Publicada em: 28/04/2003 às 17:31

Jogos e experiências

DNA na Cozinha
Milton Moraes

Extração de DNA de mucosa bucal

1. Bochechar aproximadamente 10-15ml de água com açúcar (3%, uma

colher de chá de açúcar em meio copo de requeijão. Uma quantidade
maior de células pode ser obtida fazendo um raspado da mucosa com
uma espátula de madeira).

2. Acondicione em um tubo cônico com tampa o volume obtido do

bochecho (apenas 5ml) e adicione uma pitada de sal de cozinha (para
aprox. 1% final).

3. Adicionar algumas gotas (5-10) de detergente diluído à 25% (1:4) e

homogeneizar vagarosamente.

4. Aquecer a 55oC por 10 min. Resfriar 5 min no gelo.

5. Adicionar álcool gelado (absoluto se possível) pelas bordas do copo lentamente, com o auxílio de
uma colher de sopa, até que se alcance pelo menos 1cm de espessura.

O DNA (massaroca esbranquiçada) deverá formar um aglomerado e subir.

Extração de DNA de cebola na cozinha

1. Pegue ½ cebola em cubos (como no espaguetti). Pode se utilizar um liquidificador ou mixer quando
disponível.

2. Adicionar 50ml de solução de lise (1 colher de sopa de detergente +1 colher de café de sal de
cozinha). Elevar o volume com água da pia.

3. Aquecer a 55oC por 10 min. Resfriar 5 min no gelo.

4. Passar a solução em um filtro de café. Opcional: Ao filtrado, adicionar uma pitada de amaciante de
carne.

5. Adicionar álcool gelado (absoluto se possível) pelas bordas do copo lentamente, com o auxílio de
uma colher de sopa, até que se alcance pelo menos 1cm de espessura

Será que funciona com outra amostra: ervilha, morango, Yakult, fermento biológico... Por que você não
tenta em casa?

Quais são as dicas do "Chef"?

Compare os dois métodos. Quais são as semelhanças e diferenças? Como esse processo funciona?

Como age o detergente?

O detergente dissolve lipídeos e proteínas rompendo a célula.

E a temperatura, o sal e o álcool?

A temperatura elevada (55oC) inativa as DNAses (enzimas que degradam o DNA) e auxilia a dissolução
da membrana celular.

O sal (NaCl) possibilita a precipitação dos ácidos nucleicos em solução alcoólica, porque ele bloqueia a
eletronegatividade do esqueleto fosfato-açúcar e favorece a aglomeração das moléculas de DNA.

Como DNA não é solúvel em álcool, quando este é adicionado à mistura, todos os componentes da
mistura, exceto o DNA, permanecem em solução, enquanto o DNA precipita na camada alcóolica.

Atenção aos cientistas cozinheiros

Os materiais utilizados podem ser perigosos se ingeridos e devem ser manuseados com extrema
cautela. O álcool é inflamável e deve ser mantido longe do fogo.

Desenvolvida para o evento Genes no Parque, em comemoração aos 50 anos da descoberta da

estrutura do DNA, a atividade DNA na Cozinha foi coordenada por Milton O. Moraes e contou com a
participação inestimável de Alejandra N. Martinez, Cláudia F. Alves, Diogo Coutinho, Guilherme Mattos,
Patrícia R. Vanderborght, Rocio Saavedro-Acero, Sidra E. Vasconcellos e Viviane M. Câmara. Todos os
integrantes desenvolvem atividades de pesquisa no Laboratório de Hanseníase do Instituto Oswaldo
Cruz/Fiocruz. Os procedimentos foram desenvolvidos a partir de métodos do laboratório ou descritos
por outros autores, segundo o livro Biologia Molecular na Prática Médica e Biológica, de Milton º Moraes
Museu da Vida - Casa de Oswaldo Cruz – Fiocruz

Publicada em: 13/12/2002 às 17:24

Jogos e experiências

DNA de ervilha
Materiais necessários

• Ervilhas secas (aproximadamente 100 ml)

• Sal
• Água
• Amaciante de carne, suco de abacaxi ou solução limpadora de lentes de contato (fornecerão as
enzimas).
• Um liquidificador
• Uma peneira
• Recipientes apropriados (copos, béckeres, etc.)
• Álcool 96º G.L. gelado
• Um cronômetro (relógio).

Objetivos

Extrair o DNA (ácido desoxirribonucleico) de células de ervilha, através de um método simples e

acessível, demonstrando assim a materialidade desta substância.

Procedimento

• Coloque a quantidade de ervilhas que vai usar de molho em 100 ml de água por, no mínimo, 30
minutos.
• Coloque as ervilhas, junto com sua água, no liqüidificador. Coloque uma pitada grande de sal e
mais 100 ml de água. Bata bem, por 15 segundos, na potência máxima.
• Passe sua sopa de ervilhas pela peneira, recolhendo o filtrado.
• Adicione em torno de 1/6 de detergente (em relação ao volume da "sopa"). Isto deve dar em
torno de 2 colheres de sopa. Misture e deixe descansar por 5 a 10 minutos.
• Após este período, coloque a sopa em recipientes, preenchendo-os até 1/3 de sua capacidade
(divida em 3 ou 4 recipientes menores).
• Coloque uma pitada de amaciante de carne e misture devagar. Cuidado ao misturar pois o ADN
 pode ser quebrado facilmente. O amaciante pode ser substituído por suco de abacaxi (filtrado)
ou solução limpadora de lentes de contato. Use o suficiente. Deixe descansar por 5 minutos.
• Pegue os tubos (ou copos, etc.) e incline-os, derramando álcool gelado pela parede do
recipiente. Coloque aproximadamente o mesmo volume de álcool que a sopa de ervilhas. O ADN
deve subir para a camada alcoólica e pode ser "pescado" por um palito de madeira ou outro tipo
de gancho.

