ESTeS-C

Licenciatura em Farmácia

Radiofarmácia (4º Ano)

Bloco T06 (17 páginas)

Controlo de Qualidade em
Radiofarmácia

Controlo de Qualidade

Os radiofármacos obedecem a dois tipos principais de

Especificações de Qualidade:
• Parâmetros físico-químicos
- Identificação e actividade
- Pureza radionuclídica
- Pureza radioquímica
- Pureza química
- pH
- Isotonicidade
- Estabilidade

• Parâmetros microbiológicos
- Esterilidade
- Apirogenicidade

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 Identificação e actividade
Objectivo
“Assegurar que o radiofármaco correcto é administrado com a actividade
pretendida”

Para assegurar a exactidão das medidas é necessário efectuar

regularmente o controlo de qualidade do calibrador de doses:

Nível de fundo: <40 kBq (diariamente)

Precisão: > 10% para baixas energias semanalmente

> 5% para altas energias; fonte de 137Cs

Reprodutibilidade: > 5%;

Linearidade: > 5%; (6 meses)

Pureza radionuclídica
“Pureza radionuclídica é a fracção da actividade total presente na
forma do nuclídeo pretendido”
As impurezas radionuclídicas podem ter origem no processo de
produção do radioisótopo:
• Podem ser isotópicas ou não-isotópicas
• Se tiverem um período mais curto tenderão a “desaparecer” do produto
- Ex., formação de azoto-13 durante a produção de [18F]fluoreto
utilizando a reacção 18O(p, n)18F e água isotopicamente enriquecida a
menos de 100%.

• Se tiverem um período mais longo tenderão “emergir” no produto

- Ex., formação de [18F]fluoreto durante a produção de azoto-13
utilizando a reacção 16O(p, α)13N em água natural.

A pureza radionuclídica pode ser determinada por:

• Determinação da energia
• Determinação do período
• Espectrometria gama

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 Pureza radioquímica
“Pureza radioquímica é a fracção do radionuclídeo presente na
forma química pretendida e na posição de marcação especificada”
A pureza radioquímica é geralmente determinada por métodos
cromatográficos:
• Cromatografia em Camada Fina (TLC)
- Método simples, menos sensível, discriminante.
- Pode ser adequada para detectar certos contaminantes se
adequadamente validada

• Cromatografia Líquida (HPLC)

-Normalmente acoplado a um detector de radioactividade
(radio-HPLC)
- Deve ser adequadamente validado com padrões de referência.
- Elevada resolução / Alta sensibilidade
• Cromatografia Gasosa (CG)
- Gases radiomarcados
- Componentes voláteis (solventes residuais)

Pureza Química

Presença de contaminantes químicos não radioactivos numa

preparação radiofarmacêutica

Impurezas químicas
Toxicidade para o doente
- produção de radionuclídeo
Podem influenciar a síntese
- síntese radioquímica
↓ Rendimento de radiomarcação

Exemplos:
• Matérias primas
• Produtos intermédios
• Produtos da reacção
• Solventes orgânicos
• Constituintes das colunas cromatográficas

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 Esterilidade

Esterilidade
– Garantir a segurança do RF: assegurar que os métodos utilizados
na preparação de RF permitem obter produtos estéreis

Os resultados dos testes geralmente não são obtidos antes

da sua utilização, devido à
» Irradiação
» Pequeno número de amostras
» Curto t1/2

– Execução: após decaimento da radioactividade

– Controlo dos procedimentos de preparação utilizados

Pirogénios: endotoxinas bacterianas

Endotoxinas: polissacarídeos de bactérias Gram-negativas

– Solúveis em água
– Termoestáveis Dificuldades na sua
– Não voláteis destruição e remoção
– Resistentes à maioria dos bactericidas

– Importante:
– Trabalhar em condições assépticas
– Material de vidro: 200ºC durante 2 horas

– Teste LAL (lymulus amebocyte lysate): formação de gel na presença de

endotoxinas
– Coelho: observar se há aumento de temperatura após injecção iv de uma
amostra de RF

Obrigatório para todas as aplicações parentéricas desde

01/01/2004.

