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BIOLOGIA MOLECULAR E CELULAR

Compartimentos intracelulares
A formação da proteína acontece graças à informação que
está no RNA mensageiro. A informação está nos genes que não
saem do núcleo, portanto, RNA mensageiro vai com a
informação até o citosol onde vai ser traduzido pelos
ribossomos. O reticulo endoplasmático rugoso é assim
chamado por causa dos ribossomos “aderidos” a ele... Na
verdade, os ribossomos não ficam grudados no RER. Quando
tem uma proteína que precisa entrar no RER para ir para seus
destinos, as subunidades ribossomais encostam no RER e
traduzem o RNA mensageiro, quando acaba a tradução as
subunidades se soltam e voltam a ser livres no citosol. Nem toda 2. Fagocitose de bactérias: tem seus próprios genomas e
síntese proteica ocorre no RER. Os ribossomos estão livres no sintetizam parte das suas proteínas.
citosol, quando o RNA mensageiro sai do núcleo ele vai para o
citosol, pode ser que ele vá para o RER ou pode ser que ele seja Em algum momento da evolução a célula eucariótica
lido no próprio citosol e quem dita isso é o destino da proteína anaeróbia fagocitou uma bactéria aeróbia surgindo as
que vem na sequência-sinal. mitocôndrias e cloroplastos, gerando uma endossimbiose,
onde ambas se beneficiaram. A célula se beneficiava porque
• Síntese no citosol: destino citosol, mitocôndrias, a bactéria estava fazendo respiração celular, gerando ATP e a
peroxissomos, núcleo. bactéria agora tinha um monte de proteína à sua disposição.
• Síntese no RER: destino RE, Golgi, lisossomos, membrana A mitocôndria um dia foi essa bactéria, tanto é que ela tem
plasmática, secreção. DNA próprio e produz suas próprias proteínas.

Organelas
O que são organelas com endomembranas?

São compartimentos celulares organizados, limitados por

membranas – bicamada fosfolipídica, no citoplasma das
células com funções específicas: núcleo, mitocôndria,
complexo de Golgi, REL, RER, lisossomo, peroxissomos...

A diferença entre uma célula eucariótica e uma procariótica

está, além do núcleo, na presença de organelas
membranosas, um sistema de endomembranas, e
citoesqueleto.
Mecanismo de distribuição de proteínas

Evolução das organelas

1. Invaginação da membrana plasmática: formam o sistema
de endomembranas:
Membrana nuclear, membrana RE, membrana Golgi,
endossomos, lisossomos... Todas as organelas, exceto a
mitocôndrias, provavelmente surgiram assim, por invaginações.
Nesse momento, as células passaram a ter endomembranas,
mas era anaeróbicas, era eucariótica anaeróbica.
Como que uma proteína sabe que tem que ir para o citosol,
como ela sabe que tem que ir para a mitocôndria ou para o
núcleo ou para o RER e de lá ir para o Golgi?
SEQUÊNCIA-SINAL
As sequências-sinal direcionam as proteínas às organelas
corretas. As proteínas apresentam uma sequência de AA
denominada sinal de distribuição (15-60 AA), que indica o seu

