Introducción A La Validación V2020

5/07/20
TALLER VIRTUAL
INCERTIDUMBRE
Y VALIDACIÓN DE
MÉTODOS
QUÍMICOS
CUANTITATIVOS
INTRODUCCIÓN A LA
VALIDACIÓN DE MÉTODOS
Diego Alejandro Ahumada
1
5/07/20
PRINCIPIOS DE LAS
MEDICIONES ANALITICAS
Principios de mediciones analíticas

1. Se deben hacer mediciones analíticas para satisfacer un requisito de determinado. (Es
decir, un objetivo definido).
2. Las mediciones analíticas deben realizarse utilizando métodos y equipos que han sido
evaluados con el objetivo de asegurar que son aptos para el propósito.
3. El personal que hace las mediciones analíticas debe ser calificado y competente para llevar
a cabo la tarea. "(y se debe demostrar que puede realizar el análisis correctamente).
4. Periódicamente, debería haber una evaluación independiente del rendimiento técnico de un
laboratorio.
5. Las mediciones analíticas realizadas en un lugar deben ser coherentes con las realizadas
en otro lugar.
6. Las organizaciones que hacen mediciones analíticas deberían tener procedimientos de
control de calidad y aseguramiento de calidad bien definidos.
The manager’s guide to VAM, UK Department of Trade and Industry, Valid Analytical Measurement Programme.
Published as VAM Principles M. Sargent. Anal. Proc., 1995, 32, 201-202.
2
5/07/20
Contenido
¡Porque Colombia se le mide!
2020-07-02
CONTENIDO
1.Introducción.
2.Conceptos
3.Métodos de medición: normatividad
4.Parámetros de validación
5.Herramientas para la validación
6.Niveles de validación
7.Plan de validación
3
5/07/20
CONTENIDO
1.Introducción.
2.Conceptos
INTRODUCCIÓN
“... con una creciente dependencia de
la incertidumbre de medición como un
indicador de aptitud para el uso de un
método y la fiabilidad de los
resultados, los químicos analíticos
realizarán cada más validaciones para
apoyar la estimación de la
incertidumbre ... ”1
1 IUPAC.Harmonized guidelines for single-laboratory validation of methods of analysis (2002). Disponible en:
http://www.iupac.org/publications/pac/2002/pdf/7405x0835.pdf Consulta 2018- 08-09
4
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INTRODUCCIÓN
Validación de métodos
Regulación y normas
Control de calidad
Estimación de incertidumbre
Reproducibilidad
Acreditación
Deber profesional
Taverniers, I. et al. Trends in Analytical Chemistry, Vol. 23, No. 8, 2004
Aseguramiento de mediciones en…

IMPORTANCIA DE LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS
VALIDACIÓN
Calidad de productos Seguridad ambiental
Alcance de las
mediciones
Seguridad alimentaria Comercio
10
5
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ACREDITACIÓN
ENSAYOS DE APTITUD
CONTROL DE CALIDAD INTERNO

CARÁCTERÍTICAS DE RENDIMIENTO
VALIDACIÓN
Sistema
Resultado Incertidumbre
analítico
analítico
11
CONTENIDO
1.Introducción.
2.Conceptos
12
6
5/07/20
Conceptos
¿ Qué es verificación?
Aportación de evidencia objetiva de que
un elemento dado satisface los
requisitos especificados1
1 BIPM, IUPAC, IUPAP. Vocabulario Internacional de Metrología. 2012 t 2.45
13
Verificación
14
7
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Verificación
La marca que sea!!

No estoy haciendo publicidad
15
Verificación
Método
16
8
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VALIDACIÓN
Verificación, donde los requisitos especificados
son adecuados para un uso previsto 1
Establecimiento de evidencia documental, que un proceso

específico proporciona un alto grado de seguridad de obtener
un producto/servicio que cumpla con sus especificaciones y
atributos de calidad2
Confirmación mediante examen y presentación de pruebas objetivas de que

los requisitos particulares para un uso previsto especificado se cumplen.3
1 BIPM, Vocabulario Internacional de Metrología. 2012 t 2.45

