Turma P3 Bioquímica 11- Avaliação laboratorial intercalar

Aluno: ------------------------------------------------------------------------------------------ -----/-----/2010

Os níveis de lactato no sangue de um doente foram determinados por reacção com a LDH.
Para isso, 0,15 ml de sangue foi desproteinizado com 0,45 ml de ácido perclórico a 6%. Após
centrifugação, foi usada uma alíquota de 2 )..!Ldo sobrenadante límpido (amostra) e preparada
uma série de padrões de lactato com 100 )..!L(PI), 200 )..!L(P2), 3'00 )..!L(P3) e 500 )..!L(P4) de
uma solução de lactato 200 !-lM que foi diluído 2 vezes. Os reagentes foram adicionados
convenientemente a todos os ensaios de modo a terem um volume final de 2 ml e após
incubação a 37°C durante 30 minutos as leituras de absorvência foram as seguintes: PI=O,I;
P2= 0,20; P3=0,30; P4=0,50; Amostra= 0,15
Para cada uma das questões a seguir indicadas, assinale com X no espaço .... qual dos valores
é correcto, apresentando todos os cálculos que efectuar:

1- Quantidade de lactato usado no P4: a) 50 nmoles ; b) 25 nmoles ; c) 20

nmoles ; d) 50 umoles ; e) 60 umoles/Z ul.. ; 1) 50 nmoles/2 ul.. ;
2- Quantidade de lactato no volume de amostra usado: a) 30 umoles ...; b) 15 nmoles ....; c) 30
nmoles .... ; d) 20 umoles/Z ul., ..; e) 30 nmoles/2 ul.. ..; 1) 15 nmolesl2 ul.. ..;
3- Factor de diluição do sangue: a) 7....; b) 4....; c) 8..... ; d) 3 ; e) 0,14 ....; 1) 1,14 ..... ;
4- Concentração do lactato em mmoles/L de sangue: a) 30 ; b) 6 .... ; c) 7,5 ....; d) 8,4 .... ;
e) 4,8 ....; 1) 3....;

5- Porque avaliou a absorvência a 340 nm na determinação do lactato pela LDH?