MKT-MDL-05

Versão 00

ESTUTURA E REPLICAÇÃO DO DNA

Profa. Drª Rosilma de Oliveira Araujo Melo

 Watson e Crick

• Em 1953, James Dewey Watson e

Francis Crick (análises de difração de
raio X de DNA cristalizado):DNA
nativo consistia em duas longas
cadeias (filamentos).

• Em 1962 receberam o Prêmio Nobel

de Medicina e Fisiologia, tornando-se
dois dos cientistas mais importantes
da história moderna.
 Ácidos Nucléicos

DNA (ácido desoxirribonucléico) – molécula composta por uma

sequência de nucleotídeos ligado um após o outro.
Cada nucleotídeo consiste em um açúcar (desoxirribose) ligado a um lado a
um grupo de fosfato e ligado ao outro lado para uma base nitrogenada.

Fosfato

Nucleosídeo
Nucleotídeo Desoxirribose

Base Nitrogenada
 Ácidos Nucléicos

RNA (ácido ribonucléico) – São três tipos:

RNAm – RNA mensageiro
RNAr – RNA ribossomal
RNAt – RNA transportador
O RNA é também uma longa fileira desses blocos ou letras.
Cada nucleotídeo do RNA consiste em um açúcar (ribose)
ligado a um lado a um grupo de fosfato e ligado ao outro
lado para uma base nitrogenada.

Fosfato

Nucleotídeo ribose

Base Nitrogenada
 Nucleotídeos: Bases nitrogenadas

O pareamento das bases de cada fita se dá de maneira padronizada, sempre uma purina
com uma pirimidina, especificamente: adenina com timina e citosina com guanina.
 DNA

Os nucleotídeos do DNA são

unidos por ligações fosfodiéster,
com o grupo fosfato do carbono 5’
de um nucleotídeo ligado ao
grupo 3’-OH da desoxirribose do
nucleotídeo adjacente.
 DNA

Em cada fita simples de DNA, o grupo

fosfato de um nucleotídeo se liga ao
açúcar do outro nucleotídeo formando
uma fita contínua.
Tipos de Ligações do DNA e RNA
 Estrutura helicoidal do DNA

O DNA fita dupla se forma a partir da ligação entre

duas fitas simples de DNA, onde cada base
nitrogenada se ligará ao seu nucleotídeo
correspondente.
Cada cromossomo é composto por uma molécula
dupla-fita de DNA.
 Estrutura helicoidal do DNA

O DNA consiste de duas cadeias

helicoidais de DNA;

Enroladas ao longo de um mesmo

eixo, formando uma dupla hélice de
sentido rotacional à direita (Hélice
dextrógira);

As duas fitas de DNA estão em direção

opostas, isto significa que são anti-
paralelas;

 O termo anti-paralelas: deve-se ao

fato de que uma das fitas tem a direção
exata da sua síntese (5'---3') enquanto
que a outra está invertida (3'----5').
 Estrutura helicoidal do DNA

Com base na estrutura de

dupla hélice do DNA e nas
características de
hidrofobicidade das moléculas,
a estrutura do DNA fica da
seguinte forma:

* O grupo fosfato e o açúcar

(parte hidrofílica)- externa da
molécula.

* As bases nitrogenadas
(parte hidrofóbica) - interna da
molécula.
 Regra de Chargaff:
Composição de bases

• Erwin Chargaff descobriu a razao de 1 para 1 entre as

bases nitrogenadas (adenina e timina; e citosina e
guanina).

• Regra de Chargaff:

• 1. A quantidade total de nucleotídeos pirimidínicos (T+C) é

sempre igual a quantidade total de nucleotídeos purínicos
(A+G);

• 2. A quantidade de T é sempre igual à de A, e a quantidade de C

é sempre igual à quantidade de G

• 3. A quantidade de A + T não é necessariamente igual a

quantidade de G+C.
 Análise de Difração de Raios-x do
DNA

• Análises por difração de raios X

• Estudo da estrutura da molécula por meio da
difração de raios-X: uma metodologia sobre a
estrutura das proteínas.

• Os resultados mais importantes de difração de

raios-x sobre a molécula de DNA foram obtidos
por Maurice Wilkins (1916-2004) e Rosalind
Franklin (1920 – 1958).

