Processamento de material para confecção das lâminas:

OBS: este processamento é realizado após a fixação (em formol tamponado a 10%) e clivagem (corte)
do material.

Desidratação:
Faz-se a desidratação gradativa em série crescente de álcool etílico, com trocas de hora em
hora, conforme a seqüência: 70º GL, 80º GL, 90º GL, 96º GL até o fim do dia, quando então se deixa
no álcool 100º GL durante toda à noite.

Impregnação:
No dia seguinte à desidratação, banha-se os ossos em xilol por 30 minutos. Troca-se
novamente o xilol, permanecendo por mais 30 minutos dentro da estufa a 48ºC.
De hora em hora troca-se a parafina de baixo ponto de fusão (46ºC-48ºC), totalizando 3
horas. Repete-se este procedimento, porém com a parafina de alto ponto de fusão (56ºC-58ºC).

Emblocamento:
Posiciona-se o osso para corte longitudinal em fôrma apropriada, despejando-se, em
seguida, parafina de emblocamento (parafina de alto ponto de fusão misturada com 10% de cera de
abelha).

Corte no Micrótomo:
Efetua-se secções de espessura 7m, colocando-as sobre a superfície de água morna para
completa distensão do material. Esta película sobrenadante é capturada com uma lâmina de vidro na
qual adere. Espera-se secar e remove-se o excesso de parafina para iniciar a coloração.

Coloração: Cora-se de acordo com a seqüência:

Reidratação tecidual: álcoois 96º GL, 70º GL, 50º GL, 40º GL, água destilada; 3 minutos
em cada.
Corante 1: Hematoxilina, 1 minuto.
Lavagem em água corrente: 5 minutos.
Corante 2: Eosina-Floxina, 3 minutos.
Desidratação rápida: água destilada, álcoois 70º GL, 80º GL, 96º GL, 100º GL; lavagem
rápida em cada um e mais 5 minutos no álcool 100º GL.
Clarificação: Xilol, 5 minutos.

Montagem: Cola-se com Entellan a lamínula sobre o tecido na lâmina e deixa-se secar, por no mínimo
8 horas. Limpa-se a lâmina e identifica-se com etiqueta.