2 FDA. Process Validation: General Principles and Practices.
Enero de 2011.p 3
3 ISO 8402. Quality management and quality assurance – Vocabulary. 1994 Segunda edición.
17
VALIDACIÓN
Proceso de establecer el rendimiento, Proceso de definir un requisito analítico, y
limitaciones de un método, e identificación de confirmar que el método bajo consideración
las influencias que pueden cambiar estas tiene capacidades consistentes con lo que
características y en qué medida4. requiere la aplicación5
Es el acto de probar que un método, estrategia, procedimiento

experimental, proceso, personal de laboratorio, instrumentación,
reactivos y condiciones seleccionadas, funcionarán de manera
apropiada bajo un conjunto fijo de condiciones6
4 Eurachem . The Fitness for Purpose of Analytical M ethods - A Laboratory Guide to M ethod Validation and Related Topics. www.eurachem .com Consulta: 16 de Agosto de 2018.
5 Eurachem . The Fitness for Purpose of Analytical M ethods - A Laboratory Guide to M ethod Validation and Related Topics. www.eurachem .com Consulta: 16 de Agosto de 2018.
6 Analytical Separation Science, First Edition. 2015
18
9
5/07/20
VALIDACIÓN
Confirmar la aptitud de un método de

análisis para su uso y demostrar que un
protocolo definido es adecuado para un
propósito analítico particular, cuyo
procedimiento es aplicable a un tipo
específico de material y a una relación de
concentración del analito definida 7.
7 M . Thom pson, S. Ellison, R. W ood, Pure Appl. Chem . 74 (2002) 835.
19
LA VALIDACIÓN DE…..
Sistema analítico6
6 M. Thompson, S. Ellison, R. Wood, Pure Appl. Chem. 74 (2002) 835.
20
10
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VALIDACIÓN DE UN SISTEMA ANALÍTICO
Procedimiento para establecer pruebas documentales

que demuestren científicamente que un sistema
analítico tiene las características de desempeño que
son adecuadas para cumplir los requerimientos de las
aplicaciones analíticas pretendidas 6
La validación implica la determinación de las fuentes de variabilidad, del

error sistemático y aleatorio de un sistema analítico, no sólo dentro de la
calibración sino en el análisis de muestras 7
6 M. Thompson, S. Ellison, R. Wood, Pure Appl. Chem. 74 (2002) 835.

7 FAO. Directrices sobre Buenas Prácticas en el Análisis de Residuos de
Plaguicidas. Disponible en: http://www.codexalimentarius.org/committees-task-
forces//?provide=committeeDetail&idList=4 Consulta: 8 de Octubre de 2016.
21
VALIDACIÓN ES…….
• Definir un requisito analítico
• Evidencia documental
• Pruebas objetivas
• Limitaciones de un método
• Personal de laboratorio, instrumentación, reactivos y condiciones
• Protocolo definido
• Un tipo específico de material y a una relación de concentración del
analito definida
Definir un requisito analítico y documentar pruebas

objetivas que demuestren el alcance de un sistema
analítico, evaluando los factores que influyen sobre el
proceso de medición.
González, Ivonne
31 de Marzo de 2017
22
11
5/07/20
Métodos de medición:
Tipos de métodos
2020-07-02
23
MÉTODOS
Procedimiento
operativo
Torres, H.[2014]
Procedimiento
analítico Extracción ACN
y análisis por
HPLC-UV
Método
analítico
HPLC-UV
HPLC
Técnica
analítica
24
12
5/07/20
MÉTODOS
TIPOS DE MÉTODOS QUE

MÉTODOS SE VALIDAN
Métodos
desarrollados por Métodos
desarrollados por
el laboratorio.
el laboratorio.
¿Cuáles se
Métodos no
estándar validan? Métodos no
estándar
Métodos Métodos
estándar estándar fuera
del alcance
25
MÉTODO ESTÁNDAR
Método analítico desarrollado por un organismo
de normalización u otro organismo reconocido
cuyos métodos son generalmente aceptados por
el sector técnico correspondiente.8
Ejemplo:
AOAC: 130 años
Más de 2000 métodos.
Desarrollo y Validación Estudios Método normalizado!