destino. Se a proteína não tiver nenhuma sequência-sinal ela
permanece no citosol.
Transporte pelos poros nucleares
A proteína quando se forma ela não fica em sua conformação
primária, ela de dobra. É determinado geneticamente a
maneira que a proteína vai se dobrar, algumas mutações
genéticas interferem na forma de dobrar da proteína e isso faz
com que ela perca sua função. Para entrar no núcleo a
proteína não precisa de desdobrar, pois o poro nuclear tem
tamanho suficiente para a passagem.
Para a proteína ir para o núcleo ela precisa ter uma sequência-
sinal que a direcione para lá. O complexo de poros nucleares
na carioteca formam um portão pelo meio do qual as
moléculas entram ou saem do núcleo.
No citosol existem proteínas receptoras que reconhecem a
sequência-sinal de importação para o núcleo. Ao reconhecer
essa sequência, a proteína receptora carrega a proteínas até
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o núcleo, chegando lá a proteína receptora solta a proteína
importada e volta para o citosol ao citoplasma para pegar
outra.
Proteínas nucleares
Proteínas que são destinadas ao núcleo, são ativamente
transportadas pelos poros nucleares.
Transporte pelas membranas
MITOCÔNDRIA
A mitocôndria tem uma membrana externa, um espaço
intermembrana, uma membrana interna e a matriz
mitocondrial.
Ao contrário da proteína receptora nuclear que fica no citosol,
a proteínas receptora da mitocôndria está presa na membrana
externa da mitocôndria. Para a proteína entrar, primeiro tem
que ter essa proteína receptora que vai se ligar à sequência-
sinal de proteína mitocondrial. A mitocôndria não tem poros,
tem apenas proteínas canal, chamadas de canal de
translocação. Para a passagem da proteína tem que ter um
canal na membrana externa e outro na membrana interna,
geralmente eles não estão sobrepostos, apenas quando a
sequência-sinal é identificada é que um dos canais fazem
difusão lateral até se parearem e a proteína conseguir entrar.
Se a proteína for para o espaço intermembranas não precisa
dessa translocação.
As proteínas devem ser desenoveladas quando são importadas
para dentro da mitocôndria. Isso é feito pelas chaperonas (HSP)
que estão no espaço intermembranas (existem várias
chaperonas nas células, cada uma exerce uma função
diferente). Quando a proteínas é identificada, ao começar a
passar pelo canal, as chaperonas vão puxar a proteína,
redobrar corretamente a proteína e orientar para onde a
proteína vai.

Integração de proteína na membrana externa de
mitocôndrias.
Integração de proteína na membrana interna de mitocôndrias.
Importação de proteína para o espaço intermembranas da
mitocôndria.
Peroxissomos
Peroxissomos são bolsas membranosas que contêm alguns tipos
de enzimas digestivas. Sua semelhança com os lisossomos fez
com que fossem confundidos com eles até bem pouco tempo.
Entretanto, hoje se sabe que os peroxissomos diferem dos
lisossomos principalmente quanto ao tipo de enzimas que
possuem. Peroxissomo tem função de desintoxicação, já o
lisossomo é de digestão intracelular.
• Oxidases: são responsáveis pela catálise da reação de
oxidação de substratos, envolvendo o oxigênio molecular
(O₂) como o aceptor final de elétrons, com consequente
produção de peróxido de hidrogênio (H₂O₂).
• Catalases: têm por função catalisar a reação de
decomposição do (H₂O₂) (tóxico) numa outra que não seja
prejudicial à célula. No caso, a água. Seguindo a reação: 2
H₂O₂ → 2 H₂O + O₂.
Aspectos funcionais:
• Degradação de peróxido de hidrogênio.
• Desintoxicação.
• Metabolismo de lipídios (metabolismo de ácidos graxos e
síntese de colesterol).
• Ciclo do ácido glioxílico.
• Foto-respiração.
Os peroxissomas não apresentam o seu próprio genoma.
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Peroxinas (pex1, pex2, etc.) são sintetizadas pelo genoma
nuclear (85 genes).
A importação para o peroxissomo é parecida com a do núcleo.
Apesar de não ter poros, as peroxinas, que estão na
membrana, formam como se fosse um poro. Existe uma outra
peroxina que fica no citosol com função de receptora. Então a
peroxina do citoplasma vai identificar a proteína do
peroxissomo e vai carrega-la até o seu destino. Lá ela não
precisa se desdobrar para entrar, ela consegue entra
dobradinha.
Sequência de importação: Ser-Lys-Leu (C-term).
Doenças peroxissomais
Envolve o metabolismo de ácidos graxos de cadeia muito
longa (AGCML), síntese de fosfolipídeos e ácidos biliares,
enzimas antioxidantes.
2 grupos:
• Defeito de uma única enzima: Adrenoleucodistrofia ligada
ao X, Doença de Refsum.
• Doença da biogênese dos peroxissomos: Defeito na
importação de proteínas para os peroxissomos. Síndrome de
Zellweger, Condrodisplasia risomélica tipo I,
adrenoleucodistrofia neonatal.
EX.: Adrenoleucodistrofia: Do filme “O óleo de Lorenzo”. Essa
doença causa alteração em uma enzima que faz o
metabolismo de AGCML, de um ácido graxo específico. E
quando os AGCML não são metabolizados, eles acabem
fazendo rotas alternativas gerando produtos tóxicos. O que o
pai de Lorenzo conseguiu foi que esses AGCML não fizessem
essa rota alternativa e não gerassem os produtos tóxicos. Essa
saída não cura a doença, mas retarda sua progressão.
EX.: Síndrome de Zellweger – S. cérebro-hepato-renal
Quadro clínico: Hepatomegalia, retardo mental, perda
auditiva, cegueira, elevados níveis de minerais no sangue,
ataques epiléticos, hipotonia muscular, “rasgos” faciais.
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Retículo endoplasmático rugoso e começa a tradução. Começa a sair a proteína a proteína,

