CURSO DE CIÊNCIAS

BIOLÓGICAS
MODALIDADE MÉDICA

UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS

DEPARTAMENTO DE BIOMEDICINA

Disciplina: BIOQUÍMICA I

Professora: Lândia Fernandes de Paiva Soares

CBB 3201 PERÍODO: 2º

17/04/2015 TURMA: A01

ALUNO: EDIVAN DE SOUZA LIMA

TÍTULO:

REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE ESTERÓIS

INTRODUÇÃO:

Esteróis são moléculas de natureza lipídica presentes na maioria das membranas

celulares das células eucariotas, sendo o colesterol o principal esterol das células
animais. O colesterol é fabricado pelo nosso corpo assim como obtido da dieta,
portanto, um índice elevado pode resultar em patologias.

OBJETIVOS:

A técnica consiste em determinar a concentração de colesterol total no soro ou

plasma.

MATERIAIS E REAGENTES UTILIZADOS:

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05 tubos de ensaio
Micropipeta.
Solução de Colesterol a 1%
Ácido Sulfúrico concentrado
Anidrido Acético
Amostra (sangue)
Aparelho Espectrofotômetro

PRINCÍPIO DA REAÇÃO:

Reação 1:

Reação de Salkowski
Consiste na formação de um produto de coloração marrom, resultante da coloração
com o ácido sulfúrico concentrado. Pega-se um tubo de ensaio e coloca-se 1,0 ml
de solução de colesterol a 1% e adiciona 1,0 ml de ácido sulfúrico concentrado.
Homogeneizar.

Reação 2:

Reação de Liebermann-Burchard
Consiste na formação de um produto de cor verde que se desenvolve quando o
colesterol reage com o ácido sulfúrico concentrado e com o anidrido acético. Pega-
se um tubo de ensaio e coloca-se 2,0 ml de solução de colesterol a 1% e adiciona
200 μL de anidrido acético (acelera a reação) e 1 gota de ácido sulfúrico
concentrado. Homogeneizar.

Reação 3:

Colesterol Enzimático Líquido

O kit de Colesterol Enzimático Líquido quebra a ligação éster e libera o colesterol. O
colesterol pode aparecer ligado a um ácido graxo, mas não é um lipídio, o reagente
do kit age nessa ligação, liberando o ácido graxo e o colesterol. A amostra sofre
ação de três enzimas: colesterol esterase, colesterol oxidase e peroxidase. O tubo
B serve apenas para zerar o espectrofotômetro. O tubo P é o padrão e possui uma
concentração conhecida. O tubo T irá medir a concentração da amostra.

BRANCO PADRÃO TESTE

Reagente de cor 2 ml 2 ml 2 ml

Padrão - 20 μL -
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Teste - - 20 μL

Incubar os 03 tubos em banho-maria à 37ºC e levar ao espectrofotômetro à 510nm

para realizar a leitura da absorvância.

RESULTADOS:

Reação 1:
Tubo apresentou coloração marrom.

Reação 2:
Tubo apresentou coloração verde.

Reação 3:
Tubo Teste = 0,195 abs.
Tubo Padrão = 0,181 abs.
Conc. Padrão = 200mg/dL

concT = absT x concP

absP

concT = 0,195 x 200

0,181

concT = 215,47 mg/dL

Valores de referência:
Colesterol mg/dL
Desejável..............................< 200
Limítrofe................................200 – 239
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Alto risco................................> 240

CONCLUSÃO:

Nas reações dos tubos 1 e 2, apresenta reação positiva para colesterol, porém são
técnicas não utilizadas, pois medem a concentração de esteróis e não somente o
colesterol.

Na reação 3, paciente apresenta concentração de colesterol em valores limítrofe, ou

seja, superior ao padrão desejável.