optimización interna Interlaboratorios colaborativos
8ILAC. Guideline for the Formulation of Scopes of Accreditation for Laboratories. ILAC-G18:04/2010 Disponible en:
https://www.ilac.org/documents/ILAC_G18_04_2010.pdf Consulta: 16 de Agosto de 2018
26
13
5/07/20
MÉTODOS
MÉTODO ESTÁNDAR
El laboratorio debe verificar que puede llevar a cabo

apropiadamente los métodos antes de introducirlos
asegurando que se pueda lograr el desempeño requerido.
Se deben conservar registros de la verificación. Si el
método es actualizado por el organismo que lo publicó, la
verificación se debe repe<r en la medida necesaria.
Numeral 7.2.1.5 ISO 17025:2017
27
MÉTODOS NO NORMALIZADOS
ü Método analítico desarrollado por un tercero.8
ü Método estándar al cual, por diversas razones, se

le realiza una o varias modificaciones que
pudiesen influenciar de manera significativa los
resultados obtenidos.8
8ILAC. Guideline for the Formulation of Scopes of Accreditation for Laboratories. ILAC-G18:04/2010 Disponible en:
https://european-accreditation.org/wp-content/uploads/2018/10/ILAC_G18_04_2010.pdf
28
14
5/07/20
MÉTODOS
MÉTODOS DESARROLLADOS
Método analítico que no se encuentra en normas u otras
colecciones de métodos, ni en publicaciones de
terceros, habiendo sido desarrollado por el propio
laboratorio.8
ü Procedimiento de desarrollo
ü Experiencia del personal.
ü Registros de desarrollo, validación y verificación.
8
ILAC. Guideline for the Formula_on of Scopes of Accredita_on for Laboratories. ILAC-G18:04/2010 Disponible en:
h`ps://www.ilac.org/documents/ILAC_G18_04_2010.pdf Consulta: 16 de Agosto de 2018
29
MÉTODOS
MÉTODOS NO ESTÁNDAR
El laboratorio debe validar los métodos no estándar,

los métodos desarrollados en laboratorio y los
métodos estándar usados por fuera de su alcance
previsto o de otra forma modificados.
Numeral 7.2.2.1 ISO 17025:2017
30
15
5/07/20
Un momento relacionemos hasta este

punto….
Conceptos Métodos
31
Relacionando….
Verificación y Validación
TIPOS DE
MÉTODOS
Métodos
desarrollados por
el laboratorio.
¡Se validan!
Métodos no
estándar
¡Se validan: si están

¡Se verifican! Métodos
estándar
fuera del alcance!
32
16
5/07/20
Métodos de medición:
Tipos de métodos
Normatividad y clasificación
2020-07-02
33
REGLAMENTACIÓN EN VALIDACIÓN
34
17
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REGLAMENTACIÓN EN VALIDACIÓN
Normalizados No normalizados
Desarrollados
Clasificación Normativas
35
OMS1
CLASIFICACIÓN
A B C D
Pruebas destinadas a Identificación y cuantificación de Cuantificación Evaluación de características,

impurezas disolución, uniformidad
establecer identidad.
USP2
CLASIFICACIÓN
I II: Cuantitativo III: Límites IV
Cuantificación de Cuantificación de impurezas o Cualitativas para evaluación de Evaluación de características

componentes productos de degradación impurezas de desempeño: disolución,
liberación
mayoritarios
1OMS. Comité de Expertos de la OMS en especificaciones. Anexo 5. p 124. Disponible en: http://whqlibdoc.who.int/trs/WHO_TRS_823_spa.pdf
Consulta: 16 de Agosto de 2018
2
USP. Validation of compendial procedures. USP 36. Disponible en: https://hmc.usp.org/sites/default/files/documents/HMC/GCs-
Pdfs/c1225%20USP36.pdf Consulta: 16 de Agosto de 2018
36
18
5/07/20
¿Qué dice en ICH Q2 (R1) ?
Categoría I: Identificación
¿Cómo se hace?
• Reactividad Química.
• Espectros.
• Comportamiento cromatográfico.
¿Con qué técnicas analíticas?
• DRX
• IR
• UV-Vis
• CG/HPLC
• Espectrometría de masas.
• Tubos de ensayo.
1ICH. Validation of analytical procedures: Text and methodology q2 (R1). Disponible en:
http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Quality/Q2_R1/Step4/Q2_R1__Guideline.pdf Consulta: 9
de Octubre de 2016
37
Categoría II: Impurezas.

