TOXICOLOGIA

AULA PRÁTICA: DETERMINAÇÃO DA INTOXICAÇÃO POR INSETICIDAS CARBAMENTOS E

ORGANOFOSFORADOS PELA MEDICA DA ATIVIDADE DA COLINESTERASE PLASMÁTICA

TÉCNICA
1. Transferir 0,5 mL da amostra de plasma para um tubo de ensaio e juntar 0,5 mL de tampão
(pH entre 8,0 a 8,5).
2. Colocar o tubo em banho de água a 25º C por 10 minutos.
3. Ler o pH1.
4. Acrescentar 0,2 mL de acetilcolina 3% ao tubo 1. Marcar o tempo.
5. Retornar o tubo ao banho de água por exatamente 1 hora.
6. Ler o pH2.
7. Calcular a atividade enzimática, conforme equação abaixo:

Sendo:
pH1 = pH inicial
pH2 = pH final
b = fator de correção, correspondendo à hidrólise não enzimática do substrato.
f = fator de correção para as variações do pH/h, de acordo com pH 2
t2 – t1 = tempo de incubação do tampão, substrato e enzima

Tabela 1 – Variáveis b e f para diferentes pH finais ajustados para colinesterase plasmática

 Questões para relatório:

1 – Explique o fundamento do
método.
2 – Faça a interpretação
analítica dos resultados obtidos

Fonte para consulta:

MOREAU, Regina Lúcia
Moraes. Ciências
Farmacêuticas - Toxicologia
Analítica, 2ª edição. Guanabara
Koogan, 10/2015. [Minha
Biblioteca].

1 – Explique o fundamento do método.

2 – Faça a interpretação analítica dos resultados obtidos

Protocolo 1:
Branco 0,005 Para descobrir margem de erro (Padrão-Branco/Amostra-Branco)

Padrão 1,999
Amostra 0,011

pH = {(pH1 – pH2) – b} x f
h t2 – t1

pH = {(7,46 – 5,54) – 0,01} x 1,09

h 60-10

{(1,92 – 0,01)} x 1,09

 50

1,91 x 1,09
50

0,038 x 1,09 = 0,041

Ocorreu inibição da Acetilcolinesterase?

A Acetilcolinesterase é uma substância ácida, como pH foi confirmado

Acetilcolinesterase, ocorreu concetração de ácido acético, resultando em pH
amostra.

CONTAS

1,999 100
0,011 x

1,999x = 1,1 = 0,55%

1,999

1,999 100
0,005 x

1,999x = 0,5 = 0,250%

1,999

GRÁFICO