• Os resultados obtidos indicavam que o DNA tinha

uma estrutura helicoidal.
 Principais diferenças entre
DNA e RNA

Em relação a distrubuição nas células: DNA ( Núcleo) e RNA (citoplasma).

Em relação a origem: DNA (replicação: DNA polimerase) e RNA (transcrição: RNA

polimerase).
 Curiosidades...

• O DNA humano é constituído por

cerca de 3 milhões de bases e cerca
de 20.000 genes;

• O DNA de uma célula humana

apresenta um comprimento de quase
dois metros;

• A tecnologia pode ser usada para

determinar a ordem de bases em
genes, cromossomos, ou um genoma
inteiro. Em 2000, os investigadores
concluíram a primeira sequência
completa do genoma humano
(projeto genoma).
REPLICAÇÃO DO DNA

Profa. Drª. Rosilma de Oliveira Araujo Melo

 Replicação do DNA

• Processo de síntese de DNA.

• Cada filamento de DNA atua como um molde para a produção de
um novo filamento.
 Replicação do DNA

Replicação semiconservativa: Cada fita do DNA é

duplicada formando uma fita híbrida, isto é, a
fita velha pareia com a fita nova formando um
novo DNA (experimento de Meselson-Stahl).
 Replicação do DNA

A replicação do DNA é bidirecional, à partir de uma origem de replicação ou forquilha

de replicação. A forquilha de replicação “move-se” através da fita de DNA;
Replicação do DNA
 DNA polimerases

Enzima que adiciona desoxirribonucleotídeos trifosfatos à ponta 3’ de uma

cadeia crescente de nucleotídeos, usando como molde um único filamento
de DNA que foi exposto pela deselicoidização.

dATP dGTP dCTP dTTP

 1ª Fase: Desenrolamento

A helicase ou DNA helicase é

uma enzima que promove a abertura da Quebram momentaneamente o
hélice de DNA, separando-o em duas DNA, fazendo com que este sofra
fitas simples para que possa algumas rotações e em seguida este
sofrer replicação mesmo grupo de enzimas refazem a
ligação "quebrada"

SSB são proteínas que se

juntam a fita do DNA,
impedindo de que ela volte
a se ligar, mantendo a
estabilidade da forquilha de
replicação.
1ª Fase: Desenrolamento

Ação da DNA polimerase III (5’ →

3’): responsável pela
polimerização das novas fitas
de DNA. Atua adicionando
nucleotídeos à nova fita de DNA.
 2ª Fase: Síntese Contínua

A síntese é realizada no sentido da abertura da forquilha de replicação.

 3ª Fase: Síntese Descontínua

Fragmento de Okazaki: pequenos fragmentos de DNA recém sintetizados,

acoplados a um primer.
 3ª Fase: Síntese Descontínua

DNA polimerase I:

É uma enzima relacionada ao reparo

do DNA;

Atua verificando a sequência de

nucleotídeos adicionados pela DNA
polimerase III;

Onde houver um nucleotídeo

incorreto, a DNA polimerase I troca pelo
correto.
 3ª Fase: Síntese Descontínua

DNA Ligase:
Enzima que atua ligando os fragmentos de Okazaki;
Liga um fragmento de DNA a outro, através de ligações fosfodiéster (conecta o átomo de carbono 5’ de
uma desoxirribose ao átomo de carbono 3’ da desoxirribose adjacente).
Telômeros

São estruturas constituídas por sequências

simples repetitivas de DNA;

Não codificante (RNA ou protéinas);

 Formam as extremidades dos cromossomos.

Região que protege as pontas do DNA do

encurtamento ;

Mantém a estabilidade estrutural do

cromossomo.
 Telomerase

É uma transcriptase reversa: Sintetiza DNA a partir de RNA

Primer de RNA

Ponta 3’

Remoção do primer e sintese do

DNA adicional
 Telomerase

Fita Contínua (leading) → A replicação ocorre até a ponta do DNA;

Fita descontínua (lagging) → necessita do uso de primers. Quando um primer é

removido são perdidas sequências na ponta do filamento.

Encurtamento do telômero:
envelhecimento
OBRIGADA!