Cuantitativo Control
Cantidad de impurezas Cumplimiento de un límite
Espectrofotometría
Cromatografía.
Espectrometría de masas.
Cuantitativa Cualitativa o cuantitativa.
http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Quality/Q2_R1/Step4/Q2_R1__Guideline.pdf Consulta: 16 de Agosto
de 2018
38
19
5/07/20
Categoría III: Ensayo

Pruebas cuantitativas del contenido de un analito
en una matriz.
http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Quality/Q2_R1/Step4/Q2_R1__Guideline.pdf Consulta: 16 de Agosto de
2018
39
Categoría IV: Pruebas específicas

Son pruebas fisicoquímicas que miden características
propias del desempeño del ítem de ensayo.
• Disolución.
• Potencia.
• Tamaño de partícula.
• Rotación óptica.
• Densidad.
http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Quality/Q2_R1/Step4/Q2_R1__Guideline.pdf Consulta: 16 de Agosto
de 2018
40
20
5/07/20
Valid Analytical Measurement (VAM)
National Measurement System (NMS).Introduction to method validation 2013. Disponible en:

http://www.nmschembio.org.uk/dm_documents/Introduction%20to%20method%20validation_S0OON.pdf
Consulta: 16 de Agosto de 2018
41
AOAC
Cuantitativo Cualitativo Identificación
Componentes Trazas y
principales contaminantes
Componentes principales : ≥100 g/kg

Trazas y contaminantes : <100 g/kg
AOAC. AOAC Standard Method Performance Requirement (SMPR) Documents 2012. Disponible en:
http://www.aoac.org/imis15_prod/AOAC_Docs/ISPAM/3.5SMPRGuidelinev12.1.pdf Consulta: 16 de Agosto de 2018
42
21
5/07/20
Colesterol en sangre
¿Según AOAC/ VAM?
Calcio en agua
mg de Cd /Labial
Plaguicidas en tomate
43
CONTENIDO
1.Introducción.
2.Conceptos
3.Métodos de medición: norma9vidad y clasificación
5.Herramientas para a validación
44
22
5/07/20
Parámetros de validación
2020-07-02
45
PARÁMETROS DE VALIDACIÓN
Son las propiedades, características o capacidades cuantificables del

método que indican su grado de calidad; incluyen:
- Exactitud
- Selectividad.
- Límite de detección
- Límite de cuantificación
- Linealidad.
- Sensibilidad
- Robustez.
Adaptado de : IUPAC IHARMONIZED GUIDELINES FOR SINGLELABORATORY VALIDATION OF METHODS OF ANALYSIS.

Fischbacher, C. Quality assurance in analytical chemistry. En Encyclopedia of analytical Chemistry. 2014
46
23
5/07/20
Exactitud
Grado de concordancia entre un valor medido
y un valor verdadero de un mensurando
Veracidad Precisión
Grado de concordancia entre las indicaciones
Grado de concordancia entre la media o los valores medidos obtenidos en mediciones
de un número infinito repetidas de un mismo objeto, o de objetos
de valores medidos repetidos y similares, bajo condiciones especificadas
un valor de referencia
Error sistemático Error aleatorio
Sesgo Desviación estándar
47
Límites
LD LC
El LOQ es el mínimo nivel de
La concentración neta mínima detectable analito que puede ser
determinado con desempeño
aceptable.
Robustez
Es una medida de la capacidad de un procedimiento analítico para
permanecer no afectado por pequeñas variaciones premeditadas de los
parámetros del método.
Eurachem . The Fitness for Purpose of Analytical Methods - A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics. Segunda edición
www.eurachem.com Consulta: 16 de Agosto de 2018.
48
24
5/07/20
Intervalos
Intervalo lineal Intervalo de trabajo
Capacidad del instrumento para
obtener resultados proporcionales Intervalo sobre el cual el método proporciona resultados
a la concentración del analito1 con una incertidumbre aceptable2
Sensibilidad
Es el cambio de la respuesta del instrumento que se realiza
cuando existe un cambio en la concentración
del analito.2
1
Eurachem . The Fitness for Purpose of Analytical Methods - A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics. Primera edición
www.eurachem.com Consulta: 9 de Agosto de 2018
2Eurachem .The Fitness for Purpose of Analytical Methods - A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics.
Segunda edición www.eurachem.com Consulta: 16 de Agosto de 2018.
49
Selectividad2
propiedad de un sistema de medición ,

