Você está na página 1de 2

23-12-2010

Microbiologia Básica 2010/2011


Patrícia Moreira (090101018) – Turma P3

Provas bioquímicas para identificação


bacteriana

LDC (Lysine Decarboxylase)


ODC (Ornithine Decarboxylase)

Considerações gerais

o Objectivos: Verificar a presença das enzimas LDC e ODC nas bactérias.

o LDC e ODC são descarboxilases dos aminoácidos lisina e ornitina,


respectivamente;

o A ocorrência da descarboxilação é mais favorável se o meio for ácido e


anaeróbio activação das enzimas (no caso de existirem);

Lisina Cadaverina Ornitina Putrescina

o Há libertação do grupo carboxilo dos aminoácidos com formação de CO2 e


de uma amina o meio torna-se mais alcalino;

1
23-12-2010

Composição do meio, procedimentos e interpretação de


resultados
Moeller Decarboxylase Broth:

Suprimento dos • Peptona………………...............5g/L


nutrientes azotados
• Extrato de carne…….................5g/L
Indicadores de pH
• Roxo de bromocresol…........0.01g/L
• Vermelho de cresol………..0.005g/L
HC fermentável • Glicose……………...…………0.5g/L
Co-factor das enzimas LDC e ODC • Piridoxal………….....………0.005g/L
Aminoácidos substratos • Lisina ou Ornitina…....………..10g/L
das enzimas

Quadro 1. Composição do Moeller Decarboxylase Broth.

Procedimentos: Interpretação de resultados:


1º- Fermentação da glicose pH cor amarela;
o Semear a bactéria no caldo por dispersão;

o Cobrir com um óleo mineral esterilizado (ex. parafina); 2º- Descarboxilação da lisina/ornitina pH cor roxa;

o Incubar a 35±2ºC;

o Verificar as reacções ocorridas passadas 18, 24, 48, 72 e No caso de não ocorrer descarboxilação do aminoácido em
96 horas (a verificação a partir das 48h é para bactérias que questão (pela ausência da enzima) a cor permanece
tenham um metabolismo mais lento); amarela, como resultado da fermentação da glicose.

Aplicação prática

Verificação da presença da ODC


Positivo Negativo

o Positivo: Ocorre fermentação da glicose


com posterior descarboxilação da ornitina
(ex. E. coli).

o Negativo: Apenas ocorre fermentação


da glicose (ex. Klebsiella p.). Imagem 1. Resultados das provas LDC e ODC.

Escherichia Klebsiella Salmonella Proteus


coli pneumoniae sp. vulgaris

LDC L (+) L (+) L (+) L (-)


ODC O (+) O (-) O (+) O (-)

Tabela 1. Exemplos de espécies que podem ser diferenciadas através das provas LDC e ODC.