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 Outros Critérios de Qualidade

pH
– Intervalo fisiológico (4-9)
– Optimizado para a estabilidade da preparação

Observação macroscópica da solução

– Rf para administração i.v. (excepto coloides e MAA) devem ser livres de partículas
– Controlo do material de vidro

Tamanho das partículas

– Estudos de perfusão: MAA (20 e 80 µm)
– RES: Colóides (0.1 e 0.6 µm)
– Filtração em membranas de policarbonato

Isotonicidade

Que testes devem ser aplicados?

Radiofármacos prontos a usar

– Identidade
– Actividade (para cada doente)

Semi-preparados (kits e geradores autorizados)

– Identidade
– Actividade (para cada doente)
– Rendimento da eluição de geradores
– Pureza radionuclídica (99Mo no eluído)
– Pureza radioquímica

Outros
– Total concordância com a legislação farmacêutica (BPF) aplicada a
PET, marcação de células, anticorpos e peptídeos

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 Controlo de Qualidade em
Medicina Nuclear Convencional

Gerador de 99Mo/99mTc

Contaminantes
– Presença de elevada quantidade de 99Tc no eluído
» Desintegração directa do 99Mo (13%)
» Desintegração do 99mTc
» Importante:
− ∆t entre eluições consecutivas

Produtos da Radiólise
– Presença de peróxidos e compostos oxidantes em geradores com
elevada actividade
– Desprezar o eluído na primeira eluição

Constituintes da coluna
– Al3+ indicador da quebra da coluna
– Formação de colóides de Al

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 Gerador de 99Mo/99mTc

Controlo de Qualidade
– Durante a recepção do gerador verificar se o gerador
corresponde ao que foi pedido e o estado do gerador
(controlo da taxa de exposição)
– Rendimento da eluição
– Presença de 99Mo na primeira eluição
– Presença de alumina (teste colorimétrico)
– Pureza Radioquímica (ITLC)
– pH
– Presença de partículas
– Al3+ indicador da quebra da coluna
– Formação de colóides de Al

Eluído de 99mTc

Pureza radionuclídica

pH: 4,0 a 8,0

Al3+: <5 ppm

Pureza radioquímica
>95%

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 Pureza radionuclídica

Principal contaminante
Radionuclídeo-pai:
99Mo (Eγ = 740 keV)

< 0,15 mCi 99Mo/mCi 99mTc

ou < 0,1% (Farm. Eur.)

Método de determinação:
colocar o frasco de eluição num
contentor de chumbo com ∆x = 6mm
que atenua a radiação γ de 140 keV
do 99mTc e deixa atravessar a
radiação γ de 740 keV do 99Mo e
contar no calibrador de doses

Remover o frasco de eluição do

contentor de chumbo e colocar no
calibrador de doses

Pureza radionuclídica

As impurezas radionuclídicas dependem do processo de produção

de 99Mo
– Produtos de fissão do 235U
» 99Mo:0,1%

» 131I:0,005%
» 103Ru: 0,005%
» 89Sr: 0,00006%

» 90Sr:0,000006%

– Bombardeamento de 98Mo com neutrões

» 99Mo:0,1%
» Outras impurezas:0,01%

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 Pureza Radioquímica

A determinação da pureza radioquímica requer a separação das

diferentes substâncias contendo o radionuclídeo e quantificação da
radioactividade associada à substancia química desejada

Métodos de separação analítica

– Cromatografia em papel
– Cromatografia em camada fina (TLC/ITLC)
– Cromatografia líquida (HPLC)
– Cromatografia Gasosa (GC)
– Electroforese

Localização e quantificação da radioactividade

– Radiocromatógrafo
– Câmara γ
– Contador de poço

Pureza Radioquímica

Principais contaminantes:
– 99mTcO e outros compostos de 99mTc sob a forma de colóides
2
– 99mTc adsorvido à alumina (colóides a pH neutro)

Método de determinação: cromatografia (exemplo)

– Whatman nº1/metanol:água (80:20) (Farm. Eur)
– ITLC-SG/etilmetilcetona (método alternativo)

% 99mTcO4- > 95%

coloide 99mTcO -
4

Frente do
Origem
solvente

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 Pureza Química

Principal contaminante:
– Al3+ resultante da deterioração da coluna de alumina
» Al3+ < 10 µg/ml (Ph.Eur.)