As proteínas que irão para o sistema golgiense, endossomos,
lisossomos e superfície celular entram primeiro no RE (vindas do
citosol).
2 tipos de proteínas são transferidos do citosol para o RE:
1. Proteínas hidrossolúveis: que vão para o lúmen da
organela.
2. Proteínas transmembrana: que são sintetizadas e ficam
na própria membrana.
Tudo que for produzido no RER que não for ficar vai ser
obrigatoriamente transportado para o Golgi. Então, tudo que
for produzido no RER antes de seguir viagem, passa pelo Golgi
e só depois vai para seu destino final que é o lisossomo ou MP.
nesse pedaço já lido está dizendo o destino da proteína. Se for
RER vem a partícula de reconhecimento, identifica o destino,
para a produção e carrega todo mundo para o RER. É assim
que o RNA mensageiro vai para o RER. Chegando lá a partícula
de reconhecimento é reconhecida para proteína receptora
(só reconhece a partícula se estiver ligada à sequência-sinal),
a partícula então se solta e volta para o citosol e introduz a
sequência-sinal no canal de translocação, que estava
fechado, a o ribossomo é liberado para continuara a tradução.
Então ela vai sendo traduzida e entrando ao mesmo tempo.
Lembrando que não é apensas um ribossomo lendo a RNA, são
vários ribossomos ao mesmo tempo.
Proteínas solúveis são liberadas no lúmen do RE.

Porque nem todas as proteínas são produzidas no citosol,

porque a necessidade de ser produzida no RER? Isso acontece
porque existem proteínas que precisam sofrer modificações
pós traducionais que serão realizadas pelo Golgi. A sequência
de AA, sua estrutura primária, nunca é alterada, o que
acontece são alterações químicas como: pontes dissulfídicas,
glicosilação... As proteínas que são produzidas no citosol não
precisam ser modificadas, são funcionais assim que termina a
tradução.

O transporte das proteínas para o Golgi acontece por uma
evaginação da membrana do RER. Essa vesícula formada leva
a proteína até o Golgi, lá a vesícula se fusiona com a
membrana do Golgi. Do Golgi Vi surgir outra vesícula que vai
levar a proteína modificada para o seu destino final.
Uma vez que a terminação caboxílica da proteína tenha
passado pela membrana a proteína é liberada dentro do
lúmen do RE.

Todas as proteínas que estão nas células foram parar ali através
do transporte vesicular.

Síntese de proteínas:

Retículo endoplasmático e síntese de proteínas:
Arranjo de proteínas: Sinais que determinam o arranjo da
proteína transmembrana.
1. Proteína transmembrana de passagem única.
A sequência da tradução é igual a proteína que vai para o
lúmen, porém, aqui existe um segunda sequência sinal que é
hidrofóbica, como é hidrofóbica esse pedaço vai permanecer
na membrana, não entrando no RER, fazendo ligação com as
caldas hidrofóbicas da MP.