empleando un procedimiento de medición
especificado, por la que el sistema proporciona valores
medidos para uno o varios mensurandos, de modo que
los valores de cada mensurando son independientes entre
sí
o de otras magnitudes existentes en el
fenómeno, cuerpo o sustancia en estudio
50
25
5/07/20
¿Cómo escoger los parámetros que se validan?

La selección de parámetros a validar se debe
realizar teniendo en cuenta:
• Requisitos del cliente

• Alcance del método.
• Uso del método.
• Regulaciones.
51
52
26
5/07/20
Parámetro
Parámetro
Parámetro Referencia
Referencia
Referencia
Especificidad
Especificidad
Especificidad USP,
USP,
USP,EURACHEM,
VAM
EURACHEM,VAM
VAM
Selectividad
Selectividad
Selectividad
Selectividad ISO
ISO
ISO 17025,
ISO 17025,
17025,EURACHEM,
17025, EURACHEM,
EURACHEM,VAM
EURACHEM, VAM
VAM
VAM
Precisión
Precisión
Precisión USP,
USP, ICH,
USP, ICH, EURACHEM,
ICH, EURACHEM, VAM
EURACHEM, VAM
VAM
Repetibilidad
Repetibilidad
Repetibilidad ICH,
ICH, ISO
ICH, ISO 17025,
ISO 17025, EURACHEM
17025, EURACHEM
EURACHEM
Precisión
Precisión intermedia
intermedia ICH,
ICH, EURACHEM
EURACHEM
Reproducibilidad
Reproducibilidad ICH,
ICH, USP,
USP, ISO
ISO 17025,
17025, EURACHEM
EURACHEM
Veracidad
Veracidad
Veracidad USP,
USP, ICH,
USP, ICH, ISO
ICH, ISO 17025,
ISO 17025, EURACHEM,
17025, EURACHEM, VAM
EURACHEM, VAM
VAM
Linealidad
Linealidad USP,
USP, ICH,
ICH, ISO
ISO 17025,
17025, EURACHEM,
EURACHEM, VAM
VAM
Rango USP, ICH, VAM
LD y LC USP, ICH, ISO 17025, EURACHEM
Robustez USP, ICH, ISO 17025, EURACHEM
53
Impurezas
Parámetro Identificación Cuantitativo Limites Ensayos
Especificidad SI SI SI SI
Precisión
Repetibilidad SI SI
Precisión intermedia SI SI
Reproducibilidad SI SI
Exactitud SI SI
Linealidad SI SI
Rango SI SI
LD SI
LC SI
CH Q2B, Validation of Analytical Procedures: Methodology, adopted in 1996, Geneva Q2B, in 2005
incorporated in Q2(R1)
54
27
5/07/20
Parámetro Cualitativo Cuantitativo Análisis de Propiedades

trazas fisicoquímicas
Especificidad/selectividad SI SI SI SI
Precisión SI SI SI
Veracidad SI SI SI
Linealidad/rango de trabajo SI SI SI
LD SI SI
LC SI SI

http://www.nmschembio.org.uk/dm_documents/Introduction%20to%20method%20validation_S0OON.pdf Consulta: 16 de
Agosto de 2018
55
Parámetro Cuantitativo Cuantitativo Cualitativo Cualitativo Identificación