– Efeitos indesejáveis: toxicidade e interferência com a marcação

– Método de determinação: teste químico (colorimétrico)
» Coloca-se uma gota (~10µl)de uma solução padrão de Al3+ (10µg/ml)
numa tira de papel indicador (ácido tricarboxilico)

» Coloca-se uma gota semelhante de eluído na tira de papel indicador

O Al3+ existente na solução reage com o papel indicador

– Se a coloração da gota da amostra de pertecnetato for menos
intensa que a intensidade da gota da solução padrão

eluído contém < 10 µg/ml de Al3+

CQ de Radiofármacos marcados com 99mTc

Determinação da pureza radioquímica

Contaminantes
– 99mTcO –
4
» redução incompleta do pertecnetato
» re-oxidação do pertecnetato ou do radiofármaco

– 99mTcO , 99mTc(OH) (coloidal ou 99mTc reduzido hidrolisado)

2 4
» Redução do pertecnetato na ausência de ligando, oxigénio,
agentes oxidantes, radicais livres

– Outros compostos contendo 99mTc

» Estado de oxidação do 99mTc
» pH
» Natureza do ligando

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CQ de Radiofármacos marcados com 99mTc

Determinação da pureza radioquímica (exemplo)

A separação das espécies radioquímicas depende do sistema
cromatográfico

Frente do 99mTcO - Frente do 99mTcO -

4 4
solvente solvente RF

Origem Rf Origem Coloide

coloide

MEC NaCl 0,9%

Controlo de Qualidade
em PET

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 Radiofármacos
PET vs Medicina Nuclear Convencional
• Períodos curtos
- elevadas actividades iniciais
- necessidade de manipulação remota

• Elevadas actividades específicas

- São manuseadas quantidades muito pequenas

• Química mais complexa

- baixos rendimentos radioquímicos
- maior possibilidade de contaminantes

• Geralmente requerem uma etapa de purificação

- produtos da reacção
- solventes residuais

• Necessidade de esterilização
- Filtração estéril
- Autoclavagem

PET é...
Fabrico de Medicamentos

Final do Bombardeamento
Início do estudo

Administração Radiossíntese

Controlo de
qualidade

Formulação

Separação / Isto é Fabrico de

Purificação Medicamentos

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 PET é...
Uma corrida contra o tempo...

Final do Bombardeamento
Início do estudo

Administração Radiossíntese

Controlo de
qualidade
Períodos muito curtos (15O, 13N, ≤10 min):
• Química “em-linha”
• Limitação de compostos possíveis
Formulação Períodos curtos(11C ~ 20 min)
• Alguma química possível
• Utilização “in house”
Separação /
Períodos mais longos (18F ~ 110 min)
Purificação • Permitem sínteses mais complexas
• Radiofármacos podem ser distribuídos

Qualidade em PET

Os curtos períodos de semi-desintegração dos radionuclídeos

utilizados em PET tornam impossível testar todos os
parâmetros de qualidade antes da administração

⇒ Ênfase num sólido Programa de Garantia de Qualidade

Garantia de Qualidade (GQ): “Todas as acções levadas a cabo para

garantir que os padrões e procedimentos são aplicados da forma
correcta e que os produtos cumprem todas as especificações de
libertação.”
GQ inclui:
• Boas Práticas de Fabrico (BPF)
• Procedimentos de Controlo de Qualidade (CQ)
“Conjunto de testes realizados antes da libertação de um
produto por forma a assegurar que este cumpre as
especificações de libertação”

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 Deficiente qualidade pode levar a…
Efeitos fármaco-toxicológicos

Apesar de os radiofármacos PET

serem utilizados em muito pequenas
Efeito

+ quantidades (10-9 - 10-12 M), muitos

seriam altamente tóxicos se
administrados em maiores
concentrações

* Concentração (log) * Nível de traçador

+ Nível farmacológico
Alterações na biodistribuição
• Artefactos na imagem
• Alterações na dosimetria

Falha no Controlo de Qualidade significa que o exame não será realizado!

