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Finalidade:
Meio de cultura destinado ao isolamento de microrganismos em amostras de sangue.
Registro ANVISA:
10097010-137
Apresentação:
530133 - HEMOCULT I TSB 45mL CX 10FR
530135 - HEMOCULT I TSB 90mL CX 10FR
530138 - HEMOCULT II BHI 45mL CX 10FR LB 170768
530141 - HEMOCULT I PEDIATRICO TSB 9mL CX 10FR Rev 13 – 11/2019
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- Os procedimentos de manuseio referentes ao processamento e A grande maioria dos microrganismos é isolada nas primeiras 72
manuseio para o descarte deverá estar de acordo com a RDC 222, horas. Mediante a presença de microscopia com morfologia
DE 28 DE MARÇO DE 2018 que dispõe sobre o Regulamento suspeita e sem crescimento no subcultivo em aerobiose ou caso
Técnico para o gerenciamento de resíduos de serviços de saúde. haja crescimento somente no frasco anaeróbio, suspeita-se de
anaeróbios. Neste caso, uma alíquota da amostra deve ser
d- Reagentes subcultivada em placa de ágar-sangue (preferencialmente
- Hemocult I: Frascos contendo 9, 45 ou 90mL de meio TSB (Tryptic enriquecido com hemina e vitamina K), e incubada em atmosfera de
Soy Broth) adicionado de SPS (Polianetol Sulfonato de Sódio) que anaerobiose por 48 - 72 horas. Em suspeitas diagnósticas de
microrganismos de crescimento mais lento, períodos mais
atua como anticoagulante e inibe a atividade do complemento e da
prolongados de incubação devem ser indicados.
lisozima, interferindo assim no processo de fagocitose; CO2 e
vácuo, que asseguram condições de anaerobiose, para inocular OBS:
respectivamente 1, 5 ou 10mL de sangue total. - A agitação diária dos frascos favorece o crescimento dos
- Hemocult II: Frascos contendo 45mL do meio BHI (Brain Heart microrganismos.
Infusion), adicionado de SPS, CO2, vácuo e PABA (Ácido - No caso de suspeita de fungemia, incubar a 30 ± 2°C por mais 10
Paraminobenzóico) que atua como agente inibidor de Sulfas, para dias.
- Seleção dos meios de Cultura:
inocular 5mL de sangue.
Hemocult I: indicado para o uso geral, recupera microrganismos
exigentes e não exigentes como Neisseria spp e Haemophilus spp.
5. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS (porém não Hemocult II: também é indicado para o uso geral, recupera
fornecidos) microrganismos exigentes e não exigentes, pelo fato de incorporar o
- Seringas descartáveis estéreis e demais materiais de coleta; PABA em sua formulação, permite o uso em amostras de pacientes
- Estufa para incubação; sob terapia por sulfas.
- Bico de Bunsen.
7. RESULTADOS
6. PROCEDIMENTO TÉCNICO - Não houve crescimento:
a- Preparar os frascos de hemocultura, limpando a tampa com “Não foram isolados microrganismos na amostra analisada após 7
algodão embebido em álcool 70%, deixando o algodão sobre a ou 14 dias de incubação a 35oC em aerobiose e anaerobiose”,
tampa do frasco até o momento da punção. reportando data, hora e sítio da coleta.
b- Realizar a punção utilizando as técnicas adequadas. - Havendo crescimento:
c- Transferir as alíquotas de sangue, preferencialmente para dois “Desenvolvimento de ___(indicar a espécie isolada)“, reportando
frascos contendo Hemocult sem trocar a agulha. Quando for de resultado do antibiograma, data, hora e sítio da coleta.
interesse, um dos frascos pode ser aerado.
d- Homogeneizar os frascos por inversão e incubar a 35 ± 2ºC.
e- Após 24-48 horas de incubação deve ser realizado o primeiro 8. LIMITAÇÕES DO MÉTODO
subcultivo (repiques cegos) em ágar sangue e/ou ágar chocolate e (Riscos Residuais Identificados conforme RDC 36/2015)
realizar a coloração de Gram. Os resultados falsamente positivos ou negativos podem ocorrer,
f- Incubar a 35 ± 2ºC sob tensão de CO2 por no mínimo 48 horas e com maior frequência, nas seguintes situações:
observada diariamente para verificar a presença de colônias. - Tempo longo entre a semeadura da amostra e análise. Ao utilizar
g- Deve ser realizada a inspeção visual dos frascos diariamente a colônias isoladas em um período superior a 24 horas, o
partir de 6 - 12 horas à procura de sinais de hemólise, turbidez, metabolismo bacteriano pode ficar comprometido e a leitura de
produção de gás, bolhas, película de crescimento, grumos, etc. que alguns parâmetros podem consequentemente ficar defasados ou
podem ser sinais de positividade até o 7º dia. Nestes casos, a até mesmo não ocorrer. Em colônias recentes (inferior ao período
amostra deve ser subcultivada imediatamente e preparada lâmina de 18 horas) não se encontram com o metabolismo bem definido, e
para microscopia (Gram). algumas provas podem não ocorrer.
h- No sétimo dia repicar as amostras em ágar chocolate e incubar a - Incubação em temperatura inadequada.
