre, efectiva la reacción
hemolisina-eritrocito, esa es la prueba de fijación del complemento.

El complemento para que actúe, tiene que activarse pero si no se activa no se une el anti-antige,
aunque siempre hay una cantidad mínima de complemento activado que se activa y se desactiva.
Y la forma en que va hacer el complemento era la vía clásica, vía alternativa.

La vía clásica partiera de la existencia de un complejo grande, antígeno-anticuerpo de ahí se


activaba el complemento y se da la convertasa de C3 se fragmentaba el C3, la convertasa de C5 se
fragmentaba el C5 y el C5 activaba C6, C7, C8, y formaba el complejo de ataque de membrana
que iba activar la membrana del antígeno junto con los macrófagos que destruían el antígeno esa
era la activación de la vía clásica.

Por medio de la vía alternativa, el C3B que siempre existe en los ensayos se une a un factor B y se
fragmentaba y se hacia C3BB C3BA y se une al C6, C7, C8, C9 y se forma el complejo de ataque
de membrana el complejo (CAM), daña la membrana de los virus.

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La otra es el sistema de MBL o de Lectina, es un polisacárido que actúa sobre C3 y permite que
se active algo parecido a lo que ocurre con la vía alternativa.

Pruebas de reacción antígeno-anticuerpo

La diferencia entre la prueba de precipitación y prueba de aglutinación o floculación.

En la floculación los componentes se encontraban en solución es decir, que los componentes tenían
un tamaño de aproximadamente 0.001 Micra por eso se producía un floculo o grumo, la floculación
era por ejemplo: la prueba de DDRN, la prueba de Louis, la prueba para la sífilis.

La prueba de aglutinación era la que da por el agrupamiento, cuando estos se encontraban era de
forma corpuscular ósea era de mucho mayor tamaño que en la reacción de precipitación, los
eritrocitos por ejemplo.

Reacciones de transfusión de los grupos sanguíneos

La prueba de grupo sanguíneo cuando se pone en contacto el aglutinógeno (Antígeno) con la


aglutinina (Anticuerpo). El aglutinógeno es el A, B, AB y el O. Y la aglutinina Anti A y Anti B.

Usted puede poner sangre que no se corresponde sangre B, O, A se va a producir aglutinación


porque los elementos que reacciones son de tipo corpuscular en este caso el eritrocito. Esta es la
prueba de aglutinación cuando es de forma corpuscular y el otro cuando está en solución.

La prueba de inmunofluorescencia directa e indirecta, son las que une la sustancia fluorescente y
al anticuerpo puede ser directa o indirecta.

Es directa cuando la sustancia fluorescente está unido al anticuerpo y se une directamente con el
antígeno especifico (IFD).

Puede ser indirecta cuando al antígeno se lo hace reaccionar con un anticuerpo y ese complejo
antígeno- anticuerpo se le pone una antigamaglobulina o sea una antianticuerpo que reacciona
contra el complejo pero a nivel del anticuerpo entonces se hace antígeno-anticuerpo-
anticuerpofluorescente.

Prueba de Elisa (Prueba de enzimoinmunoensayo)

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Es similar a la prueba de inmunofluorescencia indirecta, sino que en vez de utilizar una sustancia
fluorescente, utiliza un sustrato y una enzima, la enzima actúa sobre el sustrato cambiándolo de
color a sustrato y hace visible la reacción.

Paratopo (donde se une el epitopo)

Epitopo: también se llama determinante antigénico, es el sitio reaccionante del antígeno, un


antígeno tiene varios sitios donde reaccionan, se unen con el anticuerpo cada sitio es un
determinante antigen o epitopo. Ese epitopo se mete en el Paratopo, en el extremo de la bifurcación
de las ramas del anticuerpo.

Inmunofluorescencia directa

Inmunofluorescencia indirecta

Eso quiere decir, que el anticuerpo para detectar el antígeno, sobre eso le añado una
antigamaglobulina ósea un antianticuerpo que reacciona sobre el anticuerpo, ese anticuerpo tiene
antigamaglobulina unida a una sustancia fluorescente, sustancia fluorescente unida al anticuerpo
que es un antigamaglobulina que reacciona al anticuerpo unido al antígeno.