Controlo de Qualidade em PET

O que é verificado?
• Antes da libertação
- Actividade
- Volume
- Aparência
- Pureza radionuclídica
- Pureza radioquímica
- Pureza química
- pH
- Embalagem e rotulagem
- Débito de dose

• Após a libertação
- Esterilidade
- Apirogenicidade

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 Pureza radionuclídica
Pureza radionuclídica é a fracção da actividade total presente na
forma do radionuclídeo pretendido.
As impurezas radionuclídicas podem ter origem no processo de
produção do radioisótopo:
• Podem ser isotópicas ou não-isotópicas
• Se tiverem um período mais curto tenderão a “desaparecer” do produto
- Ex., formação de azoto-13 durante a produção de [18F]fluoreto
utilizando a reacção 18O(p, n)18F e água isotopicamente enriquecida
a menos de 100%.

• Se tiverem um período mais longo tenderão “emergir” no produto

- Ex., formação de [18F]fluoreto durante a produção de azoto-13
utilizando a reacção 16O(p, α)13N em água natural.

A pureza radionuclídica pode ser determinada por:

• Espectroscopia gama para confirmar a linha de 511 keV
e

• Determinação do período para identificar o nuclídeo emissor

Espectrometria gama
Intensidade

511 keV

1,022 MeV
(Pico de soma)

Energia

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 Pureza química e radioquímica
A determinação das impurezas químicas e radioquímicas é
normalmente realizada por métodos cromatográficos.

• Cromatografia Líquida (HPLC)

- Detecção química e radioquímica (radio-HPLC)
- Deve ser adequadamente validada com padrões de referência.
- Elevada resolução / Alta sensibilidade
• Cromatografia em Camada Fina (TLC)
- Com detecção de radioactividade
- Pode ser adequada para detectar certos contaminantes se
adequadamente validada
• Cromatografia Gasosa (CG)
- Gases radiomarcados
- Componentes voláteis
- solventes residuais

Impurezas químicas e radioquímicas: FDG

HCl / NaOH

Precursor Produto intermédio

18F- Agente de marcação

[18F]FDG
+
K+, aminopoliéter
2-[18F]Fluoro-
2-Desoxi-D-Manose

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 Controlo de qualidade da FDG (Far. Eur.)
Definição
• Fluodesoxiglucose (18F) injectável é uma solução estéril de
2-[18F]Fluoro-2-Desoxi-D-glucose ([18F]FDG) para uso diagnóstico

• A solução injectável contém não menos de 90,0% e não mais de 110,0%

da actividade de flúor-18 declarada no rótulo

• Não menos de 95% da radioactividade corresponde a flúor-18 na forma

de 2-[18F]Fluoro-2-Desoxi-D-glucose e 2-[18F]Fluoro-2-Desoxi-D-manose,
não excedendo a fracção de 2-[18F]Fluoro-2-Desoxi-D-manose mais de
10% da actividade total.

• Pelo menos 99,0% da radioactividade corresponde a flúor-18

Controlo de qualidade da FDG

Matérias primas
• Alvo: Cada lote de material-alvo deve ser testado em ensaios de
produção para assegurar que nas condições especificadas o alvo
produz flúor-18 na quantidade e qualidade desejadas

• Precursores: Recomenda-se o teste dos percursores em

ensaios de produção antes da sua utilização para assegurar que nas
condições especificadas o produto final é produzido na quantidade e
qualidade desejadas
especificamente a tetra-acetil-triflato-manose deve ser examinada
por
- espectrofotometria por absorção no IV
- Ponto de fusão (119 ºC – 122 ºC)

• Outras matérias primas

-Testes de identidade, pureza química e determinação do
teor devem ser realizados por procedimentos validados
- Quando as matérias primas são aceites com base em
boletins analíticos é necessário estabelecer a fiabilidade do
fornecedor

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