35 ± 2°C sob tensão de CO2 e realizar a coloração de Gram. - Sobrecarga de inóculo ou falta de inóculo. Placas com inóculos
i- Nos casos de positividade na hemocultura, deve-se proceder às mais carregados podem gerar resultados falsamente positivos e
rotinas de identificação e antibiograma adotadas pelo laboratório. inóculos em menor quantidade podem fornecer resultados
falsamente negativos.
Sugestão de processamento de hemoculturas pelo método manual: - Interpretação equivocada de resultados.
- Técnica de assepsia inadequada.
- Tempo excessivo ou insuficiente de incubação. Tempo excessivo
de incubação fornece resultados falsamente positivos e tempo
insuficiente fornece resultados falsamente negativos.
- Utilização de material vencido, contaminado ou em condições
inadequadas.
- Contaminação cruzada por uso de acessórios não esterilizados
corretamente ou ambiente não asséptico.
- Utilização de meios de cultura com aparência alterada.
- Não aguardar para que os materiais atinjam a temperatura
ambiente no momento do uso.
- Erro na conservação do produto pode ocasionar desidratação do
meio e alteração das propriedades dos componentes
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HEMOCULT Rev. 13 – 11/2019
9. CONTROLE DA QUALIDADE 5. CAMPELL, J. and J.A. Washington II. Evaluation of the necessity
- Materiais necessários for routine terminal subcultures of previous negative blood cultures.
Cepas padrão: ATCC® (American Type Culture Collection) ou J. Clin. Microbiol. 1980.
derivadas). 6. COCKERILL, F.R., J.W. Wilson, E.A. Vetter, A.M. Goodman, C.A.
Torgerson, W.S. Harmsen, C.D. Schleck, D.M. Ilstrupt, J.A.
- Controle de qualidade recomendado: Washington II and W.R. Wilson. Optimal test parameters for blood
Parâmetro Resultado esperado cultures. Clin. Infect. Dis. 2004. 38:1724-1730.
Crescimento 7. DUNNE, W.M., and LaRocco. Blood culture systems. In: Cimolai,
Promoção de crescimento - N. (ed.), Laboratory Diagnosis of Bacterial Infections. Marcel Dekker,
comparável 33-37ºC 48h
S. pyogenes
ATCC® 19615
ao lote inferior a 100 UFC Inc., New York, N.Y. 2001.
aprovado 8. DWIVEDI. S, R.Bhalla, D. R. Hoover and M. P. Weinstein.
Crescimento IntravenousCatheter-Drawn Blood Cultures Does Not Reduce
Promoção de crescimento -
comparável 33-37ºC 48h Contamination Rates in Discarding the Initial Aliquot of Blood. J.
S. pneumoniae
ao lote inferior a 100 UFC
ATCC® 49619
aprovado
Clin. Microbiol. 2009
Hemocult I - Meio líquido 9. KONEMAN, A.; Sommers, J.R. Diagnóstico microbiológico. 2. ed.
translúcido, de coloração amarelo São Paulo: Panamericana, 1989.
âmbar podendo apresentar 10. LEE, A., L. Mirret, B. Reller and M.P. Weinstein. Detection of
partículas em suspensão. Bloodstream Infection in Adults: How Many Blood Cultures are
Meio não inoculado Hemocult II - Meio líquido e Needed. J. Clin. Microbiol. 2007
transparente a ligeiramente 11. MAHON, Connie, Manuselis, George Jr. Diagnostic
opalescente, com coloração ambar
Microbiology. Saundres, USA. 1995.
claro, homogêneo, podendo
apresentar turbidez. 12. MERMEL, L.A, M. Allon, E. Bouza, D. E., P. Craven Flynn, N.P.