Trazas trazas
Selectividad SI SI SI SI
Precisión SI SI
Sesgo* SI SI
Recuperación SI SI
LD SI SI SI
LC SI SI
Rango Si SI
Comparación con SI SI SI SI SI
método de referencia
* Si existe MRC

http://www.nmschembio.org.uk/dm_documents/Introduction%20to%20method%20validation_S0OON.pdf Consulta: 16 de
Agosto de 2018
56
28
5/07/20
Analista
químico
¿Y si no tengo regulación?
57
Robustez
Siempre
No es necesario Selectividad
☐ Si es relevante/aplica Linealidad
Límite de cuantificación
Límite de detección
Reproducibilidad
Repetibilidad
Sesgo
Método
Nuevo ☐
Normalizado ☐ ☐
Modificado ☐ ☐ ☐ ☐
Piet van Zoonen, Et. al. Some practical examples of method validation in the analytical laboratory. trends in analytical chemistry,
vol. 18, nos. 9+10, 1999
58
29
5/07/20
Robustez
Siempre
Selectividad
No es necesario
☐ Si es relevante/aplica Linealidad
Límite de cuantificación
Límite de detección
Reproducibilidad
Repetibilidad
Sesgo
Método
Cualitativo ☐
Cuantitativo* ☐ ☐
Cuantitativo** ☐ ☐
* Alta concentración ** Baja concentración
Piet van Zoonen, Et. al. Some practical examples of method validation in the analytical laboratory. trends in analytical chemistry, vol. 18,
nos. 9+10, 1999
59
POR FAVOR ALISTAR:
60
30
5/07/20
CONTENIDO
1.Introducción.
2.Conceptos
3.Métodos de medición: normatividad y clasificación
5.Herramientas para validación
61
Herramientas para la validación
2020-07-02
62
31
5/07/20
Método Ciego
Materiales de referencia
MÉTODOS DE VALIDACIÓN
Inter-laboratorios
Método aceptado.
1 Swartz,
M., Krull, I. Analytical method development and validation. Marcel Dekker, INC. New York 1997. p 34-39
Fischbacher, C. Quality assurance in analytical chemistry. En Encyclopedia of analytical Chemistry. 2014
63
Herramientas
Materiales de Ensayos de Métodos Método

referencia aptitud Oficiales Ciego
Sesgo Precisión Sesgo Precisión
Linealidad Sesgo Sesgo
Robustez
Linealidad
Límites
64
32
5/07/20
HERRAMIENTAS DE VALIDACIÓN
Ventajas
• Trazabilidadà Estimación del sesgo Materiales de referencia
• Material homogéneo o con homogeneidad
conocida.
• Material estable o con estabilidad conocida.
• Incertidumbre conocida.
Desventajas
• Alto costo.
• Disponibilidad de los MR.
• Concentración disponible.
• Propiedades fisicoquímicas de la muestra.
• Puede existir sesgo del analista.
65
Ventajas
• Cálculos rápidos y sencillos.
• INM o proveedor ISO17043.
Inter-laboratorios • Sirve para asignar valor a los MR.
• Reproducibilidad, incertidumbre.
Desventajas
• ¿Trazabilidad al SI?
• Estabilidad de los ítems de ensayo.
• Dependiente del analista.
• Concentración disponible.
• Costoso y consume tiempo.
• Disponibilidad de la prueba.
• No evalúa todas las características del método.
• Depende de los demás laboratorios.
66
33
5/07/20
Ventajas Método aceptado.

• Se comparan resultados entre los dos métodos.
• Debe validarse para un analito en diversas matrices.
• Se puede realizar para más de un analista.
Desventajas
• Se realiza a través de un método ciego. MI
• Se realiza con métodos actualmente aceptados.
MÉTODO
• El diseño experimental X2
67
Ventajas
• Económico*
• Evaluación a diferentes concentraciones.

Método Ciego • Permite la evaluación de un mayor número de
variables.
• Evaluación con diferentes matrices.
• Evaluación de diferentes analistas.
• Estimación de incertidumbre.
Desventajas
• Estabilidad y homogeneidad de los ítems.
• ¿Trazabilidad al SI?
68
34
5/07/20
Método Ciego
Preparación Análisis Comparación de resultados