RNA mensageiro vai para o citosol, a subunidade menor se liga

identificam o códon de início, depois vem a subunidade maior
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2. Proteína transmembrana de passagem dupla. • Via endocítica: brotam da membrana plasmática.

Acontece na maior parte das proteínas de membrana. Nesse
Remoção das
caso existem várias sequência-sinal, uma de início, uma de
proteínas de
término que é a hidrofóbica que fica presa a membrana, nisso Adaptinas se ligam as Hidrolisam o GPT
revestimento
que ficou presa, continua a produção do lado de fora , daí e destacam a
clatrinas na superfície
vesícula
vem outra sequência sinal que é reconhecida como partícula citosólica da vesícula
de reconhecimento que coloca ela dentro do canal em brotamento Vesícula se fusiona
Adaptinas a membrana alvo
novamente. Isso acontece várias vezes.
capturam os
receptores
de carga

Dinamina se acopla ao pescoço

da vesícula em formação

As clatrinas se soltam da vesícula para poder expor as SNAREs,

que está na membrana de todas as vesículas.

Como as vesículas de membrana encontram o caminho

Não há clivagem da sequência de
parada nem da sequência de início.
Proteínas transferidas do citosol para o RE:
correto para o seu destino? A SNARE expressa na vesícula só se
fusiona com a SNARE que a reconhece. Então, se a vesícula
tem uma SNARE para lisossomo, ela não vai se fusionar à MP, só
a membrana do lisossomo, isso porque a SNARE da membrana
lisossomal que a reconhece e o mesmo acontece com a MP e
seu SNARE que só reconhece SNARE de membrana plasmática.
A SNARE da vesícula é a v-SNARE e a da organela alvo se

Transporte por vesículas
As proteínas que irão para o sistema golgiense, endossomos,
lisossomos e superfície celular entram primeiro no RE (vindas do
citosol). Mas o transporte por vesículas não acontecem só das
coisas que saem, tudo que entra na célula, que foi endocitado
também entra pelo transporte vesicular.
A partir daí as proteínas serão transportadas por vesículas de
transporte. Há 2 vias: secretória/exocítica e endocítica.
chama t-SNARE. Quando as SNAREs se reconhecem elas meio
que se “dão as mãos” e então a vesícula encosta na organela
alvo e então acontece a fusão.
Existem medicamentos que clivam SNAREs. A toxina botulínica
ela cliva SNARE, se você não tem SNARE não há o fusionamento
da vesícula, não libera acetilcolina e não vai ter a contração
muscular.

Vesículas revestidas por clatrina.

Reconhecidas
O Brotamento de vesículas: é dirigido por uma montagem de
por receptores
uma capa proteica. Reconhecimento da v-
da memb. alvo.
SNAREs pela t-SNAREs

Vesículas revestidas são as que brotam das membranas e tem

uma capa proteica distinta no citosol.

CLATRINA, que puxam a parte da membrana que vai se Proteínas SNAREs atuam na fusão de membranas.
destacar e formar a vesícula.

• Via secretória: brotam do Golgi.

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Controle de qualidade pelo RE:

Proteínas empacotadas
incorretamente são
marcadas para
degradação.

Vias secretoras
• A maioria das proteínas é quimicamente modificada no RE.
• No interior do RE ocorre a formação de pontes dissulfídicas,
pela oxidação de pares de cadeias laterais de cisteínas.
• As pontes dissulfídicas dão estabilidade para as proteínas Retículo Endoplasmático Liso
quando elas encontram mudanças de pH e enzimas no
exterior da célula.
• No RE ocorre a glicosilação, formando glicoproteínas.
• O citosol não tem enzimas de glicosilação.

Funções dos oligossacarídeos nas proteínas:

• Protegem a proteína da degradação.

• Retêm a proteína no RE até o seu enovelamento.
• Orientam a proteína para se dirigir à organela correta.
• Na superfície celular formam o glicocálix.

