Introdução:

 O que é Doseamento de Antibióticos? (1º slide)

- “A atividade (potência) dos antibióticos pode ser demonstrada

sob condições específicas através de seu efeito sobre o
crescimento de microrganismo-padrão sensível. ”
 Tipos de microrganismos usados nos ensaios: (2º
slide)
- Bactérias
- Leveduras
- Fungos
 Características básicas para microrganismo ideal:
(3º slide)
1. ser sensível à substância que se vai avaliar
2. ser facilmente cultivável
3. ter uma função metabólica ou resposta mensurável
4. Não ser suscetível a variações (características metabólicas
devem permanecer constantes através de cultivos prolongados).
5. se possível ter especificidade
6. não ser patogênico
 Fatores importantes em um ensaio (4º slide)
a) Idade e condições do cultivo
b) Tamanho do inoculo
c) Temperatura
d) Meio de cultivo
e) Relação de O2
 Crescimento das bactérias segundo Buchanan: (5º
slide)
a) Fase inicial 1 – Estacionária (2 h)
b) Lag fase ou Fase de latência 2 (4h)
c) Fase de crescimento 3 (4 a 24 h)
d) Fase estacionaria 4 (25 a 35 h)
e) Fase de declínio ou morte das bactérias 5

Fatores que influenciam a Dosagem microbiológica

pH;
Condições de incubação;
Composição do meio;
Espessura;
Uniformidade do ágar;

Avaliação comparativa, frente a um padrão biológico de

referência; Padrão USP; Cepas ATCC (American Type
Culture Collection);
 Desenvolvimento:

 Métodos de Doseamento: (6º slide)

- Método de Difusão em Ensaio em Placas

- Método Turbidimétrico

 Método Turbidimétrico: (7º slide)

- A relação entre a proporção de crescimento de uma população

microbiana no meio liquido e a concentração da substância
ensaiada, sendo mais utilizado para dosagem de vitaminas e
aminoácidos.

- VANTAGENS: (8º slide)

-> Rapidez, pouco espaço exigido, trabalho e material simples
quando computado com outros métodos biológicos, método
especifico e sensível.
- DESVANTAGENS: (9º slide)
->Alta sensibilidade _ sofre interferência de vários fatores –
impurezas, soluções turvas ou coloridas.
->É necessário validar o método e manter sempre as mesmas
condições.

 MÉTODO DE DIFUSÃO EM AGAR: (10º slide)

- Utilizado para determinação de potência de antibióticos;

- Emprega meio de cultura sólido inoculado, distribuído em

placas.

- O crescimento do microrganismo ocorre respeitando, porém,

áreas onde tenha ocorrido a difusão do antibiótico, gerando
contraste e resultando a chamada zona de inibição de crescimento,
ou ainda restrito a áreas onde tenha ocorrido a difusão do fator de
crescimento.
Vantagens: (11º slide)

- Não precisa ser estéreis;

- A técnica de disco é mais simples, rápida, e de melhor

precisão.

Desvantagens: ( 11º slide)

- Tecnicas de Orificio e Cilindro são mais trabalhosas e

necessitam de cuidados extremos com o manuseio das placas.

 Fatores que interferem no ensaio: (12º slide)

- conteúdo de agua presente no meio;

- qualidade do ágar
 - densidade do inoculo,

- pH do meio e das soluções utilizadas;

- tempo e temperatura de incubação;

- forma ativa da substância;

- coeficiente de difusão da substancia e velocidade de

crescimento do microrganismo.

Conclusão: (13º slide)

Dosagem Microbiológica de Antibióticos

Difusão em Ágar
Método físico

Microrganismo revelador

Zona de Inibição de crescimento

Método Turbidimétrico
Inibição de crescimento

Solução uniforme do antibiótico

Caldo
Os bioensaios são extremamente necessários para que se tenha
um controle de qualidade eficaz destes antimicrobianos de uso
tão difundido.