Ciego- cero Ciego simple Ciego doble
69
Ciego- cero
Ciego simple
ü Rápido
ü Simple Ciego doble
ü Evita el sesgo de analista.
ü No hay imparcialidad ü No hay imparcialidad- primer ü Evita el sesgo del personal.
ü Primera etapa de la validación ü Implica mayores recursos.
analista.
ü Personal más calificado.
ü Pierde la ceguera en la
etapa más crucial.
Falla
No continua! Comparación
Objetividad
70
35
5/07/20
CONTENIDO
1.Introducción.
2.Conceptos
71
NIVELES DE VALIDACIÓN
2020-07-02
72
36
5/07/20
Estudio
colaborativo
Confianza
Inter-laboratorio
Tiempo
Costo
Intra-laboratorio
Nivel de emergencia
FDA. Guidelines for the Validation of Chemical Methods for the FDA Foods Program. V1 2012 Disponible en:
https://www.fda.gov/media/81810/download Consulta: 1 de Julio de 2020
73
Nivel 1: Emergencia
Revalidación
El método no se ha usado con un analito o una matriz.
Validación del Validación del

funcionamiento del funcionamiento del
método con una nueva método para un analito
matriz en una matriz
¿Regulación?
SI
Es necesario probar con todos los analitos
Nivel 2
74
37
5/07/20
Nivel 2: In house validation

Regulación, extensiones de analito/ matriz, modificaciones
Se validan todos los criterios

AOAC Idealmente:
ICH comparar con otro
FDA método de referencia
USP existente
¿Pueden existir conflictos comerciales, conflictos legales?
Nivel 3
75
Nivel 3: inter-laboratorio
Mínimo 1 laboratorio adicional
Requisitos de Es necesario:
AOAC/IUPAC para comparar con otro método
estudios colaborativos de referencia existente
¿Cuándo se aplica?
Aplicación en todas las circunstancias regulatorias:
Confirmatorios, Exploratorios, Conflictos legales.
¿Visibilidad pública, conflictos internacionales comerciales,

largo plazo, uso extendido.?
Nivel 4
76
38
5/07/20
Nivel 4: Estudio colaborativo

Mínimo 8 Laboratorios
Este nivel tiene criterios equivalentes a un

estudio colaborativo de AOAC /IUPAC.
¿Cumple los criterios AOAC/IUPAC?
Método Oficial
77
Requerimientos de validación para métodos químicos

Variable N1 N2 N3 N4
Laboratorios 1 1 ≥2 8 cuantitativo
10 cualitativo
Matrices ≥1 ≥3 ≥3 ≥3
Concentraciones ≥2 + blanco ≥3 + blanco ≥3 + blanco ≥3 + blanco
Replicas por nivel ≥4 cuantitativo ≥6 cuantitativo ≥3 cuantitativo ≥2 cuantitativo

( una matriz) ≥6 cualitativo ≥9 cualitativo ≥6 cualitativo ≥6 cualitativo
78
39
5/07/20
VALIDACIÓN DE
PLAN DE SISTEMAS ANALÍTICOS
VALIDACIÓN
¿REGULACION EXISTENTE?
SI NO
¿ESTABLECE ACOGERSE A
PARÁMETROS UNA GUÍA:
VALIDACIÓN? NO AOAC, VAM..
TOMAR/ESTABLECER
CRITERIOS DE
SI ACEPTACIÓN
ESTABLECER MÉTODO DE
VALIDACIÓN /NIVELES
COMPARACIÓN
METODO INTERLABORATORIO CIEGO MRC
79
CONTENIDO
1.Introducción.
2.Conceptos
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40
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81
PLAN DE VALIDACIÓN
2020-07-02
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5/07/20
MÉTODO VALIDADO
INFORME VALIDACIÓN
DESARROLLO
VALIDACIÓN
DOCUMENTO:
PLAN DE VALIDACIÓN Define preparación y ejecución de la validación de un
método (Optimizado y Documentado)
DESARROLLO Y.
OPTIMIZACIÓN DEL
MÉTODO
83
Nuestro ejemplo: Medición de Pb, Cd y As en labial

Pesar .2 g de
• Blanco: se pesa 2
muestra en tubo de
digestión
g de cera
Preparación de la muestra
Adicional 6 mL 6 mL
de HNO3
concentrado, 2 mL
de H2O2 y 4 mL de
agua desionizada
Realizar digestión en
microondas
Transferir
cuantitativamente a
balón 50 mL
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Nuestro ejemplo: Medición de Pb, Cd y As en labial

A partir de un
MRC se prepara • Blanco: se
pesa 2 g de
Calibración analítica y cuantificación
una solución cera
intermedia
Se preparan 5
puntos de
calibración
Se optimiza y
verifica el GFAA
Se mide la curva
y la muestra*
* De ser muy tóxico el labial… tenemos que diluir la muestra
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¡ Hagámos el plan!
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Taller validación e incertidumbre de medición en métodos

químicos cuantitativos
• Generalidades de la validación
• Exactitud
• Linealidad
• Limites (LOD y LOQ)
• Selectividad
• Robustez
• Recomendaciones para informes de validación
Validación de métodos
95
POR FAVOR ALISTAR:
96
48

Introducción A La Validación V2020

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5/07/20

Principios de mediciones analíticas

¡Porque Colombia se le mide!