Extraído de http://gslc.genetics.utah.edu/units/activities/extraction/ e desenvolvido pelo programa

Natural History of Genes, custeado pelo Howard Hughes Medical Institute, da universidade de Utah.
(tradução: Miguel de Oliveira). Para detalhes sobre a função de cada ingrediente e para o conhecimento
básico de biologia envolvido, visite a página do Genetic Science Learning Center.
Museu da Vida - Casa de Oswaldo Cruz – Fiocruz

Publicada em: 07/01/2003 às 19:57

Jogos e experiências

DNA de morango
Os morangos que consumimos são plantas da espécie Fragaria
ananassa. Estas plantas são Rosáceas, ou seja, são da mesma
família das rosas que enfeitam muitos jardins. Elas se
reproduzem principalmente por meio do estolão, que é um ramo
que cresce paralelo ao chão, gerando brotos de novas plantas.
As variedades de morangos que consumimos hoje são resultado
de cruzamentos de espécies diferentes que ocorriam,
naturalmente na Europa (França e Rússia) e nas Américas (Chile
e Estados Unidos).
Uma das razões de se trabalhar com morangos é que eles se
prestam muito bem à extração de DNA, porque são muito macios
e fáceis de homogeneizar. Morangos maduros também produzem
pectinases e celulases, que são enzimas que degradam a pectina
e a celulose (respectivamente), presentes nas paredes celulares
das células vegetais. Além disso, os morangos possuem muito
DNA: eles possuem 8 (oito) cópias de cada conjunto de
cromossomos (são octoplóides!).

Materiais (por grupo):

1. 1 saco plástico tipo "zip loc"

2. 1 morango (fresco ou congelado)
3. 10 ml de solução de extração de DNA (veja como fazer abaixo)
4. Aparato filtrante: 1 filtro de papel com funil ou 1 filtro de pano ou gaze
5. Álcool etílico gelado (pode ser álcool 70º g.l.)
6. 1 tubo de ensaio limpo
7. 1 bastão de vidro ou 1 palito de madeira (tipo pau-de-laranjeira, para manicure, encontrado em
drogarias)

Preparo das soluções e outras notas sobre os materiais

• O saquinho tipo "zip loc" deve ser bem espesso. Quanto mais espesso mais resistente e
geralmente os saquinhos utilizados para embalar comidas no freezer são apropriados.
• Os morangos podem ser frescos ou congelados. Se for usar morangos congelados, deixar
descongelar completamente antes de realizar o experimento. Outras frutas macias como Kiwi ou
banana podem ser usadas, mas não fornecem ao final tanto DNA.

Solução de extração de DNA (suficiente para 100 grupos)

• 100 ml de xampu (não contendo condicionador)

• 15 gramas de NaCl (sal de cozinha) = 2 colheres de chá
 • 900 ml de água (H2O), de preferência mineral
• 50 ml de detergente podem substituir o xampu (de preferência sem corantes)

O álcool etílico (etanol) deve ser de, no mínimo, 90º g.l. e deve estar gelado.
Se for usar gaze, corte-a em quadrados e dobre em 2 camadas. Corte-a grande o suficiente para poder
ficar presa no funil ou na boca do tubo.

Método (ou como fazer)

1. Coloque um morango, previamente lavado e sem as sépalas (as folhinhas verdes) em um saco
zip loc.
2. Esmague o morango com o punho por, no mínimo, 2 minutos.
3. Adicione a solução de extração ao conteúdo do saco.
4. Misture tudo, apertando com as mãos, por 1 minuto.
5. Derrame o extrato no aparato filtrante e deixe filtrar diretamente dentro do tubo. Não encha
totalmente o tubo (encha somente até 1/8 do seu volume total).
6. Derrame devagar o álcool gelado no tubo, até que o mesmo esteja cheio pela metade.
7. Mergulhe o bastão de vidro ou o pau-de-laranjeira dentro do tubo no local onde a camada de
álcool faz contato com a camada de extrato.
8. Mantenha o tubo ao nível dos olhos para ver o que está acontecendo.

Resultados esperados:

Assim que os participantes derramarem o etanol gelado no extrato de morango eles começarão a notar
fitas brancas muito finas de ADN, que se formarão na interface entre as duas camadas. Agitando-se o
ADN que se formou na camada de etanol, este formará fibras como as de algodão, que grudarão no
objeto que se está usando para misturar (bastão de vidro ou madeira).

O que acontece quando...

• Colocamos o detergente? O detergente presente no xampu ajuda a dissolver a bicamada lipídica

que compõe a membrana plasmática e as membranas das organelas.
• Colocamos o sal? O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, impedindo
que elas precipitem com o DNA.
• Colocamos o etanol? O ADN não é solúvel em etanol (álcool etílico).

Quando as moléculas são solúveis em um dado solvente, elas se dispersam neste solvente e não são,
portanto, visíveis. Por outro lado, quando as moléculas são insolúveis em um dado solvente, elas se
agrupam, tornando-se visíveis. Quanto mais gelado estiver o álcool, menos solúvel o ADN vai estar. Por
isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até a hora do
experimento.
Bom experimento!

Bibliografia:

Retirado e adaptado de um método de Diane Sweeney a ser publicado em Biology:

Exploring Life, Pearson Education Arquivo pdf da extração de DNA de morango

Informações sobre as espécies de morango

Para saber mais você pode visitar também o site, em português, DNA VAI À ESCOLA.
Museu da Vida - Casa de Oswaldo Cruz - Fiocruz