Glicosilação no RE: 1. Adição de cadeias laterais de

oligossacarídeos e asparaginas especiais
do polipeptídio.
2. O oligossacarídeo é REL e a síntese dos principais lipídios da célula:
transferido como uma
unidade intacta para a
asparagina a partir de um
lipídio, o DOLICOL.

3. As asparaginas
glicosiladas tem uma
sequência de 3 peptídeos:
Asparagina-X-Serina
Asparagina-X-Treonina
X = qualquer aminoácido.
Síntese de fosfatidilcolina
Aqui as chaperonas têm uma função completamente
Exportação de lipídios do REL:
diferente das chaperonas da mitocôndria. No RER as
chaperonas são responsáveis por marcar as proteínas
aberrantes. Então, essas proteínas marcadas para morrer
recebem uma molécula chamada ubiquitina. Toda proteína
que ubiquitinada é entregue ao proteassomo (sistema que
destrói proteína).

Esse sistema tem que funcionar bonitinho. Quando isso não

funciona direito, gera estresse celular que leva a célula à
apoptose. Exemplo disso é no Alzheimer que é gerada tanta
proteína mal formada, tanta ubiquitina que leva a um estresse
e morte celular.
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REL e a detoxicação da célula: Drogas e metabólitos insolúveis

em água são processados por sistemas enzimáticos presentes
Doenças de armazenamento nos lisossomos:
na membrana do REL.
• Mutações que resultam na redução da síntese de enzimas
lisossomais ou na não segregação desta aos lisossomos.
• Mais de 40 doenças classificadas;
• Incidência de 1 para 7.700 nascimentos.
• Incluem:
× Mucopolissacaridose
× Esfingolipidoses

Mucopolissacaridoses: Acúmulo de glicosaminoglicanos leva a

desorganização do tecido conjuntivo (fígado, ossos, córnea).

• Produção dos hormônios esteroides a partir do colesterol.

• Armazenamento e regulação dos níveis de cálcio.

Complexo de Golgi
Modificação e distribuição das proteínas no Golgi

MPS tipo I ou doença de Huler: Vacuolização citoplasmática,

com aumento dos tecidos afetados.
Apresentação Clínica: Infecções respiratórias, hérnia inguinal e
umbilical, face grosseira, hipertrofia dos lábios, cifose –
escoliose, baixa estatura, limitação articular,
hepatoesplenomegalia, surdez moderada, comprometimento
intelectual moderado.

Esfingolipidoses: Acúmulo de algum lipídio, membranas

• O Golgi fica próximo ao núcleo e do centrossomo.
celulares (tecido nervoso).
• É composto por uma coleção de sacos achatados e
empilhados, chamados cisternas (cerca de 3-20 cisternas).
• Face de entrada: cis, adjacente ao RE.
• Face de saída: trans, em direção à MP.

Lisossomos
• Sacos membranosos contendo enzimas hidrolíticas que
conduzem a digestão intracelular.
• Cerca de 40 tipos de enzimas estão presentes, as hidrolases
ácidas que agem em pH ácido, dentro do lisossomo.
• Sua membrana contém transportadores que permitem que
os produtos finais da digestão de macromoléculas como
aminoácidos, açucares e nucleotídeos, sejam transportados
para o citosol.
• A membrana mantém uma bomba de H + dirigida por ATP,
que bombeia H+ para dentro do lisossomo mantendo o pH
ácido. As enzimas do lisossomo só atuam em pH ácido.
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Doença de Tay-Sacks: produtos e entrega para o lisossomo ou se ele mesmo