Taverniers, I. et al. Trends in Analytical Chemistry, Vol. 23, No. 8, 2004

Aseguramiento de mediciones en…

Calidad de productos Seguridad ambiental

Seguridad alimentaria Comercio

Taverniers, I. et al. Trends in Analytical Chemistry, Vol. 23, No. 8, 2004

IMPORTANCIA DE LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS

CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Taverniers, I. et al. Trends in Analytical Chemistry, Vol. 23, No. 8, 2004

1 BIPM, IUPAC, IUPAP. Vocabulario Internacional de Metrología. 2012 t 2.45

1 BIPM, IUPAC, IUPAP. Vocabulario Internacional de Metrología. 2012 t 2.45

La marca que sea!!

1 BIPM, IUPAC, IUPAP. Vocabulario Internacional de Metrología. 2012 t 2.45

Establecimiento de evidencia documental, que un proceso

Confirmación mediante examen y presentación de pruebas objetivas de que

1 BIPM, Vocabulario Internacional de Metrología. 2012 t 2.45

Es el acto de probar que un método, estrategia, procedimiento

Confirmar la aptitud de un método de

7 M . Thom pson, S. Ellison, R. W ood, Pure Appl. Chem . 74 (2002) 835.

6 M. Thompson, S. Ellison, R. Wood, Pure Appl. Chem. 74 (2002) 835.

VALIDACIÓN DE UN SISTEMA ANALÍTICO

Procedimiento para establecer pruebas documentales

La validación implica la determinación de las fuentes de variabilidad, del

6 M. Thompson, S. Ellison, R. Wood, Pure Appl. Chem. 74 (2002) 835.

Definir un requisito analítico y documentar pruebas

¡Porque Colombia se le mide!

TIPOS DE MÉTODOS QUE

Taverniers, I. et al. Trends in Analytical Chemistry, Vol. 23, No. 8, 2004

Desarrollo y Validación Estudios Método normalizado!

El laboratorio debe veriﬁcar que puede llevar a cabo

Numeral 7.2.1.5 ISO 17025:2017

ü Método analítico desarrollado por un tercero.8

ü Método estándar al cual, por diversas razones, se

El laboratorio debe validar los métodos no estándar,

Numeral 7.2.2.1 ISO 17025:2017

Un momento relacionemos hasta este

¡Se validan: si están

¡Porque Colombia se le mide!

Pruebas destinadas a Identificación y cuantificación de Cuantificación Evaluación de características,

I II: Cuantitativo III: Límites IV

Cuantificación de Cuantificación de impurezas o Cualitativas para evaluación de Evaluación de características

¿Qué dice en ICH Q2 (R1) ?

¿Qué dice en ICH Q2 (R1) ?

Categoría II: Impurezas.

Cantidad de impurezas Cumplimiento de un límite

Cuantitativa Cualitativa o cuantitativa.

¿Qué dice en ICH Q2 (R1) ?

Categoría III: Ensayo

¿Qué dice en ICH Q2 (R1) ?

Categoría IV: Pruebas especíﬁcas

Valid Analytical Measurement (VAM)

National Measurement System (NMS).Introduction to method validation 2013. Disponible en:

Cuantitativo Cualitativo Identificación

Componentes principales : ≥100 g/kg

¡Porque Colombia se le mide!

Son las propiedades, características o capacidades cuantificables del

Adaptado de : IUPAC IHARMONIZED GUIDELINES FOR SINGLELABORATORY VALIDATION OF METHODS OF ANALYSIS.

Error sistemático Error aleatorio

Sesgo Desviación estándar

1 BIPM, Vocabulario Internacional de Metrología. 2012 t 2.45