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INSTRUÇÕES DE

UTILIZAÇÃO – MEIOS EM
PLACAS PRONTOS A
USAR
PA-254047.06 Rev.: April 2013

BD Salmonella Shigella Agar


UTILIZAÇÃO PREVISTA
BD Salmonella Shigella Agar (SS Agar) é um meio diferencial selectivo utilizado no isolamento
de bacilos entéricos patogénicos, especialmente os que pertencem ao género Salmonella,
provenientes de amostras clínicas.

PRINCÍPIO E EXPLICAÇÃO DO PROCEDIMENTO


Método microbiológico
O Ágar Salmonella Shigella é uma modificação do Ágar Desoxicholato-Citrato descrito por
Leifson.1 É designado como um meio moderadamente selectivo com base no grau de inibição
dos microrganismos gram-positivos e outras Enterobacteriaceae que não a Salmonella e a
Shigella, que este inibe devido ao seu teor de sais biliares, brilliant green e citratos.
No BD Salmonella Shigella Agar, a diferenciação de organismos entéricos consegue-se
através da incorporação de lactose no meio. Os organismos que fermentam a lactose
produzem ácido que, na presença do indicador vermelho neutro, resulta na formação de
colónias vermelhas. Os organismos não fermentadores da lactose formam colónias incolores.
Este último grupo contém a maioria dos elementos patogénicos intestinais, incluindo
Salmonella e Shigella. O tiosulfato de sódio e o citrato férrico permitem a detecção da
produção de sulfureto de hidrogénio como se pode verificar pelas colónias com centros pretos.
Este meio é utilizado para o isolamento primário de Salmonella proveniente de amostras de
fezes humanas.2 Uma vez que existem meios mais eficientes para o isolamento de Shigella,
não deve ser utilizado para o isolamento deste organismo.2-4

REAGENTES
BD Salmonella Shigella Agar
Fórmula* por Litro de Água Purificada
Extracto de bovino 5,0 g
Hidrolisado pancreático de 2,5
caseína
Hidrolisado péptico de tecido 2,5
animal
Lactose 10,0
Sais biliares 8,5
Citrato de sódio 8,5
Tiosulfato de sódio 8,5
Citrato férrico 1,0
Vermelho neutro 0,025
Ágar 13,5
Brilliant Green 0,330 mg
pH 7,2 ± 0,2
*Ajustada e/ou suplementada conforme necessário para cumprir os critérios do desempenho.

PRECAUÇÕES
. Apenas para uso profissional.
Não utilizar as placas que apresentem sinais de contaminação microbiana, descoloração,
secura, fissuras ou outros sinais de deterioração.

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Consultar as INSTRUÇÕES GERAIS DE UTILIZAÇÃO para informação sobre os
procedimentos de manuseamento asséptico, os riscos biológicos e os procedimentos de
eliminação do produto usado.

ARMAZENAMENTO E PRAZO DE VALIDADE


Após recepção das placas, conservar no escuro a uma temperatura entre 2 e 8°C, dentro do
invólucro original até ao momento da utilização. Evitar congelar e aquecer excessivamente. As
placas podem ser inoculadas até ao prazo de validade (ver a etiqueta da embalagem) e
incubadas durante o tempo de incubação recomendado.
As placas são fornecidas em pilhas de 10 placas e, quando uma destas pilhas é aberta, as
respectivas placas terão de ser utilizadas no prazo máximo de uma semana, se forem
conservadas em local limpo a uma temperatura entre 2 e 8°C.

CONTROLO DE QUALIDADE PELO UTILIZADOR


Inocular amostras representativas com as seguintes estirpes (para mais detalhes, consultar as
INSTRUÇÕES GERAIS DE UTILIZAÇÃO). Incubar as placas em condições aeróbias, a uma
temperatura entre 35 e 37°C, durante 18 a 24 horas.

Estirpes Resultados de Crescimento


Escherichia coli ATCC 25922 Inibição parcial a completa; colónias cor-de-rosa a
vermelhas com precipitado
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inibição completa
Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Crescimento bom a excelente; colónias beges com
centros pretos
Shigella flexneri ATCC 12022 Crescimento razoável a bom; colónias cor-de-rosa
claro a incolores
Não inoculadas Tonalidade vermelho-laranja rosado

PROCEDIMENTO
Materiais fornecidos
BD Salmonella Shigella Agar (placas Stacker de 90 mm). Microbiologicamente controlados.