• Acúmulo de gangliosídeo GM2.
• Deficiência na síntese da hexosaminidase A.
Apresentação clínica: Grave degeneração física e mental
progressiva (1os. Anos de vida) → acúmulo de gangliosídeos
(GM2) em tecido cerebral, paralisia, cegueira, mancha
macular vermelho-cereja no olho, morte na primeira infância.
Vias de exocitose via constitutiva X via regulada
amadurece e vira lisossomo). O pH do endossomo é mais ácido
assim como o do lisossomo. Então essa mudança de pH externo
para o pH do endossomo promove a dissociação da molécula
de LDL com a proteína receptora. A proteína receptora por
transporte vesicular volta para a membrana. O endossomo
fusiona com o lisossomo que vai quebrar o LDL liberando
colesterol.
Existe uma quantidade limitada de proteínas receptoras. Por
isso, se tiver excesso de LDL não terá proteínas receptoras
suficiente para dar conta, vai sobrar LDL fora da célula, no
sangue, suscetível para sobre oxidação é formar as placas de
ateroma.

Via constitutiva ou padrão:

• Reciclar proteínas de membrana. Turnover proteico: depois

de um tempo na membrana, depois de ter cumprido sua
função a proteína volta para o citosol para ser destruída. Destino das proteínas receptoras:
• Crescimento da membrana antes da divisão celular.
• Exocitose de proteínas para o exterior (secreção).

Proteínas recém sintetizadas podem:

• Aderir a superfície celular

• Ficar incorporadas na matriz extracelular
• Difundir no liquido extracelular para nutrição ou sinalização
de outras células.

Via regulada:

• Só existe em células secretoras onde o material é estocado

em vesículas de secreção.
• As vesículas brotam pela face trans, se acumulam próximo
a membrana, para aguardar o sinal que estimulará a
liberação do seu conteúdo para o exterior.
Hipercolesterolemia Familiar
Vias endocíticas Biologia molecular e aspectos genéticos
• Fagocitose: partículas grandes (> 250 nm de diâmetro),
serve para a nutrição e para defesa.
• Pinocitose: líquido e moléculas pequenas (< 150 nm de
diâmetro), serve para a nutrição.

Pinocitose mediada por receptor

Endocitose mediada por receptor: no sangue o colesterol é
transportado pela Lipoproteína de Baixa Densidade (LDL).

O LDL não pode ficar no sangue o tempo todo porque ele é

suscetível à oxidação... Para não ter acúmulo no sangue o LDL
é endocitado pelas células. Mas para serem endocitados é
preciso ter as proteínas receptoras de LDL na membrana
plasmática das células. Os LDL se ligam as proteínas receptoras
e aí a clatrina puxa, a vesícula sai se fusiona com o endossomo
(ainda não se sabe se é organela intermediária, que recebe os
Pode ter tanto herança genética autossômica dominante
como recessiva. Maior parte é dominante.
Pode haver mutação no gene que codifica a proteína
receptora, pode ser nos genes que foram a vesícula...
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Receptor das LDL: gene e proteína PCSK9: gene à proteína

Única que tem tratamento. Não tem cura, porque não dá para
concertar o gene, mas trata.

A PCSK9 se liga à proteína receptora impedindo a dissociação

do receptor com a proteína. Então quando essa galera toda
chega no endossomo... Como foi visto, a proteína receptora é
reciclável, mas a proteína receptora ligada à PCSK9 não é
reciclada, é destruída junto no lisossomo.

Mutações: ganho de função ou perda de função.

Nesse caso a mutação gera ganho de função, em que há uma

superprodução da proteína. Que é o que acontece com essas
pessoas, elas superproduzem a PCSK9 o que faz com que a
maioria dos receptores de LDL sejam destruídos.

→ Classe 1: Sem síntese.

→ Classe 2: Sem transporte.
→ Classe 6: direcionamento defeituoso para a
membrana basolateral.

Apolipoproteína B: gene e proteína

→ Classe 5: Não há reciclagem no receptor do LDL.

PCSK9: Uso de inibidores para tratamento.

→ Classe 3: Não há ligação com o LDL e o receptor. A Anticorpo monoclonal que se liga à PCSK9 impedindo que ela
proteína receptora não reconhece o LDL. se ligue ao receptor.

Proteína adaptadora do receptor das LDL 1 (LDLRAP1)

→ Classe 4: Não há internalização.