Prueba de Eliza: Es igual a la prueba de inmufluorescenia indirecta con la diferencia de que no


utiliza la sustancia fluorescente sino que utiliza un sustrato y sobre eso actúa una enzima. En vez
de usar una sustancia fluorescente, yo puedo observar el cambio de color cuando la enzima actúa
sobre el sustrato ósea cambia el color de sustrato y muestra la presencia de una reacción.

Prueba de Elisa (para detectar el antígeno) tipo sándwich

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Se coge una microplaca, es un placa que tiene varias pocillos 8x12, ósea tiene 96 huequitos se
supone que ahí no puede hacer la tipo sándwich, al poner ahí el suero no pone el anticuerpo de la
reacción que va a probar. Ese anticuerpo quedaría parado y abierto, pongo el antígeno y se fija, de
ahí le hecho otro anticuerpo que se une por arriba con el antígeno con el sustrato. “Corrección”
hace el Anticuerpo con sustrato, hace el antígeno y hace otro anticuerpo, esa es la técnica tipo
sándwich para buscar anticuerpo.

Para el antígeno, le hecho el anticuerpo, la antigamaglobulina para que busque la gammaglobulina


que está unida al anticuerpo con el antígeno.

Otras técnicas que sirven para hacer prueba serológicas, son pruebas de biología molecular
como: técnica de Western Blot, PCR.

Reacciones de hipersensibilidad

Hipersensibilidad: Es una reacción exagerada del anticuerpo ante la presencia de antígeno.


Ejemplo:

Persona asmática con una persona normal. Si le hecho humo, la persona normal puede tolerar en
cambio la persona asmática va a reaccionar ante la presencia del humo que es un antígeno y se va
ahogar.

Idiosincrasia: Es una reacción exagerada pero sin que exista una exposición previa aun antígeno
Ejemplo:

Una persona puede tomarse un antihistamínico (Actúa contra la histamina, la histamina se


encuentra de forma natural en las células de nuestro sistema inmunitario, concretamente de los
mastocitos y los basófilos (entre otras). Si yo tengo amenorrea de un cuadro gripal, y me tomo un
antihistamínico para bloquear la reacción de histaminas y el cuadro gripal. Normalmente un
antihistamínico tiene la capacidad de producir sueno, algunas personas no le pasan nada pero otras
sí. Esa es una reacción idiosincrasia.

Uno de los fundamentos de la hipersensibilidad es que exista un exposición previa al antígeno,


porque? Porque para que reacciones el individuo quiere decir que él tiene el anticuerpo, la única
razón para que se forme un anticuerpo es porque se puso en contacto con un antígeno.

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Cuando la persona se le introduce un antígeno, su organismo la célula inmunogena responde
produciendo el anticuerpo a expensas de ese antígeno y ese antígeno es una gammaglobulina
(Proteínas: Albumina, Fibrinógeno, Globulina), se considera que el anticuerpo son globulina gama.

¿Cuáles son los anticuerpos?

Son de 5 tipos:

 IgA.
 IgD
 IgE
 IgM
 IgG

¿Cuál es el tipo anticuerpo de la reacción de hipersensibilidad y alergia?

IgE.

Cuando me pongo en contacto con un antígeno, me sensibilizo y produce anticuerpo IgE que es de
alergias y esos anticuerpos quedan fijados a nivel de diversos órganos como el respiratorio,
paredes de los vasos.

¿Qué pasa cuando por segunda ocasión aun antígeno?

Yo ya tengo formado los anticuerpos, y van reaccionar esos antígenos con los anticuerpos a nivel
de los vasos, se van a liberar sustancias vasoactivas, se va a producir una vasodilatación,
vasoconstricción y va a ver una sintomatología.

Las reacciones de hipersensibilidad pueden ser de 2 tipos:

1) Hipersensibilidad de COOMB

2) Hipersensibilidad de GELL

¿Cuáles son las reacciones de hipersensibilidad de Coombs y Hell?

Son 4:

I, II, III: Son reacciones de hipersensibilidad mediadas por anticuerpos. Se denominan H.


Inmediata mediada por anticuerpos.
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IV: Se conoce con el nombre de H. Tardía y no esta mediada por anticuerpos, sino esta mediada
por células.