Materiais não fornecidos


Meios de cultura auxiliares, reagentes e equipamento laboratorial, conforme necessário.

Tipos de amostra
Trata-se de um meio diferencial selectivo utilizado para o isolamento de Salmonella proveniente
de amostras de fezes ou zaragatoas rectais de pacientes que se suspeita estarem com uma
infecção entérica bacteriana ou de material não clínico (consultar também CARACTERÍSTICAS
DE DESEMPENHO E LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO).

Procedimento do teste
Espalhar a amostra para cultura imediatamente após esta ser recebida no laboratório. A placa
para cultura é usada principalmente para isolar culturas puras das amostras que contêm flora
mista. Em alternativa, se o material estiver a ser cultivado directamente de uma zaragatoa,
fazer rolar a zaragatoa sobre uma pequena área da superfície, na extremidade; em seguida,
espalhar a partir desta área inoculada. Também deve proceder-se à inoculação de um meio
menos selectivo como o BD MacConkey II Agar para aumentar as hipóteses de recuperação,
quando a população de organismos gram-negativos é reduzida, e para fornecer uma indicação
de outros organismos presentes na amostra.
Incubar as placas, ao abrigo da luz, a uma temperatura de 35 ± 2°C, durante um mínimo de 18
a 24 h ou durante mais tempo, caso necessário.

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Resultados
A morfologia típica das colónias é a seguinte:
Microrganismos BD Salmonella Shigella Agar
E. coli Crescimento ligeiro, cor-de-rosa ou vermelho
Enterobacter/Klebsiella Crescimento ligeiro, cor-de-rosa
Proteus Incolor, com centro preto
Salmonella Incolor, geralmente com centro preto
Shigella Incolor
Pseudomonas Irregulares, crescimento ligeiro
Bactérias gram-positivas Sem crescimento

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO E LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO


O BD Salmonella Shigella Agar é um dos meios recomendados para o isolamento de espécies
de Salmonella provenientes de amostras de fezes humanas.2-4
Este meio não é recomendado para o isolamento de Shigella. Em vez disso, deve utilizar-se BD
XLD Agar ou BD Hektoen Enteric Agar.2-4
O BD Salmonella Shigella Agar não deve ser utilizado como meio para a repicagem a partir de
caldo Selenite F. Em vez disso, deve utilizar-se BD MacConkey II Agar, BD XLD Agar ou BD
Hektoen Enteric Agar.
São raros os casos em que um único meio tem capacidade para recuperar todos os agentes
patogénicos existentes numa amostra. Por essa razão, devem ser inoculados, em conjunto com a
amostra, outros meios para o isolamento de Salmonella e/ou Shigella e, possivelmente, de outros
agentes patogénicos entéricos.
Embora possam ser realizados alguns testes de diagnóstico directamente neste meio, é
necessária a realização de testes bioquímicos para uma completa identificação e, se indicado, a
realização de testes imunológicos usando culturas puras. Consultar a bibliografia apropriada.2,3

BIBLIOGRAFIA
1. Leifson, E. 1935. New culture media based on sodium desoxycholate for the isolation of
intestinal pathogens and for the enumeration of colon bacilli in milk and water. J. Pathol. and
Bacteriol. 40:581-599.
2. Bopp, C. A., F. W. Brenner, P. I. Fields, J. G. Wells, and N. A. Stockbrine. 2003. Escherichia,
Shigella, and Salmonella. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R.
H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
3. MacFaddin, J.F. 1985. Media for the isolation – cultivation – maintenance of medical bacteria.
Volume 1. Williams and Wilkins, Baltimore, London.
4. Chapin, K.C., and T.-L. Lauderdale. 2003. Reagents, stains, and media: bacteriology. In:
Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of
clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

EMBALAGEM / APRESENTAÇÃO
BD Salmonella Shigella Agar
Cat. No. 254047 Meios em placas prontos a usar, 20 cpu
Cat. No. 254085 Meios em placas prontos a usar, 120 cpu

INFORMAÇÕES ADICIONAIS
Para obter informações adicionais, contacte o representante local da BD.

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