O’Grady, I. Raad, B.J.A. Rijnders, R. J. Sherertz, and D. K. Warren,
- Periodicidade Clinical Practice Guidelines for the Diagnosis and Management of
Testar a cada novo lote recebido ou em periodicidade estabelecida Intravascular Catheter-Related Infection: 2009 Update by the
pelo próprio laboratório. Infectious Diseases Society of America (IDSA).
13. MUNIER, G., Black,D. e Snyder J.Evalution of BacT/ALERT
- Análise dos resultados blood culture media for the detection and recovery of Histoplasma
O meio testado com cepas padrão deve expressar os resultados capsulatum from blood, abstr. C-101, p.140. Abstr. 104th Gen. Meet.
esperados. Caso se constate algum problema, os resultados não Am. Soc. Microbiol. American Society for Microbiology, Washington,
devem ser liberados até que as causas tenham sido apuradas DC. 2004.
devidamente e os problemas constatados sanados 14. MURRAY, P. R. et al. Manual of clinical microbiology. 9th ed.
Washington, DC: ASM Press, 2007.
15. OPLUSTIL, C. P. et al. Procedimentos básicos em microbiologia
10. GARANTIA DA QUALIDADE clínica. 3. ed. São Paulo, 2010.
A Laborclin obedece ao disposto na Lei 8.078/90 - Código de 16. RICHTER, S.S., J.L. Beekmann, J.L. Croco, J. Diekema, F.P.
Defesa do Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor Koonts, M.A. Pfaller, and G.V. Doern. Minimizing the workup of
desempenho, é necessário: blood culture contaminants: implementation and evaluation of
- que o usuário conheça e siga rigorosamente o presente laboratorybased algorithm. J. Clin. Microbiol. 2002.
procedimento técnico; 17. SIEGMAN-INGRA, Y., A.M., Anglim, D.E. Shapiro, K.A. Adal,
- que os materiais estejam sendo armazenados nas condições B.A. Strain and B.M. Farr. Diagnosis of Vascular-Related
indicadas; Bloodstream Infection: a Meta-Analysis. J. Clin. Microbiol. 1997.
- que os equipamentos e demais acessórios necessários estejam 18. WEINTEIN, M. P. and G. V. Doern. A Critical Appraisal of the
em boas condições de uso, manutenção e limpeza. Role of the Diagnosis of Bloodstream Infections. J. Clin. Microbiol.
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto é submetido 2011.
a testes específicos, que são repetidos periodicamente conforme 19. WEINTEIN, M.P., Reller, L.B., Murphy, J.R., e Lichtenstein, K.A.
calendário estabelecido pela empresa até a data de vencimento The clinical significance of positive blood cultures: a comprehensive
expressa em rótulo. Os certificados de análise de cada lote podem analysis of 500 episodes of bacteremia and fungemia in adults. I.
ser obtidos no site www.laborclin.com.br. Em caso de dúvidas ou Laboratory and epidemiologic observations. 1983.
quaisquer problemas de origem técnica, entrar em contato com o
SAC - Serviço de Assessoria ao Cliente através do telefone 0800-
410027 ou pelo e-mail sac@laborclin.com.br. Quaisquer problemas
que inviabilizem uma boa resposta do produto, que tenham ocorrido
comprovadamente por falha da Laborclin serão resolvidos sem ônus
ao cliente, conforme o disposto em lei.
11. REFERÊNCIAS
1. BARON, E.J., M.P. Weinstein, W.M.Dunne Jr, P.Yagupsky, D.F.
Welch, and D.M. Wilson. Cumitech 1 C, Blood Cultures IV.
Coordinating ed. E.J. Baron. ASM Press, Washington D.C. 2005. Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda
CNPJ 76.619.113/0001-31
2. BEEBE, J. and E.W. Koneman. Recovery of uncommon bacteria
Insc. Estadual 1370012926
from blood: association with neoplastic disease. J. Clin. Microbiol. Rua Casimiro de Abreu, 521
1995. Pinhais/PR CEP 83.321-210
3. BEEKMANN, S.E., D.J.Diekema, K.C. Chapin, and G.V. Doern. Telefone 041 36619000
Effects of Rapid Detection of Bloodstream Infections on Length of www.laborclin.com.br
Hospitalization and Hospital Charges. J. Clin. Microbiol. 2003. Responsável Técnico:
4. BILLE, J., L. Stockman, G.D. Roberts, C.D. Horstmeier, D.M. Ana Lúcia Monteiro – CRF/PR-5972
Serviço de Assessoria ao Cliente
Ilstrup. Evaluation of lysis-centrifugations system for recovery of
SAC 0800-410027
yeast and filamentous fungi from blood. J. Clin. Microbiol. 1983 sac@laborclin.com.br
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