Especificad Tipo I

Es la llamada Hipersensibilidad Anafiláctica, puede ser sistémica o cutánea o local. Se llaman


sistémicas porque se produce una reacción en todo el cuerpo de hipersensibilidad al exponerse a
un antígeno. Y local porque solamente se hace lo mismo de forma sistema se lo puede hacer en un
pequeño lugar (Prueba cutánea)

¿Cuál es el mecanismo de la anafilaxis?

Exposición previa al antígeno, formación de anticuerpos IgE que se fijan a nivel de los tejidos,
órganos choques como son el corazón, vasos, los bronquios y los pulmones, ahí se fijan a las IgE
formadas por una exposición previa cuando se expone por segunda ocasión al mismo antígeno.
Como ya existe formados los anticuerpos, hay una reacción antígeno-anticuerpo, y liberación de
sustancias vasoactivas liberación de histaminas, bradicinina de sustancia de reacción lenta
(Leucotrienos). Y solamente la sustancia de histamina ya da origen a una sintomatología. La
histamina a nivel de los vasos produce vasodilatación (se dilatan los vasos) y a nivel de los
bronquios (broncoconstricción se cierran los bronquios). Si se me dilatan la vasos, la presión
arterial es mantenida por presión la presión que le hace las paredes de los vasos se va a perder
porque si se dilata el vaso se cae la columna de sangre, se pierde la perfusión a nivel del cerebro,
no hay oxígeno a nivel del cerebro , se pierde la irrigación a nivel de los riñones (Glomérulo),
como no hay oxígeno, no hay perfusión cerebral, e ponen morados (cianóticos) porque se cierran
los bronquios, no hay perfusión ni oxigeno tampoco entra oxígeno. Hay anuria, no hay formación
de orina y se muere por anafilaxis.

Esto puede ocurrir localmente, si yo cojo la prueba de penicilina, cojo penicilina sódica 1000
unidades, pongo 1000 unidades de penicilina intradérmica porque se hacia el signo de la cascara
de naranja, se producía una paula en la piel llena de líquido, una roncha, se esperaba 15-20 minutos
y se hacia la lectura de si producía eritema acompañada de prurito y eso determina si hubo una
reacción alérgica o no a la penicilina.

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¿Porque se produce el eritema en el sitio donde uno hace la prueba?

Una prueba de anafilaxia cutánea, la otra era anafilaxia sistémica, porque se hace eritema en la
cutánea. Se pone rojo porque aumenta la perfusión cutánea, hay vasodilatación, aumenta la
circulación. Se hincha porque la vasodilatación separa el endotelio y pasa el líquido al intersticio
y se forma una roncha más grande, hay prurito porque hay estimulación de las terminaciones
nerviosas.

Especificad tipo II

Se define como la especificidad mediada por anticuerpos citotóxicos. Ejemplo:

Reacciones transfusionales. ¿Cuál es el anticuerpo citotóxicos en una reacción transfusional?

Si pone sangre de un sujeto diferente a otro, se va a producir hemolisis porque. Anticuerpo


citotóxicos en una reacción transfusional (Las Aglutininas).

¿Si le pongo a una persona sangre tipo B y soy una persona de Tipo A que va a pasar?

La sangre A con la B se va a precipitar, va a existir una reacción transfusional, se van a destruir


los glóbulos rojos porque hay existe los anticuerpo citotóxicos.

En los grupos sanguíneos el aglutinógeno es lo que se posee y la aglutinina (anticuerpo) que se


posee es el equivalente al antígeno que usted no tiene. Ejemplo:

Si yo soy sangre tipo B, los eritrocitos tienen el antígeno B y ¿cuál es mi anticuerpo? La


aglutinina es aquella que no corresponde al antígeno que yo tengo. Es decir, la Anti A.

Si es O, tiene anti A y anti B.

Si es AB, no debe tener aglutininas. Ni anti A, ni anti B.

¿Si yo soy sangre B, puedo recibir sangre O?

Sí, porque está relacionado con volumen. En una emergencia le va a poner sangre O como donador
universal a una persona de tipo B, si le pone una, dos o tres unidades de sangre, se va a poner dos
unidades de sangre q tiene Anti B a una persona que es de tipo B, por volumen de sangre, una

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unidad equivale 480-420, ocurre que pueden diluirse, en la reacciones puede ser probable que se
dé o puede ser mínimo o al menos no le va a tapar los riñones.

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